用于预防或治疗糖尿病周围神经病变的包含草药组合提取物的组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了用于预防和治疗糖尿病周围神经病变的药物组合物和健康功能食品，包含3.5:1(w/w)山药：穿龙薯蓣的混合物的草药提取物。与来自单独草药或其他重量比的草药混合物的提取物相比，所述混合的草药提取物具有协同提高神经生长因子的体内水平的能力，有效防止神经细胞凋亡和促进神经再生。因此，其能用于预防和治疗糖尿病周围神经病变的药物组合物和健康功能食品。
【专利说明】用于预防或治疗糖尿病周围神经病变的包含草药组合提取物的组合物
【技术领域】
[0001]本发明涉及用于糖尿病周围神经病变的预防和治疗的组合物，其包含3.5:1 (w/w)山药(Dioscorea Rhizoma):穿龙薯菌(Dioscorea nipponica)的混合物的草药提取物。
[0002]感谢
[0003]本研究得到了韩国知识经济部资助的战略R&D企划办公室(Office of StrategicR&D Planning) (OSP)全球领先技术项目的支持(N0.10039303)。
【背景技术】
[0004]糖尿病发病率正在世界范围内迅速增长。世界卫生组织评估在2008年约1.8亿人患有糖尿病，预期糖尿病患者数量到2030年增倍。因此，与糖尿病相关的财政和社会成本已经提升了，并且糖尿病并发症引起的死亡率已经上升。然而，通过严格控制血糖水平可以推迟糖尿病的发病或发展，由此重要的是通过生活方式调整和适当治疗以保持血糖正常。
[0005]糖尿病是发达国家中神经病变的主要已知原因。糖尿病周围神经病变是用来描述由糖尿病引起的周围神经系统失调的症状的术语。它是糖尿病遭遇的最常见的并发症。
[0006]糖尿病周围神经病变使得糖尿病患者的生活质量下降，并且是患者死亡的最大原因。糖尿病患者中糖尿病周 围神经病变的发病率随着患者年龄和糖尿病病程增加。糖尿病周围神经病变在I型和2型两种类型的糖尿病患者中都有发生，且在2型糖尿病患者中的发病率(32.1%)高于在 I 型糖尿病患者中(22.7%) (Primary Care Diabetes Volumel,Issue3，September2007，Pagesl29_134，Diagnosis of diabetic peripheral neuropathyamong patients with typeland type2diabetes in France, Italy, Spain, and the UnitedKingdom)。
[0007]约10%的糖尿病患者自诉持续的疼痛，疼痛可能是自发的，或者可能是刺激引起的。疼痛可能加剧或者变得不可治愈。糖尿病周围神经病变疼痛在夜间尤其严重，且主要被描述为灼烧不适、刺痛、酸痛、拉紧的感觉等。此外，在腿部比在手部更加经常感觉到糖尿病周围神经病变疼痛。通常，严重疼痛可导致体重减轻或抑郁(PainMedicine, Volume8Number S22007, Diabetic Peripheral Neuropathic Pain: Recognitionand Management)。
[0008]由肌肉力量测试，通过测定触觉、温度感觉、振动感觉、外周皮肤的血液流速和神经传导来诊断糖尿病周围神经病变。当前，通过控制血糖水平、病因治疗和对症治疗来治疗糖尿病周围神经病变。由于高血糖与神经病变发展之间的关系已得到良好的确认，并且已由许多研究显示，详述了没有保持其血糖控制的糖尿病患者中糖尿病周围神经病变的高发病率，所以，控制血糖被认为是预防/治疗糖尿病周围神经病变的主要方法(N EnglJ Medl993;329:977-86，The effect of intensive treatment of diabetes on thedevelopment and progression of long-term complications in insulin-dependentdiabetes mellitus)。[0009]糖尿病神经病变的病因学疗法中有代表性的是α类脂酸、醛糖还原酶抑制剂和Y亚油酸。α类脂酸(硫辛酸)，是抗氧化剂，降低导致神经细胞死亡的高血糖引起的氧化应激，从而阻止糖尿病神经病变的病因。通过发挥防止葡萄糖进入神经细胞中的多元醇通路的作用，醛糖还原酶抑制剂能够抑制导致神经细胞损伤的山梨醇聚集，以阻断糖尿病神经病变的发展。然而，这些中的大多数的研发由于副作用和功效不足而中途停止。当前，仅依帕司他在日本使用。Y亚油酸是神经膜磷脂的成分和前列腺素E的成分，其在神经细胞的血流平衡中起到重要作用，发现Y亚油酸改善糖尿病神经病变的某些症状(BMJ.2007Jul14;335(7610):87.Epub2007Junll, Review.Effects of treatments forsymptoms of painful diabetic neuropathy:systematic review)。
[0010]用于缓解糖尿病神经病变疼痛的对症疗法包括三环类抗抑郁药、抗痉挛药、选择性5-羟色胺再摄取抑制剂和局部辣椒素。三环类抗抑郁药(TCA)作用于抑制5-羟色胺和去甲肾上腺素在中枢神经系统的再摄取，以阻断疼痛传播，并且提高内源内啡肽的水平以缓解疼痛。抗痉挛药和选择性5-羟色胺再摄取抑制剂用作对与TCA不相容的患者的替代选择。局部辣椒素已知对于疼痛的感觉障碍有用，其触发神经肽，P物质从C型痛觉纤维的释放，并抑制P物质的供给，以干扰周围疼痛信号的传导和传播，这使得疼痛减轻。
[0011]然而，难以找到适合治疗患糖尿病周围神经病变患者的疗法，因为在病因和症状上具有高度多变性。实践中，相对于病因治疗，优先提供用于缓解疼痛和抑制糖尿病周围神经病变发展的对症治疗。因此，对于能通过再生糖尿病破坏的神经而治愈糖尿病周围神经病变的疗法的需求不断增加。发挥有利于神经元再生的功能的神经生长因子正成为用于糖尿病周围神经病变疗法的强效候选物。
[0012]许多先前研究表明在患糖尿病的对象中，神经生长因子的生物合成和在神经元上的逆运输都降低了，因此，这被认为是糖尿病神经病变的一个病因。在健康人中，NGF在真皮角质细胞中产生，与trkA受体相互作用。另一方面，在糖尿病患者的真皮角质细胞中观察到低水平的NGF，这已知与感觉神经纤维的代偿失调相关(Diabetes ObesMetab.2008Feb;10 (2):99-108.Epub2007Jun26, Review.Diabetic neuropathy: newstrategies for treatment)。
[0013]先前研究表明施用NGF降低了糖尿病周围神经病变诱导动物的疼痛以及症状。基于这个结果，也在糖尿病神经病变患者中进行了临床试验。在随机化安慰剂对照的2期临床试验中，在6个月内每周三次施用重组人NGF后，糖尿病周围神经病变患者的症状和疼痛减轻了。然而，在48周内进行的随机化安慰剂对照的3期临床试验，由于注射部位的疼痛以及不显著的药物效果而不是显著有效。因此，后续研究已转向促进内源NGF的生物合成，而不是外源NGF 的供给(Am J Med.1999Aug30; 107 (2B): 34S-42S, Review.Neurotrophicfactors in the therapy of diabetic neuropathy)。
[0014]山药(Dioscorea Rhizoma),是属于薯菌科的植物，在草药中是用于脚板薯(Dioscorea batatas Decaisne)或日本薯菌(Dioscorea japonica Thunberg)的无周皮的新鲜根茎的术语，或是用于将所述新鲜根茎蒸熟并干燥之后的所获得物的术语。
[0015]穿龙薯菌(Dioscorea nipponica),是多年生攀爬植物穿龙薯菌(Dioscoreanipponica Makino)的根莖,含有多种甾醇型阜苷,包括薯菌阜苷、原阜苷元(prosapogen)A和原皂苷元C。[0016]在草药中，这些草药已单独使用或与其他草药结合使用。在先前文献中，在任何地方都还没有报道过来自这两种草药组合的提取物对于糖尿病周围神经病变的药用功效。
[0017]韩国专利N0.854621提供了用于预防和治疗周围神经病变的组合物，其包含来自选自穿龙薯菌、五裂叶薯菌(Dioscorea quinqueoloba)、脚板薯、日本薯菌和山萆蘚(Dioscorea tokora)的植物的提取物,公开了所述组合物诱导轴突的生长,并提高内源神经生长因子的分泌，由此有效用于预防和治疗周围神经病变。
[0018]本发明人证实了来自选自穿龙薯蓣、五裂叶薯蓣、脚板薯、日本薯蓣和山萆蘚的植物的提取物的作用是如韩国专利N0.854621所公开的，诱导轴突的显著生长并提高内源NGF的分泌。出人意料地，本发明人通过动物模型试验发现来自特定比例的山药和穿龙薯蓣的混合物的提取物，通过提高体内(例如血浆和唾液腺中)的NGF至高度显著的水平，并通过缓解糖尿病神经病变引起的对热和机械刺激高度敏感的疼痛，保证了对于糖尿病周围神经病变的治疗协同效果，而来自这些草药每一种或组合的提取物在轴突生长和内源神经生长因子分泌方面具有几乎相同的效果，这在本发明中达到顶峰。
【发明内容】
[0019]技术问题
[0020]本发明目的是提供一种草药组合物，其源于在韩国专利N0.854621中公开的草药，其展现出显著提高体内神经生长因子(NGF)水平的活性，对于糖尿病周围神经病变是治疗有效的。
[0021]本发明另一目的是提供用于预防和治疗糖尿病周围神经病变的包含所述草药组合物的药物组合物和健康功能食品。
[0022]技术方案
[0023]本发明目的可通过提供药物组合物和健康功能食品实现，所述药物组合物和健康功能食品包含由3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物制备的草药提取物，所述提取物可用于预防和治疗糖尿病周围神经病变。
[0024]根据其一个方面，本发明提供了来自山药和穿龙薯蓣的混合物的草药提取物。更具体地，由本发明提供的草药提取物是从含有重量比为3.5:1 (w/w)的山药和穿龙薯蓣的混合物获得的。
[0025]根据本发明的草药提取物可从干燥的山药和穿龙薯蓣的混合物制备，其中，通过在室温下在50%乙醇中冷沉淀48小时，之后真空浓缩。具体地，将山药和穿龙薯蓣洗净、干燥、切断并以3.5:1山药:穿龙薯蓣的重量比混合，将草药混合物在5倍重量的50%乙醇中在室温一次冷沉淀48小时，然后在减压下浓缩提取物。
[0026]根据其另一个方面，本发明提供用于预防和治疗糖尿病周围神经病变的组合物，其包含作为活性成分的来自3.5:l(w/w)山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物，与药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂组合。
[0027]根据本发明的组合物含有基于组合物的总重量，以重量计从0.01重量％到80重量％的量，优选从I重量％到50重量％的量的，来自3.5:1山药:穿龙薯蓣(w/w)的混合物的草药提取物。
[0028]对于本领域技术人员应该明显的是，糖尿病神经病变的症状包括丧失感觉，例如触觉、振动感觉、温度感觉等，以及疼痛,例如灼烧不适、刺痛、酸痛、拉紧的感觉等。
[0029] 根据本发明的基于来自3.5:1 (w/w)山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物的组合物可进一步包含合适的载体、赋形剂或稀释剂。
[0030]可用于本发明组合物的载体、赋形剂或稀释剂的实例包括乳糖、右旋葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟苯甲酸甲酯、羟苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。
[0031]本发明组合物可配制成口服剂型例如散剂、丸剂、片剂、胶囊、悬浮液、乳液、糖浆、气雾剂等，局部剂、栓剂或无菌注射溶液。本发明药物组合物可与稀释剂或赋形剂例如填充剂、增稠剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等联合配制。预期用于口服的固体制品可采取片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊等形式。关于这些固体剂，本发明的组合草药提取物与至少一种赋形剂联合配制，例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖或明胶。除了所述简单的赋形剂，可使用润滑剂，例如硬脂酸镁和滑石。预期用于口服的液体制品包括悬浮液、内服溶液、乳液、糖浆等。除了简单的稀释剂例如水或液体石蜡之外，各种赋形剂，例如润湿剂、增甜剂、芳香剂、防腐剂等可包含在液体制品中。此外，本发明药物组合物可通过非口途径服用。为此，可使用无菌水性溶液、非水性溶剂、悬浮液、乳液、冻干产物、栓剂等。可注射丙二醇、聚乙二醇、植物油例如橄榄油、和酯例如油酸乙酯可适用于非水性溶剂和悬浮液。栓剂的基本材料包括硬脂酸甘油三酯(Witepsol)、聚乙二醇(macrogol)、吐温61、可可脂、甘油三月桂酸酯(laurin butter)和甘油明胶。
[0032]根据其另一方面，本发明提供来自3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物在制备用于糖尿病周围神经病变的治疗剂中的用途。
[0033]根据其另一方面，本发明提供用于治疗糖尿病神经病变的方法，包括以治疗有效量向需要其的哺乳动物施用药物组合物，所述药物组合物包含来自3.5:l(w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物。
[0034]包含3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物的药物组合物的剂量可依赖于多种因素变化，所述多种因素包括患者的年龄、性别、体重和健康状况、饮食、服用时间、服用途径、排泄率等。典型地，本发明药物组合物可以每天单剂量或多剂量施用，以
0.01到10g/kg，优选I到5g/kg的日剂量。然而，本领域技术人员应该明白剂量决不限制本发明。
[0035]根据本发明的包含来自3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物的药物组合物可通过多种途径施用至哺乳动物，例如大鼠、小鼠、牲畜、人等。可预期所有的施用途径，例如，药物组合物可口服、直肠内、静脉内、肌内、皮下、子宫内、硬膜内或脑血管内(intracerebrovascularIy)施用。
[0036]由于几乎无毒性和副作用，来自3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物可在长时期内安全摄入，用于预防糖尿病神经病变的目的。
[0037]在本发明中，进行体内测试以检测来自3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物提高体内神经生长因子水平和减轻糖尿病周围神经病变症状的能力。来自分别为健康和患有糖尿病神经病变的动物模型的数据显示，与来自单独草药或来自其他重量比的草药混合物的提取物相比，根据本发明的来自特定比例草药混合物的提取物具有治疗协同效果。
[0038]根据其另一方面预期，本发明是用于预防和改善糖尿病神经病变的健康功能食品，其包含来自3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物和营养学(sitologically)可接受的食品添加剂。
[0039]如本文所使用，术语“健康功能食品”是指包括在“针对健康功能食品的2002法律(2002Law for health functional foods) ”中定义的那些,例如根据韩国食品和药品管理局的KFDA通知号2004-12，见于规定了针对人类功能性和安全性核实的健康功能食品材料或成分的列表中的健康食品。[0040]更特别地，本发明提供用于预防或改善糖尿病神经病变的健康功能食品，其包含来自3.5:1的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物和营养学可接受的食品添加剂。
[0041]根据本发明的包含来自3.5:1的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物的组合物可应用至用于减轻糖尿病神经病变症状的药品、食品和饮品。例如，可加入本发明草药提取物的食品包括饮料、口香糖、茶、复合维生素和食品辅料(food aid)。对于在药品中的应用，草药提取物可以是丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、胶囊或液体的形式。
[0042]当应用至固体食品时，本发明草药提取物可基于食品的总重量，以重量计0.1到15%的量、优选以重量计0.2到10%的量使用。在液体形式的健康品中，本发明草药提取物可以在每IOOmL液体0.1到30g的量的范围，优选0.2到5g。
[0043]除了对于不可缺少的草药成分的特定比率，对于液体健康组合物没有给予任何特定的限制。如一般饮料，液体健康组合物可进一步包含各种调味剂、天然碳水化合物和其他添加剂。
[0044]天然碳水化合物的优选实例包括单糖，例如葡萄糖、果糖等；二糖，例如麦芽糖、蔗糖等；多糖，例如糊精、环糊精等；以及糖醇，例如木糖醇、山梨醇、赤藓糖醇等。可用于本发明的调味剂可以是天然的(索马甜、甜叶菊提取物(例如莱苞迪苷A、甘草甜索))或合成的(糖精、阿巴斯甜)。天然碳水化合物可以每IOOmL液体健康组合物约I到20g的量、优选约5到12g的量使用。
[0045]此外，本发明组合物可含有各种营养物、维生素、矿物质(电解质)、合成调味剂和/或天然调味剂、着色剂、填充剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、PH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇和用于碳酸饮料的碳酸化剂。对于在天然果汁、果汁饮料或蔬菜饮料中的使用，本发明组合物可进一步含有果肉。这些添加剂可单独或组合使用。一般地，但不重要地，添加剂的量为每100重量份组合物，从约O到20重量份的级别。
[0046]有益效果
[0047]如迄今所描述，根据本发明来自3.5:l(w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的草药提取物，在提高神经生长因子(NGF)体内水平、轴突的生长和认知能力方面，显示出比来自单独山药或穿龙薯蓣、或其他重量比的山药和穿龙薯蓣混合物的提取物显著更高的协同效果，因此能用在用于预防和治疗糖尿病周围神经病变的药物组合物和健康功能食品中。
【专利附图】
【附图说明】
[0048]图1是显示实施例1的提取物对I型糖尿病小鼠坐骨神经作用的电子照片。[0049]图2是显示实施例1的提取物对1型糖尿病大鼠坐骨神经作用的电子照片。【具体实施方式】
[0050]通过以下实施例，可获得对于本发明更好的理解，所述实施例用于解释说明，不诠释为限制本发明。
[0051]实施例1:从山药和穿龙薯蓣的混合物制备提取物
[0052]从韩国Kyoungdong市场的中药店购买都处于干燥条件下的山药和穿龙薯菌。从中移除杂质后，用切刀将草药剁碎，以山药:穿龙薯蓣为3.5:1的重量比混合。在2kg的混合物中加入1OL的50%乙醇溶液，之后在室温搅拌孵育48小时。通过过滤移除草药混合物，在真空下浓缩滤液，并冷冻干燥以提供混合的草药提取物(粗提物)(见表1)。
[0053]表1:创造性的组合草药提取物产率
[0054]
【权利要求】
1.用于预防或治疗糖尿病周围神经病变的药物组合物，所述药物组合物包含作为活性成分的 3.5:1 (w/w)的山药(Dioscorea Rhizoma):穿龙薯菌(Dioscorea nipponica)的混合物的提取物以及药学可接受的载体。
2.根据权利要求1的药物组合物，其中所述糖尿病周围神经病变是由选自由神经细胞的营养不良、退化和凋亡组成的组的至少一种原因形成的疾病。
3.根据权利要求1的药物组合物，其中所述糖尿病周围神经病变表现出选自以下的症状:灼烧不适、刺痛、酸痛、拉紧的感觉、丧失触觉、振动感觉或温度感觉和它们的组合。
4.用于预防或改善糖尿病周围神经病变的健康功能食品，所述健康功能食品包含3.5:1 (w/w)的山药:穿龙薯蓣的混合物的提取物。
5.根据权利要求4的健康功能食品，其中所述提取物制备为以下形式:散剂、丸剂、片剂、胶囊、糖衆 和饮料。
【文档编号】A61K36/8945GK103619346SQ201180070202
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2011年12月29日 优先权日:2011年3月16日
【发明者】金舜会, 孙美苑, 崔祥珍, 金慧珠, 刘子荣, 金善砺 申请人:东亚St株式会社