专利名称：疏血通组合物在制备治疗心肌缺血的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的用途，具体地说，涉及疏血通组合物的新用途。
背景技术：
疏血通组合物是以地龙和水蛭为原料的中药组合物，通常为注射剂，授权公告号 CN1192782C，公告日2005年3月16日，发明名称“治疗心脑血管疾病的注射剂的制造方法及其产品”的发明专利公开了该中药组合物注射剂的制备方法。目前，疏血通注射剂用于治疗急性期脑梗塞，具有抗栓、溶栓、改善血液循环的作用。心肌缺血性疾病时一种常见疾病，多发于中老年人群中。且心肌缺血性疾病的发病随年龄的增长而增高，程度也随年龄的增长而加重，有资料表明，自40岁开始，每增加10 岁，心肌缺血性疾病的患病率增加1倍。在我国，心肌缺血性疾病的发病率约在30%，且逐年增高，现已成为导致人口死亡的主要原因之一。目前治疗心肌缺血性疾病的药物有化学药物，也有中药制剂。其中，常用的化学药物包括硝酸酯制剂、β阻滞剂、抗血小板药物、抗凝药物、钙通道阻滞剂等，但这些化学药物常常导致一些不良反应，如诱发支气管哮喘、引起心力衰竭等。常用的中药制剂包括丹参制剂、复方银杏制剂等，但不同患者的个体体质不完全相同，因此这些中药制剂的疗效也不完全相同。
发明内容
本发明的目的是提供一种疏血通组合物的新用途。为了实现上述目的，本发明提供疏血通组合物在制备治疗心肌缺血药物中的应用，所述疏血通组合物主要由如下重量份的原料药制成水蛭150 650份、地龙850 350 份。其中，原料药优选的重量份配比为水蛭300 600份、地龙500 800份。本发明所述的重量份可以是yg、mg、g或kg等医药领域公知的重量单位。本发明的疏血通组合物可以制成药学上可接受的各种剂型，例如，可以通过本领域常规方法，使用药学上可接受的载体制成汤剂、片剂、颗粒剂等口服剂，或者注射剂；优选为注射剂。上述疏血通组合物的注射剂，其制备方法可参见授权公告号CN1192782C的发明专利中公开的制备方法。经试验证明，本发明所述的疏血通组合物能够使心肌缺血范围缩小、缺血程度减轻，心肌梗死范围缩小，减少心肌耗氧量，抑制血清心肌酶活性升高；能够抑制腺苷二磷酸钠(ADP)、花生四烯酸(AA)及胶原(CG)诱导的血小板聚集；能够明显延长实验性动脉血栓形成时间；能够降低高分子右旋糖苷引起的全血粘度、血浆粘度的升高，对血沉和红细胞压积也有有益的影响；还能够改善红细胞流态和毛细血管开放数；此外，疏血通组合物对血流动力学各项指标未产生明显影响。综上所述，本发明所述的疏血通组合物具有明显的抗心肌缺血作用和活血化瘀作用，其作用强度较丹红注射液稍强或相当，为疏血通组合物的应用拓展了新的临床应用领域。
图1为疏血通注射剂对急性心肌缺血犬缺血程度和缺血范围的影响的示意图。图2为疏血通注射剂对急性心肌缺血犬心肌梗死范围的影响的示意图。图3为疏血通注射剂对急性心肌缺血犬血清心肌酶的影响的示意图。图4为疏血通注射剂对急性心肌缺血犬心肌耗氧量的影响的示意图。图5为疏血通注射剂对急性心肌缺血大鼠心肌梗死范围的影响的示意图。图6为疏血通注射剂对心肌缺血大鼠血清心肌酶的影响的示意图。图7为疏血通注射剂对大鼠实验性血栓形成时间的影响的示意图。
具体实施例方式以下通过具体实施例来进一步说明本发明，但不用来限制本发明的范围。以下实施例中所用到的相关试验材料如下1、药品与试剂受试药疏血通注射液(以下简称疏血通)，牡丹江友搏药业有限责任公司生产， 该疏血通的配比及制备方法参见授权公告号CN1192782C的实施例1，批号070202-2，黄色澄明液体，规格2mL/支；临用前，以生理盐水制成所需浓度的药液供动物给药用。阳性对照药丹红注射液(以下简称丹红)，济南步长制药有限公司生产，批号 070631，红棕色澄明液体，规格IOmL/支；临用前，以生理盐水制成所需浓度的药液供动物给药用。红四氮唑(TTC)，上海试剂三厂生产，以磷酸盐缓冲液配制成的溶液供染色用。天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒，乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒杜邦公司生产。肌酸激酶同工酶(CK-MB)试剂盒利德曼公司生产。高分子右旋糖酐(分子量50万)，中国医学科学院血液病研究所科技公司生产。腺苷二磷酸钠(ADP) :SIGMA公司生产。花生四烯酸(AA) :ICM公司生产，以IN Na2CO3溶液中和、溶解，并以Tris缓冲液稀释配制成20mM的花生四烯酸钠溶液。胶原(CG)称取大鼠腹部去毛皮肤lg，放入生理盐水冰水浴中，以玻璃研磨器研磨成勻浆，3000rpm离心IOmin后取上清液，上清液再以8000rpm离心lOmin，制得100mg/mL 的溶液。凝血酶时间(TT)诊断试剂盒，凝血酶原时间(PT)诊断试剂盒，活化部分凝血活酶时间(APTT)诊断试剂盒德国美创公司生产。2、试验动物ICR小鼠，中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供，动物合格证号 SCXK 津 2005-0001。SD大鼠，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号SCXK (京)2007-0001。Wistar大鼠，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号 SCXK (京)2007-0001。beagle犬，中国维光实验动物中心。合格证号SCXK(皖)06-001。杂种犬，购自天津市郊。饲养观察两周以上备用。实施例1对实验性急性心肌缺血犬的治疗作用一、试验方法成年健康杂种犬，体重11. 4 士 1.2 (10 15) kg，雌雄兼用，静脉注射3%戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉。左侧第四肋间开胸，暴露心脏，分离冠状动脉左旋支，经MFV-3200型电磁血液流量计测定冠状动脉血流量(CBF)；分离冠状动脉前降支第二分支以下一段血管， 于其下穿0#丝线，以备结扎；在结扎线下拟缺血心肌表面放置30个点的多点固定式心外膜电极，心肌电信号经AB-601G生物电放大器，标测30个点的心外膜心电图变化。股动脉插管至腹主动脉，经TP-400T型压力换能器接AP-641G血压放大器测量收缩压(SAP)、舒张压 (DAP)、平均动脉压(MAP)；四肢皮下插入针状电极，经AC-601G心电放大器测量标准II导联心电图(ECGII)。上述模拟信号同步输入RM-6300型八导生理记录仪(日本光电公司生产)，经MP-150系统采集、转换为数字信号，以AcqKnowledge v. 3. 5. 7软件进行分析处理。待各项指标稳定后开始连续采集各种数据，作为基础值。随后结扎冠脉前降支， 15min后记录缺血性心外膜心电图，作为给药前值。实验分5组，每组6只犬，采用静脉恒速输注方式给药，给药时间30min，给药体积为15mL/只。对照组给予生理盐水；3个受试药组给予疏血通，剂量分别为0. 1,0. 2,0. 4mL 原液/kg，按体表面积折算，分别相当于临床用量的0. 5、1、2倍；阳性药组给予丹红注射液， 剂量为0. 5mL原液/kg，按体表面积折算，相当于临床用量的2倍。测量开始给药后10、20、 30、40、60、90、120min 的 ECGII、SAP、DAP、MAP、CBF 及 30 个点的心外膜心电图。以心外膜心电图ST段升高值的总和(Σ ST)作为衡量心肌缺血程度的指标；将心外膜心电图ST段升高超过2mV的点定为缺血点，计算总缺血点数(NST)，作为心肌缺血范围的指标。于给药前及给药后30、60min取动脉血及冠状静脉窦血以ABL-520型血气分析仪 (丹麦Radiometre公司)测定动、静脉血的氧分压和氧饱和度。于给药前及给药后Mi取血离心制备血清，以RXL全自动生化分析仪(杜邦公司)进行AST、LDH、CK-MB测定。分别于给药前及给药后30、60min取血离心制备血浆，用凝血仪测定凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)。分别于给药前及给药后30、60、90、120min用试纸法和重量法测定出血时间和出血量。给药后他放血处死动物，迅速取出心脏，以1/3心脏重量作为左旋支引流区，计算每百克心肌的血流量(CF)，并按公式计算冠脉阻力(CR)及心肌耗氧量。公式如下CF = CBF X 300/ 心脏重量 CR = MAP/CF血氧含量=1.39 X 15 X氧饱和度+0.03 X血氧分压心肌耗氧量=(动脉血氧含量-静脉血氧含量)XCBF/100心脏称重后以伊文思兰冠脉SOmmHg逆向灌流，在结扎部位以下，将心室按约 5mm厚平行于房室沟冠状切片，切片上未染兰的区域为结扎血管的灌流区，即危险区；室温下切片以TTC避光染色lOmin，危险区内梗死心肌呈白色，存活心肌呈红色，测量危险区、梗死区面积，并计算心肌梗死范围。以t检验比较给药前后和组间均数差异的显著性。 结果如表1、图1所示。二、试验结果1、对心外膜心电图的影响(1)对缺血程度(Σ ST)的影响对照组静脉给予生理盐水后池内，Σ ST与给药前比较无显著变化。静脉给予疏血通后，Σ ST剂量依赖性地降低；0. 1,0. 2,0. 4mL/kg疏血通组分别于给药30、20、10min 后，Σ ST开始明显下降，3个剂量池内最大下降百分数分别为25.511.0% (P < 0.01)、 40. 59. 2% (P< 0. 001),56.311.6% (P < 0. 001)，高剂量作用持续2h以上。与丹红注射液(0.5mL/kg)比较，疏血通(0.4mL/kg)作用更快，强度也更高。结果见表1、图1。(2)对缺血范围(NST)的影响静脉给予NS后池内，NST无明显改变。静脉给予疏血通后心肌缺血范围有不同程度缩小，0. 1、0. 2、0. %iL/kg疏血通组分别于给药40、30、30min NST后，NST开始明显减少，2h 内心肌缺血范围最大下降了 11.0 士 8. 4% (P > 0. 05),24. 1 士 13. 1 % (P < 0.05)、 28. 1 士 14. 6% (P < 0. 01)，高剂量作用持续2h以上。与丹红注射液(0. 5mL/kg)比较，疏血通(0. 4mL/kg)作用略强，但无统计学差异(P > 0. 05)。结果见表1、图1。表1疏血通对急性心肌缺血犬缺血程度(Σ ST)和缺血范围(NST)的影响(士s， η = 6)注1、括号内数据为与给药前的差值；2、与给药前配对比较< 0.05，**Ρ < 0. 01 ；3、与对照组比较ΔΡ<0. 05，δδΡ<0. 01 ；4、疏血通0. 4mL/kg与丹红注射液0. 5mL/ kg 比较，++P < 0. 01。2、对心肌梗死范围的影响TTC染色结果表明，对照组梗死区占危险区的6% ；静脉给予疏血通后，心肌梗死范围剂量依赖性缩小，0. 1、0. 2、0.4mL/kg梗死区占危险区分别缩小了 17.2% (P >0. 05),32. 1 % (P < 0. 05),42. 1 % (P < 0.01)；梗死区占左室分别缩小了 22.7% (P > 0. 05),34.0% (P > 0.01),43. 3% (P < 0. 01)。阳性药组明显缩少心肌梗死范围。与丹红注射液(0.5mL/kg)比较，疏血通(0.4mL/kg)稍强，但无统计学差别。结果见表2、图2。
表2疏血通对急性心肌缺血犬心肌梗死范围的影响(士s，η = 6)
权利要求
1.疏血通组合物在制备治疗心肌缺血的药物中的应用，所述疏血通组合物主要由如下重量份的原料药制成水蛭150 650份、地龙850 350份。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述疏血通组合物主要由如下重量份的原料药制成水蛭300 600份、地龙500 800份。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述疏血通组合物的剂型为药学上可接受的剂型。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述疏血通组合物的剂型为注射剂。
全文摘要
本发明提供了疏血通组合物在制备治疗心肌缺血的药物中的应用，所述疏血通组合物主要由如下重量份的原料药制成水蛭干品250～750份、地龙干品750～250份。本发明所述的疏血通组合物具有明显的抗心肌缺血作用和活血化瘀作用，其作用强度较丹红注射液稍强或相当，为疏血通组合物的应用拓展了新的临床应用领域。
文档编号A61K35/62GK102389441SQ20111036606
公开日2012年3月28日 申请日期2011年11月17日 优先权日2011年11月17日
发明者李振国 申请人:牡丹江友搏药业有限责任公司