专利名称：褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种褐藻多糖硫酸酯新用途，即褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途。
背景技术：
在现有技术中，慢性阻塞性肺病简称慢阻肺(COPD)，它包括慢性支气管炎(老慢支)、和肺气肿等疾病。其病理特征为肺部气流的慢性阻塞，影响正常呼吸，最后导致呼吸衰竭。常见症状为反复的咳嗽；喘息，不能正常吸气和喘气。目前中国约有4000万慢阻肺患 者，每分钟就有5个人死于慢阻肺，所以称之为不动声色的“杀手”。COPD主要是由有害颗粒或气体(最常见的是来自吸烟)引起的，其引发肺中的异常炎性应答。COPD的天然进程表征为被称作急性加重的症状的偶然性突然恶化，多数是由于感染或空气污染引起的。目前COPD无治愈性疗法，被证明减少死亡率的唯一措施是停止吸烟和补充氧。可以通过使用支气管扩张剂、例如β 2激动剂和/或抗胆碱能剂控制C0PD。β 2激动剂刺激β2受体，抗胆碱能剂则阻遏来自胆碱能神经的刺激，二者都是松驰气道附近的平滑肌、增大气流的药物。有数种β2激动剂可用舒喘宁或舒喘灵和特布他林是广泛使用的短效β2激动剂，其迅速提供COPD症状的缓解。长效β2激动剂(LABA)例如沙美特罗和福莫特罗用作维持治疗。异丙托品(IpratiOpium)是最广泛使用的短效抗胆碱能处方药。在COPD中，抗胆碱能剂似乎优于β 2激动剂，然而β 2激动剂和抗胆碱能剂二者都不具有抗炎作用，并且它们不阻断COPD的进展。褐藻多糖硫酸酯又名岩藻多糖(英文名称fucoidan)，是存在于海洋褐藻或海洋无脊椎动物中的一大类由岩藻糖组成的硫酸化多糖，具有抗凝血、抗肿瘤、抗血栓等多种生物活性。现在人们对褐藻多糖硫酸酯的组成有较为清晰的了解，它是一类化学组成和结构非常复杂的多糖。褐藻多糖硫酸酯化学结构非常复杂，不同褐藻中分离到的多糖组分及结构有很大差异。到目前为止，对来源于墨角藻iFucus vesi culosus )和泡叶藻(Ascophyllumflot/ios )的褐藻多糖硫酸酯的结构研究最多，墨角藻褐藻多糖硫酸酯主要以α (I —3)糖苷键连接，硫酸化主要发生在C4位。对泡叶藻褐藻多糖硫酸酯的多项研究都表明其中存在大量的α (I —3)和α (I —4)糖苷键。此外还有几种褐藻岩藻多糖的结构被报道。昆布(Mcklonia褐藻多糖硫酸酯主要为α (I — 3)连接,硫酸化在C4位。来源于板管嚴iCladosiphon okamuranusimHGhorda的褐藻多糖硫酸酯主链均为α(1 — 3)的岩藻糖，硫酸化在C4位，而且，二者均有少量的2-0-乙酰化。已有多篇文献公开了褐藻多糖硫酸酯的制备方法及其制药用途。日本专利昭46-2248采用十六烷氯化吡啶或十六烷三甲基溴化铵与褐藻多糖硫酸酯反应成季胺盐复合物，再利用该复合物对盐的溶解度差异，用乙醇、甲醇和离子交换树脂处理，纯化除去褐藻胶、中性多糖和其它杂质，而得到比较纯化的褐藻多糖硫酸酸酯。CN1129109A则公开了由干海带浸泡、数次过滤、二次乙醇提取、一次乙醇洗涤、配合调节PH范围等的碱凝析法。CN1344565A则公开了另一种制备方法，包括原料预处理、控温搅拌浸提、离心、浓缩、乙醇沉淀、无水乙醇脱水等步骤。CN1517356A则将岩藻聚糖硫酸酯配制成水溶液，加入过氧化氢、次氯酸或亚硝酸及其盐，将所得混合溶液加热，用截留分子量3000-5000的膜超滤，得到岩藻聚糖硫酸酯低聚糖。CN1560086A则公开了一种高硫酸根含量岩藻聚糖硫酸酯的制备方法，用热水或酸水浸提褐藻，制得含褐藻聚糖硫酸酯的提取液，将该提取液浓缩至多糖的重量百分数为2-10%，调PH5-8，加入壳聚糖溶液搅拌，离心或过滤收集沉淀，将沉淀用于5-10倍盐溶液提取2-4次，离心或过滤收集清液，将该清液透析或超滤脱盐。CN1616494A以天然海藻硫酸多糖为原料，将海藻硫酸糖溶液中加入抗坏血酸和过氧化氢，控制反应温度，恒温降解时间为O. 5-3hr，再透析或超滤，减压浓缩，制得4-100KDa的低分子量海藻硫酸多糖产物。另外，CN1670028A、CN1392160A、CN1197674A也分别公开了采用絮凝等方法制备海藻多糖。在本发明中，以上发明公开的内容均被全文引入本文作为参考。 褐藻多糖硫酸酯最早被发现具有抗凝血活性，近二十年来陆续公开了褐藻多糖硫酸酯具有抗病毒、提高免疫力、抗肿瘤、降血糖、抗辐射等活性，在治疗肝病、胃病有应用。大量的公开资料表明褐藻多糖硫酸酯的生物活性与其结构特征密切相关。由于不同来源的褐藻多糖硫酸酯其化学组成和结构特征差异非常大，其生物活性有很大的差异。例如与墨角藻褐藻多糖硫酸酯相比，海带褐藻多糖硫酸酯具有更高的抗血小板聚集作用，而抗凝血性很弱(Zhu et al, Thrombosis Research, 2010, 125: 419 - 426),褐藻多糖硫酸酯的抗凝血和抗补体活性与其单糖组成、硫酸基含量、分子量大学、主链连接方式、支链、取代基团等因素密切相关。但尚未有文献表明褐藻多糖硫酸酯在预防和治疗慢性阻塞性肺病方面的用途。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种褐藻多糖硫酸酯的又一新用途，对慢性阻塞性肺病有疗效的褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途。本发明的技术解决方案是褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途。所述的慢性阻塞性肺病为慢性支气管炎或肺气肿，包括但不限于。褐藻多糖硫酸酯分子量范围为1000 2000000，优选为优选是5000 200000。褐藻多糖硫酸酯的岩藻糖含量为25-45%，硫酸基含量为25-50%。褐藻多糖硫酸酯来源于海带、马尾藻、裙带菜、羊栖菜、鼠尾藻、海黍子、昆布、泡叶藻或墨角藻中的一种或多种。优选来源于海带。褐藻多糖硫酸酯为注射剂、口服制剂、鼻腔给药制剂或局部给药制剂。所述药物含有褐藻多糖硫酸酯和药学可接受的辅料。我们通过对不同褐藻多糖硫酸酯在治疗慢阻肺的比较研究，发现一种高硫酸化褐藻多糖硫酸酯，即岩藻半乳聚糖硫酸酯，具有意想不到的良好治疗效果，是本发明优选药物。该岩藻半乳聚糖硫酸酯的结构特征为以-4- a -L-Fuc-C I — 3)- a -L-Fuc-( I-3)-a-L-Fuc-C I — 3)- α -L-Fuc-C I-残基形成主链，平均每4个糖残基含有一个支链，支链由a -L-Fuc(I-或者β -D-Gla- (I — 6) - β -D-Gla- (I-组成；硫酸基连接在岩藻糖的2或/和4位以及半乳糖的3或/和4位上。药物剂型不限于此，按上述药用原料与制药上常用的药用载体，如赋形剂或辅料可以混合制成注射液、冻干粉针剂、喷鼻剂、注射微球、脂质体、片剂、胶囊剂、水剂、散剂、糊齐U、喷雾剂、颗粒剂、软胶囊、滴丸剂、凝胶剂、贴片、膏剂等，其中优选注射液、冻干粉针剂、胶囊剂和喷鼻剂或其它制药行业上常规制剂。本发明的优点是1、首次发现褐藻多糖硫酸酯对慢性阻塞性肺病具有良好的治疗作用，褐藻多糖硫酸酯属于多糖类物质，来源于海洋褐藻，其中很多褐藻如海带、裙带菜、羊栖菜等都是食用海藻，本身具有增强免疫功能等活性，毒副作用小，安全性好。可以用于制备预防和治疗慢性阻塞性肺病的药物和保健品。2、通过对不同褐藻多糖硫酸酯治疗慢性阻塞性肺病活性的比较研究，首次发现高硫酸化的褐藻多糖硫酸酯组分(岩藻半乳聚糖硫酸酯)对慢性阻塞性肺病具有意想不到的良好治疗作用，是本发明优选药物。经动物实验表 明，褐藻多糖硫酸酯对慢性阻塞性肺病具有良好的预防和治疗作用，能够缓解慢性阻塞性肺病病程的发展，具有显著的疗效。下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
图I是海带褐藻多糖硫酸酯分级组分Fl (从上到下)的IR图。图2是海带褐藻多糖硫酸酯分级组分F2 (从上到下)的IR图。图3是海带褐藻多糖硫酸酯分级组分F3 (从上到下)的IR图。
具体实施例方式实施例I :海带(Zaffiiaaria)褐藻多糖硫酸酯及分级组分的制备
(I)将5kg海带除去泥沙，加入100L O. IM的盐酸室温搅拌提取3小时，提取液过滤后，藻渣用100L O. IM盐酸重复提取I次，过滤，合并两次提取的滤液，用碱调滤液pH至5-7，用硅藻土过滤，滤液超滤，浓缩，加入浓缩液4倍体积量的无水乙醇沉淀，沉淀用无水乙醇洗涤，真空干燥，得到褐藻多糖硫酸酯FPS 602 g。(2)取上述得到的海带褐藻多糖硫酸酯溶于水，配成浓度为2. 5%的水溶液，上样到以 DEAE-Sepharose-CL_6B 为载体柱层析,依次用 O. 5 mol/L NaCl> I. O mol/L NaCl 和2. Omol/L NaCl溶液线性梯度洗脱，收集各洗脱液，分别透析、冻干。其中由O. 5 mol/L NaCl洗脱得到褐藻多糖硫酸酯分级组分F1，I. O mol/L NaCl洗脱得到褐藻多糖硫酸酯分级组分F2；2. 0mol/L NaCl洗脱得到褐藻多糖硫酸酯分级组分F3。分别对三个分级组分进行化学组分分析，单糖比例分析，硫酸根含量，分子量和红外分析，结果见表I和表2以及参见图I、图2、图3。表I海带褐藻多糖硫酸酯FPS及分级组分FI、F2、F3的化学组分
权利要求
1.褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途。
2.根据权利要求I所述的用途，其特征在于所述的慢性阻塞性肺病为慢性支气管炎或肺气肿。
3.根据权利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酷分子量范围为1000 2000000。
4.根据权利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯的岩藻糖含量为25-45%，硫酸基含量为25-50%。
5.根据权利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯来源于海带、马尾藻、裙带菜、羊栖菜、鼠尾藻、海黍子、昆布、泡叶藻或墨角藻中的ー种或多种。
6.根据权利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯为注射剂、ロ服制剂、鼻腔给药制剂或局部给药制剂。
7.根据权利要求I所述的用途，其特征在于所述药物含有褐藻多糖硫酸酯和药学可接受的辅料。
8.根据权利要求3所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酷分子量范围为5000 200000。
全文摘要
本发明涉及一种褐藻多糖硫酸酯新用途，即褐藻多糖硫酸酯在制备预防和治疗慢性阻塞性肺病药物中的用途。褐藻多糖硫酸酯的岩藻糖含量大于29%，硫酸基含量大于30%。褐藻多糖硫酸酯系从海洋褐藻包括海带、裙带菜、马尾藻、鼠尾藻、全缘马尾藻、羊栖菜、硇洲马尾藻、海黍子、海蒿子等褐藻中提取得到的硫酸多糖，经动物实验表明，对慢性阻塞性肺病具有良好的预防和治疗作用，能够缓解慢性阻塞性肺病病程的发展，具有显著的疗效。
文档编号A61P11/00GK102764266SQ20121026662
公开日2012年11月7日 申请日期2012年7月30日 优先权日2012年7月30日
发明者张全斌, 张弘 申请人:吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司