专利名称：用于预防和治疗炎性疾病或免疫疾病的含树花素的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及树花素(Ramalin)用于治疗炎性疾病或免疫疾病的新用途。更具体地，本发明涉及用于预防和治疗炎性疾病或免疫疾病的药物组合物，其包含具有抗炎活性的树花素或其盐，还涉及使用所述组合物预防或治疗炎性疾病或免疫疾病的方法。
背景技术：
炎性反应是由多种因素，例如病原感染或机体中组织损伤导致的防御性反应，并且发挥最初的保护作用以限制对感染或受损区域的损害。在大多数情况下，此类炎性反应导致致病因素消除，并通过先天免疫物质诱导适应性免疫(Hawiger J., Innate Immunityand Inflammation:A Transcriptional Paradigm.1mmunologic Research.23，pp.99—109，2001)。已知伴随炎症出现的皮肤发红、肿块、灼热和疼痛等是持续炎性反应的结果，所述持续炎性反应例如局部血流增加和局部血流速率降低，其源自炎症区域中炎症介质和细胞因子导致的血管舒张；血管释放血浆成分增加，其源自血管透性增加；血管释放免疫细胞增加，其源自血管内皮细胞对循环免疫细胞的粘附；以及由趋化性导致的向感染区域的迁移增力口 (Gallo RL，Murakami M，Takaaki 0，Zaiou Μ., Biology and clinical relevanceof naturally occurring antimicrobial peptides.J.Allergy.Clin.1mmunol.110，pp.823-831.2002 ；Graeme B.Ryan, MB，and Guido M.，Acute Inflammation.AmericanJournal of Pathology.86 (I)，pp.185-274，1977)。此外，炎症相关的血管舒张和血管透性增加还可归因于一些细胞响应组织损伤而产生的组胺，以及在血液中以失活状态存在并由组织损伤活化的低分子量激肽类(Yamaki K，Thorlacius H，Xie X，Lindbom L,Hedqvist P， Raud J.， Characteristics of histamineinduced leukocyte rolling inthe undisturbed microcirculation of the rat mesentry.British J.Pharmacol.123,pp.390-399，1998 ；Brocklehurst WE， Role of Kinins and Prostaglandins inInflammation.Proc.Roy.So c.Med.64，pp.4-6，1971)。通常，急性炎性反应出现迅速，维持时间短，并伴随着被称为急性期反应的系统反应。慢性炎症会导致与诸如感染或自身免疫性疾病相关联的持续免疫活化，巨噬细胞的积累和活化也是慢性炎症的标识(Huang AL，Vita JA, Effects of Systemic Inflammationon Endothelium-Dependent Vasodilation.Trends, Cardiovasc.Med.16，p.1520,2006)。然而，持续的慢性炎症反应会导致宿主细胞或组织的严重损害。通过巨噬细胞对病原的响应启动感染部位的炎性反应。已知由病原活化的巨噬细胞产生的活性氧簇和活性氮簇(例如NO)、诸如前列腺素类和白细胞三烯的炎症介质，以及诸如TNF-a、IL-6和IL-8的促炎性细胞因子，参与了炎性反应(Renauld JC，Newinsights into the role of cytokines in asthma.J.Clin.Pathol.54, pp.577-589,2001 ；Blake GJ，Ridker PM，Tumour necrosis factor-a , inflammatory biomarkers,andatherogenesis.Eur.Heart J.23，pp.345347，2002)。NF- κ B 是与炎症介质产生相关的基因的转录因子，NF-K B的活化在巨噬细胞的炎症相关作用中非常重要。据报道，NF-kB在巨噬细胞中转录炎症相关基因，包括诱导型一氧化氮合酶(iN0S2)、环氧合酶(C0X-2)、TNF-a、IL-6 和 IL-8 等。在人体的巨噬细胞中，一氧化氮(NO)是通过一氧化氮合酶(下文称作N0S)由L-精氨酸产生的(Kerwin, J.F.etal.，J.Med.Chem.，38:4343,1995)。人体的 NOS 具有三种NOS异构体，包括内皮组成型NOS (下文称作ecNOS)、神经组成型NOS (下文称作ncNOS)和诱导型NOS (下文称作iNOS)。其中，ecNOS和ncNOS分别在内皮细胞和神经细胞中表达，并且依赖于钙和钙调蛋白，而只有在细胞被病原菌细胞膜的脂多糖(下文称作LPS)、诸如IL-1和TNF-α的细胞因子、以及诸如辐射的免疫刺激活化时，iNOS才在多种细胞中高度表达，且iNOS不依赖于钙和钙调蛋白。NO在高浓度下发挥防御抵抗肿瘤细胞和病原菌的作用，且血管内皮细胞中产生的低浓度NO发挥调节血压的作用，而神经细胞中产生的NO则进行多种生理反应，涉及神经递质功能、学习和记忆等。组成型NOS (cNOS)在维持人体动态平衡中发挥重要作用，且ecNOS产生的NO在血管系统中发挥作用以抑制血管舒张和血小板粘附或凝集，而ncNOS产生的NO则在神经系统·中发挥作用以提高长期记忆，或充当导致忧郁症的神经递质并参与消化道运动或阴茎勃起。另一方面，由特异细胞因子或LPS诱导的iNOS表达而产生的NO参与炎性表达或宿主防御机制。内毒素刺激活化了巨噬细胞中的转录因子NF-κ B，诱导iNOS表达，从而提高了 NO 的产生(Butler, A.R., Chemistry&Industry, 16:828,1995)。已知当 LPS 外源刺激、诱导炎症的辐射等诱导iNOS表达时，持续4-6小时产生大量NO，从而导致人体内的炎性反应。对于大鼠，通过外源刺激在巨噬细胞中表达大量iNOS mRNA和蛋白，且通过表达合成得到的NO发挥抗菌作用和抗癌作用。然而，已知当大量过量的NO产生时，其导致炎性反应，例如关节炎和败血病、组织移植排斥、诸如自身免疫性疾病和糖尿病的免疫疾病，以及神经元细胞死亡。因此，iNOS活性抑制剂非常有望作为治疗此类疾病的活性物质，且据此观点，抑制iNOS产生NO的化合物可用作治疗人体中多种炎性疾病的试剂。现已进行的关于抑制NO产生的物质的研究主要涉及研发特异性抑制iNOS酶活性的物质。具体地，现已进行了研发前体L-精氨酸衍生物、L-瓜氨酸衍生物、氨基胍衍生物、异硫脲衍生物等的研究(Babu，B.R.B.and Griffith 0.ff., Current Opinion in Chemical Biology, 2:491,1998)。然而，炎性反应中iNOS转录阶段的表达调控在决定NO的产生中非常重要，因此，需要研发涉及通过IkB(IkB是巨噬细胞中转录因子NF- κ B的抑制剂)的磷酸化调控NF- κ B活性的药物，或涉及Akt、ERK、c-jun-和p38_MAPK信号途径(其涉及NF- κ B活性的调控)的药物。地衣类似于无花植物，是真菌(地衣共生菌)与藻类和/或蓝细菌(共生光合生物)的共生体。地衣中的真菌形成包含典型次级代谢物的叶状体或地衣基质(AhmadjinV.，The lichen symbiosis, Wiley, New York, pp.1-6,1993)。足量的天然地衣样品难以获得，并且培养大量地衣的技术也是未知的。为此，与高等植物的研究相比，对地衣的研究相对不足。由于用于地衣的组织培养方法、大规模生产方法和生物分析方法已经得到改进，在此基础上进行了积极的研究(Behera, B.C.et al.，Lebensm.ffiss.Technol.,39:805,2006)。从地衣中分离出了具有多种生物活性(包括细胞毒性、抗真菌性、抗菌性、抗氧化性和抗炎活性)的化合物，包括脂肪酸、缩酚酸类、缩酚酸环醚类、二苯并呋喃、双萜、蒽醌、萘醌类(naphtoquinones)、地衣酸、普耳文酸(pulvinic acids)、咕吨酮和环二硫哌嗪二酮(epidithiopiperazinediones)(Muller, K., Appl.Microbiol.Biotechnol.,56:9-16,2001)。孔树花(Ramalina terebrata)是天然生长在南极乔治王岛(King GeorgeIsland)的地衣，并可容易地从乔治王岛收集。在对南极地衣孔树花的研究中，本发明人曾分离了具有优异抗氧化活性的新化合物树花素(Ramalin)(韩国专利申请N0.2008-111021)。然而，尚没有报道树花素具有抗炎活性。因此，本发明人通过进行体外和体内的比较实验检测了树花素的细胞免疫抑制活性，从而测定了树花素在小鼠巨噬细胞RAW264.7中对LPS诱导的NO产生的影响，结果发现，树花素具有抑制炎性反应的作用。更具体地，本发明人发现本发明的树花素抑制了 iNOS的mRNA表达，从而显著抑制了 NO产生，抑制了 NF- κ B的活化，抑制了 p38MAPK、ERKI/2和JNK信号途径，抑制了 LPS受体TLR4的表达，并且在体内实验中显示了优异的抗炎和免疫调节作用，从而完成了本发明。
发明内容
技术问题本发明的目的是提供具有抗炎和免疫调节活性的树花素的新用途。技术方案为了实现上述目的，本发明提供了用于预防或治疗炎性疾病或免疫疾病的药物组合物，其包含作为活性成 分的具有下式I结构的树花素或其药学上可接受的盐:
权利要求
1.用于预防或治疗炎性疾病或免疫疾病的药物组合物，其包含作为活性成分的具有下式1结构的树花素或其药学可接受的盐，
2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述炎性疾病或免疫疾病为:特应性皮炎、关节炎、尿道炎、膀胱炎、动脉硬化、变应性疾病、鼻炎、哮喘、急性疼痛、慢性疼痛、牙周炎、牙龈炎、炎性肠病、痛风、心肌梗死、充血性心力衰竭、高血压、心绞痛、胃溃疡、脑梗死、唐氏综合症、多发性硬化、肥胖症、糖尿病、痴呆、抑郁症、精神分裂症、结核病、睡眠障碍、败血症、烧伤、胰腺炎、帕金森氏症、中风、由癫痫发作导致的脑损害或自身免疫性疾病。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其进一步包含通常用于制备药物组合物的适合的载体、赋形剂或稀释剂。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其与一种或多种药剂组合制剂或联合使用，所述药剂选自:抗组胺药、抗炎药、抗癌药和抗生素组成的组。
5.用于预防或改善炎性疾病或免疫疾病的功能性食品，其包含具有下式I结构的树花素作为活性成分，
6.如权利要求5所述的功能性食品，其中所述炎性疾病或免疫疾病为:特应性皮炎、关节炎、尿道炎、膀胱炎、动脉硬化、变应性疾病、鼻炎、哮喘、急性疼痛、慢性疼痛、牙周炎、牙龈炎、炎性肠病、痛风、心肌梗死、充血性心力衰竭、高血压、心绞痛、胃溃疡、脑梗死、唐氏综合症、多发性硬化、肥胖症、糖尿病、痴呆、抑郁症、精神分裂症、结核病、睡眠障碍、败血症、烧伤、胰腺炎、帕金森氏症、中风、由癫痫发作导致的脑损害或自身免疫性疾病。
7.功能性化妆品，其包含具有下式I结构的树花素作为活性成分，
8.如权利要求7所述的功能性化妆品，其用于改善炎性疾病。
9. 如权利要求8所述的功能性化妆品，其中所述炎性疾病是特应性皮炎或烧伤。
全文摘要
本发明涉及从南极地衣孔树花(Ramalina terebrata)分离的树花素的新用途(抗炎活性)，更具体地，涉及包含作为活性成分的树花素的药物组合物。本发明的树花素是源自天然物质的化合物，没有毒性或副作用，并且抑制诱导型一氧化氮合酶(iNOS2)在转录阶段的表达以显著抑制炎性反应的关键介质一氧化氮(NO)的产生。此外，其还抑制炎症介质NF-κB的活化，抑制p38MAPK、ERK1/2和JNK信号途径，并抑制LPS受体TLR4的表达，表明树花素具有优异的抗炎作用。因此，包含树花素的组合物能够有效地用于根本性地治疗或预防炎性疾病或免疫疾病，并消除或缓解所述疾病的症状。
文档编号A61K31/17GK103140222SQ201180032808
公开日2013年6月5日 申请日期2011年6月2日 优先权日2010年6月3日
发明者任珽汉, 金一赞, 李圣九, 金德圭, 韩世钟, 李亨锡, 金星珍, 金兑勍, 康弼盛, 朴喜勇, 朴荷主, 表皙能 申请人:韩国海洋研究院