专利名称：一种治疗前列腺增生、尿闭的药物组合物及检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物及检测方法，特别涉及一种治疗前列腺增生、尿闭的 药物组合物及检测方法。
背景技术：
前列腺增生又名前列腺肥大，多发生于50岁以上的老年人。据欧美等国统计，在 老年男性中其发病率高达80%以上；国内报道较低，但也达50%以上。由于前列腺恰好位 于膀胱出口处，围绕着尿道的特殊位置，一旦发生增生，便会从四面八方压迫尿道，使膀胱 内的尿液排出受阻，引起泌尿系统的一系列病变，主要引起尿道的机械性梗阻。病变发展至 晚期由于膀胱代偿功能衰竭，膀胱残余尿越来越多，使膀胱内压增高引起输尿管扩张和肾 积水，使肾功能受损，并发肾积水或尿毒症，后果极其严重。前列腺增生的治疗主要依靠药物和手术，手术虽然是最彻底的治疗手段，但对于 轻度增生以及年龄较大而不能耐受手术者，药物仍是理想的治疗手段。目前治疗前列腺增 生症的药物大致可分为以下几类α-受体阻滞剂，如酚苄明、盐酸坦索罗辛等；5-α还原 酶抑制剂，如保列治、爱普列特等；中草药复方制剂。α-受体阻滞剂可缓解梗阻，改善症 状，但副作用较多，使用患者约30%出现体位性低血压、心动过速、鼻塞等副作用，且长期使 用会出现耐受现象，费用也较昂贵；5-α还原酶抑制剂作用较为持久，但费用较高，长期疗 效有待进一步观察。中药复方制剂则根据中医理论，针对其疾病机理从根本上治疗前列腺增生，具有 疗效确切、使用方便、无明显毒副作用等优势，更适宜在临床上推广应用。
发明内容
本发明目的在于提供一种药物组合物；本发明另一目的在于提供一种治疗前列腺 增生的药物组合物；本发明的第三个目的在于提供该药物组合物的制备方法；本发明的第 四个目的在于提供该药物组合物的质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现本发明药物组合物的原料药组成为丹参100-200重量份、泽兰20-80重量份、桃 仁20-80重量份、红花100-200重量份、赤芍20-80重量份、白芷50-150重量份、香橼50-150 重量份、泽泻100-200重量份、王不留行100-200重量份、败酱草200-300重量份、川楝子 50-150重量份、乌药50-150重量份、黄柏(盐制)100-200重量份。本发明药物组合物的原料药组成还可以为丹参100-200重量份、泽兰20-80重量 份、桃仁20-80重量份、红花100-200重量份、赤芍20-80重量份、白芷50-150重量份、陈皮 50-150重量份、泽泻100-200重量份、王不留行100-200重量份、败酱草200-300重量份、川楝子50-150重量份、小茴香(盐制)50-150重量份、黄柏(盐制)100-200重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参100-130重量份、泽兰60-80重量 份、桃仁20-40重量份、红花160-200重量份、赤芍20-40重量份、白芷120-150重量份、陈 皮50-80重量份、泽泻160-200重量份、王不留行100-130重量份、败酱草260-300重量份、 川楝子50-80重量份、小茴香(盐制)120-150重量份、黄柏(盐制)100-130重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参115重量份、泽兰70重量份、桃仁 30重量份、红花180重量份、赤芍30重量份、白芷135重量份、陈皮75重量份、泽泻180重 量份、王不留行115重量份、败酱草280重量份、川楝子75重量份、小茴香(盐制)135重量 份、黄柏(盐制)115重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参125重量份、泽兰65重量份、桃仁 35重量份、红花165重量份、赤芍35重量份、白芷125重量份、陈皮75重量份、泽泻165重 量份、王不留行125重量份、败酱草265重量份、川楝子75重量份、小茴香(盐制)125重量 份、黄柏(盐制)125重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参160-200重量份、泽兰20-40重量 份、桃仁60-80重量份、红花100-130重量份、赤芍60-80重量份、白芷50-80重量份、陈皮 120-150重量份、泽泻100-130重量份、王不留行160-200重量份、败酱草200-230重量份、 川楝子120-150重量份、小茴香(盐制)50-80重量份、黄柏(盐制)160-200重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参180重量份、泽兰30重量份、桃仁 70重量份、红花115重量份、赤芍70重量份、白芷75重量份、陈皮135重量份、泽泻115重 量份、王不留行180重量份、败酱草215重量份、川楝子135重量份、小茴香(盐制)75重量 份、黄柏(盐制)180重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参165重量份、泽兰35重量份、桃仁 65重量份、红花125重量份、赤芍65重量份、白芷75重量份、陈皮125重量份、泽泻125重 量份、王不留行165重量份、败酱草225重量份、川楝子125重量份、小茴香(盐制)75重量 份、黄柏(盐制)165重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参140-150重量份、泽兰45-55重量 份、桃仁45-55重量份、红花140-150重量份、赤芍45-55重量份、白芷90-110重量份、陈皮 90-110重量份、泽泻140-150重量份、王不留行140-150重量份、败酱草235-255重量份、川 楝子90-110重量份、小茴香(盐制)90-110重量份、黄柏(盐制)140-150重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为丹参144重量份、泽兰48重量份、桃仁 48重量份、红花144重量份、赤芍48重量份、白芷96重量份、陈皮96重量份、泽泻144重量 份、王不留行144重量份、败酱草240重量份、川楝子96重量份、小茴香(盐制)96重量份、 黄柏(盐制)144重量份。
本发明药物组合物制备方法为以上十三味，泽泻、白芷粉碎成细粉I ；丹参、川 楝子加4-8倍量50-70%乙醇回流提取1-3次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，回收乙醇； 小茴香、陈皮加8-12倍量水提取挥发油至尽，蒸馏后的水溶液，即药液另器收集；药渣与其 余赤芍等七味药加水煎煮1-3次，每次加4-10倍量水煎煮1-4小时，合并煎液，滤过，滤液 与药液合并，浓缩成50°C相对密度为1. 20 1. 40的浸膏，干燥，粉碎成细粉II，细粉II加入 细粉I混勻，制成颗粒，干燥，加入上述小茴香等挥发油，加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的制剂。
本发明药物组合物制备方法优选为以上十三味，泽泻、白芷粉碎成细粉I ；丹 参、川楝子加6倍量60%乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇；小 茴香、陈皮加10倍量水提取挥发油至尽，蒸馏后的水溶液，即药液另器收集；药渣与其余赤 芍等七味药加水煎煮2次，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时， 合并煎液，滤过，滤液与药液合并，浓缩成50°C相对密度为1. 28 1. 30的浸膏，干燥，粉碎 成细粉II，细粉II加入细粉I混勻，制成颗粒，干燥，加入上述小茴香等挥发油，加入常规辅 料，经常规方法，制成临床接受的口服固体制剂。
本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或 几种
含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 50-90 10-50 比例的 0. 05mol/L NaH2P04 缓冲溶液(H3PO4 调 pH 为 3. 0士0. 5)-乙腈为流 动相；检测波长为270nm ；理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于1500 ；
对照品溶液的制备精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g 的溶液；
供试品溶液的制备精密称取相当于生药含量1/600-1/800的制剂内容物精密加 入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻， 静置，取上清液，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品液、供试品液各10 μ 1注入液相色谱仪，测定，即得；
本发明药物组合物每单位制剂含黄柏以盐酸小檗碱C2tlH18ClNO4计，不得少于 0. IOmg ；
鉴别方法Α、取相当于生药含量1/100-1/300的制剂内容物，除去糖衣，研细，加 乙醚15ml，振摇提取5分钟，滤过；取滤液5ml，挥干，残渣加1 %香草醛硫酸溶液1滴，液滴 边缘呈紫色；另取滤液5ml，挥干，残渣加冰醋酸少许，使溶解，再加硫酸1滴，微热，溶液显 紫棕色；
B、取相当于生药含量1/100-1/300的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醇10ml， 振摇提取10分钟，滤过，滤液加镁粉少许及盐酸数滴，置水浴上加热，溶液显红色；
C、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量 1/70的粉末，加甲醇50ml超声提取半小时，滤过，滤液加于100-120目，5g，内径10_15mm的 中性氧化铝柱上，用40%甲醇50ml洗脱，洗脱液蒸干，加水15ml溶解，水溶液用水饱和正丁 醇提取两次，每次15ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗两次，每次IOml ；弃去水层，正丁 醇提取液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱 和溶液，作为对照品；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品4 μ 1、供试品8 μ 1，分别点样于 同一硅胶G板上，以5-25 5-15 1-3比例的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层色谱法试验，吸取对照品，鉴别方法C中供试品各5 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 20-60 1-10 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点；
E、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含 量1/3500-1/700的粉末，加甲醇IOml超声5分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解， 作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成Iml含0. 5mg的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 4-8 1-5 0.5-2.5 0.5-2.5 0. 1-1. 0比例的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨 试液为展开剂，置氨试液饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明药物组合物质量控制方法优选如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或 几种
含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 73 27比例的0. 05mol/L NaH2PO4缓冲溶液(H3PO4调pH为3. 0 士0. 5)-乙腈为流动相；检 测波长为270nm ；理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于1500 ；
对照品溶液的制备精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g 的溶液；
供试品溶液的制备精密称取相当于生药含量1/700的制剂内容物，精密加入甲 醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，静 置，取上清液，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品液、供试品液各10 μ 1注入液相色谱仪，测定，即得；
本发明药物组合物每单位制剂含黄柏以盐酸小檗碱C20H18C1N04计，不得少于 0. IOmg ；
鉴别方法Α、取相当于生药含量1/200的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醚 15ml，振摇提取5分钟，滤过；取滤液5ml，挥干，残渣加香草醛硫酸溶液1滴，液滴边缘 呈紫色；另取滤液5ml，挥干，残渣加冰醋酸少许，使溶解，再加硫酸1滴，微热，溶液显紫棕 色；
B、取相当于生药含量1/200的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醇10ml，振摇提 取10分钟，滤过，滤液加镁粉少许及盐酸数滴，置水浴上加热，溶液显红色；
C、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量 1/70的粉末，加甲醇50ml超声提取半小时，滤过，滤液加于100-120目，5g，内径10_15mm的 中性氧化铝柱上，用40%甲醇50ml洗脱，洗脱液蒸干，加水15ml溶解，水溶液用水饱和正丁 醇提取两次，每次15ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗两次，每次IOml ；弃去水层，正丁 醇提取液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱 和溶液，作为对照品；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品4 μ 1、供试品8 μ 1，分别点样于 同一硅胶G板上，以13 7 2比例的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以三氯化铝试液，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层色谱法试验，吸取对照品，鉴别方法C中供试品各5 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以40 5 10 0.2比例的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点；E、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含 量3/3500的粉末，加甲醇IOml超声5分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为 供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品 溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 6 3 1.5 1.5 0.5比例的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，置氨 试液饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本发明药物组合物组方将古方与现代中医药理论有机结合，方中丹参、红花、桃 仁、赤芍，清热凉血、活血通经、祛瘀止痛；白芷、黄柏、泽泻，清热燥湿、利水通淋；香橼、乌 药，行气止痛；三组药相配，理气活血，通经散结，用于治疗前列腺增生症，及其引起的夜尿 次数骤增、尿急、尿痛、血尿及发热等症状具有很好的效果。本发明药物组合物经实验研究 证实可对尿道平滑肌、前列腺平滑肌具有收缩作用，促使前列腺肥大的病理模型恢复正 常；可阻断双氢睾酮受体的作用，以及抑制5a_还原酶和3-羟基脱氢酶的活性，从而阻止体 内睾酮转化为双氢睾酮，抑制前列腺体增长；可清热凉血、活血通经、祛瘀止痛，改善前列腺 局部的血液循环，有利于病变组织炎性分泌物的引流，消除症状反应；可抗炎，抗感染，促进 机体代谢及造血，增强机体免疫功能。本发明组合物相比现有制剂前列舒丸具备很好的药效，并且本发明所述的范围在 可以实现本发明 药效的同时，经过筛选，意外的发现，在组合物的某些范围内，具备更为突 出的药效。本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后 得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且 方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供 试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控 制，并且用该方法测定的产品相比其他方法测定的产品在药效上表现的更为稳定。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例1药物对前列腺增生的临床疗效药物组I (丹参115g、泽兰70g、桃仁30g、红花180g、赤芍30g、白芷135g、陈皮 75g、泽泻180g、王不留行115g、败酱草280g、川楝子75g、小茴香(盐制)135g、黄柏(盐 制)115g)药物组II (丹参125g、泽兰65g、桃仁35g、红花165g、赤芍35g、白芷125g、陈皮 75g、泽泻165g、王不留行125g、败酱草265g、川楝子75g、小茴香(盐制)125g、黄柏(盐 制)125g)药物组III (丹参144g、泽兰48g、桃仁48g、红花144g、赤芍48g、白芷96g、陈皮 96g、泽泻144g、王不留行144g、败酱草240g、川楝子96g、小茴香(盐制)96g、黄柏(盐 制)144g)。按照药物组I、药物组II及药物组III处方比例，按照优选工艺制备本发明药物制剂，比较各组药物治疗前列前列腺增生的临床疗效，选取经患前列腺增生的患者120例，随 机分为3组，经比较各组间病情分布无显著性差异，分别服用以上各组本发明药物一个疗 程，比较病情改善情况，结果见表1。
表1本发明药物对前列腺增生症状的临床疗效
组别例数痊愈显效有效无效总有效率(％)P药物组I4071826295药物组II4081726295*药物组III4051518783.5
注*与药物组III相比P < 0. 05
结果表明本发明药物组III与其它组相比较有着显著差异(P < 0. 05)，本发明药 物组I、II治疗前列腺增生效果优于III组。
实验例2本发明组IV药物制剂与前列舒丸临床比较试验
药物组IV (丹参144g、泽兰48g、桃仁48g、红花144g、赤芍48g、白芷96g、香橼96g、 泽泻144g、王不留行144g、败酱草240g、川楝子96g、乌药96g、黄柏(盐制)144g)，按照实 施例的方法制成
对照组前列舒丸，
本组病人共计204例，其中慢性前列腺炎试验组61人，对照组60例，前裂腺增生 试验组43例，对照组40例，所有病例均为门诊病人，一经确诊即随机服药观察。
(一 )年龄分布
1、慢性前列腺炎两组年龄分布(见表2)
表2慢性前列腺炎两组患者年龄分布
η18 30 岁31 40 岁41岁以 上最小年 龄最大年 龄试验组611618271865对照组601319282064
经统计学处理ρ < 0. 05，两组年龄差异无显著意义。
2、前列腺增生患者，年龄分布(见表3)
见表3前列腺增生症两组患者年龄分布
权利要求
1.一种治疗前列腺增生、尿闭的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成 为丹参100-200重量份、泽兰20-80重量份、桃仁20-80重量份、红花100-200重量份、赤 芍20-80重量份、白芷50-150重量份、香橼50-150重量份、泽泻100-200重量份、王不留行 100-200重量份、败酱草200-300重量份、川楝子50-150重量份、乌药50-150重量份、黄柏 (盐制)100-200重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为 丹参115重量份、泽兰70重量份、桃仁30重量份、红花180重量份、赤芍30重量份、白芷135重量份、香橼75重量份、泽泻180重量份、王不留行115重量份、败酱草280重量份、 川楝子75重量份、乌药135重量份、黄柏(盐制)115重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为 丹参144重量份、泽兰48重量份、桃仁48重量份、红花144重量份、赤芍48重量份、白芷96重量份、香橼96重量份、泽泻144重量份、王不留行144重量份、败酱草240重量份、 川楝子96重量份、乌药96重量份、黄柏(盐制)144重量份。
4.如权利要求1所述的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法 和/或含量测定中的一种或几种含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 50-90 10-50 比例的 0. 05mol/L NaH2P04 缓冲溶液(H3PO4 调 pH 为 3. 0士0. 5)-乙腈为流 动相；检测波长为270nm ；理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液；供试品溶液的制备精密称取相当于生药含量1/600-1/800的制剂内容物精密加入甲 醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，静 置，取上清液，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品液、供试品液各10 μ 1注入液相色谱仪，测定，即得； 本发明药物组合物每单位制剂含黄柏以盐酸小檗碱C2tlH18ClNO4计，不得少于0. IOmg ； 鉴别方法Α、取相当于生药含量1/100-1/300的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醚 15ml，振摇提取5分钟，滤过；取滤液5ml，挥干，残渣加香草醛硫酸溶液1滴，液滴边缘 呈紫色；另取滤液5ml，挥干，残渣加冰醋酸少许，使溶解，再加硫酸1滴，微热，溶液显紫棕 色；B、取相当于生药含量1/100-1/300的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醇10ml，振摇 提取10分钟，滤过，滤液加镁粉少许及盐酸数滴，置水浴上加热，溶液显红色；C、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量 1/50-1/80的粉末，加甲醇50ml超声提取半小时，滤过，滤液加于100-120目，5g，内径 10-15mm的中性氧化铝柱上，用40%甲醇50ml洗脱，洗脱液蒸干，加水15ml溶解，水溶液用 水饱和正丁醇提取两次，每次15ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗两次，每次IOml ；弃 去水层，正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加 甲醇制成饱和溶液，作为对照品；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品4 μ 1、供试品8μ 1， 分别点样于同一硅胶G板上，以5-25 5-15 1-3比例的氯仿-甲醇-水的下层溶液为 展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；D、另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层 色谱法试验，吸取对照品，鉴别方法C中供试品各5 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 20-60 1-10 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点；Ε、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量 1/3500-1/700的粉末，加甲醇IOml超声5分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作 为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品 溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 4-8 1-5 0. 5-2. 5 0. 5-2. 5 0. 1-1. 0比例的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨 试液为展开剂，置氨试液饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
5.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测 定中的一种或几种含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，73 27 比例的0. 05mol/L NaH2PO4缓冲溶液(H3PO4调pH为3. 0士0. 5)-乙腈为流动相；检测波长 为270nm ；理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液；供试品溶液的制备精密称取相当于生药含量1/700的制剂内容物，精密加入甲醇 50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，静置， 取上清液，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品液、供试品液各10 μ 1注入液相色谱仪，测定，即得； 本发明药物组合物每单位制剂含黄柏以盐酸小檗碱C2tlH18ClNO4计，不得少于0. IOmg ； 鉴别方法Α、取相当于生药含量1/200的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醚15ml，振 摇提取5分钟，滤过；取滤液5ml，挥干，残渣加香草醛硫酸溶液1滴，液滴边缘呈紫色； 另取滤液5ml，挥干，残渣加冰醋酸少许，使溶解，再加硫酸1滴，微热，溶液显紫棕色；B、取相当于生药含量1/200的制剂内容物，除去糖衣，研细，加乙醇10ml，振摇提取10 分钟，滤过，滤液加镁粉少许及盐酸数滴，置水浴上加热，溶液显红色；C、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量1/70 的粉末，加甲醇50ml超声提取半小时，滤过，滤液加于100-120目，5g，内径10_15mm的中性 氧化铝柱上，用40 %甲醇50ml洗脱，洗脱液蒸干，加水15ml溶解，水溶液用水饱和正丁醇提 取两次，每次15ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗两次，每次IOml ；弃去水层，正丁醇提 取液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶 液，作为对照品；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品4 μ 1、供试品8 μ 1，分别点样于同一 硅胶G板上，以13 7 2比例的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以三氯化铝试液，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点；D、另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层 色谱法试验，吸取对照品，鉴别方法C中供试品各5 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以 40 5 10 0.2比例的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点；Ε、取本发明药物组合物制剂适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取相当于生药含量3/3500 的粉末，加甲醇IOml超声5分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取 盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各1 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以6 3 1.5 1.5 0. 5比例 的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液为展开剂，置氨试液饱和的展开缸内，展开，取 出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的荧光斑点。
6. 一种治疗前列腺增生、尿闭的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下 鉴别方法和含量测定方法所述药物组合物的制备方法为丹参144g泽兰48g桃仁48g红花144g赤芍48g 白芷96g 陈皮96g 泽泻144g 王不留行144g 败酱MOg 川楝子96g 小茴香(盐 制)96g 黄柏(盐制)144g ；以上十三味，泽泻、白芷粉碎成细粉；丹参、川楝子加6倍量 60%乙醇回流提取二次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇；小茴香、陈皮加10倍量 水提取挥发油至尽(约4小时)，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余赤芍等七味药加水 煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤 液与上述药液合并，浓缩成相对密度为1J8-1.30(5(TC )的浸膏，干燥，粉碎成细粉，加入 泽泻、白芷细粉混勻，制成颗粒，干燥，加入上述小茴香等挥发油，压制成1000片，包糖衣， 即得；鉴别方法为(1)取本品5片，除去糖衣，研细，加乙醚15ml，振摇提取5分钟，滤过；取滤液5ml，挥 干，残渣加香草醛硫酸溶液1滴，液滴边缘呈紫色；另取滤液5ml，挥干，残渣加冰醋酸少 许，使溶解，再加硫酸1滴，微热，溶液显紫棕色；(2)取本品5片，除去糖衣，研细，加乙醇10ml，振摇提取10分钟，滤过，滤液加镁粉少 许及盐酸数滴，置水浴上加热，溶液显红色；(3)取本品适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取本粉末5g，加甲醇50ml超声提取半小时， 滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100-120目，5g，内径10-15mm)上，用40%甲醇50ml洗脱，洗 脱液蒸干，加水15ml溶解，水溶液用水饱和正丁醇提取两次，每次15ml，合并正丁醇液，用 正丁醇饱和水洗两次，每次IOml ；弃去水层，正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为 供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品；照薄层色谱法(中国 药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品4 μ 1、供试品8 μ 1，分别点样于同一 硅胶G板上，以氯仿-甲醇-水(13 7 2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 三氯化铝试液，置于紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的荧光斑点；(4)另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取对照品，鉴别(3)中供试品各5μ 1，分 别点样于同一硅胶G板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸GO 5 10 0.2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取本品适量，除去糖衣，粉碎成粉末，称取粉末0. 3g，加甲醇IOml超声5分钟，滤 过，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成Iml 含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试 验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分别点样于同一硅胶G板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲 醇-浓氨试液(6 3 1.5 1.5 0.5)为展开剂，置氨试液饱和的展开缸内，展开，取 出，晾干，置于紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的荧光斑点； 含量测定方法为色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，0.05mol/L NaH2PO4 缓冲溶液(H3PO4调pH = 3.0 士 0.5)-乙腈(73 27)为流动相；检测波长为270nm ；理论板 数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g的溶液；供试品溶液的制备精密称取本品0.5g，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处 理30分钟，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，静置，取上清液，用微孔滤膜 (0. 45 μ m)滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品液、供试品液各10 μ 1注入液相色谱仪，测定，即得； 本品每片含黄柏以盐酸小檗碱(C2tlH18ClNO4)计，不得少于0. 10mg。
全文摘要
一种治疗前列腺增生、尿闭的药物组合物及检测方法。组成为丹参、泽兰、桃仁、红花、赤芍、白芷、香橼、泽泻、王不留行、败酱草、川楝子、乌药、黄柏组成，制备方法为取上述组合物原料药，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床接受的制剂。本发明采用高效液相色谱法对盐酸小檗碱进行含量测定。本发明药物组合物用于治疗前列腺增生、尿闭具备很好的疗效。
文档编号A61K36/884GK102028828SQ20101057680
公开日2011年4月27日 申请日期2007年2月26日 优先权日2007年2月26日
发明者付建家, 付立家 申请人:北京亚东生物制药有限公司