专利名称：从草果中提取的活性成分及其在制备降糖药品与食品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从草果中提取的活性成分及其在制备降糖药品与食品中的应用。
背景技术：
我国糖尿病患者增长速度迅速，尤其中老年人群高血糖比例逐年増加。但我国降糖保健食品的开发却相当滞后。西方国家的降糖保健食品已发展成为重要新兴产业。美国毎年降糖保健食品市场销售额高达25亿 30亿美元，品种达上百种之多。日本糖尿病发病率已接近4%，其相应的降糖保健食品产业也发展较迅速，2002年总销售额就已突破1万亿日元，其中降血糖/减肥保健食品约占1/2份额。而在我国，1978年以前糖尿病的平均发病率低于1%，到2000年底已上升至3. 4%，短短20年间糖尿病发病率已翻了一番。现在，京沪地区糖尿病发病率甚至分别达到了 8%和11%。因此，降糖保健食品市场巨大，且具有庞大市场操作空间和消费需求，行业效益十分可观。国际医学界普遍认为，糖尿病人不仅应服降糖药物控制过高的血糖，而且摄食某些特殊食品(保健食品)同样能起到控制高血糖的效果。这类食物就是降糖功能性食品。目前国际市场上销售中的降糖食品至少有上百种之多，其中在美国等西方国家销售情况最好的4种降糖保健食品依次为苦瓜(主要活性成分为“苦瓜多肽”)；印度匙羹藤(主要成分为“匙羹藤酸”)；葫芦巴豆(主要成分为葫芦巴胶)；肉桂粉(主要成分为“桂皮酸”)。我国虽然已是糖尿病高发国，但国内尚未形成降糖保健品大市场。故开发新资源降糖保健食品在我国将有广阔的市场前景。草果(Amomum tsao-ko Crevostet Lemarie)在我国云南、广西、贵州等广大地区都有种植，来源广泛，作为食品香辛料和中草药应用已有千年历史。人们从草果精油中鉴定了近8 Q种化学成分，主要是1，8-桉油素、柠檬醛、香叶醇、反-2-十一烯醛、2-癸烯醛、β —菔烯等。目前未见有有关草果降糖作用的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种降糖效果好的从草果中提取的活性成分。本发明的另ー个目的是提供上述活性成分在制备降糖药品与食品中的应用。本发明采取的技术方案
一种从草果中提取的活性成分，由如下方法得到经干燥的草果去皮后粉碎，用氯仿-甲醇-水体系萃取，萃取后经过滤除去残渣，滤液经分液漏斗静置分层，取下层滤液，滤液在30-40°C经真空浓缩得饱和浓缩液，将所述饱和浓缩液通过ニ氧化硅凝胶柱，并分别依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脱，取甲醇洗脱液经真空浓缩成饱和溶液后过ニ氧化硅凝胶柱，用氯仿-甲醇-水体系作洗脱剂进行洗脱，收集前60%洗脱液经真空浓缩至饱和，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋，得活性成分固体物。所述氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇和水的体积比为5 10 :1。
所述的从草果中提取的活性成分在制备降糖保健药品及食品添加中的应用。所述的应用中所述活性成分的添加量不低于0.001 Wt %。本发明采用上述技术方案取得的有益效果本发明利用我国特产资源草果为原料，所提取的活性成分具有显著的降血糖功效，其降糖效果优于肉桂粉(见图1)，针对中老年血糖增高的人群，为市场提供有效的预防血糖增高的生物制剂，该活性成分可以与无机成型剂或有机成型剂配合，调配成各种常规的ロ服应用剂型，如胶囊、片剂、ロ服液等，也可以添加于各种食品当中制成各种功能性降糖食品。
图1为草果粉与肉桂粉的降糖效果对比图2为标准饲料和添加草果活性成分的实验饲料抑制体重増加效果对比图； 图3为标准饲料和添加草果活性成分的实验饲料降低血糖浓度效果对比图。
具体实施例方式实施例1 草果活性成分的制备
(1)干燥的草果经去皮后，粉碎成100目以上粉末，取50g草果粉末，加入150ml氯仿、 300ml甲醇和30ml去离子水，在室温下浸泡12小时后用均质机高速搅拌(转数1600-20000 转/分)5-10分钟，然后用超声波均质机均质10分钟(功率为500-1000W)，静置4小时以上，抽滤得滤液，滤液移至IL分液漏斗，振荡1分钟后静置12小吋，使氯仿层(下层夜)与甲醇层(上层液)分开，上层液用IOOml氯仿分3次洗涤后与下层液合井，合并后的混合液加入 2g无水硫酸钠干燥，过滤得滤液。滤渣重复上述步骤3-6次，合并每次萃取的氯仿层滤液。(2)将上述氯仿层滤液，经旋转蒸发仪在30-40度浓缩后，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋。上述干燥后的固体再加入氯仿/甲醇混合溶液(氯仿甲醇=l:2》00ml 溶解，用均质机均质1分钟后过滤，滤液移至分液漏斗，分液后取下层氯仿层液体经旋转蒸发仪在40度以下浓缩后，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋。上述操作重复3次，制得提取物I。(3)将干燥的200-300目硅胶H500g，干硅胶的视密度在0. 4左右，加入干硅胶体积一倍的氯仿(氯仿用无水氯化钙干燥，以除去醇和水，用玻璃棒充分搅拌，抽真空脱气20分钟，采用湿法灌柱(层析柱是直径55mm长600ml的玻璃柱)。沉降完成后，最上层加入l-2cm 的石英砂，加入更多的氯仿，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积，最后用IOOOml正己烷置換柱中氯仿制成填充量为55mmX500mm的层析柱。(4)称取步骤(2)中得到的提取物A 6g，加入适量无水甲醇溶解成饱和溶液缓慢从层析柱上端加入，待溶剂层下降至石英砂底面后，分別用1200ml氯仿、1000ml丙酮、 1200ml甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，经旋转蒸发仪在30-40度下浓缩后，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋，得甲醇溶出物II。(5)将氯仿100ml、甲醇100ml、去离子水30ml混合，配成混合液，再将该混合液用氯仿稀释10倍作为洗脱液。将上述甲醇溶出物B加入适量甲醇制成饱和溶液，缓慢从层析柱上端加入，待溶剂层下降至石英砂底面后，用上述配制的洗脱液进行淋洗，收集开始从层折柱流出的1500ml洗脱液，经旋转蒸发仪在30-40度下浓缩后，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋，得具有紫外吸收特性的草果降糖活性成分，剰余的洗脱液中洗脱下来的主要为多糖组分。实施例2 含有草果活性成分的实验饲料的制备
称取如下质量百分比的组分淀粉47. 8%、干酪素20%、蔗糖15%、猪油6%、纤维素5%、混合矿物盐4%、混合维生素2%、L-甲硫氨酸0. 2% ；以上原料经充分混合后，调制成标准饲料。 向每公斤标准饲料中加入50-500mg的实施例1中制得的草果降糖活性成分，配制成实验饲料。将40只12周龄的ICR雄性小鼠随机分配成A、B、C、D四组，每组10只，A组为对照組，供给标准饲料，B组供给添加甲醇溶出物II的实验饲料，C组供给添加前60%洗脱液中得到的有紫外吸收特性的组分即草果活性成分，D组供给添加后40%洗脱液中得到的多糖组份。毎日平均每只小鼠供给4. 5g饲料，喂养90天，并每天观察小鼠状況，每周测一次体重，结果见图2 (四组实验数据的Spjotvoll/Moline test统计学分析得出的数据差异见表1，此试验是在P<0. 05的情况下得出的。)喂养结束后，A组和C组小鼠经ニ氧化碳麻醉后采血，血液经冷冻离心分离，測量血液过氧化脂质(TBARS)和血糖浓度，实验结果见图3。表1图2的Spjotvoll/^toline test统计学分析结果
权利要求
1.一种从草果中提取的活性成分，其特征在于其由如下方法得到经干燥的草果去皮后粉碎，用氯仿-甲醇-水体系萃取，萃取后经过滤除去残渣，滤液经分液漏斗静置分层，取下层滤液，滤液在30-40°C经真空浓缩得饱和浓缩液，将所述饱和浓缩液通过ニ氧化硅凝胶柱，并分别依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脱，取甲醇洗脱液经真空浓缩成饱和溶液后过ニ氧化硅凝胶柱，用氯仿-甲醇-水体系作洗脱剂进行洗脱，收集前60%洗脱液经真空浓缩至饱和，放入冷冻干燥机中冷冻干燥48-72小吋，得活性成分固体物。
2.根据权利要求1所述的从草果中提取的活性成分，其特征在于所述氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇和水的体积比为5 10 :1。
3.权利要求1所述的从草果中提取的活性成分在制备降糖保健药品及食品添加中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述活性成分的添加量不低于0.001wt
全文摘要
本发明公开了一种从草果中提取的活性成分及其在制备降糖药品与食品中的应用，所述活性成分是草果粉经氯仿-甲醇-水体系萃取后过二氧化硅凝胶柱，并分别依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脱，取甲醇洗脱液过二氧化硅凝胶柱，用氯仿-甲醇-水体系进行洗脱得到的。该活性成分具有降糖作用，能制成降糖药品和降糖保健食品。
文档编号A61K36/9064GK102552791SQ20121001057
公开日2012年7月11日 申请日期2012年1月14日 优先权日2012年1月14日
发明者俞龙泉, 张文娜, 时伟, 段书德, 谷维娜, 韩爱云 申请人:石家庄学院