专利名称：用于治疗肌营养不良症的非免疫抑制性环孢素的制作方法
用于治疗肌营养不良症的非免疫抑制性环孢素本发明涉及非免疫抑制性环孢素A衍生物在减少被诊断有患有肢带型肌营养不 良(LGMD)，特别是肌聚糖病(sarcoglycanopathy)的受试者中肌纤维坏死的诱发和肌变性 的应用。肌营养不良症(MD)包括多组主要累及横纹肌组织的遗传性障碍，这些障碍导致 进行性肌无力，消瘦，并且在许多病例中，导致早产儿死亡。与人MD有因果关系的许多特征 性突变与结构性粘附蛋白中的改变有关，所述粘附蛋白将基础的收缩蛋白粘附在基膜上， 从而为骨骼肌细胞膜(肌膜)提供刚性，或与直接稳定或修复细胞膜的蛋白，诸如肌聚糖 (sarcoglycan)或肌营养不良蛋白(dystrophin)有关。肌聚糖基因α-，β-, Υ-，和δ-肌聚糖基因的遗传突变导致包括异源综合征， LGMD及其亚组，肌聚糖病的骨骼肌疾病。肌聚糖病的综合征或表型取决于哪种肌聚糖基因 被突变以及遗传突变的类型(等位基因变异体)，并且显示四种形式的特殊功能障碍=LGMD 2C型，2D型，2Ε型和2F型(分别为Υ-，α-，β-，和δ -肌聚糖基因的突变)，它们占所有 被诊断为LGMD病例的25%。具体地，在δ -肌聚糖基因中具体观察到的不同突变导致LGMD 2F型或LGMD2F的严重功能障碍(Online Mendelian Inheritance in Man(人类孟德尔遗 传联机系统)
#601287，genetic mutations (遗传突变)
601411. Emery 等， The Lancet,2002，359 :687_695·)。不同的LGMD类型的特征为伴有萎缩的进行性消瘦和无力，主要累及分别在肩 部和髋部近端的臂部和腿部的肌肉。疾病表型类似于严重的杜氏(Ducherme)或贝克 (Becker)肌营养不良综合征的那些表型。然而，后两者疾病涉及不同的分子机制和遗传障 碍。在出现LGMD的分子诊断之前，LGMD患者经常被诊断为患有患有杜氏肌营养不良。疾 病的发作从幼儿时期至成人期的轻度至重度临床类型不等。至多25%的患者显示疾病的 严重形式，发生严重的腰椎前凸，跟腱挛缩，肌肉肥大，心肌病和心脏传导缺陷。小腿或舌 肥大，累及肌肉的选择性和晚期心脏并发症或多或少地与各不同的临床类型特异性地相关 (DaniAle 等，IntJ. Biochem Cell Biol.，2007 ；39 1608-1624)。进行性无力导致限制性肺 疾病和需要辅助通气的肺换气不足。通常，发病率和死亡率存在差异。早发者，发展到死亡 的进程是非常迅速的。死亡经常是呼吸系统并发症的结局。迄今为止，对于患有任意一种LGMD综合征的患者没有特异性的治疗方法。用于保 留肌肉功能的积极支持疗法，例如，矫形术，手术和物理治疗使功能性能力达到最大，并且 延长了预期寿命。然而，这些措施不能阻止肌纤维变性和呼吸系统并发症的最终发生。随着缺少参与肌营养不良症的特异基因的动物的开发，不久会更好地理解肌聚糖 病的基础的分子机制。近年来，显示缺少S-肌聚糖的小鼠(scgd-/-小鼠)的肌肉细胞由 于S-肌聚糖基因(SCgd)的靶向失活而具有增加的细胞钙内流的倾向。人们认为肌营养 不良蛋白-糖蛋白复合物(DGC)诸如肌营养不良蛋白或肌聚糖复合物的组分丢失导致肌细 胞膜的物理性质的根本改变，以及肌膜的渗透压泄漏的增加。由膜不稳定性和脆性导致的 不受调控的钙内流通道的激活可引起骨骼肌中的营养不良障碍，导致肌纤维变性和诱发肌 纤维坏死。
Parsons 等(J. Biol. Chem.，2007，282 10068-10078)显示基因缺失引起的钙 / 钙调蛋白激活的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶钙调磷酸酶(钙调磷酸酶(calcineurin))活 性抑制减少了 scgd-/-小鼠中的骨骼肌和肌纤维变性和炎症，并且是细胞保护性的。在用 作贝克肌营养不良模型的缺少mdx基因(肌营养不良基因突变)的小鼠中没有观察到抑 制钙调磷酸酶活性后的类似疾病改善，即使在两种肌营养不良模型中均观察到增加的钙内 流。事实上，钙调磷酸酶转基因的激活保护mdx小鼠(Chakkalakal等，Hum. Mol. Genet.， 2004，13 379-399 ；Stupka 等，ActaNeuropathol.，2004，107 :299_310，但参见 De Luca 等， Am. J. Pathol.，2005，166 :477_489)。Parsons等将钙调磷酸酶鉴定为LGMD治疗的潜在靶 标。基于他们的观察结果，Parsons等建议抑制钙调磷酸酶活性可在选择肌疾病类型，诸如 肢带型肌营养不良中提供一些益处，因此，环孢素(CsA)可能是潜在有益的。导致由LGMD中膜通透性改变所诱发的进行性肌纤维变性的效应器机制还未被明 确，并且是积极研究的主题，其可为最终开发用于患此类疾病的患者的基于机制的新型治 疗策略提供基础。然而，此时，对于治疗患LGMD的患者没有有效的方法可用。因此，有诸如 本文所述的新型治疗方式的需求。本发明的目的是为临床医生提供用于治疗患有LGMD，并且特别是患有肌聚糖病， 更特别地是患有LGMD 2F型的患者中肌纤维坏死和肌变性的诱发和进展的治疗方法。此治 疗方法应该保护肌营养不良骨骼肌以及还保护心肌和膈肌免于坏死，并且应该延缓疾病的进展。本发明人惊奇地发现不抑制钙调磷酸酶的非免疫抑制性环孢素A(CsA)衍生物对 患诊断为LGMD，特别是肌聚糖病，更特别地是LGMD 2F型的受试者的施用是有效的治疗。他 们观察到非免疫抑制性环孢素A衍生物[D-MeAla]3-[EtVal]4-CsA的施用减少了诊断患有 肌纤维坏死，特别是LGMD，更特别地是LGMD 2F型的受试者的肌肉病变，和疾病的变性和进 展，以及通过减少线粒体对潜在的钙超载的敏感性来使肌纤维面积分布正常化。受试者可以是显示由于负责该疾病的显型的基因的缺失或不表达引起的肌营养 不良显性的人或哺乳动物诸如，例如，小鼠。因此，本发明涉及式I的非免疫抑制性环孢素A衍生物，更优选地式II的 非免疫抑制性环孢素A衍生物和最优选地式III的非免疫抑制性环孢素A衍生物 [D-MeAla]3-[EtVall4-CsA在制备用于预防或减少患有LGMD，特别是肌聚糖病，更特 别地LGMD 2F型的受试者中的肌变性的药品中的应用。适于用于本发明的非免疫抑 制性CsA衍生物也描述在Novartis AG的国际专利申请W02005/021028的3_6页上。 [D-MeAla]3-[EtVal]4-CsA 公开在 Wenger 等的国际专利申请 WO 00/01715 中。式 III 的 [D-MeAla]3-[EtVall4-CsA 已经被归属为 CAS 注册号 254435-95-5。用于本发明中的非免疫抑制性CsA衍生物是由下式所述的环状十一氨基酸多肽式I
权利要求
具有下式的非免疫抑制性环孢素A衍生物在制备用于治疗肢带型肌营养不良的药物中的应用，其中W是MeBmt、二氢 MeBmt、8’ 羟基 MeBmt或O 乙酰基 MeBmt；X是αAbu、Val、Thr、Nva或O 甲基苏氨酸(MeOThr)；R是Pro、Sar、(D) MeSer、(D) MeAla或(D) MeSer(O乙酰基)；Y是MeLeu、硫代MeLeu、γ 羟基 MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeaIle或MeaThr；N 乙基Val(EtVal)、N 乙基Ile、N 乙基Thr、N 乙基Phe、N 乙基Tyr或N 乙基Thr(O乙酰基)，其中当R是Sar时Y不是MeLeu；Z是Val、Leu、MeVal或MeLeu；Q是MeLeu、γ 羟基 MeLeu、MeAla或Pro；T1是(D)Ala或Lys；T2是MeLeu或γ 羟基 MeLeu；和T3是MeLeu或MeAla。FPA00001190033500011.tif
2.权利要求1的非免疫抑制性环孢素A衍生物的应用，其中 W 是 MeBmt、二氢-MeBmt>8'-羟基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基苏氨酸(MeOThr)； R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙酰基)；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 轻基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙酰基)，其中当R是Sar时Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -轻基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala;T2 是 MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu。
3.权利要求1的非免疫抑制性环孢素A衍生物的应用，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
4.用于治疗肢带型肌营养不良的具有下式的非免疫抑制性环孢素A衍生物
5.权利要求4的非免疫抑制性环孢素A衍生物，其中 W 是 MeBmt、二氢-MeBmt>8'-羟基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基苏氨酸(MeOThr)； R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙酰基)；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 轻基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙酰基)，其中当R是Sar时Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -轻基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
6.权利要求4的非免疫抑制性环孢素A衍生物，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
7.一种预防或减少患有肢带型肌营养不良的受试者中的肌变性的方法，包括向所述患 者施用有效量的具有下式的非免疫抑制性环孢素A衍生物
8.权利要求7的方法，其中W 是 MeBmt、二氢-MeBmt>8'-羟基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基苏氨酸(MeOThr)；R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙酰基)；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 轻基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙酰基)，其中当R是Sar时Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -轻基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
9.权利要求7的方法，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
全文摘要
本发明涉及非免疫抑制性环孢素A衍生物在预防或减少患有肢带型肌营养不良的受试者中的肌变性中的应用。
文档编号A61K38/13GK101939021SQ200980104370
公开日2011年1月5日 申请日期2009年2月5日 优先权日2008年2月8日
发明者杰弗里·D·莫尔肯廷 申请人:德比奥法姆股份有限公司