专利名称：红豆蔻提取物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种红豆蔻提取物及其医药用途。
背景技术：
红豆蔻为姜科植物大高良姜Alpinia galangal Willd.的果实，其性温味辛，归脾胃经，具有散寒燥湿，醒脾消食之功效。主产于广东、广西、云南等地。常用于腹脘冷痛，食积胀满，呕吐泄泻，饮酒过多等症。(国家药典委员会，中华人民共和国药典2010年版一部， 142 页)炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应，表现为红、肿、 热、痛和功能障碍。“炎性病症”是指一组存在炎症反应病理变化的病症。肿瘤坏死因子α (TNFa)是一种单核因子，主要由单核细胞和巨噬细胞产生，内毒素(LPS)是TNFa的诱导剂。TNFa具有多种生物学效应1)能杀伤和抑制肿瘤细胞的细胞因子；2)促进中性粒细胞吞噬；3)抗感染；4)促进髓样白血病细胞向巨噬细胞分化； 5)作为重要的炎症介质，参与某些自身免疫病的病理损伤等。据文献报道，TNFa表达抑制剂可用于治疗类风湿性关节炎、银屑病关节炎、青少年慢性关节炎、强直性脊柱炎、脊椎关节病、成人斯蒂尔病、风湿性多肌病、克罗恩病、 溃疡性结肠炎、牛皮癣、魏格纳肉芽肿、贝切特病(Behcet’ s)、AA淀粉样变性、坏疽性脓皮症、慢性脱髓鞘多发性神经炎、眼色素层炎、肉状瘤病、舍格伦综合症、SAPHO综合症、 TNF受体相关性周期性综合症等多种炎性病症[1_18](1. Catrina Al, Trollmo C, af Klint
E,et al. Arthritis Rheum. 2005 ；52 :61-72 ；2. Komatsu M, Kobayashi D, Saito K, et al.Clin Chem. 2001 ；47 :1297-1301. ；3.Van denBrande JM, Braat H, van den Brink GR, et al. Gastroenterology. 2003 ；124 :1774-1785. ；4. Maini R，St Clair EW，Breedveld F, Furst D, Kalden J. WeismanM, Smolen J, Emery P, Harriman G, Feldman. Lipsky P.ATTRA CT Study Group. Lancet 1999；354 :1932. ；5. Rutgeerts P, D ' Haens G, Targan S, Vasiliauskas Ε,Hanauer SB,Present DH,Mayer L,Van Hogezand RA,Braakman T,Deffoody KL, Schaible TF, Van Deventer SJ. Gastroenterology 1999 ；117 :761. ；6. Breban Μ, VignonE,Claudepierre P,Devauchelle V,Wendling D,Lespessailles Ε,EulIer-Ziegler L, Sibilia J, Perdriger A, Mezieres Μ, Alexandre C, Dougados Μ.Rheumatology 2002；41 :1280. ；7.Breban Μ, Vignon Ε, Claudepierre P, Devauchelle V, Wendling D, Lespessailles Ε, Euller-Ziegler L, Sibilia J, Perdriger A, Mezieres Μ, Alexandre C, Dougados Μ. Rheumatology 2002 ；41 :1280. ；8. Mease PJ. Skin Therapy Letter 2003 ； 8:1. ；9.Lamprecht P, Voswinkel J, Lilienthal Τ, Nolle B, Heller Μ, Gross WL, Gause A. Rheumatology 2002 ；41 :1303. ；10.Sfikakis PP. Ann. Rheum. Dis. 2002 ；61 Suppl2 1151. ； 11.Gottenberg JE, Merle-Vincent F, Bentaberry F, Allanore Y, Berenbaum
F,Fautrel B, Combe B, Durbach A, Sibilia J, Dougados M, Mariette X. Arthritis &Rheumatism 2003 ；48 :2019. ； 12.Mimouni D.Anbalt GJ, Kouba DJ, Nousari HC. British
3Journal of Dermatology 2003 ；148 813. ； 13.Slavering C, Cantina F, Nicola L, Catalos MG, Machine P, Pulsate L, Paula A, Olivier I, Board L. J. Rheumatol.2003 ； 30:760. ； 14. Reiff A. Arthritis & Rheumatism 2003 ；48 2079. ； 15. Kohn A, Prantera C, Pera A, Cosintino R, Sostegni R, Daperno Μ. Digestive & Liver Disease 2002 ； 34 626. ； 16. Wagner AD, Andresen J, Jendro MC, Hulsemann JL, Zeidler H.Arthritis& Rheumatism 2002 ；46 :1965· ； 17.Aeberli D, Oertle S, Mauron H, Reichenbach S, Jordi B, Villiger PM. Swiss Medical Weekly 2002 ；132 414. ； 18.Chin RL, ShermanffH, Sander HW, Hays AP,Alto N. Journal of the Neurological Sciences 2003 ；210 19.)现代药理学研究表明红豆蔻种子的甲醇提取物中分离出的成分腹腔注射能明显抑制大鼠溃疡；其根茎的挥发油显示抗微生物活性，能抗革兰氏阳性菌、酵母菌及一些皮肤真菌，具有细胞毒和抗真菌活性其果实的甲醇提取物中分离的成分具有抗肿瘤作用(《中华本草》第八卷，上海科学技术出版社，1999)。但迄今尚未见有关红豆蔻提取物抑制TNF α 表达活性的报道
发明内容
本发明的目的旨在提供红豆蔻提取物的一种新的医药用途。本发明的第一 B面是提供了红豆蔻提取物用于制备TNF α表达抑制剂的用途。在另一优选例中，所述红豆蔻提取物可由如下方法制得红豆蔻用石油醚(30 60°C)回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。在另一优选例中，所述TNFCI表达抑制剂可用于预防或者治疗炎性病症。在另一优选例中，所述炎性病症为类风湿性关节炎、银屑病关节炎、青少年慢性关节炎、强直性脊柱炎、脊椎关节病、成人斯蒂尔病、风湿性多肌病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、 牛皮癣、魏格纳肉芽肿、贝切特病、AA淀粉样变性、坏疽性脓皮症、慢性脱髓鞘多发性神经炎、眼色素层炎、肉状瘤病、舍格伦综合症、SAPHO综合症或TNF受体相关性周期性综合症。本发明的第二方面是提供一种红豆蔻提取物，其可由如下方法制得红豆蔻用石油醚(30 60°C)回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。本发明的第三方面是提供一种制备所述红豆蔻提取物的方法，包括将红豆蔻用石油醚(30 60°C )回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。本发明的第四方面是提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的所述红豆蔻提取物和可药用载体。
图1在正常人外周血单核细胞中红豆蔻提取物剂量依赖性抑制内毒素诱导的炎症因子TNF α的表达；
具体实施例方式本发明的问世部分是基于这样一个意外发现红豆蔻提取物在体外可显著抑制炎症因子TNF α的表达。因此，红豆蔻提取物可用于制备TNF α表达抑制剂。进而，本发明提供了一种红豆蔻提取物用于制备TNF α表达抑制剂的用途。其中，所述红豆蔻提取物可由如下方法制得红豆蔻用石油醚(30 60°C )回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。本发明的另一方面是提供一种红豆蔻提取物，其可由如下方法制得红豆蔻用石油醚(30 60°C )回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。本发明的另一方面是提供一种制备所述红豆蔻提取物的方法，包括将红豆蔻用石油醚(30 60°C )回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。本发明还提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的所述红豆蔻提取物和可药用载体。“治疗有效量”是指能够达到治疗效果的提取物的量。本领域的专业人员能够理解“治疗有效量”可以随着给药的方式、载体的使用以及可能和其他治疗剂合用等而有所不同。本发明的红豆蔻提取物可用本领域的常规方法制得，例如可将红豆蔻粉末用石油醚(30 60°C)回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩，冷冻干燥制得。研究证实，TNFa表达抑制剂可用于预防或者治疗多种“炎性病症”。所述 “炎性病症”是指一组存在炎症反应病理变化的病症，包括但不限于类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis)、银屑病关节炎(Psoriatic arthritis)、青少年慢性关节炎 (Juvenile chronic arthritis)、强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis)、脊椎关节病 (Spondyloarthropathy)(Adult onset Still， s disease) (Polymyalgia rheumatica) M-'M (Crohn' s disease) > ^ ft^n JSi^ (Ulcerative colitis)、牛皮痛(Psoriasis)、魏格纳肉芽月中(Wegener，s granulomatosis)、贝切特病 (Behcet's)、AA 淀粉样变性(AA amyloidosis)、坏疽性脓皮症(Pyodermagangrenosum)、慢性脱髓鞘多发性神经炎(Chronic inflammatory demyelinatingpolyneuropathy)、眼色素层炎(Uveitis)、肉状瘤病(Sarcoidosis)、舍格伦综合症(Sjogren，s syndrome)、SAPHO 综合症(SAPH0 syndrome)以及TNF受体相关性周期性综合症(TNF receptor associated periodic syndrome)等。可以理解，本发明的红豆蔻提取物可用于制备预防或者治疗上述炎性病症的药物。本领域的专业人员能够理解，所述炎性病症或许会在今后被证明具有其他的、未必与 TNFa的表达密切相关的发病机理，但这并不影响本发明的红豆蔻提取物用于制备治疗上述炎性病症的药物。本发明的红豆蔻提取物可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本发明的红豆蔻提取物及可药用载体。较佳地，本发明的药物组合物含有0. 1-99. 9%重量百分比的作为活性成分的本发明的红豆蔻提取物。“可药用载体”不会破坏本发明的红豆蔻提取物的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用
量对人体无毒。所述可药用载体包括但不限于软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、 水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸部分甘油酯混合物等。其他常用的药物辅料如粘合剂(如微晶纤维素)、填充剂(如淀粉、葡萄糖、无水乳糖和乳糖珠粒)、崩解剂(如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁)以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释剂、润湿剂等所述红豆蔻提取物以及药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服制剂包括片剂、颗粒剂、悬浮液、胶囊、溶液等，非肠道给药制剂包括注射液。局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。所述红豆蔻提取物以及药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道、阴道等。所述红豆蔻提取物及药物组合物的用量可根据给药途径、患者的年龄和体重、病症严重程度的不同而不同，其日剂量可以是0. 001 100mg/kg，可以一次或多次给药。以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但并不意味着本发明仅限于此。实施例1制备红豆蔻提取物取红豆蔻粉末100g，加石油醚(30 60°C ) IOOOmL,回流提取两次，1. 5h/次，过滤，合并滤液，减压浓缩流浸膏，冷冻干燥至干，得红豆蔻提取物1. lg。实施例2红豆蔻提取物抑制肿瘤坏死因子(TNF α )实验研究实验材料细胞正常人外周血单核细胞(PBMC)受试药物红豆蔻提取物(按实施例1方法制备)，溶解于DMSO中，制备得60mg/ mL母液。阳性对照IKK-2inhibitor (德国默克公司产品)^lJ =Ficoll-Paque Plus (Amersham Bioscience)；内 _ (LPS, lipopolysaccharide)为德国默克公司产品；TNF α ELISA试剂盒为美国R&DSystem公司产品；二甲基亚砜(DMSO)为上海展云化工有限公司产品；细胞培养基及胎牛血清为Gibco公司产品方法与结果新鲜血液以EDTA为抗凝剂，Ficoll分离血细胞，重悬细胞于含有10%胎牛血清的 RPMI1640培养基中，向96孔板中加入IOOuL密度为2 X IO5细胞/mL新分离的细胞，每孔细胞总数为2X104个，每个样品做2个孔。在细胞中加入指定浓度的供试样品(终浓度分别为 1. 1、3. 3、10、30ug/mL，加样量为 IOuL)和阳性对照(IKK_2inhibitor，终浓度为 IOuM)。 置于37°C含5% C02的培养箱中孵育30分钟；加入IOuL浓度为10ug/mL的LPS (终浓度为lug/mL)，置于37°C含5% CO2的培养箱中孵育16小时；于700rpm离心10分钟，将上清转入96孔酶标板中，应用TNF α ELISA试剂盒测定 TNFa浓度。
抑制率账^勿二气白
内毒素处理组-空白组通过XLfit软件计算红豆蔻提取物抑制PBMC中TNF α的IC50。实验结果表1.红豆蔻提取物抑制TNF α表达
权利要求
1.红豆蔻提取物用于制备TNFα表达抑制剂的用途。
2.权利要求1的用途，其中所述红豆蔻提取物可由如下方法制得红豆蔻用石油醚 (30 60°C )回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。
3.权利要求1或2的用途，其中所述TNFa表达抑制剂可用于预防或者治疗炎性病症。
4.权利要求3的用途，其中所述炎性病症为类风湿性关节炎、银屑病关节炎、青少年慢性关节炎、强直性脊柱炎、脊椎关节病、成人斯蒂尔病、风湿性多肌病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、魏格纳肉芽肿、贝切特病、AA淀粉样变性、坏疽性脓皮症、慢性脱髓鞘多发性神经炎、眼色素层炎、肉状瘤病、舍格伦综合症、SAPHO综合症或TNF受体相关性周期性综合症。
5.一种红豆蔻提取物，其可由如下方法制得红豆蔻用石油醚(30 60°C )回流提取， 过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。
6.一种制备权利要求5的红豆蔻提取物的方法，包括将红豆蔻用石油醚(30 60°C ) 回流提取，过滤，合并滤液，减压浓缩至干燥。
7.—种药物组合物，包括治疗有效量的权利要求5的红豆蔻提取物和可药用载体。
全文摘要
本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种红豆蔻提取物及其医药用途。本发明的红豆蔻提取物可用于治疗炎性病症。
文档编号A61K36/9062GK102225178SQ20111015386
公开日2011年10月26日 申请日期2011年6月9日 优先权日2011年6月9日
发明者宗伟英, 王滔, 肖功胜, 苏凡, 魏晨 申请人:中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心