专利名称：一种具有治疗糖尿病功效的中药活性成分的制作方法
技术领域：
本发明属于中药学、内分泌学和分子药理学相结合的领域，具体涉及中药桅子的活性成分桅子苷(geniposide),桅子苷作为一种胰高血糖素样肽-I受体(GLP-IR)激动剂，通过特异性激活GLP-IR信号通路，通过保护胰岛细胞生存，进而达到实现降低糖尿病模型小鼠血糖水平的功效，在此基础上可进一步开发出含桅子苷的治疗糖尿病的药物。
背景技术：
近年来糖尿病(DiabetesMellitus),尤其是 2 型糖尿病(Type 2DiabetesMellitus, T2DM)已成为与心血管疾病，肿瘤并列的发病率和死亡率最高的三大非传染性疾 病之一。β细胞衰竭是糖尿病致病机制的核心环节，是糖尿病发生、发展的病理生理基础，β细胞再生及功能修复成为近年来糖尿病研究领域的重要方向。桅子别名黄桅子、山桅、白蟾，是茜草科植物桅子的果实。目前，桅子的果实是传统中药，属卫生部颁布的第I批药食两用资源，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用，在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等症。桅子中含有40余种生理活性物质，其中为国内外所公认的中药桅子有效成分为环烯醚萜类物质。桅子所含的环烯醚萜类物质包括桅子苷、京尼平苷、羟异桅子苷、桅子苷酸等，其中活性成分最高的是桅子苷和京尼平苷。桅子苷的化学式
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€11,近年来肠促胰素(incretin)的发现极大地拓宽了人们对2型糖尿病发病和治疗的理念，开辟了全新的研究空间。肠促胰素是一类肠源性激素，包括胰高血糖素样肽I(GLP-1)、葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)等。其中GLP-I是近年来2型糖尿病治疗新靶点。GLP-I在肠道L细胞内合成并分泌，通过与其受体结合激活下游信号通路，主要生理作用是刺激胰岛β细胞分泌胰岛素，抑制胰高血糖素分泌，从而降低餐后血糖。GLP-I对β细胞的直接保护作用备受关注，它能够上调胰岛素基因表达，直接减少β细胞凋亡，促进β细胞增殖再生，促进胰岛素合成作用，有益于改善β细胞功能。然而，内源性GLP-I和GIP的半衰期很短，通常在数分钟内就会被体内二肽基肽酶4 (DPP-4)降解。GLP-I受体激动剂，DPP-4抑制剂的研发成为治疗T2DM的新策略。基于GLP-I的药物近年来在我国陆续进入临床应用。目前已在中国上市的GLP-I受体激动剂如艾塞那肽和利拉鲁肽，DPP-4抑制剂类有例如西格列汀、沙格列汀及维格列汀。基于GLP-I效应的新药研发依旧是目前糖尿病治疗药物研发热点。
发明内容
本发明要解决的技术问题已知中药桅子能用于糖尿病的治疗，但是其作用机制一直未被揭示，本发明则通过大量的研究，解决了如下长期困惑了糖尿病治疗领域的问题中药桅子的降糖功效是通过其活性成分桅子苷，而桅子苷则是潜在的一种GLP-I受体激动剂，具有保护胰岛β细胞、降低血糖功效的特性。本发明解决了长期以来学术界一直对桅子治疗T2DM作用机理未知的技术问题，在作用机理明确以后，即可以在进一步的工业化生产中大规模的生产出含桅子苷的治疗2型糖尿病特效药物。本发明采用的技术方案·一种来源于中药桅子的具有治疗糖尿病功效的药物，其有效成分为从中药桅子提取出的桅子苷，将桅子苷作为GLP-I受体激动剂，通过特异性激活GLP-IR信号通路的途径来保护胰岛β细胞，从而实现降低体内血糖水平的功效。本发明的有益效果中国糖尿病患者最新数量已近I亿，是世界上糖尿病患者人数最多的国家。现有治疗药物存在各种不足例如促进胰岛素分泌剂磺脲类易发生低血糖、双胍类轻者有消化道胃肠反应重者乳酸性酸中毒、α葡萄糖苷酶抑制剂不宜用于胃肠道功能紊乱者、胰岛素增敏剂有全身水肿的副作用故心力衰竭者慎用。而中医药治疗糖尿病历史悠久，疗效确切，价格便宜，服用安全，因此本发明对从天然中药中寻找出新型抗糖尿病活性化合物具有重要意义。
图I为桅子苷对糖尿病模型小鼠的降糖作用(con对照组，con/gen对照+桅子苷组，diabetes糖尿病模型组，diab/gen糖尿病+桅子苷组)。图2为显微镜下纯化后培养的小鼠胰岛细胞团。图3为分离纯化培养的小鼠胰岛β细胞在不同培养条件下增殖与凋亡比例(5. 5=5. 5mM 葡萄糖，33. 3=33. 3mM 葡萄糖，ILIF=IL-I β +IFN-Y )。图4为scramble siRNA及siGLP_lR处理的Insl细胞中GLP-1R基因及下游信号通路主要成员Akt激活表达水平的比较。图5为桅子苷分别刺激scramble siRNA及siGLP_lR处理的小鼠胰岛细胞增殖与凋亡比例数据图。
具体实施例方式实施例I. 2型糖尿病模型动物降糖作用实验采用SPF级C57/BL6小鼠，重量18-20克，随机分为4组，每组6只。动物实验分组情况见表I。表I.动物实验分组设计(为单次实验设计数量，共重复3次)
权利要求
1.一 种来源于中药桅子的具有治疗糖尿病功效的药物，其有效成分为从中药桅子提取出的活性成分桅子苷，其特征为将桅子苷作为GLP-I受体激动剂，通过特异性激活GLP-IR信号通路的途径来保护胰岛β细胞，从而实现降低体内血糖水平的功效。
全文摘要
本发明为栀子苷作为GLP-1受体激动剂发挥保护胰岛β细胞作用，属于中药学、内分泌学和分子药理学相结合的领域，是具体涉及栀子苷通过特异性激活胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)信号通路，从而促进胰岛β细胞生存，进而实现其降糖功效。本发明采用降糖中药栀子活性成分栀子苷培养小鼠原代胰岛β细胞，能显著促进β细胞增殖，抑制其凋亡，同时降低高糖或炎症因子环境下β细胞凋亡率。通过siRNA实验降低GLP-1R在β细胞表达，栀子苷对β细胞的保护作用被抑制。本发明揭示了栀子苷作为GLP-1R激动剂，通过特异性激活GLP-1R通路实现保护胰岛细胞作用，阐明栀子治疗糖尿病的分子药理机制，为中医药治疗糖尿病提供理论依据。
文档编号A61P3/10GK102895364SQ201210437549
公开日2013年1月30日 申请日期2012年11月6日 优先权日2012年11月6日
发明者舒娈, 贾晓斌, 韦英杰 申请人:江苏省中医药研究院