专利名称：与修饰的聚糖相关的方法
与修饰的聚糖相关的方法本申请要求于2008年12月19日提交的美国临时专利申请序列号61/139，2M的优先权，其全部披露通过引用结合在此。背景对于结合糖(例如糖蛋白)上的聚糖的修饰通常显著地影响该结合糖的功能。例如，聚糖修饰可以影响糖蛋白正确折叠的能力、稳定性(例如，对蛋白质分解和/或其他降解的耐受性)、催化活性、药效学和/或药物代谢动力学特性、和/或与其他分子的相互作用。糖蛋白的聚糖修饰可以影响该糖蛋白的转运和靶向。例如，糖蛋白的聚糖修饰可以影响该糖蛋白是否保留在细胞内(包括，例如将该糖蛋白正确地靶向到正确的一个或多个亚细胞区室中)，该糖蛋白是否将是膜结合的和/或该糖蛋白是否将是从细胞中分泌的。概述聚糖通常通过唾液酸化(即，通过加入一种唾液酸)来修饰。当分析糖蛋白时通常忽略了对聚糖的非常规修饰，例如硫酸化、磷酸化以及多乙酰化唾液酸化(例如，二乙酰化唾液酸化)。这类修饰可能被忽略至少部分是由于它们的分析的复杂性以及这类修饰的不稳定性。本披露包括以下认识，即虽然如此，非常规修饰是生物学相关的并且用于对它们进行鉴别和定量的方法是令人希望的。除其他事项之外，本披露提供了用于对非常规修饰的聚糖进行富集、鉴别、检测和 /或定量的方法。在很多实施方案中，这些方法包括提供一种聚糖制品(例如唾液酸酶处理过的聚糖制品)，从该聚糖制品中已经释放了唾液酸类。这种制品包括聚糖(即，耐唾液酸酶的聚糖)，这些聚糖没有被释放唾液酸的处理所切割。所提供的方法典型地包括使所提供的聚糖制品经受一种分离技术，该技术将具有一个第一电荷的聚糖类与不带电的聚糖类和 /或具有一个第二电荷的聚糖类分开，和/或基于聚糖的荷质比来分离它们；并且任选地对分离出的聚糖进行定量。在很多实施方案中，定量包括使用至少一种定量标准物。附图简要描述
图1描绘了一个示例性的N-连接的聚糖的结构。图2描绘了聚糖中修饰的残基的非限制性实例甘露糖-6-磷酸(M6P)和6_磺酸基-N-乙酰葡糖胺(6-磺酸基-GlcNAc)。为了清楚起见，在没有另外的修饰下描绘了一种常见唾液酸的结构(N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac))。正常地乙酰化出现在位置5处(已示出)；在位置7、8、和9处可以发生另外的乙酰化。如在此所使用的，关于唾液酸“多乙酰化” 是指在位置7、8、和9中两个或更多个位置处另外的乙酰化。关于唾液酸使用“二乙酰化” 来指在位置7、8、和9中两个位置处另外的乙酰化。图3描绘了在唾液酸酶处理后，从一个中国研究来源获得的，从具有生物活性的促红细胞生成素治疗性糖蛋白衍生的非常规修饰的种类的一种阴离子交换层析-高效液相色谱(AEX-HPLC)图。插图描绘了使用2-氨基苯甲酰胺-壳二糖作为外标物的一个校准曲线。在此被鉴别为非常规修饰的种类的这些峰被进一步鉴别为磷酸化的N-聚糖和硫酸化的聚糖。图4描绘了在唾液酸酶处理后，从具有与图3中所描述的促红细胞生成素治疗性糖蛋白97%的氨基酸序列一致性，具有生物活性的感兴趣的一种第二糖蛋白衍生的非常规修饰的种类的一种阴离子交换层析-高效液相色谱(AEX-HPLC)图，。在此被鉴别为非常规修饰的种类的这些峰被进一步鉴别为磷酸化的N-聚糖和硫酸化的聚糖。图5描绘了来自硫酸化的聚糖的色谱分析的结果，这些聚糖是从小鼠体内产生的单克隆抗EGFR抗体衍生的。通过质谱法来鉴别该峰内聚糖的构成。例如在图B中所使用的命名法中，"5,4,1，0，0+S03” 相应于 HexNAc5、Hex4、Fuel、NeuAcO、NeuGcO+ —个硫酸盐。图6描绘了来自硫酸化的和二乙酰化唾液酸化的聚糖的色谱分析的结果，这些聚糖是从来自一个单克隆(克隆1)的CTLA4-IgG衍生的。通过质谱法来鉴别该峰内聚糖的构成。图7描绘了来自硫酸化的和二乙酰化唾液酸化的聚糖的色谱分析的结果，这些聚糖是从来自两个不同的单克隆(克隆2，上图；克隆3，下图)的CTLA4-IgG衍生的。定义乙酰基如在此所使用的，术语“乙酰基”(也称作“乙酰基团”并且通常缩写为 “Ac”)被用于此处是指具有化学式-COCH3的官能团。乙酰化如在此所使用的，术语“乙酰化”是指通过共价地加入一个乙酰基团来进行修饰。例如，一种乙酰化的聚糖是通过共价地加入一个或多个乙酰基团来进行修饰的一种聚糖。乙酰化的聚糖可以或不可以具有另外的修饰。乙酰化如在此所使用的，术语“乙酰化”(在IUPAC命名法中也被称作“乙酰基团化”)是指将一个或多个乙酰基团共价地加到一个分子上(例如，一种聚糖上)的过程。大致、约、大约如在此所使用的，当应用于感兴趣的一个或多个值时，术语“大致”、“约”或“大约”是指类似于所说明的参考值的一个数值。在某些实施方案中，术语“大致”、“约”或“大约”是指落在所说明的参考值的25^^20^^19^^18^^17^^16%. 15%、 14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或更少之内的数值的一个范围。生物样品如在此所使用的，术语“生物样品”是指从任何活细胞或生物体获得的、 由其排泄的或由其分泌的任何固体或液体样品，包括但不限于组织培养物、生物反应器样品、人或动物的组织、植物、果实、蔬菜、单细胞的微生物(例如，细菌以及酵母)以及多细胞的生物体。例如，生物样品可以是从以下各项得到的一种生物液体例如，血液、血浆、血清、 尿液、胆汁、精液、脑脊髓液、房水或玻璃体液、或任何一种身体的分泌物、一种渗出液、一种溢泌物(例如，从脓肿或感染或炎症的任何其他部位获得的液体)、或者从关节获得的液体 (例如，正常的关节或被疾病(如类风湿性关节炎、骨性关节炎、痛风或脓毒性关节炎)侵袭的关节)。生物样品还可以是例如，从任何器官或组织(包括活检或尸检样本)获得的样品，可以包括细胞(不论是原代细胞或培养细胞)，任何细胞的条件培养基、组织或器官、组织培养物。 细胞表面糖蛋白如在此所使用的，术语“细胞表面糖蛋白”是指一种糖蛋白，其至少一部分存在于细胞的外表面上。在一些实施方案中，细胞表面糖蛋白是一种蛋白，该蛋白被定位在细胞表面上，这样使得这些聚糖结构中至少一个存在于该细胞的外表面上。
细胞表面聚糖“细胞表面聚糖”是一种聚糖，该聚糖存在于细胞的外表面上。在本披露的多个实施方案中，细胞表面聚糖作为细胞表面糖蛋白的一部分被共价地连接到一个多肽上。细胞表面聚糖还可以被连接到细胞膜的类脂上。相关联如在此所使用的，术语“相关联”是指在两个事物之间建立一种可预测的关系。在此所描述的实施方案中，细胞的表面上的糖基化模式(或其一种特征)是与由该细胞所生成的一种目标结合糖(例如，糖蛋白)的糖基化模式(或其一种特征)相关联。 这些相关联的模式(或特征)不必彼此完全相同，只要一个可以从另一个被预测出来即可。 一旦建立了相关性，它能够被记录在例如一种书面记录中或能够另外地被附加到一种介质或记忆源中(例如，计算机可读的介质或计算机存储体或存储盘)。然后，相关的糖基化模式(或其特征)的检测可以包含参考书面的或附加的记录、或参考证实该相关性的比较实验、等。这种比较实验可以与糖基化模式(或其特征)的评估同时完成，或可以是一种历史的或将来的实验。二乙酰化如在此所使用的，术语“二乙酰化”是指在通常未发现乙酰化的分子上两个位置处的乙酰化。当用于唾液酸分子的修饰时，“二乙酰化”是指除了在位置5处的乙酰化之外(这是典型地唾液酸中的乙酰化)，在两个位置处的乙酰化。在一些实施方案中， 唾液酸分子的“二乙酰化”包括位置7、8、和9中的两个位置的乙酰化。(参见图2。)聚糖如本领域中已知的并且在此所使用的，“聚糖”是糖类。聚糖可以是糖残基的单体或聚合物，但典型地包含至少三个糖，并且可以是直链的或分支的。聚糖可以包括天然的糖残基(例如，葡萄糖、N-乙酰葡糖胺、N-乙酰神经氨酸、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、己糖、阿拉伯糖、核糖、木糖、等)和/或修饰的糖(例如，2’ -氟代核糖、2’ -脱氧核糖、磷酸甘露糖、6’磺酸基N-乙酰葡糖胺、等)。术语“聚糖”包括糖残基的均聚物和杂聚物。术语 “聚糖”还包括结合糖的聚糖组分(例如，一种糖蛋白、糖脂、蛋白聚糖、等)。该术语还包括游离的聚糖，包括从结合糖中切割的或另外地由其释放的聚糖。聚糖制品如在此所使用的，术语“聚糖制品”是指根据一个特定的产生方法而获得的一组聚糖。在一些实施方案中，“聚糖制品”是指从一种糖蛋白制品(参见以下糖蛋白制品的定义)中获得的一组聚糖。在某些实施方案中，聚糖制品包括对唾液酸酶具有耐受性的聚糖。结合糖如在此所使用的，术语“结合糖，，包括其中至少一个糖部分被共价地连接到至少一个其他部分上的所有分子。该术语具体地包括具有共价附连的糖部分的所有生物分子，包括例如N-连接的糖蛋白、0-连接的糖蛋白、糖脂、蛋白聚糖、等。糖形术语“糖形”被用在此处是指结合糖的一种特定的形式。即，当相同的主链部分(例如多肽、脂类、等)，(该相同的主链部分是结合糖的一部分)具有被连接到不同的聚糖或聚糖的不同组上的可能性时，则结合糖(即，其中主链被连接到一个特定组的聚糖上) 的每一种不同形式被称为一种“糖形”。糖脂如在此所使用的，术语“糖脂”是指包含一个或多个共价连接的糖部分(即， 聚糖)的一种类脂。该一个或多个糖部分可以是处于单糖、二糖、低聚糖、和/或多糖的形式。该一个或多个糖部分可以包括糖残基的一个单一的无支链的链或者可以包括一个或多个分支的链。在某些实施方案中，这些糖部分可以包括硫酸基团和/或磷酸基团。在某些实施方案中，这些糖蛋白包含0-连接的糖部分；在某些实施方案中，这些糖蛋白包含N-连接的糖部分。糖蛋白如在此所使用的，术语“糖蛋白”是指一种蛋白，该蛋白包含共价连接至一个或多个糖部分(即，聚糖)上的一个肽主链。如本领域的普通技术人员所理解的，这种肽主链典型地包括氨基酸残基的一个直链。在某些实施方案中，这种肽主链跨越了细胞膜，这样使得它包括一个跨膜部分以及一个细胞外部分。在某些实施方案中，跨越了细胞膜的糖蛋白的肽主链包括一个细胞内部分，一个跨膜部分、以及一个细胞外部分。在某些实施方案中，本披露的方法包括用一种蛋白酶来切割一种细胞表面糖蛋白以释放该糖蛋白的细胞外部分，或其一部分，其中这种暴露基本上不使细胞膜破裂。该一个或多个糖部分可以是处于单糖、二糖、低聚糖、和/或多糖的形式。该一个或多个糖部分可以包括糖残基的一个单一的无支链的链或者可以包括一个或多个分支的链。在某些实施方案中，这些糖部分可以包括硫酸基团和/或磷酸基团。可替代地或另外地，糖部分可以包括乙酰基、羟乙酰基、丙基或其他烷基的修饰。可替代地或另外地，糖部分可以通过二乙酰化来修饰。在某些实施方案中，这些糖蛋白包含0-连接的糖部分；在某些实施方案中，这些糖蛋白包含N-连接的糖部分。在某些实施方案中，在此所披露的方法包括对以下各项中任何一项或全部进行分析的一个步骤细胞表面糖蛋白、释放的细胞表面糖蛋白的片段(例如，糖肽)、附连到细胞表面糖蛋白上的细胞表面聚糖、细胞表面糖蛋白的肽主链，此类糖蛋白、聚糖和/或肽主链的片段，以及它们的组合。糖蛋白制品如在此所使用的术语，“糖蛋白制品”是指一组单独的糖蛋白分子，该组中的每一个包括具有一个特定氨基酸序列(这种氨基酸序列包括至少一个糖基化位点) 的多肽以及被共价地附连到该至少一个糖基化位点上的至少一种聚糖。在糖蛋白制品中的一种特定的糖蛋白的单独的分子典型地具有相同的氨基酸序列，但是可以在该至少一个糖基化位点的占用率方面和/或在被连接到该至少一个糖基化位点上的聚糖的身份方面有所不同。即，一种糖蛋白制品可以仅包括一种特定的糖蛋白的一种单一的糖形，但是更典型地包括多种糖形。相同的糖蛋白的不同制品可以在存在的糖形的身份方面(例如，在一种制品中存在的糖形可能是另一种制品中不存在的)和/或在不同糖形的相对量的方面有所不同。在一些实施方案中，本发明提供了用于分析相同糖蛋白的不同制品(即，具有相同的氨基酸序列)的方法以及试剂。在一些实施方案中，本发明提供了用于分析两个(或更多个)糖蛋白的方法以及试剂，这些糖蛋白的氨基酸序列显示至少85^^90^^91^^92%, 93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 的一致性，或者更高的一致性。糖苷酶如在此所使用的术语“糖苷酶”是指一种试剂，该试剂切割位于聚糖中顺序的糖之间或糖与主链部分之间(例如，在糖蛋白的糖与肽主链之间)的一个共价键。在一些实施方案中，糖苷酶是一种酶。在某些实施方案中，糖苷酶是包括一个或多个多肽链的一种蛋白(例如，一种蛋白质酶)。在某些实施方案中，糖苷酶是一种化学切割试剂。糖基化模式如在此所使用的，术语“糖基化模式”是指在一个特定的样品上存在的一组聚糖结构。例如，一个特定的结合糖(例如，糖蛋白)或一组结合糖(例如，一组糖蛋白)将具有一种糖基化模式。在一些实施方案中，提及细胞表面聚糖的糖基化模式，或者一种“表面糖基化模式”。如在此所使用的，“表面糖基化模式”可以指存在于感兴趣的一个单一的细胞表面糖蛋白和/或糖脂的细胞外结构域上的聚糖的模式(或“糖基化模式”)。 另外地或者可替代地，“表面糖基化模式”可以指存在于多种细胞表面糖蛋白和/或糖脂的细胞外结构域上的聚糖的模式(或“糖基化模式”)。在某些实施方案中，“表面糖基化模式” 描述了存在于细胞表面糖蛋白和/或糖脂的整个补体上的聚糖的模式(或“糖基化模式”)。基于上下文，本领域的普通技术人员应当容易地理解“表面糖基化模式”是否是指多种细胞表面糖蛋白和/或糖脂的糖基化模式。糖基化模式可以被表征为，例如聚糖的身份、单独的聚糖或特定类型的聚糖的量(绝对的或相对的)、糖基化位点的占用程度、聚糖的修饰(例如唾液酸化、多乙酰化唾液酸化、磷酸化、硫酸化、等)、等，或者这些参数的组合。多乙酰化如在此所使用的，术语“多乙酰化”是指在通常未发现乙酰化的分子上的两个或更多个位置处的乙酰化，。当用于唾液酸分子的修饰时，“多乙酰化”是指除了在位置5处的乙酰化之外(这是典型地唾液酸中的乙酰化)，在两个或更多个位置处的乙酰化。 在一些实施方案中，唾液酸分子的多乙酰化包括位置7、8、和9中两个或更多个位置的乙酰化。(参见图2。)N-聚糖如在此所使用的，术语“N-聚糖”是指糖的一种聚合物，该聚合物从一种结合糖中释放出来，但是之前通过一个氮连接(参见以下N-连接的聚糖的定义)被连接到该结合糖上。N-连接的聚糖如在此所使用的，术语“N-连接的聚糖”是指通过一个氮连接被连接到一个结合糖上的聚糖。存在着不同种类的N-连接的聚糖，但是它们典型地基于共同的核心戊糖(Man)3(GlcNAc) (GlcNAc)。0-聚糖如在此所使用的，术语“0-聚糖”是指糖的一种聚合物，该聚合物从一种结合糖中释放出来，但是之前通过一个氧连接(参见以下0-连接的聚糖的定义)被连接到该结合糖上。0-连接的聚糖如在此所使用的，术语“0-连接的聚糖”是指通过一个氧连接被连接到一个结合糖上的聚糖。0-连接的聚糖典型地通过N-乙酰基-D-半乳糖胺(GalNAc)而被附连至糖蛋白上或者通过N-乙酰基-D-葡糖胺(GlcNAc)而被附连至L-丝氨酸(kr) 或L-苏氨酸(Thr)的羟基基团上。一些0-连接的聚糖还具有多种修饰作用，如乙酰化作用和硫酸化作用。在一些例子中，0-连接的聚糖通过岩藻糖被附连到糖蛋白上，或通过甘露糖被附连到L-丝氨酸(kr)或L-苏氨酸(Thr)的羟基基团上。磷酸基如在此所使用的，术语“磷酸基”被用于此处是指一个PO4-基团(在自由溶液中)，或一个PO3基团(作为化合物的一部分)。作为化学名称的一部分，术语“磷酸基” 是指通过加入一个磷酸基团进行的化学修饰。磷酸化如在此所使用的，术语“磷酸化”是指通过共价加入一个磷酸基团而进行的修饰。例如，磷酸化的聚糖是通过共价加入一个或多个磷酸化的基团而修饰的聚糖。磷酸化的聚糖可以或不可以具有另外的修饰。磷酸化作用如在此所使用的，术语“磷酸化作用”是指将一个或多个磷酸基团共价地加至一个分子(例如，一种聚糖)上的过程。蛋白酶如在此所使用的，术语“蛋白酶”是指一种试剂，该试剂切割位于多肽链中的顺序的氨基酸之间的一个肽键。在一些实施方案中，蛋白酶是一种酶(即，一种蛋白水解酶)。在某些实施方案中，蛋白酶是包括一个或多个多肽链的一种蛋白(例如，一种蛋白质酶)。在某些实施方案中，蛋白酶是一种化学切割试剂。蛋白质总体而言，“蛋白”是一种多肽(即，通过肽键彼此连接的至少两个氨基酸的链)。蛋白可以包括除了氨基酸之外的部分(例如，可以是糖蛋白)和/或可以被另外地加工或修饰。本领域的普通技术人员应当理解的是“蛋白”可以是如细胞所生产的一种完整的多肽链(具有或不具有信号序列)，或者可以是它的一个功能性部分。普通技术人员应当进一步地理解的是有时蛋白可以包括多于一种的多肽链，例如通过一个或多个二硫键相连接或者通过其他方式相结合。唾液酸如在此所使用的，术语“唾液酸”是用于神经氨酸(一种九碳单糖)的 N-或0-取代的衍生物的一个通称。神经氨酸的氨基基团典型地在唾液酸中带有乙酰基亦或羟乙酰基基团。存在于唾液酸上的羟基取代基可以通过乙酰化作用、甲基化作用、硫酸化作用、以及磷酸化作用进行修饰。主要的唾液酸是N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)。唾液酸将一个负电荷传递到聚糖上，因为羧基基团在生理PH下倾向于解离出一个质子。示例性的去质子的唾液酸显示如下
权利要求
1.一种方法，包括以下步骤a)提供一种聚糖制品，从该聚糖制品中已经释放了唾液酸类；b)使该聚糖制品经受一种分离技术，该分离技术基于荷质比来分离聚糖类；并且c)使用至少一种定量标准物来对至少一种分离出的聚糖进行定量。
2.如权利要求1所述的方法，其中该提供步骤包括将一种包括聚糖类的组合物暴露于至少一种试剂，该试剂在允许切割唾液酸残基的条件下切割多种唾液酸残基。
3.如权利要求1所述的方法，其中该聚糖制品包括选自下组的非常规修饰的聚糖类， 该组由以下各项组成硫酸化的聚糖类、磷酸化的聚糖类、多乙酰化唾液酸化的聚糖类、以及它们的组合。
4.如权利要求3所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约50%。
5.如权利要求4所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约10%。
6.如权利要求4所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约5%。
7.如权利要求4所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约1%。
8.如权利要求4所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约0.1%。
9.如权利要求4所述的方法，其中这些非常规修饰的聚糖构成该聚糖制品中存在的聚糖类的少于约0. 05%。
10.如权利要求1所述的方法，进一步包括分析分离出的聚糖类的结构特征。
11.如权利要求1所述的方法，进一步包括分析分离出的聚糖类的单糖构成。
12.如权利要求10或11所述的方法，其中该分析结构特征的步骤包括执行选自下组的一种技术，该组由以下各项组成核磁共振(NMR)、质谱法、液相色谱法、二维色谱法、毛细管电泳法(CE)、以及它们的组合。
13.如权利要求1、10或11所述的方法，进一步包括将分离出的聚糖类与以前鉴别的分离的聚糖类进行比较。
14.如权利要求13所述的方法，其中这些以前鉴别的分离的聚糖的特征被储存在一个数据库中。
15.如权利要求12所述的方法，进一步包括将分离出的聚糖类与以前鉴别的分离的聚糖类进行比较。
16.如权利要求15所述的方法，其中这些以前鉴别的分离的聚糖的特征被储存在一个数据库中。
17.如权利要求12所述的方法，进一步包括对分离出的聚糖类的结构特征进行一个或多个另外轮次的分析。
18.如权利要求1所述的方法，其中该经受步骤包括在一个带电荷的柱上对该聚糖制品进行分离。
19.如权利要求18所述的方法，其中该带电荷的柱是一个阴离子交换柱。
20.如权利要求1所述的方法，进一步包括一个在该聚糖制品中标记聚糖类的步骤。
21.如权利要求20所述的方法，其中用与这些聚糖相同的标记物来标记该定量标准物。
22.如权利要求1所述的方法，其中该提供步骤包括提供从结合糖类中释放出的一种聚糖类制品。
23.如权利要求22所述的方法，其中这些结合糖包括糖蛋白类。
24.如权利要求22所述的方法，其中这些聚糖是使用一种糖苷酶多肽来从结合糖类中释放的。
25.如权利要求22所述的方法，其中这些聚糖是通过胼解来从结合糖类中释放的。
26.如权利要求22所述的方法，其中这些结合糖是从治疗性配制品类、商品化的生物制品类、生物反应器类、以及生物样品类中得到的。
27.如权利要求22所述的方法，其中这些结合糖是从选自下组的来源得到的，该组由以下各项组成组织培养物类、人或动物的组织类、植物类、果实类、蔬菜类、以及它们的组
28.如权利要求沈所述的方法，其中这些结合糖是从体液类中获得的。
29.如权利要求观所述的方法，其中这些结合糖是从选自下组的体液中获得的，该组由以下各项组成血清、血浆、血液、唾液、精液、尿液、脑脊髓液、以及它们的组合。
30.如权利要求1所述的方法，进一步包括鉴别这些分离出的聚糖。
31.如权利要求1所述的方法，进一步包括进行一种或多种技术，该一种或多种技术允许基于大小、疏水性、电荷、或它们的一种组合来分离多种分子。
全文摘要
除其他事项之外，本披露提供了用于富集、鉴别、和/或定量非常规修饰的聚糖类(例如磷酸化的聚糖类、硫酸化的聚糖类、和/或多乙酰化的聚糖类)的方法。在很多实施方案中，这些方法包括提供一种聚糖制品，从该聚糖制品中已经释放了唾液酸；使该唾液酸酶处理过的聚糖制品经受一种基于荷质比来分离聚糖的分离技术；并且使用至少一种定量标准物对这些带电荷的产物进行定量。
文档编号A61K38/14GK102239173SQ200980147771
公开日2011年11月9日 申请日期2009年12月18日 优先权日2008年12月19日
发明者C·J·鲍斯克斯, C·刘, J·L·墨菲, S·N·冈奈, Z·施莱佛 申请人:动量制药公司