专利名称：一种血管粘接吻合密封胶及试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种血管粘接吻合密封胶及试剂盒，属于医学生物技术领域。
背景技术：
血管吻合方法有很多，传统的吻合方法是间断缝合吻合法，即“金标准”血管吻合法。但针线对血管壁造成穿透性损伤，尤其是对内膜的损伤会导致一定的吻合失败率，且操作繁琐，耗时过长。因此不少学者寻求更理想的血管吻合方法。如支撑吻合法、套入吻合法、热凝吻合法、粘接吻合法及机械吻合法等。
血管粘接吻合法是应用医用胶(氰基丙稀酸酯吻合胶)，并结合支架等技术吻合血管的方法。使用的医用胶，对血管组织仍有毒性损伤等副作用，胶体漏入管腔，则会在吻合口有强烈致血栓作用，从而导致吻合失败。
中空内支架端端直接粘接吻合法，是以往研究的一种粘结吻合方法，具有微创、简洁、快速和吻合完毕后即能通血等特点。具体方法为将中空速溶支架置入待吻合血管两端，将两端拢紧对合，然后在吻合口周围涂布医用吻合胶，胶体固化后即完成操作。
该方法也存在不足之处1.血管两断端吻合时，将两端对合再紧密，仍可能留有缝隙，涂布医用胶时，难免会漏入管腔，形成血栓，造成吻合失败；2.对于中大血管，或张力较大的吻合口，强度可能不够；3.粘胶固缩时会产生裂纹，从而易形成吻合口漏。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能有效阻止胶体漏入管腔的血管粘接吻合密封胶。
本发明要解决的另一个技术问题是提供一种便于使用的血管粘接吻合密封胶试剂盒。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案一种血管粘接吻合密封胶，由浓度为10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸钠溶液组成。
作为较佳实施方式，CaCl2溶液的浓度为20wt％，海藻酸钠溶液的浓度为3wt％。
本发明的原理低浓度的海藻酸钠溶液具有一定的流动性和粘性，遇CaCl2溶液后立即在接触面形成海藻酸钙膜，并不会被体液溶解和冲走，滞留原位，从而阻隔医用胶渗入管腔，避免其对血管和管断端及内膜的损伤和形成血栓，起到密封和保护的作用。
本发明使用方法简单，先将海藻酸钠溶液滴入血管吻合口，随后在其上滴加CaCl2溶液而成膜，即可密封吻合口。
我们对海藻酸钠溶液和CaCl2溶液的浓度进行了优选试验，分别选取1wt％、2wt％、3wt％、5wt％和10wt％的海藻酸钠溶液及40wt％、20wt％和10wt％CaCl2溶液，首先按不同浓度将海藻酸钠溶解形成淡黄色半透明的粘稠液体，然后与不同浓度的CaCl2溶液反应成膜，测定其滴加操作的方便程度、粘度、流动性(浸润时间)、成膜速度和成膜厚度等指标，确定最终密封胶的浓度配比。
研究发现(1)的对于不同浓度的海藻酸钠溶液，成膜速度与溶液浓度无明显关系，成膜厚度随溶液浓度增加而增加，镜下观察表明，浓度越高成膜致密性越好。但是，海藻酸钠溶液浓度由1wt％到10％，流动性逐渐变差，流动时间逐渐增长，在手术操作中，要求密封胶在1～2秒内完成血管吻合口周围的浸润，因此流速不能太慢，选择1wt％-5wt％较好，综合考虑其他因素，3wt％为最佳浓度。此外，5wt％浓度下凝胶成形好，便于操作。(2)对于不同浓度的CaCl2溶液，成膜厚度随其浓度增加而轻度增厚。成膜速度与溶液浓度无明显关系。
海藻酸钠溶液与CaCl2溶液反应生成海藻酸钙，据报道，该物质与机体有较好的生物相容性，对机体基本无毒、无害。我们选用40wt％和20wt％的CaCl2溶液与5wt％的海藻酸钠溶液反应制成40wt％和20wt％的海藻酸钙凝胶，埋植入2组各8只SD大鼠体内，分3点埋植于背部两侧和腹部皮下，术后饲养，观察大鼠的活动和饮食、饮水情况，以及埋植局部的皮肤等反应情况，并且检测机体对海藻酸钙的反应，判断试验动物在植入后可能存在的毒性反应和其他不良反应。
结果表明(1)埋植物在3周后逐渐消失。(2)40wt％组SD大鼠皮下埋入点局部皮肤，2天后有3只出现红肿，一周后有2只出现破溃，排除移植物和渗液后结痂愈合；其余大鼠和20wt％组SD大鼠，在移植部位未见明显不良反应，切口愈合良好。全部试验动物活动无异常、无死亡，饮食正常。(3)体内组织学检测发现在第2周至第4周时，可见外周有包膜和血管形成，到第8周时，包膜变薄血管减少；至16周时，包膜基本消失，埋入的海藻酸钙仅剩一薄层，绝大部分已经吸收(约80％)。相同时程内，浓度低的组剩余量少。随着时间推移，两组剩余量均减少。根据以上结果，40wt％的海藻酸钙局部有较强的刺激反应，以致皮肤炎性红肿和坏死，但是动物活动无异常，无死亡，饮食正常。说明CaCl2溶液浓度过高，仅对局部不利，甚至是破坏性的，但对全身无明显影响。因此选择20wt％左右的CaCl2溶液是比较合适的。
本发明还提供了一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，包含10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸钠溶液。该试剂盒也可是包含CaCl2、海藻酸钠和溶剂。其中溶剂可以是蒸馏水、双蒸水、注射用水等，用以溶解CaCl2和海藻酸钠，配制10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸钠溶液。
该试剂盒中还配制有血管内支架。血管内支架作为常规技术，可以是目前市售的任何可用于血管吻合手术的中空内支架。
为了取得更优异的技术效果，本发明在中空内支架表面涂布有CaCl2成分。这种支架表面涂布方法简单易行，向10-25wt％的CaCl2溶液加入明胶，使明胶浓度为wt2.5％，取中空内支架蘸涂该2.5wt％的明胶CaCl2溶液后烘干，包装，用60Co消毒备用。
本发明还提供一种特制的血管内支架，其为径向中空、两端呈梭形的柱状结构，外表面涂布有CaCl2成分。该支架以聚乙二醇为原料制成，制作方法参照梁向党，张伯勋，范昱玮等.新型血管吻合用支架对血管内膜的影响。医疗卫生装备.2003；24(7)5-6和13孙赓，张伯勋，梁向党等.吻合用血管内支架溶解方式的研究。医疗卫生装备.2004；25(6)14-15。
表面涂布有CaCl2成分的血管内支架，置入管腔内部后，可以利用吻合操作中血管内残余的水份使支架表面的CaCl2成分变成溶液游离，当接触到滴入的海藻酸钠凝胶溶液后，其首先与CaCl2溶液反应而在靠近吻合口管腔内侧的管壁成膜，称之为“内成膜”；此后，在海藻酸钠凝胶外侧滴加CaCl2溶液，便在吻合口管腔外周一侧完成成膜，成为“外成膜”。
本发明的有益效果在于本发明的密封胶安全无毒、能迅速成膜、固化，形成不溶于水的膜状物，便于手术操作，可有效阻隔、降低胶体毒性；涂布有CaCl2成分(涂层)的血管内支架，能起到双重阻隔医用胶渗漏到管腔内部的作用。
下面结合附图和具体实施方式
对本发明作进一步说明，凡依照本发明公开内容所作的本领域任何等同替换，均属于本发明的保护范围。
图1为血管内支架的结构示意图。
图2为血管内支架的剖面图。
具体实施例方式
实施例1.制备密封胶一.材料海藻酸钠、CaCl2、化学纯，购于北京生化试剂公司。
二.制备方法
将海藻酸钠和CaCl2分别溶于蒸馏水，制成浓度为20wt％的海藻酸钠溶液和3wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法第一种方法不使用支架的手术中，将海藻酸钠溶液滴入血管吻合口，随后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可从血管壁外侧密封吻合口。此后可滴加医用胶，医用胶不会泄漏到血管管腔内。
第二种方法在普通血管内支架表面蘸涂CaCl2溶液，置于血管断端的吻合口内，将海藻酸钠溶液滴入血管吻合口，随后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可从血管壁内、外双侧密封吻合口。
第三种方法使用实施例4的制备的血管内支架，直接将支架置于血管断端吻合口内，血管壁上的水份使支架表面的CaCl2成分游离为溶液，直接将海藻酸钠溶液滴入血管吻合口，随后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可从血管壁内、外双侧密封吻合口，如图2所示。
实施例2.制备密封胶一.材料海藻酸钠、CaCl2、化学纯，购于北京生化试剂公司。
二.制备方法将海藻酸钠和CaCl2分别溶于蒸馏水，制成浓度为10wt％的海藻酸钠溶液和1wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法同实施例1。
实施例3.制备密封胶一.材料海藻酸钠、CaCl2、化学纯，购于北京生化试剂公司。
二.制备方法将海藻酸钠和CaCl2分别溶于蒸馏水，制成浓度为25wt％的海藻酸钠溶液和5wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法同实施例1。
实施例4.制备血管内支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明胶，均购自北京化学试剂公司。
二.制备方法1.准确称取1.25g明胶溶解于50ml 20wt％的CaCl2溶液中，加热，制备出2.5wt％的明胶CaCl2溶液备用。
2.将聚乙二醇加热致65～70℃，溶解形成无色透明的粘稠液体，控制温度，利用模具分别制成径向中空的圆柱体，支架的两端修成锥形，使其整体呈枣核状外观。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明胶CaCl2溶液，再次烘干，包装，60Co消毒备用。
血管内支架1的结构如图1和图2所示，具有径向的孔洞11和表面CaCl2涂层12。
实施例5.制备血管内支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明胶，均购自北京化学试剂公司。
二.制备方法1.准确称取1.25g明胶溶解于50ml 10wt％的CaCl2溶液中，加热，制备出2.5wt％的明胶CaCl2溶液备用。
2.将聚乙二醇加热致65～70℃，溶解形成无色透明的粘稠液体，控制温度，利用模具分别制成径向中空的圆柱体，支架的两端修成锥形，使其整体呈枣核状外观。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明胶CaCl2溶液，再次烘干，包装，60Co消毒备用。
血管内支架1的结构如图1和图2所示，具有径向的孔洞11和表面CaCl2涂层12。
实施例6.制备血管内支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明胶，均购自北京化学试剂公司。
二.制备方法1.准确称取1.25g明胶溶解于50ml 25wt％的CaCl2溶液中，加热，制备出2.5wt％的明胶CaCl2溶液备用。
2.将聚乙二醇加热致65～70℃，溶解形成无色透明的粘稠液体，控制温度，利用模具分别制成径向中空的圆柱体，支架的两端修成锥形，使其整体呈枣核状外观。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明胶CaCl2溶液，再次烘干，包装，60Co消毒备用。
血管内支架1的结构如图1和图2所示，具有径向的孔洞11和表面CaCl2涂层12。
实施例7.制备试剂盒一.制备方法1.按实施例1至3的任何一种方法制备密封胶；2.按实施例4至6的任何一种方法制备血管内支架；3.将密封胶与血管内支架组合于一定规格的包装物中，即得。
二.使用方法1.术野暴露按照常规手术操作将试验动物(纯种新西兰白兔，中国人民解放军总医院试验动物中心提供)麻醉后，仰卧位，颈部备皮铺无菌洞巾。无菌条件下，取颈前正中切口，长约8厘米，逐层切开，于甲状软骨下缘无分支段，分离曝露两侧颈总动脉，直径约为2.0毫米，游离长度3-4厘米。两端夹好止血夹阻断血流后，剪断动脉，血管自然回缩，有约1-1.5厘米的缺损，肝素盐水冲洗管腔、血管吻合合拢器，轻柔将两断端拉拢对合，准备吻合。
2.密封吻合口用纱布条蘸干术野内积液，取出与动脉直径相当的内置中空支架，先轻柔置入动脉一端，然后再置入动脉另一端；血管完全合拢后，将海藻酸钠溶液滴于吻合口，溶液很快浸润吻合口圆周，蘸去管壁上多余的海藻酸钠溶液；然后再将CaCl2溶液同法滴于吻合口，CaCl2溶液接触海藻酸钠溶液即能迅速成膜，此时吻合口欠严密的缝隙即被密封胶膜密封，蘸去管壁上多余的CaCl2溶液。
3.粘接吻合口(现有技术中为手术常规操作)方法1.直接粘接取出吻合胶(医用508系列粘接剂中的EC胶，由广州白云医用胶有限公司提供)，于吻合口先滴1-2滴胶液，胶液很快流淌浸润吻合口四周，固化后再涂布一次胶，很快固化即完成粘接吻合。
方法2.被膜(包膜)粘接取出吻合胶(医用508系列粘接剂中的EC胶，由广州白云医用胶有限公司提供)，于吻合口先滴1-2滴胶液，胶液很快流淌浸润吻合口四周，固化后，将膜片轻轻放于血管之下，在血管吻合口周围涂布一圈胶后，迅速翻卷膜片两端，相对翻卷粘接，包于吻合口外一周，加压固化。
三.使用效果先后松开两端止血夹，可见血流逐渐通过吻合口，血流畅通。术后即时畅通率100％，密封完好，无缝隙、无漏血，有效防止医用胶漏入管腔。透过管壁可见吻合口内的支架逐渐溶解，吻合口段无狭窄发生。
权利要求
1.一种血管粘接吻合密封胶，其特征在于由浓度为10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸钠溶液组成。
2.根据权利要求1所述的一种血管粘接吻合密封胶，其特征在于由浓度为20wt％的CaCl2溶液和3wt％的海藻酸钠溶液组成。
3.一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，其特征在于包含10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸钠溶液。
4.根据权利要求3所述的一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，其特征在于包含20wt％的CaCl2溶液和3wt％的海藻酸钠溶液。
5.根据权利要求3或4所述的一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，其特征在于还包含有中空的血管内支架。
6.根据权利要求5所述的一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，其特征在于在中空内支架表面涂布有CaCl2涂层。
7.根据权利要求6所述的一种血管粘接吻合密封胶试剂盒，其特征在于所述中空内支架为径向中空、两端呈梭形的柱状结构。
全文摘要
本发明公开了一种血管粘接吻合密封胶，由浓度为10－25wt％的CaCl
文档编号A61L31/02GK101077424SQ200610081220
公开日2007年11月28日 申请日期2006年5月25日 优先权日2006年5月25日
发明者范恒华, 张伯勋, 伍骥 申请人:范恒华