专利名称：淫羊藿素在制备防治心脑血管疾病药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种化合物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用，具体涉及 淫羊藿素在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。
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心脑血管疾病的特点是发病急、死亡率高、致残率高。心脑血管疾病已成
为危害人民健康的头号杀手。据卫生部统计，我国目前约有7000万中风及其后 遗症患者，有6000万冠心病患者，40岁以上的中老年人中57%患有不同程度的心 脑血管疾病。随着人口老龄化，心脑血管疾病的发病率呈上升趋势，其预防和 治疗愈来愈重要。因此，寻找疗效好且毒副作用小的防治药物是医药研发领域 的研究热点。
淫羊藿是一种传统的补益中药，具有补肾P曰、强筋骨、祛风湿等多种功效，。 从淫羊藿药材中分离得到的单体淫羊藿苷，能降低心肌耗氧量、增加冠脉流量， 从而具有改善心血管系统的功能，另外，它还可有调节内分泌、预防骨质疏松、 增强免疫力、抗肿瘤等生理活性。因淫羊藿苷在吸收前已经发生代谢，体内以 代谢物淫羊藿次苷、及淫羊藿素等形式存在。(文献[l]:邱峰，陈英杰等，淫羊 藿苷在大鼠体内的代谢，药学学报，1999， 34 ( 2 ): 222-225 )
淫羊藿素具有抗AP肽致大鼠原代培养神经细胞凋亡的作用(文献[2]:张 翔南，王欢欢，王志强等，淫羊藿素抗AP肽致大鼠原代培养神经细胞凋亡的 作用，浙江大学学报，2007, 36 ( 3 ): 224-226 )，但其冠心病的治疗作用尚未 报道。
淫羊藿素可以从淫羊藿药材或淫羊藿苷的体内代谢物中分离得到(文献[3]:孙朋悦，徐颖，文晔等，朝鲜淫羊藿的化学成分，中国植物化学杂志，
1998, 8 (2): 122-125;文献[4]:刘铁汉，王毅，吴立军等，淫羊藿苷的肠菌代谢 研究1.肠内细菌对淫羊藿苷的代谢转化，2000, 31 ( 11 ): 834-837 )，或将淫羊 菱苷经酶解分离得到。(文献[5]:叶海涌，刘健，楼宜嘉，淫羊藿苷衍生物的制 备机器雌激素样作用研究，浙江大学学报，2005， 34 ( 2 ): 131-136 )。动物急 性毒性试验结果表明，淫羊藿素毒性较低。
发明内容
本发明目的是提供淫羊藿素(icaritin)在制备防治心脑血管疾病药物中 的应用，特别是在制备防治冠心病及脑缺血性疾病等药物中的应用。
本发明还提供了含有淫羊藿素防治心脑血管疾病的药物组合物；并且还 提供了含有淫羊藿素的药物组合物的给药途径及其药物制剂。 淫羊藿素的结构式如下
本发明人通过系列实验证实了淫羊藿素具有防治心脑血管疾病的作用，尤 其是防治冠心病及脑缺血性疾病等作用显著。
本发明人采用了冠脉结扎所致大鼠心肌梗死模型，以心电图、心肌酶及心 肌梗死面积作为观测指标，结果表明淫羊藿素可明显改善缺血，减少心肌细胞 损伤，显著缩小心fl^死面积，提示其具有较好的防治心肌缺血性疾病的作用。
淫羊藿素可从朝鲜淫羊藿药材中分离(文献[3])得到。本发明实施例中所用的淫羊藿素可采用参考文献[3]的制备方法制备，也可采用其它制备方法制 备。本发明在此不做详细描述。
本实验结果表明淫羊藿素可以用于制备防治心脑血管疾病尤其是冠心病 的药物。在制备防治心脑血管疾病药物包括防治冠心病药物时可以单独使用， 也可以含有淫羊藿素的药物组合物的形式使用。
本发明淫羊藿素药效学起效剂量为3. 5mg/kg，根据实验推算，推荐人临床 曰用量为60mg/天。
本发明还提供了以淫羊藿素为活性成分用于防治心脑血管疾病的药物 组合物及其药物剂型。本发明提供的药物组合物可按本领域内已知方法制 备，并可通过口服、舌下、经皮、肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道 或静脉等途径给药。本发明提供的药物组合物的剂型可按本领域已知方法 制备，即以上述有效量的淫羊藿素为有效活性成分，并包括了药剂学上可 接受的其他辅料组分，其中所述的淫羊藿素含量可以为1% ~ 99. 99 %。本 发明的药物制剂包括口服剂和非肠道给药制剂，其中口服剂包括胶嚢剂、 口服液、口嚼剂、丸剂、片剂、颗粒剂等，非肠道给药制剂包括注射液剂 型及注射用冻干粉针剂型等。本发明的药物制剂还包括局部给药制剂，如 霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂等。本发明所述的剂型并不限于此。
在制备口服制剂时可选用的辅型剂可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖、 硬脂酸盐等常规充填剂。在制备冻干粉针剂可以通过无菌喷雾干燥、低温 真空干燥、冷冻干燥等方法制备。各制剂的后期制备工艺及设备均属制药 领域的常规^t术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。
具体实施例方式
为了便于理解淫羊藿素防治心脑血管疾病的效果，本发明人用淫羊藿素进行了如下药效学实验
实施例1:淫羊藿素和淫羊藿苷对冠脉结扎所致大鼠实验性心^/U使死的影响
将Wistar大鼠144只，随机分为9组，每组16只分别为假手术组、模型
组、阳性药组(盐酸地尔疏卓6mg/kg)、淫羊藿素小剂量组(8mg/kg)、淫羊藿素 中剂量组(15mg/kg )、淫羊藿素大剂量组(30mg/kg )，淫羊藿苷小剂量组(8mg/kg )、 淫羊藿苷中剂量组U5mg/kg)、淫羊藿苷大剂量组(30mg/kg)。采用结扎冠状动 脉复制心肌梗死的动物模型，分别在结扎后30min、给药后lh、 2h、 3h、 4h、 5h 共6个时间点，考察其对心电图，心肌梗死面积，心肌酶的影响。结果见表1-3。 表1淫羊菱素和淫羊菱苷对冠脉结扎所致大鼠实验性心^使死T波变化绝对值的影响
("s,单位mV)
、. . ,, T波变化绝对值(mV)
组别mg/kg数结扎后 30min给药后 lh给药后2h给药后3h给药后4h给药后5h
假手术组一160. 043 ± 0. 0330. 028 ± 0. 0230. 039 ± 0. 0290. 040 ± 0. 0350. 028 ± 0. 0250. 040 ± 0. 023
模型组—160.128 ± 0. 09C0.151 ± 0. 045"40.123 ± 0.0. 102 ± 0. 073"A0. 095 ± 0. 041"'0. 081 ± 0. 051"'
盐酸地6160.122 ±0.129 ±0. 082 ±0. 061 ±0. 055 ±0. 054 ±
尔硫卓組0. 0970.1010. 050. 0. 041'0. 040.0. 032.
淫羊泰素8160.133±0.115 ±0.102±0. 078 ±0. 052 ±0. 050 ±
小剂量组0. 0750. 0430. 0680. 055.0. 032.0. 045.
淫羊蓬素15160.120 ±0.113±0. 093 ±0. 072 ±0. 050 ±0. 050 ±
中剂量组0. 0720. 0650. 0650. 038'0. 039.0. 043.
淫羊藿素30160. 116 ±0. 107 ±0. 084 ±0. 071 ±0. 051 ±0. 051 ±
大剂量组0. 0840. 034'0. 058.0. 040.0. 049.0. 038.
淫羊菱苷8160. 145 ±0.127 ±0.115±0. 099 ±0. 087 ±0. 070 ±
小剂量组0.1090.1000. 0760. 0650. 0670. 061
淫羊泰苷15160. 130 ±0. 128 ±'0.100 ±0. 096 ±0. 051 ±0. 057 ±
中剂量组0. 0830. 0880. 0490. 0540. 023.0. 055.
淫羊蓬苷30160.126 ±0.118 ±0. 090 ±0. 080 ±0. 054 ±0. 052 ±
大剂量组0. 0810. 0700. 059'0. 057.0. 040.0. 022.与假手术组比较，"aP<0. 001;与模型组比较，'P<0. 05, "P<0. 01或'"P〈0. 001。
由表l可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组在扎后T波明显升高，
心肌严重缺血。与模型组比较，盐酸地尔硫卓组在药后显著降低T波变化绝对
值，改善冠脉结扎引起的缺血症状。淫羊藿素各剂量组均显著降低T波变化绝
对值，改善冠脉结扎引起的缺血症状，淫羊藿苷中剂量组和大剂量组亦能显著
降低T波变化绝对值，改善冠脉结扎引起的缺血症状；与淫羊藿苷相比，淫羊
藿素其起效剂量更低，且起效更快，作用时间更长，故可以推断抗心肌缺血作
用优于淫羊愛苷。
表2淫羊藿素和淫羊藿苷对冠脉结扎致大鼠实验性心肌梗死心肌酶的影响
(;c±&单位U/L)
組别剂量动物 数ASTLDHCKCK-MB
假手术组—16306. 8+116.6558. 9+499.2904.4+352.9612. 2 ± 344. 9
模型组—16638. 9+169. 4Aii1536. 8+540. 8"A3654. 4+751. 4。"1413. 2 ± 703. 9
盐酸地尔 硫卓組616610.1+169.01396. 7+339. 32651. 5+835. 21099. 7 ± 407.1
淫羊菱素 小剂量组816627.6+223.51417.1+396. 22538. 4+546. 11172. 0± 559. 3
淫羊s素 中剂量组1516583. 3+207. 51250. 6+445. 02126. 0+741.5."948. 3 士 461. 3"
淫羊涯素 大剂量组3016496. 2+144. 61117. 9+365. 91826. 4+674. 4."776. 5 ±290. 0"
淫羊蓬普 小剂量组816631.8+176.2"16. 6+516. 62861. 3+1086.11186. 4 ± 593.1
淫羊楚苷 中剂量組1516594.7+219.91314. 6+584. 92542. 5+817. 81043. 3± 746. 8
淫羊泰普 大剂量组3016521.7+216.01152.6+373. 22094. 6+839. 5".852. 3 ±291. 8"
与假手术组比较，"<0. 001;与模型组比较，'P<0.05, "P<0. 01或'"P〈0. 001。由表2可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组心肌细胞破坏严重，
血清心肌酶AST、 LDH、 CK、 CK-MB值显著升高；与才莫型组比较，淫羊泰素中、
大剂量组可以保护心肌细胞免受破坏，降^f氐CK、 CK-MB水平；淫羊奢脊大剂量
组可以保护心肌细胞免受破坏，降低CK、 CK-MB水平；与淫羊泰普相比，可见
淫羊蓉素对保护心肌细胞的作用更好，起效剂量低。
表3淫羊藿素和淫羊藿苷对冠脉结4Llfc大鼠心l^死面积占全心面积百分比的影响
(x±s)
组别剂量动物数全心面积梗死面积梗死区占全心面积
(迈g/kg )(咖2 )(ram2 )比例(% )
正常組一16592. 88 ±60. 55——
模型组-16612. 05 ±55. 48106. 78 ±46. 8017. 50±7. 64
盐酸地尔硫卓组616608. 46 ±52. 7371. 35 ± 30. 65'11. 60 ±4. 67'
淫羊藿素小剂量组816605. 81 ±40. 2676. 52 ± 20. 36.12. 64 ±3. 34.
淫羊密素中剂量组1516600.17 ±50.1370. 56 ±19. 04'11. 81 ±3.12'
淫羊密素大剂量组3016623. 29 ±56, 8364. 25 ±26. 65"10. 48 ±4. 90"
淫羊藿苷小剂量组816594. 28 ±53. 5280. 86 ±30. 6113. 69±5. 30
淫羊藿苷中剂量組1516614. 20 ±40. 5077.12 ± 25. 70'12.55士4.ir
淫羊密苷大剂量组3016608. 03 ±60. 4571. 96 ± 20. 46.11. 90 ±3. 34.
与才莫型组比较，'P〈0. 05, "P<0. 01。
由表3可见，冠脉结扎后，模型组心肌梗死严重，心*死面积显著。与模型組比较，盐酸地尔石克卓组、淫羊奢素各剂量组和淫羊藿苷中、大剂量组均能很好改善心肌缺血导致的心肌梗死，显著缩小心肌梗死面积，其中改善梗死情况以淫羊藿素大剂量效果最显著，作用优于阳性药。与淫羊泰苷相比，淫羊藜素抗心肌缺血的起效剂量更低，作用更好。
综合以上结果，淫羊蓑素对冠脉结扎所致大鼠实验性心肌缺血具有治疗作用，能通过改善缺血、减少心肌细胞损伤和减少心肌梗死范围等，从而对冠脉结扎所致大鼠实验性心肌缺血和梗死有治疗作用，可以推断淫羊蓉素对人类的冠心病也具有治疗作用，可用于人类心血管相关疾病的治疗。
实施例2:淫羊藿素对大鼠大脑中动脉结扎所致大鼠脑梗死的影响。
将Wis tar大鼠96只，随机分为6组，每组16只分别为假手术组、模型组、阳性药组(尼莫地平30mg/kg)、淫羊菱素小剂量组(8mg/kg)、淫羊蓉素中剂量组(15mg/kg)、淫羊藿素大剂量组(30mg/kg)。采用结扎大鼠大脑中动脉复制局部脑梗死的动物模型，观察其对局部脑缺血及梗死的影响，考察其对脑梗死面积的影响。结果见表4。
表4淫羊愛素对大鼠大脑中动脉结扎所致脑梗死面积占全脑面积百分比的影响(x±s)
组別剂量动物数总面积梗死面积梗死区占全脑面积比
(迈g/kg)(n)(咖1)(mmz)例(％ )
假手术组—161151. 8" 50. 94——
模型组—121168. 30 ±39. 96105. 78 ±46. 809. 31 ±3.53
尼莫地平组30151161. 80±65. 3252. 68 ±16,74"'4. 56 ± 1. 45—'
淫羊泰素小剂量组8131148. 67 ±59. 1370. Sl ±15.18"5. 90± 1. l广
淫羊藿素中剂量组15151150. 17±45. 2660. 56 ± 20. 02"5. 12 ±1.92"
淫羊荣素大剂量组30151156. 53± 75. 7448. 92 ±17. 63"'4. 46 ± 1. 56".
与才莫型组比较，"AO. 01,…代0. 001
由表4可见，单侧大脑中动脉结扎后，模型组损伤严重，脑梗死面积显著增大。与模型组比较，尼莫地平组及药物各剂量组均能很好改善脑动脉缺血导致的局部脑梗死，显著缩小脑梗死面积，改善梗死情况大剂量效果最显著，作用优于阳性药。
实施例3:淫羊蓉素对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型脑梗死面积占全脑面积的百分比的影响。
将Wistar大鼠96只，随机分为6组，每组16只分别为假手术组、才莫型组、阳性药组(尼莫地平30mg/kg)、淫羊密素小剂量组(8mg/kg)、淫羊泰素中
9剂量组(15mg/kg)、淫羊藿素大剂量组(30mg/kg)。采用颈总动脉插线，致大鼠大脑中动脉阻塞，缺血lh后再灌注，导致缺血再灌注损伤;f莫型。考察其对局部脑缺血后再灌注造成的梗死的影响，考察其对脑梗死面积的影响。结果见表5。
表5淫羊愛素对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型脑梗死面积占全脑面积的百分比的影响(x±"
组別剂量动物数总面积梗死面积梗死区占全脑面积比
(mg/kg)U)(,。例(％ )
假手术组—161076. 71 ±85. 25——
模型组131040. 27 ±55. 71324. 19 ±38. 8328. 43 ±3.13
尼莫地平组3015薩，44 ±92. 62277. 12 ±25. 70".23. 41 ±2. 22...
淫羊藿素小剂量组8141075. 75 ±83. 95297. 96 ± 27. 02"25. 69 ±2. 33"
淫羊蓬素中剂量组15141051. 87 ±61.29278. 03 ± 42. 90"24. 68 ±3. 36"
淫羊蓬素大剂量组3015,.26 ±74. 94267. 25 ±35. 51"'22. 98 ± 3. 65."
与冲莫型组比较，"代O. 01，"'代o. 001
由表5可见，大鼠大脑缺血再灌注后，模型组动物的脑组织梗死严重，梗死面积显著增大。与模型组比较，尼莫地平组及药物各剂量组均能很好改善大脑中动脉缺血导致的脑梗死，显著缩小梗死面积，改善梗死情况大剂量组效果最显著，作用优于阳性药。
综合以上结果，淫羊奢素对单纯大脑中动脉结扎，及结扎后再灌注损伤所致的2种脑梗死大鼠模型的脑梗死面积均具有显著的治疗作用，其通过改善缺血，减少梗死范围等作用发挥对局部脑梗死的治疗作用，可以推断淫羊度素对人类的脑梗死具有治疗作用，可以用于人类心血管相关疾病的治疗。实施例4:淫羊藿素胶嚢剂的制备
取淫羊藿素20g，研磨粉碎，过80目筛。加过80目筛的微晶纤维素40g混合均匀后，加入90y。乙醇作为粘合剂制软材，过30目筛制颗粒，烘干后，过30-80目筛整粒，分装于3号胶嚢中，用铝塑复合包装，即得。每粒胶嚢含淫羊愛素 0.02g。 口服给药，每日2次，每次1粒。 实施例5:淫羊度素冻干粉针剂的制备
取淫羊黎素20g，加入2. 3%的甘露醇为支架剂，加入注射用水至1800 ml 搅拌溶解后，加入总配置量2. 0%。活性炭，搅拌半小时，过滤，定容至2000ml， 继以0. 45Mffl 、 0. 22Mffl微孔滤膜分级过滤，滤液以每瓶2ml定量分装于西林瓶 中，冷冻干燥，回充氮气，加塞，轧盖，包装，即得。每支冻干粉针剂含量有 淫羊藿素0. 02g，每天注射给药1次，每次1支。 实施例6:淫羊藿素片剂的制备
取淫羊藿素20g，研磨粉碎，过80目筛。加过80目筛的孩i:晶纤维素20g混 合均匀后，加入2%的羟丙曱纤维素作为粘合剂进行制软材，制粒干燥整粒，加 入4%的崩解剂羧甲基淀粉钠和润滑剂0. 5%硬脂酸镁与细粉混合均勻整粒，混匀， 压片，即得。每片含淫羊藿素O. 03g。 口服给药，每日3次，每次1片。
权利要求
1.如下式所示的淫羊藿素在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。
2. 根据权利要求l所述的应用，其特征在于淫羊藿素在制备防治冠心病药物中 的应用。
3. 根据权利要求1和2所述的应用，其特征在于所述药物是由有效量的淫羊 藿素和药学上可接受的辅料组成。
4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述药物可通过口服、舌下、经 皮、肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉途径给药。
5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述药物以口服剂、注射剂;M;部给药制剂形式存在。
6. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述口服剂包括胶嚢剂、口服液、 口嚼剂、丸剂、片剂、颗粒剂；所述注射剂包括注射液、注射用冻干粉针剂 型；局部给药制剂包括霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂。
全文摘要
本发明涉及淫羊藿素在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。本发明的试验证明，淫羊藿素具有显著防治心脑血管疾病的作用，尤其具有显著防治冠心病的作用。本发明同时还提供了淫羊藿素用于制备防治冠心病的药物制剂。
文档编号A61K31/352GK101637466SQ20081013536
公开日2010年2月3日 申请日期2008年8月1日 优先权日2008年8月1日
发明者周亚伟 申请人:周亚伟