专利名称：河豚毒素贴膜及其一种制备方法
技术领域：
本发明涉及一种河豚毒素外用药物，尤其涉及一种河豚毒素贴膜。
背景技术：
河豚毒素(Tetrodotoxin,简称TTX)，是一种小分子量、非蛋白质化合物，其分子式=C11H17N3O8，分子量为319. 27。河豚毒素对肠道有局部刺激作用，进入生物体内被吸收后，通过血液循环作用于神经末梢和神经中枢，可高选择性、高亲和性地阻断神经兴奋膜上的电压依赖性钠离子通道，从而阻滞生物体电位，抑制神经肌肉间兴奋传导，最终导致与之相关的生理机能障碍，主要表现为肌肉和神经麻痹，可起到镇痛、麻醉、戒毒等作用。临床主要用于内科、外科、皮肤科等领域。其功能主要有以下几个方面1、镇痛，含河豚毒素的注射剂已被用于神经痛、癌痛、关节痛、肌肉痛、麻风痛以及创伤、挫伤、烧伤引起的疼痛，对破伤风痉挛效果尤其显著；2、局部麻醉，由于河豚毒素的麻醉作用比一般局部麻醉药要强万倍，故国外已有河豚毒素与普通麻醉药复配作为麻醉药的专利出售；3、镇静，可作瘙痒镇静剂，对皮肤瘙痒症、皮炎等有止痒功效，且有治愈效果，也可用作呼吸镇静剂，治疗气喘、百日咳等症状；4、降压，河豚毒素有独特的降血压效果，可以在临床上用于抢救高血压患者；5、抗心律失常，河豚毒素有明显的抗心律失常活性，若与其他抗心律失常药物配用，可显著增强对心律失常的疗效；6、戒毒，对吸毒者注射微量的河豚毒素后，所有各种“戒毒综合症”在30分钟后全部消失，连续注射5天后可完全戒毒。1998年加拿大国际韦克斯技术公司利用河豚毒素成功研制一种名为“tetrodin”的戒毒新药。此外，河豚毒素在治疗遗尿症、男性阳痿、女性性欲缺失、延缓衰老、提高免疫力等方面也取得了显著成效。因而河豚毒素具有很大的药用开发价值。河豚毒素的生产方法主要有化学合成法、生物组织提取法、微生物发酵法。其中化学合成法步骤繁琐、得率低、产品纯度不高；组织提取法需消耗大量的河豚鱼资源，破坏生态系统；微生物发酵法存在产毒菌株遗传特性不稳定，需经过专门分离技术手段将细菌外毒素从混合体中分离出来，提纯工艺复杂、收获率小、细菌质量较低等缺陷。因此，有必要研究一种全新的河豚毒素生产方法。ZL200910075184. 7和ZL200920104149. 9公布了一种细菌外毒素透析培养方法和相应的微生物透析培养器，为河豚毒素生产提供了一个新思路。目前，河豚毒素药物载体以溶液形式的注射针剂居多，但河豚毒素注射液安全性低，一旦不慎流入社会，极易被不法分子利用进行违法活动。此外，河豚毒素注射液注射时会带来一定痛苦，也不适用于外用。公开号CN101066340A的专利中公开了一种复方外用河豚毒素油膏及其制备方法，以河豚鱼肝油为活性成分，制成一种外用涂敷油膏，用以应对外伤(包括I、II度烧、烫伤)、外伤感染等症状，但未见有采用河豚毒素作为贴膜药剂的报道。肉毒毒素作为美容除皱的主要药物已有多年的应用历史，但肉毒毒素现主要采用注射方式，存在一定痛苦，且需要到专门美容机构、借由专业人员才能实施
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种通过贴敷就能够具有消痒、止痛、美容除皱作用的贴膜。为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是一种河豚毒素贴膜，包括布置在基膜上的药物，所述药物包括药用活性成分河豚毒素以及稳定剂乳糖、助溶剂枸橼酸、氧化锌、松香、凡士林、薄荷精油。本发明的进一步改进在于所述河豚毒素贴膜中各组分按质量份数计为河豚毒素I、份，乳糖3. 5 1500份，枸橼酸f200份，氧化锌3(Γ500份，松香6(Γ2000份，凡士林1000^8000份，薄荷精油80 600份。本发明的进一步改进在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为Γ3份。本发明的进一步改进在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为3 5份。本发明的进一步改进在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为6、份。一种河豚毒素贴膜的制备方法，包括以下步骤
Α、河豚毒素提取
收取河豚毒素透析培养菌液，然后在0°C的环境下离心处理，取上清液，按I. O: I
I.2:1的比例与苦味酸混合，所得混合液按1:5 1:7的比例与沸水混合，趁热过滤；冷却滤液，得结晶沉淀，分离结晶沉淀，并将此沉淀在沸水中重结晶三次，得黄色针状河豚毒素苦味酸盐结晶盐；将河豚毒素苦味酸盐在沸水中溶解，并用氨水将所得河豚毒素苦味酸盐溶液的PH值调节至9，冷却后得河豚毒素结晶物；将所得河豚毒素结晶物用稀醋酸溶解，并再用氨水调节PH值至9，然后再次结晶纯化，并将所得结晶物干燥后即的所需的河豚毒素；
B、将河豚毒素研细，按比例与枸橼酸混合溶解，同时按比例加入乳糖，均匀搅拌；
C、将溶解好的河豚毒素与氧化锌、松香、凡士林、薄荷精油按比例均匀混合，制成贴剂。由于采用了上述技术方案，本发明所取得的技术进步在于将河豚毒素制成一种外用贴膜，改变了传统河豚毒素药剂的给药途径，直接从人体外部进行局部给药，河豚毒素将不再进入生物体血液循环系统，而直接作用于皮肤和皮下浅层肌肉神经，起效更加迅速，使用更加方便、简便。同时，河豚毒素贴膜使得河豚毒素药剂的保存、使用更加方便、安全，且极大减轻了患者因使用河豚毒素针剂注射所带来的疼痛感。此外，河豚毒素贴膜相对现有的河豚毒素外用止痛油膏，可使药物与外界完全隔离，不会蹭脏衣服，患者使用更加卫生、方便。河豚毒素贴膜根据河豚毒素含量的不同，可分别起到止痒、镇痛或美容除皱的效果，贴膜中河豚毒素的质量份数为广3份时，主要可以起到止痒作用，其镇痛效果和美容除皱效果稍弱；贴膜中河豚毒素的质量份数为3飞份时，主要用于止痛，但也能够起到止痒和美容除皱的效果；贴膜中河豚毒素的质量份数为6、份时，在具有美容效果的同时，也具有镇痛、止痒的效果。河豚毒素与肉毒毒素都具有麻痹神经末梢、消除皱纹的功效，河豚毒素贴膜的出现，将有助于实现美容除皱的常态化，消费者可以自行通过贴膜实施美容除皱，无需再借助医疗美容机构，且消除了注射肉毒毒素时带来的疼痛感。本发明河豚毒素贴膜中所用河豚毒素由河豚毒素透析培养液中提取，河豚毒素透析培养方法可使每ml培养液产毒量从ng级增加至mg级，产毒量得到了大幅度提高，极大降低了河豚毒素生产成本。同时，河豚毒素贴膜所使用剂量仅为最小致死量的千分之一，极大提高了河豚毒素药剂的安全性。同时也在一定程度上消弱了因河豚毒素药剂流失而造成的社会安全隐患。实际实验研究发现，本发明河豚毒素贴膜与其他具有镇痛、止痒效果的药物相比起效时间大大缩短，最短l(T30min即可起效,且药效更为持久,可持续48 72h，连续使用3天疼痛即可得到消除。本发明河豚毒素贴膜除皱效果可达12(Tl50h。利用本发明试制6cmX IOcm具有镇痛作用的河豚毒素贴膜1000张、具有止痒作用的河豚毒素贴膜500张，具有美容除皱效果的贴膜500贴，试用有效率100%，药效如上所述，且使用后未见有任何毒副作用。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明进行进一步详细描述(下述药物按质量份数计)。
iI或繪毅(#..項量翁教 A树 I袋龜例 2S #4 3456实*斜%施M 8 施(H 9: —狐毒素II345678PIlii3.51001_20SOO_300900ι smIM15010_50160200氣化.HM15090I 4203W200"0smm3004mim100ιοο 5001500iimJL 士绰IOW■ O5000im)7mmiOOO4mm32008_薄歸精油SO100im200ISO棚350500議将实施例1飞中的药物均匀涂在医用纱布上或制成贴剂，药物厚度以能够覆盖纱布为准，可以用于止痒和镇痛；将实施例7、中的药物均匀涂在面膜纸上或制成贴膜，可以用于美容除皱。制备步骤为
A、河豚毒素提取
收取河豚毒素透析培养菌液，然后在0°C的环境下离心处理，取上清液，按I. 1:1的比例与苦味酸混合，所得混合液按1:6的比例与沸水混合，趁热过滤；
冷却滤液，得结晶沉淀，分离结晶沉淀，并将此沉淀在沸水中重结晶三次，得黄色针状河豚毒素苦味酸盐结晶盐；
将河豚毒素苦味酸盐在沸水中溶解，并用氨水将所得河豚毒素苦味酸盐溶液PH值调节至9，冷却后得河豚毒素结晶物；
将所得河豚毒素结晶物用稀醋酸溶解，并再用氨水调节PH值至9，然后再次结晶纯化，并将所得结晶物干燥后即的所需的河豚毒素；
B、将河豚毒素研细，按照上述质量份数与枸橼酸混合溶解，同时加入上述质量份数的乳糖，均匀搅拌；
C、将溶解好的河豚毒素与氧化锌、松香、凡士林、薄荷精油按照份数比均匀混合，制成贴剂。2011年9月石家庄市的冯女士因腿部干痒，需不断抓挠，曾涂抹多种止痒膏，效果不明显。9月22日，将本实施例I中的止痒药贴贴敷于患处，20分钟后即不再有干痒感觉，将此药贴一直贴敷30小时，然后换另一帖，使药贴在患处贴敷两天，自然脱落，此后该患者
5的患处不再发痒。2011年10月石家庄市的李先生因过敏出现手臂干痒，曾服用多种抗过敏药物，效果不明显。10月3日，将本实施例2中的止痒药贴贴敷于患处，15分钟后即不再有干痒感觉，将此药贴一直贴敷24小时，然后换另一帖，使药贴在患处连续贴敷三天，后自然脱落，干痒完全消除。2011年8月石家庄市的·杨某背部干痒，不断抓挠后抓伤出血，痒痛难忍，随即将本实施例3中的止痒药贴贴敷于患处，30分钟后干痒和疼痛感均得到消除，将此药贴一直贴敷30小时，使其自然脱落，该患者患处痒痛感未再复发。2011年9月石家庄市的赵先生因车祸导致肘部划伤大出血，疼痛难忍，口服止疼药片后，不见效果。9月15日，将本实施例4中的镇痛药贴贴敷于患处，30分钟后疼痛感即得到极大减轻，将此药贴贴敷48小时后，换另一帖，连续贴敷3天后，疼痛得到消除。2011年10月石家庄市李某进行剖腹产手术，术后在刀口上贴敷本实施例5中的镇痛药贴，25分钟后疼痛感即得到极大减轻，将此药贴连续贴敷48小时，换另一帖，连续贴敷7天后，疼痛得到消除，且刀口痕迹也得到减轻。2012年9月石家庄市王女士使用本实施例6中的美容贴膜进行面部美容除皱，贴敷20分钟后取下贴膜，面部皱纹得到有效淡化，且该效果可保持140h，试用期间未出现任何不良反应。2012年10月石家庄市孙女士使用本实施例7中的美容贴膜进行面部美容除皱，贴敷18分钟后取下贴膜，面部皱纹得到有效淡化，且该效果可保持135h，试用期间未出现任何不良反应。2011年10月石家庄市的钱女士使用本实施例8中的美容贴膜进行面部美容除皱，贴敷15分钟后取下贴膜，发现面部皱纹淡化，且该效果持续时间为130h，试用期间未出现任何不良反应。2011年11月石家庄市赵女士使用本实施例9中的美容贴膜进行面部美容除皱，贴敷20分钟后取下贴膜，发现面部皱纹得到有效淡化，且该效果可保持150h，试用期间未出现任何不良反应。
权利要求
1.一种河豚毒素贴膜，包括布置在基膜上的药物，其特征在于所述药物包括药用活性成分河豚毒素以及稳定剂乳糖、助溶剂枸橼酸、氧化锌、松香、凡士林、薄荷精油。
2.根据权利要求I所述的河豚毒素贴膜，其特征在于所述河豚毒素贴膜中各组分按质量份数计为河豚毒素I、份，乳糖3. 5^1500份，枸橼酸f200份，氧化锌3(Γ500份，松香60^2000份，凡士林1000 8000份，薄荷精油80 600份。
3.根据权利要求2所述的河豚毒素贴膜，其特征在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为Γ3份。
4.根据权利要求2所述的河豚毒素贴膜，其特征在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为3飞份。
5.根据权利要求2所述的河豚毒素贴膜，其特征在于所述河豚毒素贴膜中河豚毒素的质量份数为6、份。
6.一种河豚毒素贴膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤 Α、河豚毒素提取 收取河豚毒素透析培养菌液，然后在0°C的环境下离心处理，取上清液，按I. O: I I.2:1的比例与苦味酸混合，所得混合液按1:5 1:7的比例与沸水混合，趁热过滤； 冷却滤液，得结晶沉淀，分离结晶沉淀，并将此沉淀在沸水中重结晶三次，得黄色针状河豚毒素苦味酸盐结晶盐； 将河豚毒素苦味酸盐在沸水中溶解，并用氨水将所得河豚毒素苦味酸盐溶液的PH值调节至9，冷却后得河豚毒素结晶物； 将所得河豚毒素结晶物用稀醋酸溶解，并再用氨水调节PH值至9，然后再次结晶纯化，并将所得结晶物干燥后即得所需的河豚毒素； B、将河豚毒素研细，按比例与枸橼酸混合溶解，同时按比例加入乳糖，均匀搅拌； C、将溶解好的河豚毒素与氧化锌、松香、凡士林、薄荷精油按比例均匀混合，制成贴剂。
全文摘要
本发明公开了一种河豚毒素贴膜及其一种制备方法，该河豚毒素贴膜包括药用活性成分河豚毒素、稳定剂乳糖、助溶剂枸櫞酸、氧化锌、松香、凡士林和薄荷精油等，根据其上含有的河豚毒素量的不同，可分别起到止痒、镇痛和美容除皱的功效。河豚毒素贴膜改变了传统河豚毒药剂给药方式，使用更加方便。该河豚毒素药剂价格便宜、简单易制备，见效较快，药效持续时间长，干净、卫生。此外，该贴膜还克服了原有河豚毒素针剂流失造成社会安全隐患，将有助于推动美容除皱项目的常态化，消费者无需借助美容医疗机构即可方便、快捷、舒适的进行美容除皱护理。
文档编号A61K31/529GK102920684SQ20121045917
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月15日 优先权日2012年11月15日
发明者林涛, 武斌 申请人:林涛