专利名称：连接有聚乙二醇的氨基酸及其制法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及连接了聚乙二醇长链的氨基酸、其制备方法及其用于多肽的合成，用于制备带有聚乙二醇长链的多肽。
背景技术：
随着生物技术的发展，越来越多的具有生物活性的小肽被研究者发现具有治疗作用，如胸腺肽、生长抑素、血管紧张素、阿基瑞林等等。但小肽应用于临床也有许多不利之处，例如易产生免疫排斥反应、稳定性较差、在体内被清除速率较快等。因此，人们采用了各种方法消除上述不利因素，其中手段之一是采用聚乙二醇化技术。聚乙二醇化技术(PEGylation PEG化)又称为化学修饰，是目前分子变构化学(molecule altering structure chemistry,MASC)中最重要的技术之一。PEG化技术的研 究始于20世纪80年代，Abuchowski等第一次将聚乙二醇共价结合到蛋白质上，以保护蛋白质免遭破坏，结果发现聚乙二醇修饰不仅可以增加蛋白质的水溶性，还能减缓肾脏的清除，改变了蛋白质的药代动力学和药效学性质。经过近几十年的发展，PEG化技术不仅在蛋白质类药物的开发中得到普遍的应用，而且已扩展到新型药物载体、控释制剂等各个领域。许多制备聚乙二醇化小肽的方法已被报道，潘和平等在中国专利200310117356. 5中报道了胸腺五肽的聚乙二醇化衍生物，含有它们的药物组合物及用途；中国专利200410066897. 4中报道了一种人胰高血糖素样肽-I的复合物及其制备方法，连接了 PEG的人胰高血糖素样肽-I生物稳定性高，体内半衰期长，生物利用度高。在传统的聚乙二醇化技术中，需要对聚乙二醇的端基进行活化，引入适当的活性基团，此活性基团对要结合的药物分子中的至少一个官能团具有活性，能与之形成稳定的化学键。但这种方法在用于小肽的PEG化时存在着许多的局限性其一是小肽的氨基酸中可能不具有能与活化的PEG结合的侧链基团。另外，小肽的分子量较小，PEG化的位点可能覆盖了活性部位。本发明提供的带有PEG的氨基酸用于多肽的合成，可以在设定好的位点引入PEG，避免了传统PEG化方法的局限性。
发明内容
本发明提供一种新型的，带有聚乙二醇的氨基酸，能用于多肽的化学合成。本发明的技术方案如下一种连接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下结构通式R — PEG — CO-X-氨基酸或R — PEG — X-氨基酸其中PEG为聚乙二醇链，R为PEG的羟基或烃氧基，烃氧基可以选自C广C12烷氧基、环烷氧基或芳烷氧基，X为氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脱去活性氢的杂原子。
本发明的连接有聚乙二醇的氨基酸，其中的氨基酸优选的是侧链含杂原子的天然氨基酸。它们中最优选的天然氨基酸是赖氨酸、组胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烃氧基为甲氧基，它们有如下几种结构
权利要求
1.一种连接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它具有以下结构通式 R-PEG-X-氨基酸 其中PEG为聚乙二醇链，R为PEG的羟基或烃氧基，烃氧基选自C广C12烷氧基、环烷氧基或芳烷氧基，X为氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脱去活性氢的杂原子。
2.根据权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是其中的氨基酸是侧链含杂原子的天然氨基酸。
3.根据权利要求2所述的连接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它们中的天然氨基酸是赖氨酸、组胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烃氧基为甲氧基。
4.一种制备权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步骤 取单烃氧基聚乙二醇酸，a -叔丁氧羰基氨基酸和二环己基碳二亚胺溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外还具有带活性氢的氮原子的氨基酸，在室温下搅拌回流4 16小时，将混合物过滤，滤液减压蒸干并真空干燥，即得连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，将所得的连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，搅拌，然后蒸发浓缩并真空干燥，所得固体物质用二氯甲烷溶解并用干燥剂干燥，过滤后再加入冷却乙醚至滤液中，将所得沉淀物过滤后真空干燥，即得连接有聚乙二醇的氨基酸。
5.一种制备权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步骤 取单烃氧基聚乙二醇酰氯溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外还具有带活性氢的杂原子的氨基酸，室温下搅拌过夜，将反应混合物过滤，滤液蒸发浓缩并真空干燥，即得连接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，将所得的连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，搅拌，然后蒸发浓缩并真空干燥，所得固体物质用二氯甲烷溶解并用干燥剂干燥，过滤后再加入冷却乙醚至滤液中，将所得沉淀物过滤后真空干燥，即得连接有聚乙二醇的氨基酸。
6.一种制备权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步骤 取单烃氧基聚乙二醇溶于二氯亚砜中，室温搅拌2小时，旋转蒸发除去剩余的二氯亚砜，将所得固体物质溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外还具有带活性氢的杂原子的氨基酸，室温下搅拌过夜，过滤反应混合物，滤液蒸发浓缩并真空干燥，即得连接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，将所得的连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，搅拌，然后蒸发浓缩并真空干燥，所得固体物质用二氯甲烷溶解并用干燥剂干燥，过滤后再加入冷却乙醚至滤液中，将所得沉淀物过滤后真空干燥，即得连接有聚乙二醇的氨基酸。
7.一种制备权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步骤 取单烃氧基聚乙二醇胺，a-叔丁氧羰基氨基酸和二环己基碳二亚胺(DCC)溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外还具有其它羧基的氨基酸，在室温下搅拌回流4 16小时，将混合物过滤，滤液减压蒸干并真空干燥，即得连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，将所得的连接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，搅拌，然后蒸发浓缩并真空干燥，所得固体物质用二氯甲烷溶解并用干燥剂干燥，过滤后再加入冷却乙醚至滤液中，将所得沉淀物过滤后真空干燥，即得连接有聚乙二醇的氨基酸。
8.—种权利要求I所述的连接有聚乙二醇的氨基酸的用途，其特征是将其用于多肽的合成，或将其连接到药物上。
全文摘要
一种连接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下结构通式R—PEG—X-氨基酸其中PEG为聚乙二醇链，R为PEG的羟基或烃氧基，烃氧基可以选自C1~C12烷氧基、环烷氧基或芳烷氧基，X为氨基酸中除α-羧基和α-氨基外的脱去活性氢的杂原子。用本发明的连接有聚乙二醇的氨基酸合成多肽，可以得到聚乙二醇链在特定位置的多肽，如此的多肽不但改善了它们的药代动力学，而且不影响多肽原有的治疗作用。本发明公开了其制法。
文档编号A61K47/48GK102827365SQ20121032168
公开日2012年12月19日 申请日期2006年11月7日 优先权日2006年11月7日
发明者姚文兵, 田浤, 高向东, 陈阳建, 宋潇达 申请人:中国药科大学