专利名称：：载氧血液代用品制剂的制作方法载Wl液代用品制剂发明领域本发明涉及一种包含能够在体内可逆地结合和释放氧的载氧物质的载氧血液代用品制剂。该制剂应用于医药领域，例如，作为一种血液代用品输给大量失血后的血容量减少的患者，为局部缺血部位和肿瘤组织Ji^氧气，作为保存天然器官的灌注溶液，以及作为细胞培养的培养基。
背景技术：
：对于载氧血液代用品制剂理想的是这些血红蛋白基组合物(composition)或口卜啉-金属络合物基组她含尽可能低的量的高铁血红蛋白鹏割介物。高1红蛋白及其等价物的水平升高的主要原因是在生产过程和/鄉。存期间时的自氧化。因此，有人试图在生产过程中用一种惰性气体给溶液去氧的方法从血红蛋白溶液中除去氧气。参见日本专利Nos.2,709,419和3，466，516。但是，证明，步骤当被单独使用时不是充分有效的，因为血红蛋白对自氧化高度敏感。因此，在血红蛋白基制剂被包皿容器或袋时必须使气氛中的氧浓度尽可能地降低。这必然增加生产成本。发明因此，本发明的一个目的是lii共一种载氧血液代用品制剂，雜贮存期间稳定以使高ML红蛋白或其等价物的量在贮存期间保持在低7jC平。本发明的另一目的是在不增加生产成本盼瞎况下劍共一种载氧血液代用品制剂。作为精神饱满的研究的结果，我们发mMil在载氧血液4训品制剂中掺入一定量的低毒并因此可容许作为药学制剂添加齐啲还原剂，典型地半胱氨酸，會,解决上述问题。本发明基于战发现。鈔卜，我们发^Mii将战载氧审跻胆IA内袋，然后将内袋与氧吸收包一起^A外封萄outererwebpe)中，可以得到一种能稳定C存的制剂。发明效果包含一种根据本发明的载氧物质的制齐提稳定的并且保持低含量的高铁血红蛋白或其等价物。本发明的制剂能在氧浓度与空气一样高的气氛中被包装至蹂性袋中。这样帮助避免成本增加。本发明的最佳实施方式本发明的载氧血液代用品制剂包含一种载氧物质和一种还原剂。现在Mia佳实施方式^X寸发明进行详细描述。A.载氧物质载氧物质可以是已知可以在体内可逆池结合和释放氧气的倒可物质，包括天然来源的物质例如衍生自血红细胞的那些物质。其实例包括脂质体包被血红蛋白、卟啉金属络合物-清蛋白络合物、聚乙二醇(PEG)"修饰卩卜啉金属络合物-清蛋白缀合物、血红蛋白、分子内和分子间交联血红蛋白、聚合血红蛋白、PEG-《針市聚合血红蛋白，及其混合物。脂质体包被血红蛋白"脂质体包被血红蛋白"(HbV)是指在其内部空间中包含血红蛋白的脂质体。脂质体一般是指包括外部层状脂相和内部7K相的封闭的小泡囊。脂质体结构可以是多层或单层的。脂质体优选具有体积平均粒径从10nm到500nm，，从30nm到500nm。体积平均粒径可以M诸如动态光,方法测定。月旨质体可以从本领域已矢啲任柳旨类制得。参见，《脂质体技术》(LiposomeTechnology),第2版，巻l，41(1993)。其非限定性的实例包括糖脂、甾醇、脂肪酸、磷脂、两亲'鹏基氨基酸衍生物、二烷基二甲铵化合物、聚甘油烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、^S^、烷基甲基箭糖醐安、蔗糖脂肪酸酯、两亲性聚氧乙烯-聚孚L酸嵌段共聚物(W093/00101)、长^^基月錄咖十四'離胺、十六烷基胺以及硬脂胺，长鄉旨肪酸^S將'J如肉豆蔻mi井，棕榈iy井以及硬脂鹏井，及这些脂类的混合物。特别优3^人基于全部脂类组分具有0.1到30摩尔％的聚乙二醇含量的聚乙二醇-非磷酸化脂类复合物制得柳旨质体。糖脂包括甘油脂类和神经鞘脂类两者。甘油脂类的例子包括双半乳糖基甘油酯例如双半乳糖基双月桂酰甘油酯、双半乳糖基双肉豆蔻酰甘油酯、双半乳糖基双棕榈酰甘油酯或双半乳糖基双硬脂酰甘油酯；以及半乳糖基甘油酯例如半乳糖基双月桂酰甘油酯、半乳糖基双肉豆蔻酰甘油酯、半学L糖基双棕榈酰甘油酯和半乳糖基双硬脂酰甘油酯。甾醇的例子包括胆甾醇、胆甾醇半琥珀酸酯(hemisucdnate)、3--[N-(N'-N'-二甲氨基乙基)氨基甲酰基]胆甾醇、麦角甾醇以及羊毛甾醇。磷脂的例子包括磷脂翻旦碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酉M/l醇、磷脂酸、溶血磷脂醐旦赋lizophosphatidylcholine)、鞘磷脂、卵黄卵磷脂、烦喊脂或氢化磷脂。口卜啉金属络合物-清蛋白缀合物卟啉金属络合物是指具有一个卟啉环和一个在卟啉环中心配位的金属原子的配合化合物。为了用作载氧组分，该络合物必须能够可逆地结合氧。1M的金属种类包括铁、钴和铬。Fe(H)和Co(H)是特别雌的。卟啉络合物特别的例子包括四苯基卟啉、原卟啉、八烷基卟啉及其衍生物的铁(n)络合物。B卜啉金属络合物可以被具有分子量为200-4，000，000，优选1,000-50,000的聚乙二醇CPEG)斷布o与卟啉络合物构成缀合物的清蛋白组^括人1清清蛋白、动物血清清蛋白、重组人类清蛋白(rHSA)、重组动物血清清蛋白，及其聚合物。为了避免微生物感染，rHSA^^寺别,的。口卜啉络合物-清蛋白缀合物的一个特别的例子是截留在重组清蛋白的疏水口袋内的2-[8-(N-(2-甲基咪唑基》辛酰氧甲蜀-5，10，15,20-四(a，a，a，a-O-新戊酰氨基)苯基口卜啉-铁(n)。参见，Tsuchida，E.等的生物缀合化学(BioconjugateChemistry),8，534-538，1997。血红蛋白作为一种血红蛋白组分，可以使用多种来源的天然血红蛋白或重组血红蛋白。重组血红蛋白是^的。在可用的血红蛋白组分中也包括分子内-或分子间交联血红蛋白，聚合物例如血红蛋白二聚体，以及PEG^t布的血红蛋白聚^t/。其特别的例子包括用戊二醛好内交联的血红蛋白，;lii^用碳二亚胺或N-琥珀酰亚胺-3-(2-吡啶基硫代)丙麟(SPDP)的二硫键交换反应制得的針间交tt红蛋白聚合物，ffi31^用PEG马来胺的二硫键交换反应制得的分子间交联PEG4針布血红蛋白聚合物，以及￡^用PEG马来酰亚胺的，分子间交WL红蛋白聚合物的二硫键交换反应制得的分子间交联PEG-修饰的血红蛋白聚合物。载氧脂质体可以通过任何本领域已知的方^描逆向蒸发法，高压挤出法或者微流化法从脂类组分和血红蛋白组分的混合物制得。在温度10'C以下制备脂质体包被血红蛋白制剂以避免血红蛋白变性是理想的。月旨质体可以从PEG-脂类缀合物中制得。通常，PEG和脂粒间的连接键采用一种间隔分子。间隔分子必须具有至少一个官能团，會,连接PEG和另一个能够连接脂类的官能团。典型例子是琥珀酸和氨基酸。在两端具有两个官能团以及在两端之间具有一个官能团的三官能氨基酸。其实例包括赖氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。在两端具有相同官能团和在两端之间具有第二官能团的三官能氨基酸特别优选包括具有一个末端羧基基团和两个,基团的氨基酸例如赖氨酸、天冬翻安或谷氨酰胺，以及具有两个末端羧团和一个氨基基团的氨基酸例如天冬氨酸或谷氨酸。卟啉金属络合物-清蛋白缀合物可以通过E.Tsuchida等在生物缀合化学(BioconjugateChemistry),8，534-538，1997中报道的清蛋白-血红素缀合物的制备方M制备。血红蛋白可以从去除基质的人类红细胞溶胞产物中得到。本发明的载氧制剂从具有介于7.0到7.5的pH值的无基质血红蛋白溶液中取得。pH值可以使用氢氧化钠、碳,、或碳酸氢钠的水溶棘调节。备选地，诸如Tris、bis-Tris、HEPES或者磷,缓冲液的缓冲液可以用来调节血红蛋白溶液的pH值。B.还原剂不是所有的还原剂都育調于本发明。还原剂必须肯,避她红蛋白在氧的存在下自氧化为高铁血红蛋白。同时它必须在使用的浓度时是生理上可接受的。可用的还原剂的例雅括含硫氨基舰其衍生物例如半胱氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、高半胱氨酸或N-乙酰半胱氨酸以及含硫ims其盐例如连二亚硫酸、连二亚硫勝内、亚硫勝内、亚硫,、焦亚硫勝内、重亚硫M、重亚硫,、次亚硫勝内(sodiumhyposulfite)、次亚硫酸钾，以MI白粉(羟基甲磺酸钠)。抗坏血酸，其衍生物及其盐也可被使用。最雌的是L-半胱氨酸(L-Cys)。还原剂以在可,用水、生理盐7jC或诸如PBS的缓冲液中的溶液或分散体的形式加入载氧物质以便更容易地与M物质混合。混合物中还原剂的浓度范围是A人0.001至U20mM，4皿>人0.01至U10mM，更ttit,人0.5至U10mM。C.载氧血液代用品制齐啲制备载氧物质和还原齐赃混合前M用惰性气体冲洗来充分去氧。然后混合物通过在缺氧氛围的无菌环境中将混合物^A—个容器或一个柔性袋中而被包装。典型地该容器为一个玻璃小瓶。柔性皿用诸如聚偏1,1-二氯乙烯或乙烯-乙烯醇共聚物的氧气不可渗透材料制备。柔性袋也可以采用聚乙烯膜和铝箔的层压材料制备。填充有本发明的载氧制剂的袋可以与氧吸收包一起包装在同样用氧气不可渗透材料制成的外袋或外封套中。氧气吸收材料可以是抗坏血酸基或铁基材料。其放入内袋和外袋之间的空间的量可以根据所述空间的体积改变，并足以将空间氧水平降低到0.1%以下。例如，可以使用一定量的能够吸收氧气的体积为所述空间体积的5到10倍的氧气吸收材料。上述二元包装通过基本上所有的氧气维持在内袋和外封套之间的空间来促进载氧制剂的贮存稳定性，并且内袋中的载氧制剂通过双重屏障而被保护不与外部氧气接触。一般载氧制剂的包装操作必须在低氧浓度环境中进行。但是，本发明的载氧制剂可以在含有高得多的浓度氧气的气氛中被包装。例如，包装操作可以在氧气浓度与大气中的氧气浓度一样高的气氛中进行。如下面的实施例表明，即使当在氧气浓度与大气中的氧气浓度一样高的气氛中被包装，该制剂在至少一个月内也是稳定的。相应的，产生低氧环境的设备也就不需要了并且生产成本的增加也被避免。该载氧制剂可以进一步包含多种药学上可接受的、本领域已知的和常规的添加剂。本发明的载氧制剂可以在从-2(TC到6(TC、优选从4"C到25'C的范围内的鹏下歸。实施例本发明将M参考下面的实施例来详细描述。在这些实施例中，一种脂质体包被血红蛋白和L-半胱氨酸分别作为载氧物质和还原剂被使用。但是，应该働军本发明不限于这些实施例。第I部分.高铁血红蛋白百分比(％Met)的测定方法1、各种溶液的制备一种含有浓度为5g/dL的Hb的溶液在pH7的磷麟缓冲液(PBS)中制备。一种含有5g/dL的NaN02的水溶液和一种含有10g/dL的L-Cys的水溶液也被制备。L-Cys溶液通过在一个玻璃小瓶中用氮气鼓泡去氧并且在缺氧割牛下je存直至使用。2、0%Met和100。％Met时的标准吸收曲线的制作。a)高铁血红蛋白(MetHb)将1mL上述Hb溶液中加入50pL，NaN02溶液并且允许在室温下静置1小时。在一*有5mL的PBS的颈状光度计比色皿中加入10pL战Hb溶液和然后再加入150^L的PBS。MetHb溶液的吸光度在300nm到500nm的波长范围内测量并被记录为一条吸收曲线。b)去氧血红蛋白(去氧Hb)将1mL上述Hb溶液中加入50(jLPBS。一个含有5mL的PBS的颈状光度计比色皿用氮气鼓泡去氧10射中。然后将150pL，L-Cys溶液和lO^L上述Hb溶液加入该比色皿中。Hb溶液的吸光度在300nm到500nm波长范围内测量并被记录为一条吸收曲线。3、405nm波长时的吸光度(A405)和430nm波长时的吸光度(A430)的计算将MetHb和去氧Hb的吸收曲线相互重叠。在重叠曲线上画一，线连接在大约360nm和460nm两条吸收曲线彼此相交处的两个等距离吸收点。从基线上在405nm和430nm处的MetHb的吸光度{皿MetHb的吸收曲线上被读取，分别±也，表示为b和d。类似的，从基线上在405nm和430nm处的去氧Hb的吸光度值被读取，分别地，表示为a和c。A405(MetHb)和A430(去氧Hb诉下面的等式(I)和(n)计算。A405(MetHb)二Oa)xMet/100+a(I)A430(去氧HbV)=(c-d)xMet/100+c(D)其中Met是用下面的等式(HI)计算的高红蛋白的7尺平(％)。Met(%)={100(a-Qc)}/{a-b-Q(c-d)}(IE)其中Q-A405(MetHb)/A430(去氧Hb)4、样品的M改(％)的测量在一M有5mL的PBS的颈状光度计比色皿中加入Hb的样品溶液到5^dL的Hb浓度。在用氮气謝包15倂中后，波长范围从300nm到500nm的吸收曲线被记录。然后画一皿线连接在大约360nm和460nm处的两个等吸收点并且从基线上读取在405nm和430nm处的吸光度值。然后以与第3部分相同方式用等式(1)，(II)和(m)计算Met(%)。第n部分.测试样品的稳定性第1步.月旨质体分散体的制备在Hb浓度为40g/dL的血红蛋白(Hb)溶液中加入一定量的吡哆醛-5，-磷酸(PLR)的NaOH水溶液和一定量高半胱氨酸(Hcy)以使Hb，PLP和Hcy的最终浓度分别为5.9mmol/L，17.3腿ol/L和5mmol/L。然后调节混合物的pH值到7.4，4。C下搅拌过夜，然后用0.22pm滤器过滤。将所得溶液反复脱气并朋CO羰基^3次以获f驟氧血红蛋白(COHb)溶液。對虫地，一种摩尔比为10/10/2的二棕榈酰磷脂翻旦碱(DPPC)，胆甾醇和1.5-二棕榈酰-L-谷氨酸-N-琥珀酸的混合物在苯中溶解至20g/L的浓度。在上述苯溶液中加入溶解于生理盐水的浓度为1g/L的聚乙二醇(PEG)-双硬脂酰戊二酸酯缀合物(PEG-DSGE)直到PE-DSGE相对于全部脂类的比率为o.3摩尔％。然后将混合物充分混合^m干以获得脂类混合物的干粉。将所得干粉分份加入到如上制得的COHb溶液中，允许在4"C水合，并剧烈搅拌过夜。所得分散体用一个压出机(从Lipex生物膜有限公司(Lipexbiomembrances，Inc.)获得)压出来调节脂质体的平均粒度到大约220nm。获得含有血红蛋白浓度为大约10g/dL禾口脂类浓度为6g/dL的脂质体包丰tti工蛋白分散体。第2步.含有L-Cys的脂质体分散体的制备将上述脂质体分散体的等，分在一个100mL小瓶中1用氮气鼓泡5-6小时充分去氧。^f魁也，将L-Cys溶解于生理盐水中至28mM并被對^t也去氧。含有L-Cys的zK平分别为5.6mM，2.8mM，1.4mM和0.7mM的测i式溶液，分别地，iM以40:10，45:5，47.5:2.5禾卩48.75:1.25的mL比率混合去氧脂质体分散体和去氧L-Cys餘棘制备。测试溶液的总^f只为50rnL。第3步.包含亚硫酸氢钠的脂质体分散体的制备将40mL在第1步制备的去氧脂质体分散体的等分部分在生理盐水中与10mL摩尔浓度为50mM的亚硫,钠的去氧溶液混合以制备含有5mM亚硫酸氢钠的测试溶液。第4步.含有抗坏血酸的脂质体分散体的制备對以于第3步，将40mL在第1步制备的去氧脂质体分散体的等鄉分在生理盐水中与10mL的50mM的抗坏血酸溶液混合以制备含有5mM抗坏血酸的测试溶液。第5步.不含L-Cys柳旨质体分散体的制备将在第1步制备的去氧脂质体分散体的45mL等分部分与5mL生理盐水混合以制备不含倒可还原剂的溶液。实施例1.在玻璃小瓶中含有L-Cys的脂质体分散体的稳定性在10mL玻璃小瓶(24mm圆柱体直径，40mm高和12.5mm口孔径)用在第2步制备的含有0.7nM，1.4mM或2.8mM的L-Cys的样品溶液充入并且用橡胶塞和铝帽密封。填充过程在氧气浓度小于0.1%的氛围中进行。*小瓶在25X:下jt存6个月。^i寸在脂质体中的血红蛋白的稳定性在第2，7，28天和第6个月以高铁血红蛋白百分比(％Met)的形式用，方法测定。结果在下表1中表l.玻璃小瓶中脂质体包被血红蛋白的^Met%Met<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>如表1所示，％Met在25'C下贮存6个月后保持基本不变。实施例2.在缺氧情况下(O2<03%)艘的塑料袋中的脂质体分散体的稳定性将50ml在第II部^f(j备的含有2.8mM的L-Cys的脂质体分散体样品在氧气浓度小于03%的氛围中被包装和封闭在一个用聚丙烯(HFB片，Nipro公司(NiproCorporation))制成的矩形(8x10cm)袋中。被包装的翻一步与氧吸收剂(AGELESS,三菱气体化学有限公司(MitsubishiGasChemicalCo.,Ltd.))一起被包装在一个氧气不可渗透的外封套(TECHBARRIER,三菱塑料有限公司(MitsubishiPlastics,Inc.))中。所得产品在40。C温度和75%的相对湿度或者25°C温度和60X的相X寸湿度下ie存。高铁血红蛋白的7K平(Met%)随时间一式两份(n=2)测定。结果在下表2中表示。表2.02<0.3%时包装的塑料袋中的脂质体包被血红蛋白的。/oMetIG存条时间件2天14天28天3个月6个月12个月温度1.01.1-2.7-一一40°CRH75%0.90.7-2.7-一一鹏2.11.4-0.1-1.62.0-0.525°CRH60%0.02.80.2-1.8-0.1-0.3如表2所示，二元包對dualpackage)中的脂质体分散##品的。/。Met在40°C，75%RH,贮存1个月或者25。C，60%RH，贮存12个月时没有升高。实施例3.在缺氧情况下(02<3%)艘的塑料袋中的脂质体分散体的稳定性重复实施例2,除了在氧气浓度为3%的气氛中进行包装操作以外。结果在下表3中表示。表3.0^3。/。时包装的塑料袋中的脂质体包被血红蛋白的。/。Met时间件2天14天28天2个月6个月12个月鹏3.12.3-0.2--一40°CRH75%1.21.2-0.1-一-鹏2.70.3-1.0-0.7-1.5-0,425°CRH60%2.8-1.2-2.9-1.61.60,0如表3所示，二元包装中柳旨质体分散储品的。/。M改在40。C，75%叫贮存1个月或者25"C，60XRH贝亡存12个月时没有升高。实施例4.在大气(02二21%)下包装的塑料袋中柳旨质体分散体的稳定性重复实施例2，除了在大气情况(02=21%)中进行包装操作以外。结果在下表4中表示。表4.02二21柳寸包装的塑料袋中的脂质体包被血红蛋白的n/。Met时间贮存餅-^-7-__li^_28天驢25。C6.4__3.6RH60%7.07.77.2如表4所示，二元包装中的脂质体分散体样品的。/。Met在25。C，60%RH,贮存28天时没有升高。比较例1.在玻璃小瓶中不加入L-Cys柳旨质体分散体的稳定性重复实施例1,除了使用在第5步中制备的不含有L-Cys的脂质体分散体以外。在缺氧情况下(O2<0.1%)进行包驟作。结果在下表5中表示。表5.在玻璃小瓶中不含有L-Cys的脂质体包被血红蛋白的。/。MetmA右次//4"时间贝—存^1牛2天7天28天6个月鹏25。CRH60%13.913.714.416.9如表5所示，在鹏小瓶中不含有L-Cys柳旨质体分散体的n/。Met在25'C，60%RH,贮存时随着时间显著升高。比较例2.当不加入L-Cys时塑料袋中脂质体分散体的稳定性。重复实施例2，除了4顿第5步中制备的不含有L-Cys的脂质体分散体并且在大气情况(02=21%)中进行包驟作以外。结果在下表6中表示。表6.在塑料袋中不含有L-Cys的脂质体包被血红蛋白的。/。Met<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>如表6所示，在二元包装中不含有L-Cys的脂质体分散体样品的MMet在25°C，60%RH]C:存时随着时间显著升高。实施例5，6，7和比较例3.含有L-Cys，NaHS03或抗坏血酸的脂质体分散体与不含L-Cys的分散体的稳定性比较。与实施例1类似，将玻璃小瓶(24mm圆柱体直径，40mm高和12.5mm口孑L径)填充入10ml在第2-5步中制备的含有5.6mM的L-Cys(实施例5)，5mM的NaHS03(实施例6)，5mM的抗坏血酸(实施例7)，或不含有L-Cys(比较例3)柳旨质体分散体并且用橡胶薪蹈帽密封。填充操作在氧气浓度低于r%或低于3%的缺氧气氛下进行。氧气浓度低于1%或低于3%时被包装柳旨质体分散体的稳定性分另赃下表7和表8中表示。表7.玻璃小瓶中在40。C(02<1%)时fc存的脂质体包被血红蛋白的。/oM改<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表8.玻璃小瓶中在40'C(02<3%)时Jt存的脂质体包被血红蛋白的。/。Met<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>如表7和8所示，在含有L-Cys，NaHS03或抗坏血酸的脂质体分散体中的Met的7jC平(％Met)并没有显著升高，而当没有加入任何还原剂时Met的水平(%Met)显著升高。丕业应用本发明的载氧血液代用品制剂不仅可以作为血液代用品用于为血容量减少的患者fir注，而且还有其4te用。这些应用包括，例如，夕卜禾样术前稀释血液的溶液，血液充氧器和其^^卜部循环的补充液，移植活器官的灌注液，缺血部位的氧气Jif共液，治疗慢性贫血的制剂，液体换气的灌注溶液，治疗癌症的致敏制剂，和培养组织再生细胞的i咅养基。该制剂也用于为具有罕见血型的患者或由于地区性原因拒绝输血的患者输主。另外，本发明的制剂在兽医领域也是有用的。权利要求1.一种载氧血液代用品制剂，其包含能够在体内可逆地结合和释放氧的载氧物质和一定量的有效防止所述载氧组合物的至少部分不可逆氧化的生理上可容许的还原剂。2、权利要求1的载氧血液代用品制剂，其中所述载氧物质为血红蛋白基物质或卟啉-金属络合物基物质。3、权利要求1的载氧血液代用品制剂，其中所述还原剂选自由含硫氨基酸、含硫酮酸及其盐、和抗坏血酸、及其衍生物和盐组成的组。4、权利要求3的载氧血液代用品制剂，其中所述还原剂为L-半胱氨酸。5、权利要求2的载氧血液代用品制剂，其中所述血红蛋白基物质为血红蛋白、分子内或分子间交联血红蛋白、血红蛋白聚合物、聚乙二醇修饰的血红蛋白聚合物、或脂质体包被血红蛋白。6、权利要求2的载氧血液代用品制剂，其中所述卟啉-金属络合物基物质为卟啉-金属络合物与清蛋白的缀合物，或卟啉-金属络合物与聚乙二醇修饰清蛋白的缀合物。7、权利要求1的载氧血液代用品制剂，其中所述载氧物质为脂质体包被血红蛋白，并且其中所述还原剂为L-半胱氨酸。8、权利要求5的载氧血液代用品制剂，其中所述载氧物质中L-半胱氨酸的浓度介于0.5mM与10mM之间。9、一种二元包装，其包含填充有权利要求1的载氧血液代用品制剂的内袋和接收所述内袋和氧吸收剂的外封套，所述内袋和所述外封套用基本上氧气不可渗透的塑料材料制成。全文摘要本发明提供了一种在贮存时稳定的载氧血液代用品制剂。该制剂包含一种能够在体内可逆地结合和释放氧的载氧物质和一定量的有效防止所述载氧物质的至少部分不可逆氧化的生理上可容许的还原剂。优选地，载氧物质是以脂质体包被血红蛋白形式存在的血红蛋白基物质。文档编号A61J1/10GK101264320SQ200810096698公开日2008年9月17日申请日期2008年2月14日优先权日2007年2月14日发明者堀伸明,片山直久,甲斐俊哉,真锅宜久,西田诚司,须贺裕子申请人:尼普洛株式会社