专利名称：一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法
技术领域：
本发明涉及一种从龙须菜中萃取抗氧化剂的方法，尤其是一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法。
背景技术：
龙须菜别名又称为巧味芽、江蓠或海龙须，其属于红藻门、真红藻纲、杉藻目、龙须菜科的藻类，是生长于潮间带中、下部的大型藻类，其外表呈红褐色略带微绿色，尺寸大小约为(15至20)3立方厘米，体态直立可呈圆柱状、扁压叉状或侧面分生，全世界约有100种， 其主要分布于包括印度、印度尼西亚、中国大陆、台湾及日本等温、热带地区；龙须菜含丰富的醣类及蛋白质，其醣类的主要化学成份为藻多醣，是主要生产琼脂的藻类之一，可提炼藻胶或作为食品添加剂，研究结果显示，龙须菜经多种方式萃取后，均能获得促进免疫细胞增殖与抑制乳癌、肝癌及胰脏癌细胞的活性物质，并可抑制悬浮性细胞人类急性骨髓HL-60、 慢性骨髓淋巴癌K562、人类融合瘤细胞HB4C5、人类结肠癌细HT-29以及乳癌细胞MCF-7的生长，而适量的藻胆红蛋白具有抑制染色体突变的效用，可提高免疫能力。现有技术中的龙须菜萃取液是由龙须菜溶液通过研磨机研磨、萃取而得，为了提高龙须菜中藻多醣、活性蛋白以及藻胆红蛋白成份的萃取率，也会采用高温热水萃取法，但该种萃取方式所得的活性蛋白与藻胆红蛋白的萃取率低且生理活性不佳，不利于实际应用。因此，上述问题，将是本领域技术人员所要解决的困难所在。
发明内容
鉴于上述现有技术所述的不足，本发明的目的在于提供一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法。所述提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法包括将龙须菜干燥粉碎后，加入3 至10倍的去离子水形成龙须菜溶液，然后将该溶液置于一种超音波粉碎机中进行循环粉碎，该超音波粉碎机的输出振动频率为20至45KHZ，粉碎时间为60至120分钟，输出的最大功率为1100W ；该萃取控制的环境温度低于40°C，使粉体的平均粒径大小细化为微米级或纳米级，从而使得龙须菜溶液的化学性质稳定；将该溶液通过一个过滤网，以过滤其杂质即得包含至少1243μ g/ml活性蛋白、0. 41mg/ml藻胆红蛋白和130μ g/ml藻多醣的龙须菜萃取液。本发明方法所得龙须菜萃取液的藻胆红蛋白含量比现有技术更高，从而增加了其抗氧化能力。
图1是本发明的流程图。
具体实施例方式为了达到上述本发明目的及其功效，下面将结合附图和较佳实施例对本发明进行说明，以使得本领域的普通技术人员根据以下所述能够实施本发明。实施例请参阅图1的本发明流程图，由图1可知本发明提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，该方法步骤包括(1)添加溶剂，首先将龙须菜冲洗干净后，置于烘箱烘烤以去除水份，再将龙须菜粉碎，并选择适量的龙须菜粉末加入三倍重量的去离子水形成龙须菜溶液；(2)低温粉碎，其步骤为将上述溶液置于一种超音波粉碎机中进行循环粉碎，其输出的振动频率为20至45KHz，该萃取的环境温度低于40°C，其粉碎时间为60至120分钟， 输出的最大功率为1100W，通过超音波粉碎机高能量的超音波，可将龙须菜固体颗粒粉碎成小颗粒粉体，该粉体的平均粒径大小可为微米级，也可调整超音波功率使粉体的平均粒径大小达到纳米级，在此低温处理状态下该溶液的化学性质稳定；(3)过滤步骤，即将该溶液通过一种孔径大小为400目至600目过滤网，以过滤其杂质即可得龙须菜萃取液，其中包含至少130yg/ml的藻多醣、1243 μ g/ml的龙须菜蛋白质以及0. 41mg/ml的藻胆红蛋白质。为了显示本发明方法的效果，通过以下两项实验分别检测该龙须菜萃取液的藻多醣、活性蛋白和藻胆红蛋白含量以及其抗氧化能力，该实验对一个控制组与两个实验组进行了比较分析，控制组为本发明的龙须菜萃取液；实验组1是由龙须菜溶液经研磨机以 16000rpm的转速研磨而不是以超音波粉碎的方式形成的龙须菜萃取液；实验组2是采用本发明的萃取方法，但其控制温度在80至100°C的龙须菜萃取液；其中活性蛋白与藻胆红蛋白的检测包含下列三部分(I)藻多醣含量的分析；(II)活性蛋白质含量的分析；(III)藻胆红蛋白含量的分析。(I)藻多醣含量的分析(a)分别从控制组、实验组1以及实验组2中取出細1，并加入浓度99. 5%的8ml 乙醇后置于15ml的离心管中进行沉淀M小时；(b)以8000rpm转速离心3分钟，将沉淀物在50°C下干燥后，再加入細1纯水回溶， 再从其中各取400 μ 1加入浓度5%的200 μ 1酚溶液于8ml的玻璃试管中；(c)在10至20秒内加入浓度为95%至97%的Iml硫酸溶液，在室温下静置10分钟后，混合均勻，放入25°C水浴槽中15分钟；(d)用分光光度计在490nm下测量其吸光值，其标准曲线是浓度为0、0. 01,0. 02、
0.03,0. 04,0. 05mg/mL的蔗糖水溶液，结果如表1所示。(II)活性蛋白质含量的分析(a)分别从控制组、实验组1以及实验组2中取出5 μ 1力卩入96孔盘中，然后加入 25 μ 1 的蛋白质类试剂溶液(alkaline copper tartrate)；(b)再将200 μ 1经稀释的R)lin_酚试剂加入到每个孔洞中并混合均勻，在室温下静置15分钟；(c)用分光光度计在750nm下测量其吸光值，其标准曲线是以浓度为0、0. 25,0. 5、
1、2&%ig/ml的标准蛋白溶液1试剂配制DCprotein assay package检测套组，其中，吸光值的标准曲线是以标准蛋白浓度，40mg的胎牛血清蛋白绘制而成，其结果如表1所示。(III)藻胆红蛋白含量的分析(a)控制组、实验组1以及实验组2经离心后，分别取出其上清液40ml并移至另外 50ml的离心管，各加入12. 7g的硫酸铵，缓慢且充分地搅拌；(b)置于4°C下避光沉淀两小时，在SOOOrpm下离心10分钟，将上清液去除以留下沉淀物，即得藻胆红蛋白粗萃取物；(c)分别用5ml的去离子水回溶，测量其体积以分析蛋白质含量，其结果如表1所示。表1.龙须菜萃取液的成份含量分析及比较结果
权利要求
1.一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤(1)添加溶剂，首先将龙须菜干燥粉碎后，加入3至10倍的去离子水形成龙须菜溶液；(2)低温粉碎，其条件为将上述溶液置于超音波粉碎机中进行循环粉碎，其输出的振动频率为20至45KHz，粉碎时间为60至120分钟，该萃取控制的环境温度低于40°C，使粉体的平均粒径大小细化为微米级或纳米级；(3)过滤步骤，即将该溶液通过一个过滤网，以过滤其杂质即得龙须菜萃取液。
2.如权利要求1所述的一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，其特征在于，所述过滤网的孔径大小为400至600目。
3.如权利要求1所述的一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，其特征在于，所述龙须菜萃取液包含浓度至少为1243μ g/ml的活性蛋白。
4.如权利要求1所述的一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，其特征在于，所述龙须菜萃取液包含浓度至少为0. 41mg/ml的藻胆红蛋白。
全文摘要
本发明涉及一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法，所述方法包括该萃取控制在40℃以下的环境低温，并利用一种超音波粉碎机进行龙须菜溶液循环粉碎，该超音波粉碎机输出的振动频率为20K至45KHz，其粉碎时间为60至120分钟，使得龙须菜溶液的化学性质稳定，将该溶液通过一种过滤网，以过滤其杂质即得龙须菜萃取液。本发明所得龙须菜萃取液的藻胆红蛋白含量比现有技术更高，从而增加了其抗氧化能力。
文档编号A61P39/06GK102266357SQ20101018841
公开日2011年12月7日 申请日期2010年6月1日 优先权日2010年6月1日
发明者朱益生 申请人:朱益生