专利名称：用于预防或治疗肺癌的制剂及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用由新型纳米材料包裹的反义寡核苷酸制成的制剂，尤其涉及一种用于预防或治疗肺癌的制剂及其制备方法与应用。
背景技术：
反义技术作为一种基因治疗的策略，具有序列特异性的特点，具有特异调控已知基因表达的优越性。但是反义寡核苷酸进入细胞的机制尚不清楚，目前认为可能的机制有 I)通过受体介导的内吞摄入；2)通过细胞膜的被动扩散。由于硫代修饰后，寡核苷酸带有负电荷，难以通过带有负电荷的细胞膜表面，如果不采取任何介导方法，细胞对寡核苷酸的摄取是极为有限的。早期，人们为了高效地将寡核苷酸导入细胞内，采取了多种策略，如显微注射术、电穿孔术、钙离子介导、链球菌溶血素介导等，这些都可以显著提高寡核苷酸的转染效率，但它们对细胞均有显著的毒副作用和损伤，导致其在体内实验应用中存在困难。 所以，寻找一种高效、低毒的运输载体成为亟待解决的问题。
国内外先后报道了一些可运输药物的载体，如合成多聚体(如石因碱)、类脂、脂质体、壳聚糖、RNAs和病毒衣壳。它们的效应在既往的文献中已被清楚地描述。而Ac- α CD 是一种药物传输载体的pH响应性环糊精衍生物，如下述说明书中式I所示。与先前的药物运输载体相比较，Ac-α⑶具有以下优点1) Ac-a⑶具有良好的生物相容性，且可生物降解，降解产物对机体无毒副作用。2)合成过程简单，材料的降解性可以简单地通过环糊精种类及缩醛化时间在一定范围内调控；3) Ac- a⑶具有良好的pH敏感性，即在正常pH7. 4时水解缓慢，而在PH5. O时较快水解；4)Ac_ a CD易溶于二氯甲烷，氯仿，甲醇，乙醇，丙酮等常见溶剂，有利于各种传输系统带的制备；5)通过简单的乳液/溶剂挥发可以便利的制备粒径大小及分布可调控的纳米微粒。
目前而言，纳米载体携带的目标主要是具有治疗或研究用途的药物或基因。研究显示纳米载体在介导基因转染方面具有较好的优势，首先纳米材料一般具有生物兼容性， 自身不会导致细胞的异常转化与死亡。其次纳米粒子具有特殊的结构和表面电荷，有利于细胞的摄取，保证其携带的基因具有较高的转染率。基于纳米载体的多种优势，其在基因转染方面的应用也得到不断推广和发展。发明内容
本发明的目的在于提供一种用作为载体的新型纳米材料包裹的反义寡核苷酸制成的用于预防或治疗肺癌的制剂。
本发明所述的用于预防或治疗肺癌的制剂，其包含式I的pH响应性环糊精衍生物和SEQ ID NO: I所示的反义寡核苷酸
权利要求
1.一种用于预防或治疗肺癌的制剂，其特征在于，包含式I的PH响应性环糊精衍生物、 PEI1800和SEQ ID NO: I所示的反义寡核苷酸，
2.—种权利要求I所述的制剂的制备方法，其特征在于，包含步骤1)合成式I的pH响应性环糊精衍生物氮气保护下，2-甲氧基丙烯中添加含环糊精的无水二甲基亚砜，再加入吡啶对甲苯磺酸丙酮化作用后，在反应混合液中加入三乙胺，过滤，低压干冻，干燥后得到所述PH响应性环糊精衍生物；2)将SEQID NO: I所示的反义寡核苷酸包被入步骤I)制备的pH响应性环糊精衍生物，包被时添加聚乙烯亚胺，制得所述制剂。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤I)具体为氮气保护下， 4mL2-甲氧基丙烯2-甲氧基丙烯中添加20mL含Ig环糊精的无水二甲基亚砜，再加入16mg 吡啶对甲苯磺酸丙酮化作用3小时后，在反应混合液中加入O. 5mL三乙胺，过滤之后，低压干冻白色粉末，收集缩醛化后的沉淀，真空干燥即得到所述环糊精衍生物。
4.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所述聚乙烯亚胺与环糊精衍生物的质量比为I. 25 5. O =IOO0
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述聚乙烯亚胺与环糊精衍生物的质量比为 I. 25 :100，2· 5 100 或 5. O 100ο
6.权利要求I所述的制剂在制备预防或治疗肺癌的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种用于预防或治疗肺癌的制剂及其制备方法与应用。所述制剂包含式I的pH响应性环糊精衍生物、聚乙烯亚胺(PEI1800)和SEQ ID NO:1所示的反义寡核苷酸。本发明所述的制剂在包被时添加PEI1800，通过将反义寡核苷酸包被入式I的pH响应性环糊精衍生物制成。将反义寡核苷酸包裹于纳米材料内，这保证了反义寡核苷酸的结构不被破坏，保持原有的生物学活性，因此，脂溶性的纳米材料易于进入细胞内，可有效的携带反义寡核苷酸进入细胞。所述的制剂可以明显影响细胞的增殖和凋亡，有效的抑制肿瘤细胞的生长，能够用于制备预防或治疗肺癌的药物。
文档编号A61K48/00GK102935239SQ20121045910
公开日2013年2月20日 申请日期2012年11月14日 优先权日2012年11月14日
发明者王关嵩, 陈华萍, 张建祥, 贺斌峰, 魏征华, 王长征, 刘雪萍 申请人:中国人民解放军第三军医大学第二附属医院