专利名称：治疗肺间质纤维化的药物组合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗肺间质纤维化的药物组合物。
背景技术：
间质性肺疾病是众多具有不同程度肺的炎症和纤维化的急、慢性肺疾病的总称，肺纤维化是其最终病理结局。特发性肺纤维化(IPF)是其中最具代表性的一种类型，它是一种病因不明、发病机制不清、缺乏治疗手段的致命性弥漫性肺间质疾病，其病理特征是肺泡上皮的损伤和成纤维细胞增殖，并形成成纤维细胞灶。既往IPF的治疗以糖皮质激素和细胞毒类药物为主，但疗效甚微，IPF确诊后平均存活期为2 4年，5年生存率为 30% 50%。 (Idiopathic Pulmonary Fibrosis Clinical Research Network.Acontrolled trial of sildenafil in advanced idiopathic pulmonary fibrosis. N EnglJ Med, 2010，363:620-628;Raghu G, Collard HR, Egan JJ, et al. An Official ATS /ERS/JRS/ALAT Statement: Idiopathic pulmonary fibrosis: evidence-based guidelines fordiagnosis and management. Am J Respir Crit Care Med, 2Oll,83 :788_824)肺纤维化危害严重、死亡率高、临床治疗措施匮乏，因此开发新的抗肺纤维化药物显得迫在眉睫，中医药是朴素药物的重要来源。肺纤维化属于中医学“肺痿”范畴，(晁恩祥、张纾难.肺痿再辨识.北京中医药大学学报，1997,20(5) :14-15;张纾难.试论瘀血肺痿.上海中医药杂志，1994，(I) 7-9)近十年来，中医药在防治肺纤维化取得了一定的进展，显示出良好的前景。在实验方面，许多研究表明，无论是丹参、当归等单味药，还是固定方药对肺纤维化模型的肺泡炎、肺纤维化程度均有明显减轻作用。(郑岚、郑建平.中医药治疗肺间质纤维化近10年研究进展·光明中医，2011,26 (1):188-191)如专利申请号200910083617. 3，该申请中公开了一种治疗肺间质纤维化的中药组合物，具体包括川贝母、虫草菌丝、三七、红景天、灯盏花、丹参、银杏叶、水蛭、地龙、知母。如专利申请号200810103844. 3，该申请中公开了一种治疗肺间质纤维化的蒙药，具体包括冬青叶、丹参、北沙参、沙棘、苦杏仁、炙甘草、天竺黄。如专利申请号201010000734. 1，该专利公开了一种用于治疗肺间质纤维化的灯盏花素与三七皂苷Rgl组合物，其重量比为2 5:1 2。如专利申请号201010000735. 6，该申请提供了三七皂苷Rgl在制备治疗肺间质纤维化药物中的应用。以上研究为本病的治疗提供了宝贵的经验。但我们也清醒地看到，本病的相关中医研究资料较少，有的是个案报道，难有较强的说服力。此外，大多数学者多以血瘀或气阴亏虚挟瘀立论，在临床实践中存在一定的局限性。本课题组通过临床实践认识到肺纤维化病性为虚实夹杂，阳虚寒凝是本，痰滞血瘀是标。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种治疗肺间质纤维化的药物组合物及其制备方法和应用。
本发明所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草为原料制备的，且任一组分的质量百分含量均不超过总量的30% ；优选的，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的卫矛I 30份、红景天I 30份、黄花水倒莲I 30份、淫羊藿I 30份和炎甘草I 30份；优选的，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的卫矛2 25份、红景天2 25份、黄花水倒莲2 25份、淫羊藿2 25份和炙甘草2 25份； 进一步优选的，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的卫矛6 12份、红景天6 12份、黄花水倒莲6 12份、淫羊藿4 10份和炎甘草10 18份；最优选的，是以如下重量份数的原料制备的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草各10份；或者卫矛12份、红景天6份、黄花水倒莲6份、淫羊藿8份和炙甘草14份；或者卫矛6份、红景天6份、黄花水倒莲6份、淫羊藿10份和炙甘草18份；或者卫矛8份、红景天12份、黄花水倒莲12份、淫羊藿8份和炙甘草12份；或者卫矛12份、红景天8份、黄花水倒莲8份、淫羊藿4份和炙甘草16份；所述治疗肺间质纤维化的药物组合物的制备方法，包括以下步骤(I)将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草，在室温下，用有机溶剂或者是有机溶剂水溶液浸泡20 28小时，有机溶剂或者有机溶剂水溶液的重量用量为卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草总重量的3 5倍，然后减压挥去有机溶剂或者是有机溶剂水溶液得浸膏，将所述浸膏至于100°C 105°C干燥3 5h，获得有机溶剂提取物；所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯，有机溶剂水溶液的体积浓度为65 75% ；(2)然后再将经有机溶剂或者是有机溶剂水溶液提取过后卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草，再用8 12倍重量的水回流提取2 4小时，然后收集提取液，浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，获得的水提取物；(3)将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草的有机溶剂或者是有机溶剂水溶液提取物与水提取物混合，即获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物；动物试验证明，本发明获得的治疗肺间质纤维化的药物组合物，可以用于治疗肺间质纤维化，可以通过口服途径施加于需要治疗的患者，剂量一般为O. 5 4. O克生药量/公斤体重/天，具体可根据患者的年龄、病情，由医师决定；
本发明还涉及一种药物组合物，包括治疗有效量的所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物和医药学上可接受的载体；所述的载体是指药学领域常规的载体，例如稀释剂、赋形剂如水等；粘合剂如纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂如淀粉等；崩裂剂如碳酸钙、碳酸氢钠 ’另夕卜，还可以在组合物中加入其他辅助剂如香味剂和甜味剂。本发明的组合物可以制备成常规的固体制剂，如片剂、胶囊等，用于口服。本发明根据本病的发病、病理及临床特点，并结合实践，发明人认为，肺纤维化其实质是一种出现在肺脏的“阴疽”，根据洪广祥教授“治肺不远温”之学术观点，(赵凤达、蔡灿林.洪广祥“治肺不远温”在慢性咳喘病中的运用.江西中医药，1993,24(2) :3-4)治疗须以温阳散寒、化痰行瘀为主，故申请者对具有温通作用的中草药进行了广泛的筛选，并配伍组方。
本发明依据中药理论，从大量的中药中，选择了卫矛选用卫矛科植物Euonymusalatus (Thunb. ) Sieb.具翅状物的枝条或翅状附属物，红景天选用景天科植物大花红景天Rhodiola crenulata(Hook, et Thoms. )H. Ohba的干燥根和根莖，黄花水倒莲选用远志科植物Polygala fallax Hemsl. [P. aureocauda Dumn]的根，淫羊藿选用小檗科植物淫羊藿 Epimedium brevicornu Maxim 和炎甘草选用豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensisFisch.干燥根或根茎的炮制加工品，上述中药材均购于广州市清平药材市场，上述药材经广州中医药大学附属第二医院黄志海主任药师鉴定符合《中国药典》2010版要求或地方药材标准)，作为原料，制备获得了所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物，获得了意想不到的效果。根据《中国药典》和文献记载卫矛为卫矛科植物Euonymus alatus (Thunb. ) Sieb.具翅状物的枝条或翅状附属物，又名鬼箭羽、鬼箭、六月凌、四面锋、蓖箕柴、四棱树、山鸡条子、四面戟、见肿消、麻药。《本草纲目》中记载“鬼箭生山石间，小株成丛，春长嫩条，条上四面有羽如箭羽，视之若三羽尔。青叶，状似野茶，对生，味酸涩。三、四月开碎花，黄绿色。结实大加冬青子”。卫矛有破血通经、解毒消肿、杀虫之功效。主治症瘕结块、心腹疼痛、闭经、痛经、崩中漏下、产后瘀滞腹痛、恶露不下、疝气、历节痹痛、疮肿、跌打伤痛、虫积腹痛、烫火伤、毒蛇咬伤。红景天为景天科植物大花红景天Rhodiola crenulata (Hook, et Thoms. ) H. Ohba的干燥根和根茎。我国古代第一部医学典籍《神农本草经》就将红景天列为药中上品。红景天性味甘苦平，归肺、心经，功能益气活血，通脉平喘。主治气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘。现代药理实验发现红景天具有抗缺氧、抗疲劳、抗菌作用、镇痛作用、抗辐射作用、延缓衰老作用以及对内分泌系统的双向调节等多种药理作用。黄花水倒莲为远志科远志属植物Polygala aureocauda Dunn. (PAD),又名黄花远志.是一种使用悠久的民间草药。主产福建、江西、湖南、广西和云南等省区，生于海拔1150 1650m的山谷林下，水旁阴湿处。黄花水倒莲味甘，微苦，性平，微温；具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀、调经等功效，是广西民间少数民族常用药，其根能滋补、强壮、祛风湿、舒经络，治疗病后体虚、腰肌劳损、风湿关节痛、跌打损伤、急慢性肝炎、子宫下垂和月经不调。现代研究证明其根含有皂苷、多糖、有机酸、氨基酸等，具有抗衰老、改善心肌缺血、免疫调节等作用。临床上用于调节血脂取得了良好的效果，具有良好的开发前景。
淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb. Et Zucc.)Maxim、柔毛淫羊藿 Epimedium pubescens Maxim或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥叶。淫羊藿是使用最为悠久的中药之一，最早记载于《神农本草经》；淫羊藿是现在应用最为广泛的中药之一，受到国内外广泛关注，除其传统用法补肾壮阳祛风湿之外，淫羊藿尚具有免疫增强、抗衰老、抗肿瘤、抗艾滋病等作用。临床上，淫羊藿常用于治疗骨质疏松、更年期综合症、乳房肿块、高血压、冠心病等疾病。炎甘草甘草为豆科植物Glycyrrhizauralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhizainflate Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根莖，炎甘草是甘草的炮制加工品，味甘平，归心、肺、脾、胃经。功能补脾和胃，益气复脉，主治脾胃功能减退，大便溏薄，乏力发热以及咳嗽、心悸等。综上所述，本发明的有益效果本发明突破研发常规，没有囿于传统中医理论限制，根据肺间质纤维化患者的病 机为虚实夹杂，阳虚寒凝是本，痰滞血瘀是标，大胆筛选药物并组方，动物实验和临床试验结果表明，该药物组合物具有效果显著的特点，有很好的临床应用前景。
具体实施例方式实施例I在室温下，取卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草各10公斤(共50公斤)，用浓度500公斤体积浓度为95%的乙醇浸泡提取，浸泡时间为24小时，减压回收乙醇得浸膏，将浸膏至于100°C的烘箱中干燥5h，获得乙醇提取物；将经乙醇提取过的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草再用500公斤水回流提取2小时，提取液浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，干燥，得水提取物；将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草的乙醇提取物和水提取物混合，即获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。可将获得的治疗肺间质纤维化的药物组合物100克和100克可溶性淀粉混匀，可采用本领域公知的方法制备成为制片。实施例2在室温下，取卫矛12公斤、红景天6公斤、黄花水倒莲6公斤、淫羊藿8公斤、炙甘草14公斤(共46公斤)，用体积浓度为70%的460公斤甲醇浸泡提取，浸泡时间为24小时，减压回收甲醇得浸膏，将浸膏至于100°C的烘箱中干燥5h，获得甲醇提取物；将经甲醇提取过的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草再用460公斤回流提取4小时，提取液浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，干燥，得水提取物；将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草的甲醇提取物和水提取物混合，获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。可将获得的治疗肺间质纤维化的药物组合物100克和150克可溶性淀粉混匀，采用本领域公知的方法，制粒、干燥，然后把颗粒装入用水溶性多糖为原料制成的空心胶囊内，即得胶囊剂。实施例3
在室温下，取卫矛6公斤、红景天6公斤、黄花水倒莲6公斤、淫羊藿10公斤、炙甘草18公斤(共46公斤)，用460公斤乙酸乙酯浸泡提取，浸泡时间为24小时，减压回收乙酸乙酯得浸膏，将浸膏至于100°C的烘箱中干燥5h，获得乙酸乙酯提取物；将经乙酸乙酯提取过的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草再用460公斤水回流提取3次，提取液浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，干燥，得水提取物；将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草的乙酸乙酯提取物和水提取物混合，获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。将获得的治疗肺间质纤维化的药物组合物100克和100克可溶性淀粉混匀，采用本领域公知的方法制颗粒、干燥，即得颗粒剂。实施例4在室温下，取卫矛8公斤、红景天12公斤、黄花水倒莲12公斤、淫羊藿8公斤、炙 甘草12公斤(共52公斤)，用520公斤丙酮浸泡提取，浸泡时间为24小时，减压回收丙酮得浸膏，将浸膏至于100°C的烘箱中干燥5h，获得丙酮提取物；将经丙酮提取过的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草再用520公斤水回流提取4小时，提取液浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，干燥，得水提取物；将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草的醇提取物和水提取物混合，获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。可将获得的治疗肺间质纤维化的药物组合物100克和100克可溶性淀粉混匀，采用本领域公知的方法制备成为片剂。实施例5在室温下，取取卫矛12公斤、红景天8公斤、黄花水倒莲8公斤、淫羊藿4公斤、炙甘草16公斤(共48公斤)，用体积浓度为70%的480公斤乙醇溶液浸泡提取，浸泡时间为24小时，减压回收乙醇得浸膏，将浸膏至于100°C的烘箱中干燥5h，获得乙醇提取物；将经乙醇提取过的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草再用480公斤水回流提取2小时，提取液浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，干燥，得水提取物；将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿、炙甘草的乙醇提取物和水提取物混合，获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。可采用本领域公知的方法，制备成为口服液制剂。实施例6一、下述试验中所用的药物组合物为实施例I和实施例4的治疗肺间质纤维化药物组合物；二、试验用于观察该药物组合物治疗肺间质纤维化的作用及部分机制。I.材料与方法1.1动物健康雄性Wistar大鼠，体质量180 200g，购于广东省医学实验动物中心，实验动物许可证编号0086042，实验设施合格证号0044963。1.2药品盐酸博来霉素(浙江海正药业股份有限公司)。I. 3仪器KMB生物组织包埋机(浙江金华科迪仪器设备有限公司);RM2126石蜡切片机(上海徕卡仪器有限公司)；DH9143B III电热恒温鼓风干燥箱(上海新苗医疗器械制造公司；Axiostar Plus生物显微镜(德国Carl Zeiss公司)。
1.4动物分组及造模80只Wistar雄性大鼠随机分为4组，每组20只。分别为正常组、模型组、阳性药物组(醋酸强的松)和药物组合物组，其中正常组为正常饲养，其他3组动物用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，仰卧固定于鼠台上，颈部乙醇消毒后逐层分离并暴露气管，注射器经气管软骨环间隙刺入气管，缓慢注入博来霉素(5mg/kg)，注后立即将动物直立并左右旋转，使药液在肺内均匀分布。术后第2天开始灌胃给药，阳性药物组给药剂量为I. 5mg · kg · (Γ1,药物组合物组给药剂量为20mg · kg · (Γ1。模型组给予等体积的生理盐水。实验期间，大鼠自由饮水和进食，给药14天后，每组随机取10只动物处死，称重后以2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(2. 5mL/kg))后固定于操作台上，由腹主动脉取血，分离血清。再分离气管和肺脏，结扎气管后取出肺脏，然后从气管插管至左主支气管进行支气管肺泡灌洗，收集支气管肺泡灌洗液(总回收量大于灌洗液的90%)。取肺组织，观察肺组织形态学变化，给药28天后处死其余动物，进行同样的实验操作。1.5肺组织形态学观察肺组织病理学检查按常规病理学方法进行固定，脱水，包埋，切片，按照SZAPIEL的方法用HE染色评定肺泡炎症程度，Masson染色评定肺纤维化程度。肺纤维化及肺泡炎症程度的等级资料转化为计量资料，方法如下0级计O分，I级计I·分，以此类推。2.结果2.1 H-E染色结果给药14天后的各组显微镜下观察结果发现正常组终末细支气管、呼吸性细支气管、肺泡管和肺泡结构正常。模型组肺泡间隔中出现了大量的纤维增生灶，即实变区。阳性药物组炎症和纤维化灶交错，部分小支气管周围可见实变区。药物组合物组也表现出炎症和纤维化灶。给药14天后的各组显微镜下观察结果发现正常组结构正常。模型组大鼠纤维化程度明显，有大片实变区，支气管周围纤维化程度较高。部分肺泡壁明显增厚，肺泡间隔纤维化病灶显著。部分肺泡腔扩张呈囊状，肺泡壁断裂，肺泡腔萎陷。阳性药物组肺泡间隔及支气管周围仍可见纤维病灶，部分肺泡及细支气管内可见散在的炎性细胞。药物组合物组肺泡间隔纤维增生灶较少，肺泡内未见明显的炎性细胞。2. I Masson染色评定肺纤维化程度结果表11和表12的结果显不给药14天和28天后，模型组的肺泡炎症严重程度明显高于正常组(P < O. 01)，阳性药物组和药物组合物组的肺泡炎症严重程度与模型组比较，则有显著性降低(P < O. 01)，药物组合物组和阳性药物组比较，2组的肺泡炎症严重程度在第14天无显著性差异(P > O. 05)，但第28天药物组合物组的肺泡炎症严重程度要显著性低于阳性药物组(P < O. 05)。表21和表22的结果显示给药14天和28天后，模型组的肺纤维化程度明显高于正常组(P < O. 01)，阳性药物组和药物组合物组的肺纤维化程度与模型组比较，则有显著性降低(P < O. 01)，药物组合物组和阳性药物组比较，2组的肺纤维化程度在第14天无显著性差异(P > O. 05)，但第28天药物组合物组的肺纤维化程度要显著性低于阳性药物组(P < O. 05)。表11各组大鼠肺泡炎症严重程度比较(i ± s)分
权利要求
1.治疗肺间质纤维化的药物组合物，其特征在于，是以卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草为原料制备的，且任一组分的质量百分含量均不超过总量的30%。
2.治疗肺间质纤维化的药物组合物，其特征在于，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的卫矛I 30份、红景天I 30份、黄花水倒莲I 30份、淫羊藿I 30份和炎甘草I 30份。
3.根据权利要求2所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物，其特征在于，是以如下重量份数的原料制备的卫矛2 25份、红景天2 25份、黄花水倒莲2 25份、淫羊藿2 25份和炙甘草2 25份。
4.根据权利要求2所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物，其特征在于，进一步优选的，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的卫矛6 12份、红景天6 12份、黄花水倒莲6 12份、淫羊藿4 10份和炎甘草10 18份。
5.根据权利要求2所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物，其特征在于，是以如下重量份数的原料制备的卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草各10份； 或者 卫矛12份、红景天6份、黄花水倒莲6份、淫羊藿8份和炙甘草14份； 或者 卫矛6份、红景天6份、黄花水倒莲6份、淫羊藿10份和炙甘草18份； 或者 卫矛8份、红景天12份、黄花水倒莲12份、淫羊藿8份和炙甘草12份； 或者 卫矛12份、红景天8份、黄花水倒莲8份、淫羊藿4份和炙甘草16份。
6.制备权利要求I 5任一项所述治疗肺间质纤维化的药物组合物的方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草，在室温下，用有机溶剂或者是有机溶剂水溶液浸泡20 28小时，有机溶剂或者有机溶剂水溶液的重量用量为卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草总重量的3 5倍，然后减压挥去有机溶剂或者是有机溶剂水溶液得浸膏，将所述浸膏至于100°C 105°C干燥3 5h，获得有机溶剂提取物； 所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯，有机溶剂水溶液的体积浓度为65 75% ； (2)然后再将经有机溶剂或者是有机溶剂水溶液提取过后卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草，再用8 12倍重量的水回流提取2 4小时，然后收集提取液，浓缩至25°C时的比重为I. 05 I. 10，获得的水提取物； (3)将卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草的有机溶剂或者是有机溶剂水溶液提取物与水提取物混合，即获得所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物。
7.—种药物组合物，包括治疗有效量的权利要求I 5任一项所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物和医药学上可接受的载体。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，为片剂或胶囊。
9.权利要求I 5任一项所述的治疗肺间质纤维化的药物组合物在制备治疗肺间质纤维化的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗肺间质纤维化的药物组合物及其制备方法和应用，所述治疗肺间质纤维化的药物组合物，是以卫矛、红景天、黄花水倒莲、淫羊藿和炙甘草为原料制备的，且任一组分的质量百分含量均不超过总量的30%。本发明突破研发常规，没有囿于传统中医理论限制，根据肺间质纤维化患者的病机为虚实夹杂，阳虚寒凝是本，痰滞血瘀是标，大胆筛选药物并组方，动物实验和临床试验结果表明，该药物组合物具有效果显著的特点，有很好的临床应用前景。
文档编号A61P11/00GK102895322SQ201210365678
公开日2013年1月30日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者刘良徛, 张云兵, 兰智慧, 付向春 申请人:江西中医学院附属医院