专利名称：：谷胱甘肽传递系统的制作方法
技术领域：
：本发明是关于生物传递系统，特别是关于谷胱甘肽传递系统。现有技术物质要进入脑内会因为血脑屏障的阻碍而受到限制，血脑屏障是由许多脑微血管中的内皮细胞构成，细胞间因为紧密连接(tightjunction),其间隙非常微小，所以可以提供有效的保护作用，以避免外来毒素进入脑中。目前认为仅有脂溶性分子及分子量较低的物质才能利用被动扩散(passivediffusion)的机制通过血脑屏障，进而进入脑中。所以，一些活性物质，例如专门用于治疗脑部或神经方面疾病的蛋白质药物，或作用于中枢神经的多肽类止痛药物，因为其分子量大、亲水性高，所以并不能藉由被动扩散通过血脑屏障进入脑中，并且因为容易遭受血液中酶分解，无法有效通过血脑屏障，发挥其药效。目前文献上提及能够递送亲水性或大分子药物穿透血脑屏障的药物传递系统，除了利用化学修饰增加药物的疏水性藉以通过血脑屏障外，另外就是利用吸收介导的转运(absorption-mediatedtransport,AMT)、载体介导的细月包转运(carrier-mediatedtranscytosis,CMT)或受体介导的纟田胞转运(receptor-mediatedtrancytosis,RMT)这三种方式将药物载体带进脑中，其中以吸收介导的转运(AMT)方式进入脑中的，大部分是以带电荷的药物载体为主，藉由电荷吸附在内皮细胞后，再通过血脑屏障进入脑中。以载体介导的细胞转运(CMT)方式通过血脑屏障的，大都是一些亲水性的金属离子，如钠、钾，或是一些二肽(di-peptide)、三肽(tri-peptide)或葡萄糖，借着内皮细胞上面的转运体(transporter)，进入脑中。而一些大分子，如胰岛素(insulin)、运铁蛋白(transfemn)或低密度脂蛋白(low-densitylipoprotein,LDL)，则是利用受体介导的细胞转运(RMT)的方式，通过血脑屏障进入脑中。谷胱甘肽(glutathione,GSH)为一种内源性的抗氧化剂，缺乏时会造成多种神经性病症。血中的谷胱甘肽(GSH)浓度长期过低也将会造成慢性疲劳综合症(chronicfatiguesyndrome,CFS)。1988年，KiwadaHiroshi等在JP63002922专利中，曾提及将长碳链的酰基谷胱甘肽(N-acylglutathione)(例如棕榈酸谷胱甘肽(N-palmitoylglutathione))与磷脂质(例如磷脂胆碱(phosphotidylcholine))制备成脂质体，可利用其蓄积于肝脏的特性，靶向肝脏，增加药物于肝脏的递送速度，进而治疗肝脏相关疾病。1994年时，BerislavV.Zlokovic等曽报导，利用天竺鼠可以证实谷胱甘肽(GSH)这种三肽可以经由特殊传递途径，不纟皮分解^C坏，完整地自血液进入脑微血管中，再通过血脑屏障(bloodbrainbarrier,BBB)后，进入天竺鼠的脑中，此特殊途径为谷胱甘肽转运体(GSH-transporter)。在1995年时，BerislavV.Zlokovic也曽于其发表的文献中提及谷胱甘肽(GSH)以毫摩尔(millimolar)的浓度存在于脑星状细胞(astrocyte)及内皮细胞(endothelium)中。RamKannan等在1995年的文献中曾才艮导，脑内皮细胞对谷胱甘肽(GSH)的吞噬作用与钠离子浓度有关。若钠离子较低，会抑制脑内皮细胞对谷胱甘肽(GSH)的吞噬作用。同时并指出，钠依赖型谷胱甘肽转运体(Na-dependentGSHtransporter)负责吞谨作用，位于血脑屏障的血液侧(luminalside)。非钠依赖型谷胱甘月太專争运体(Na-independentGSHtransporter)负责排出作用(efflux),位于血脑屏障的脑腔侧(abluminalside)。并且以大鼠及天竺鼠的脑，经表达转录后，建立大白鼠肝小管谷胱甘肽转运体(rathepaticcanalicularGSHtransporter,RcGshT)系统，以分析cDNA片段(片段5,78及11~12)的方式，证实其中片段7为钠依赖型谷胱甘肽转运体。片段5及11为非钠依赖型谷胱甘肽转运体。在1999年的文献中，使用小鼠脑内皮细胞才朱(mousebrainendothelialcellline,MBEC-4)作为血脑屏障的体外模型，并且证实钠依赖型谷胱甘肽转运体(Na-dependentGSHtransporter)是位于小鼠脑内皮细月包才朱的血液侧。RamKannan等更在2000年时，证实在人类脑血管内皮细胞(humancerebrovascularendothelialcell,HCEC)中，谷胱甘肽(GSH)的确是利用钠依赖型谷胱甘肽转运体(Na-dependentGSHtransporter)来递送进入血脑屏障。并且膜(luminalplasmamembrane)。2003年，ZhaoZhiyang等在US2003/109555专利中，也提到将谷胱甘肽s-转移酶/谷胱甘肽((glutathiones-tmnsferase,GST)/(glutathione,GSH))，利:用磺胺(sulfonamide)共价键，结合于抗癌药物上，制备成药物前体后，能够主动靶定于特定的癌细胞上，并且能在切断磺胺共价^:后，释放药物以达到疗效。所以，此改质方法可以保护药物的胺基团，增加药物的溶解度及改变药物于身体的吸收及分布。此专利的重点，主要着重于如何以磺胺共价键键合，将谷胱甘肽s-转移酶/谷胱甘肽(GST/GSH)合成于特定抗癌药物上。
发明内容本发明提供一种传递系统，包括载体或活性物质，以及连接于该载体或活性物质上的谷胱甘肽或其衍生物。本发明还提供一种化合物，包括基团，该基团包括维生素E衍生物或磷脂质衍生物，与该基团连接的聚乙二醇或其衍生物，以及与该聚乙二醇或其衍生物连接的谷胱甘肽或其衍生物。具体地，本发明提供如下方面(1)一种传递系统，包括载体或活性物质；以及连接于该载体或活性物质上的谷胱甘肽或其衍生物。(2)上述(l)所述的传递系统，其中该载体是包括纳米微粒、高分子纳米微粒、固化脂质纳米微粒、高分子微嚢、脂质体、微乳或液态纳米微粒。(3)上述(2)所述的传递系统，其中该脂质体是包括卵磷脂或氢化卵磷脂。(4)上述(3)所述的传递系统，其中该脂质体还包括胆固醇、水溶性维生素E或十八胺。(5)上述(3)所述的传递系统，其中该卵磷脂或氢化卵磷脂的摩尔比大体介于0.5~100%。(6)上述(4)所述的传递系统，其中该胆固醇或水溶性维生素E的摩尔比大体介于0.005~75%,十八胺的摩尔比大体介于0.00125%。(7)上述(l)所述的传递系统，其中该载体还包括活性物质，包封于该载体内部。(8)上述(7)所述的传递系统，其中该活性物质包括小分子化合物、多肽、蛋白质、DNA质体、寡核酸或基因片段。(9)上述(7)所述的传递系统，其中该活性物质的摩尔比大体介于0細550%。(10)上述(l)所述的传递系统，其中该载体或活性物质是靶向于器官组织上的或血脑屏障上的谷胱甘肽转运体。(11)上述(7)所述的传递系统，其中该活性物质是对脑内皮细胞具有穿透率。(12)上述(ll)所述的传递系统，其中该活性物质的细胞穿透率大体介于0.01~100%。(13)—种化合物，包括基团，包括维生素E衍生物或磷脂质衍生物；与该基团连接的聚乙二醇或其衍生物；以及与该聚乙二醇或其衍生物连接的谷胱甘肽或其衍生物。(14)上述(13)所述的化合物，其中该维生素E衍生物包括生育酚衍生物或生育三烯醇衍生物。(15)上述(13)所述的化合物，其中该维生素E衍生物包括a-生育酚、卩-生育酚、Y-生育酚、S-生育酚、a-生育三烯醇、(3-生育三烯醇、Y-生育三烯醇、S-生育三烯醇、琥珀酸a-生育酚、琥珀酸(3-生育酚、琥珀酸y-生育酚、琥珀酸S-生育酚、琥珀酸a-生育三烯醇、琥珀酸(3-生育三烯醇、琥珀酸y-生育三烯醇、琥珀酸S-生育三烯醇、醋酸a-生育酚、醋酸(3-生育酚、醋酸Y-生育酚、醋酸S-生育酚、醋酸a-生育三烯醇、醋酸(3-生育三烯醇、醋酸Y-生育三烯醇、醋酸S-生育三烯醇、烟酸a-生育酚、烟酸p-生育酚、烟酸Y-生育酚、烟酸5-生育酚、烟酸a-生育三烯醇、烟酸P-生育三烯醇、烟酸Y-生育三烯醇、烟酸5-生育三烯醇、磷酸a-生育酚、磷酸(3-生育酚、磷酸，生育酚、磷酸S-生育酚、磷酸a-生育三烯醇、磷酸P-生育三烯醇、磷酸Y-生育三烯醇或磷酸5-生育三烯醇。(16)上述(13)所述的化合物，其中该磷脂质衍生物具有化学式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中A,为神经鞘胺醇，R,包括辛酰基或椋榈酰基。(17)上述(13)所述的化合物，其中该磷脂质衍生物具有化学式(II)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中A2为磷酸乙醇胺，R2包括肉豆蔻酰基、棕榈酰基、硬脂酰基或油酰基。(18)上述(13)所述的化合物，其中该聚乙二醇或其衍生物的聚合度大体介于6-210。(19)上述(13)所述的化合物，其中当该基团为维生素E衍生物时，该聚乙二醇或其衍生物的分子量大体介于300~10，000。(20)上述(13)所述的化合物，其中该聚乙二醇衍生物是包括羧酸、马来酰亚胺、PDP、酰胺或生物素。为让本发明的上述目的、特征及优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附图，作详细说明如下图1是为本发明的传递系统。图2是为本发明不同曱硫脑啡呔(met-enkephalin)载体的最大可能效果(maximalpossibleeffect,MPE)。图3是为本发明不同曱硫脑啡呔载体的曲面下面积(areaundercurve,AUC)。图4是为本发明不同加巴喷丁(gabapentin)载体的最大可能效果。图5是为本发明不同加巴喷丁载体的曲面下面积。图6是为本发明未包封的曱硫脑啡呔与曱硫脑啡呔载体的血中稳定性比主要组件符号说明10~传递系统；20~脂质体；30~配体；40基团(维生素E衍生物或磷脂质衍生物);50聚乙二醇或其衍生物；60-谷胱甘肽或其衍生物。具体实施例方式本发明提供一种传递系统，包括载体或活性物质，以及连接于载体或活性物质上的谷胱甘肽谷胱甘肽或其衍生物。上述载体可包括纳米微粒、高分子纳米微粒、固化脂质纳米微粒、高分子微嚢、脂质体、微乳或液态纳米微粒。而脂质体可包括例如大豆卵磷脂(soyledthin)的卵磷脂类或例如氬化大豆卵磷月旨(hydrogenatedsoylecithin)的氢化卯磷脂类成分。上述脂质体还可包括胆固醇、水溶性维生素E或十八胺(octadecylamine),以增加血中稳定性或电荷数量。在脂质体中，卵磷脂或氢化卵磷脂的摩尔比大体介于0.5~100%，胆固醇或水溶性维生素E的摩尔比大体介于0.005~75%，而十八胺的摩尔比大体介于0.001~25%。此外，本发明载体可包封活性物质，例如小分子化合物、多肽、蛋白质、DNA质体、寡核酸或基因片段。此活性物质于载体中的摩尔比大体介于0.0005~95%，而载体的包封率大体介于0.5~100%。(glutathionetransporter),例如心脏、肺脏、肝脏、肾脏或血脑屏障上的谷胱甘肽转运体。细胞组成的血脑屏障层，其穿透率大体介于0.01~100%。本发明还提供一种化合物，包括由维生素E衍生物或磷脂质衍生物组成的基团，与基团连接的聚乙二醇或其衍生物，以及与聚乙二醇或其衍生物连接的谷胱甘肽或其衍生物。上述维生素E衍生物可包括a-生育酚(a-tocopherol)、(3-生育酚(|3-tocopherol)、y-生育酚("y隱tocopherol)、5-生育酚(5-tocophero1)、a-生育三晞醇(a-tocotrienol)、卩-生育三烯醇((3-tocotrieno1)、y-生育三烯醇(Y画tocotrienol)、5-生育三烯醇(5-tocotrieno1)、琥珀酸a-生育酚(a-tocopherolsuccinate)、琥珀酸(3-生育酚(卩-tocopherolsuccinate)、琥珀酸y-生育酚(^-tocopherolsuccinate)、琥珀酸5-生育酚(5-tocopherolsuccinate)、琥珀酸a-生育三烯醇(a-tocotrienolsuccinate)、；虎3白酉l1(3-生育三歸醇(卩-tocotrienolsuccinate)、琥玉白酸y-生育三烯醇(y-tocotrienolsuccinate)、琥珀酸S-生育三烯醇(S-tocotrienolsuccinate)、醋酸a-生育酚(a隱tocopherolacetate)、醋酸卩-生育酚(卩-tocopherolacetate)、醋酸y-生育酚(^-tocopherolacetate)、醋酸5-生育酚(^-tocopherolacetate)、醋酸a-生育三烯醇(a-tocotrienolacetate)、醋酸卩-生育三蜂醇(卩-tocotrienolacetate)、醋酸y-生育三梯醇(y-tocotrienolacetate)、醋酸5-生育三歸醇(5-tocotrienolacetate)、烟酸a-生育酚(a-tocopherolnicotinate)、烟酸(3-生育酚((3-tocophero1nicotinate)、》因酉臾y一生育酉分(^-tocopherolnicotinate)、烟酸5-生育盼(5-tocophero1nicotinate)、烟酸a-生育三婦醇(a-tocotrienolnicotinate)、烟酸(3-生育三歸醇((3-tocotrieno1nicotinate)、烟酸y-生育三烯醇(y-tocotrienolnicotinate)、》因酸5-生育三丈希酉享(5-tocotrieno1nicotinate)、石粦酉臾a-生育酚(a-tocopherolphosphate)、磷酸P画生育酚(卩-tocopherolphosphate)、磷酸y-生育酚(^-tocopherolphosphate)、磷酸§-生育酚(^-tocopherolphosphate)、石粦酸a-生育三歸酉享(a-tocotrienolphosphate)、石粦酸卩画生育三辨醇(P-tocotrienolphosphate)、石粦酸y陽生育三蜂醇(y-tocotrienolphosphate)或碌酸5-生育三》希酉事(5-tocotrienolphosphate)。上述磷脂质衍生物可具有下列化学式(i)或(n)化学式(I)中，A,可为神经鞘氨醇(sphingosine)，&可包括辛酰基(octanoyl)或棕榈酰基(palmitoyl)。化学式(II)中，A2可为磷酸乙醇胺(phosphoethanoamine)，R2可包才舌肉豆蔻酰基(myristoyl)、才宗扭]酰基(palmitoyl)、硬脂酰基(stearoyl)或油酰基(oleoyl)。上述聚乙二醇或其衍生物的聚合度(polymerizationnumber)大体介于6~210。此聚乙二醇或其衍生物的分子量可随连接不同的维生素E衍生物或磷脂质衍生物而改变，例如，当连接基团为维生素E衍生物时，聚乙二醇或其衍生物的分子量大体介于300~10,000，当连接基团为例如化学式(I)所示的磷脂质衍生物时，聚乙二醇或其衍生物的分子量大体介于750-5,000,当连接基团为例如化学式(II)所示的磷脂质衍生物时，聚乙二醇或其衍生物的分子量大体介于3505，000。上述聚乙二醇衍生物可包括羧酸、马来酰亚胺(maleimide)、PDP、酰胺(amide)或生物素(biotin)。请参阅图1,说明本发明的传递系统。传递系统10包括脂质体20与连接其上的配体30。配体30包括由维生素E衍生物或磷脂质衍生物组成的基团40,与基团40连接的聚乙二醇或其衍生物50，以及与聚乙二醇或其衍生物50连接的谷胱甘肽或其衍生物60。本发明利用连接谷胱甘肽配体的靶向载体运送例如蛋白质、多肽或d、分子化合物的活性物质，使活性物质藉由载体介导的细胞转运(carrier-mediatedtranscytosis,CMT)或受体介导的纟田月包專争运(receptor—mediatedtranscytosis,RMT)的方式通过血脑屏障，进行脑部或神经疾病的治疗。实施例实施例1TPGS-谷胱甘肽制备<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>首先，取l当量的N-Cbz谷氨酰胺(N-Cbzglutamine)与1当量的羟基琥珀碌b亚胺(N-hydroxysuccinimide,HOSu)溶于15毫升的二曱醚(dimethylether,DME)溶剂，并冷却至摄氏0度。之后，在相同温度下，加入1当量的二环己基碳二亚胺(dicyclohexylcarbodiimide，DIC)搅拌反应4小时。反应混合物于冷冻静置2小时后过滤。过滤掉二环己基尿素(dicyclohexylurea,DCU)并抽干溶剂后，所得的纯化合物产率为98%。接着，将残余物浸于乙醚/己烷溶液中并过滤。之后，在烘箱中干燥，以得到白色固体。之后，将上述白色固体、1当量的半胱氨酸锂与5当量的碳酸钠混合溶于15毫升水中，并加入乙腈溶剂，以生成步骤2的中间产物。上述混合物继续在室温中强烈搅拌3~6小时，直至TLC分析结果指出步骤2的中间产物消失为止。接着，以200毫升的水清洗溶液，有机层以石克酸钠干燥并过滤。最后，在烘箱中浓缩，以得到化合物2。接着，将化合物2与1当量的羟基琥珀硫亚胺(N-hydroxysuccinimide，HOSu)溶于15毫升的二甲醚(dimethylether,DME)溶剂，并冷却至摄氏0度。之后，在相同温度下，加入1当量的二环己基碳二亚胺(dicyclohexylcarbodiimide，DIC)搅拌反应4小时。反应混合物于冷冻静置2小时后过滤。过滤掉二环己基尿素并抽干溶剂后，加入1当量的甘氨酸锂与5当量的碳酸钠混合溶于15毫升水中，并加入乙腈溶剂，以生成步骤4的中间产物。上述混合物继续在室溫中强烈搅拌36小时，直至TLC分析结果指出步骤4的中间产物消失为止。接着，以200毫升的水清洗溶液，有机层以硫酸钠千燥并过滤。最后，在烘箱中浓缩，以得到化合物3。接着，加入琥珀酸a-生育酚聚乙二醇1000(a-tocopherylpolyethyleneglycol1000succinate,TPGS-OH)与化合物3进行偶合酯化反应，以得到化合物4。接着，加入10%的Pd/C催化剂(上述三肽-TPGS重量的0.2倍)至溶有化合物4的100毫升甲醇中。之后，将上述悬浮液于室温充满氬气环境中搅拌16小时并过滤。残留物以乙醇结晶，以得到化合物5。接着，在二氯曱烷存在下，加入三乙基硅烷(triethylsilane)与TFA对化合物5进行去保护，以得到化合物6，即为TPGS-谷胱甘肽化合物。曱硫脑啡呔载体溶液制备首先，取0.5克的脂质置于12.5毫升的氧化锆研磨钵中。本实施例脂质组成包括83.2。/。的大豆磷脂胆碱(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、4.2%的琥珀酸a画生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)、4.2%的谷胱甘肽-TPGS(glutathione-TPGS，GSH-TPGS)以及8.4%的胆固醇。同时，取适量的曱硫脑啡呔溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制备4%的药物溶液。之后，取0.5毫升的药物溶液与5颗氧化锆研磨球(直径10毫米)置于研磨钵中，并以500rpm研磨1小时，以形成凝稠膏状物。之后，取0.2克的祐稠膏状物置于IO毫升烧杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM，pH7.4),于室温下进行水合反应1小时，即可获得经谷胱甘肽(GSH)修饰的曱硫脑啡呔脂质体溶液。脂质体中的曱硫脑啡呔浓度为0.56mg/mL,包封率达33.3%。脂质体平均粒径为173.1纳米，分子量多分散性指数(polydispersityindex,PI)为0.243。实施例2~6实施例26的制备方法与实施例1类似，其差别在于载体组成的不同，请参阅表l与表2。表1(摩尔比)___<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实施例7加巴喷丁载体溶液制备首先，取0.5克的脂质置于12.5毫升的氧化锆研磨钵中。本实施例脂质组成包括83.2。/。的大豆磷脂胆碱(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、4.2%的琥珀酸a-生育酚盐聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)、4.2%的谷胱甘肽-TPGS(glutathione-TPGS，GSH-TPGS)以及8.4%的胆固醇。同时，取适量的加巴喷丁溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4)，以制备10。/。的药物溶液。之后，取0.5毫升的药物溶液与5颗氧化锆研磨球(直径10毫米)置于研磨钵中，并以500rpm研磨1小时，以形成祐稠膏状物。之后，取0.2克的黏稠膏状物置于10毫升烧杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM，pH7.4)，于室温下进行水合反应1小时，即可获得经谷胱甘肽(GSH)修饰的加巴喷丁脂质体溶液。脂质体中的加巴喷丁浓度为1.08mg/mL,包封率达35.7%。脂质体平均粒径为147.7纳米，分子量多分散性指数(polydispersityindex,PI)为0.157。对比例1曱硫脑啡呔载体溶液制备首先，取0.5克的脂质置于12.5毫升的氧化锆研磨钵中。本实施例脂质组成包括83.2。/。的大豆磷脂胆碱(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、8.4%的琥珀酸a-生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a画tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)以及8.4%的胆固醇。同时，取适量的曱石克脑啡呔溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制备4%的药物溶液。之后，取0.5毫升的药物溶液与5颗氧化锆研磨球(直径10毫米)置于研磨钵中，并以500rpm研磨1小时，以形成黏稠膏状物。之后，取0.2克的黏稠膏状物置于10毫升烧杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM,pH7.4),于室温下进行水合反应1小时，即可获得曱硫脑啡呔脂质体溶液。脂质体中的曱硫脑啡呔浓度为0.57mg/mL,包封率达31.1%。脂质体平均粒径为164.1纳米，分子量多分散性指数(polydispersityindex,PI)为0.281。只十比例23对比例2~3的制备方法与对比例1类似，其差别在于载体组成的不同，请参阅表3与表4。表3(摩尔比)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>加巴喷丁载体溶液制备首先，取0.5克的脂质置于12.5毫升的氧化锆研磨钵中。本实施例脂质组成包括83.2。/。的大豆磷脂胆碱(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、8.4%的琥珀酸a-生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500)，TPGS)以及8.4。/。的胆固醇。同时，取适量的加巴喷丁溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制备10。/。的药物溶液。之后，取0.5毫升的药物溶液与5颗氧化锆研磨球(直径10毫米)置于研磨钵中，并以500rpm研磨1小时，以形成祐稠膏状物。之后，取0.2克的黏稠膏状物置于10毫升烧杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM,pH7.4)，于室温下进行水合反应1小时，即可获得加巴喷丁脂质体溶液。脂质体中的加巴喷丁浓度为1.17mg/mL,包封率达38.5%。脂质体平均粒径为155.8纳米，分子量多分散性指数(polydispersityindex,PI)为0.186。曱硫脑啡呔脂质体体外穿透率测试1本发明利用模拟人体血脑屏障的RBE4/glioma细胞模型量测曱硫脑啡呔的穿透率。实施例12(经谷胱甘肽修饰、及对试结果，请参阅表5。表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>实施例1167.79.81.3实施例2165.29.81.2测试结果发现，实施例l、2的穿透率(9.8%)明显较对比例1(3.4%)高出许多，大约2.82倍。曱硫脑啡呔脂质体体外穿透率测试2本发明利用模拟人体血脑屏障的RBE4/glioma细胞模型量测曱硫脑啡呔的穿透率。实施例3(经谷胱甘肽修饰)及对比例2(未经谷胱甘肽修饰)的测试结果，请参阅表6。表6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>测试结果发现，实施例3的穿透率(6.99%)明显较对比例2(3.55%)高出许多，大约1.96倍。此外，若先以谷胱甘肽与细胞培养30分钟后，再测试实施例3的穿透率，结果发现穿透率降低0.25%。原因是先行加入的谷胱甘肽会先将细胞上的谷胱甘肽受体占满，造成实施例3无法经由与谷胱甘肽受体的结合，而通过血脑屏障。所以，可以证实谷胱甘肽-曱硫脑啡呔脂质体配方，是经由与谷胱甘肽受体的结合，诱发受体介导的细胞转运(receptor-mediatedtranscytosis)或载体介导的纟田月包4争运(carrier-mediatedtranscytosis)4乍用而通过血月卤屏障。曱硫脑啡呔脂质体热板测试本发明利用热板药效实验测试小鼠静脉注射给药后，在摄氏55度的热板上对热的止痛效果。结果请参阅图2，曱硫脑啡呔溶液以30mg/kg的剂量给药后，并无明显止痛效果产生，证实未经靶向修饰的曱硫脑啡呔无法经由静脉注射小鼠产生药效。对比例3为未经谷胱甘肽修饰的曱硫脑啡呔脂质体配方，在30mg/kg的给药剂量下，给药90分钟后，可达到最大可能效果(MPE=13%)。实施例5为经过谷胱甘肽修饰的曱硫脑啡呔脂质体配方，在30mg/kg的给药剂量下，给药60分钟后，可达到最大可能效果(MPE二37。/。)。继续参阅图3，由曲线下面积(areaundercurve,AUC)数据可发现，实施例5的止痛效果为对比例3的3.2倍，更为曱硫脑啡呔溶液止痛效果的14.7倍。由此可证实经谷胱甘肽修饰的药物载体，的确可有效保护药物并穿透血脑屏障，达到止痛效果。加巴喷丁脂质体热板测试本发明利用热板药效实验测试小鼠静脉注射给药后，在摄氏55度的热板上对热的止痛效果。结果请参阅图4，加巴喷丁溶液以30mg/kg的剂量给药后，并无明显止痛效果产生，证实未经靶向修饰的加巴喷丁无法经由静脉注射小鼠产生药效。对比例4为未经谷胱甘肽修饰的加巴喷丁脂质体配方，在10mg/kg的给药剂量下，给药270分钟后，可达到最大可能效果(MPE=3.15%)。实施例7为经过谷胱甘肽修饰的加巴喷丁脂质体配方，在10mg/kg的给药剂量下，给药180分钟后，可达到最大可能效果(MPE=4.47%)。继续参阅图5,由曲线下面积(areaundercurve,AUC)^t据可发现，实施例7的止痛效果为对比例4的1.544咅，更为加巴喷丁;容液止痛效果的2.76倍。由此可证实经谷胱甘肽修饰的药物载体，的确可有效保护药物并穿透血脑屏障，达到止痛效果。甲硫脑啡呔脂质体血中稳定性测试首先，取实施例5制作的载体溶液与胎牛血清(FBS)以1:l(体积比)的比例混合，并置于摄氏37度的水浴。待分别0、1、2及4小时后，取出上述混合液进行柱层析分析(SephroxCL-4B，75mmx120mm)。之后，测定曱硫脑啡呔于脂质体内的残留浓度，结果请参阅图6。结果发现，实施例5制作的载体溶液，置血清中4小时后，其曱硫脑啡呔浓度仍维持起始浓度的93%以上。然未包封的曱硫脑啡呔在血中的残存量却不到2%。由此可知，本发明载体确实可提升药物在血液中的稳定性。虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何熟习此项技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作更动与润饰，因此本发明的保护范围当视后附的权利要求所界定者为准。权利要求1.一种化合物，包括基团，包括维生素E衍生物或磷脂质衍生物；与该基团连接的聚乙二醇或其衍生物；以及与该聚乙二醇或其衍生物连接的谷胱甘肽或其衍生物。2.如权利要求第1项所述的化合物，其中该维生素E衍生物包括生育酚衍生物或生育三烯醇书t生物。3.如权利要求第1项所述的化合物，其中该维生素E衍生物包括a-生育酚、p-生育酚、y-生育酚、s-生育酚、a-生育三烯醇、(3-生育三烯醇、y-生育三烯醇、5-生育三烯醇、琥珀酸a-生育酚、琥珀酸p-生育酚、琥珀酸y-生育酚、琥珀酸5-生育酚、琥珀酸a-生育三烯醇、琥珀酸(3-生育三烯醇、琥珀酸Y-生育三烯醇、琥珀酸S-生育三烯醇、醋酸a-生育酚、醋酸P-生育酚、醋酸Y-生育酚、醋酸S-生育酚、醋酸a-生育三烯醇、醋酸(3-生育三烯醇、醋酸Y-生育三烯醇、醋酸5-生育三烯醇、烟酸a-生育酚、烟酸(3-生育酚、烟酸y-生育酚、烟酸5-生育酚、烟酸a-生育三烯醇、烟酸P-生育三烯醇、烟酸y-生育三烯醇、烟酸5-生育三烯醇、磷酸a-生育酚、磷酸P-生育酚、磷酸Y-生育酚、磷酸s-生育酚、磷酸a-生育三烯醇、磷酸|3-生育三烯醇、磷酸y-生育三烯醇或磷酸S-生育三烯醇。4.如权利要求第1项所述的化合物，其中该磷脂质衍生物具有化学式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)其中A，为神经鞘胺醇，R,包括辛酰基或棕榈酰基。5.如权利要求第1项所述的化合物，其中该磷脂质衍生物具有化学式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(II)其中A2为磷酸乙醇胺，R2包括肉豆蔻酰基、棕榈酰基、硬脂酰基或油酰基。6.如权利要求第1项所述的化合物，其中该聚乙二醇或其衍生物的聚合度大体介于6~210。7.如权利要求第1项所述的化合物，其中当该基团为维生素E衍生物时，该聚乙二醇或其衍生物的分子量大体介于30010，000。8.如权利要求第1项所述的化合物，其中该聚乙二醇衍生物是包括羧酸、马来酰亚胺、PDP、酰胺或生物素。全文摘要本发明提供一种传递系统，包括载体或活性物质，以及连接于该载体或活性物质上的谷胱甘肽或其衍生物。本发明还提供一种化合物，包括基团，该基团包括维生素E衍生物或磷脂质衍生物，与该基团连接的聚乙二醇或其衍生物，以及与该聚乙二醇或其衍生物连接的谷胱甘肽或其衍生物。文档编号A61P39/00GK101385859SQ200810169358公开日2009年3月18日申请日期2006年1月19日优先权日2005年12月19日发明者吕欣芝,林一峰,王蔼君,简启恒,黎世达申请人:财团法人工业技术研究院