专利名称：一种金丝桃苷原料药的提取分离和静脉注射液的制备方法
技术领域：
本发明主要涉及一种制备方法，尤其涉及一种金丝桃苷原料药的提取分离和静脉注射液的制备方法。
背景技术：
杜胃$花科杜胃$花属植物照山白Rhododendron micranthum Turcz.,以枝叶入药，叶中含挥发油含量为0.27% (鲜叶)[1，2]。酚酸类成分有:对-羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid),原儿茶酸(protocatechuic acid),香草酸(vanillic acid)和丁香酸(syringic acid) [2]。还含槲皮素(quercetin),棉花皮素(gossypetin),山奈酹(kaempferol)[l, 2],金丝桃苷(hyperoside)和紫云英苷(astraga-lin) [3]。另外，还含浸木毒素(andromedotoxin) [4]。金丝桃苷，又名槲皮素-3-0-β-D-吡喃半乳糖苷。属于黄酮醇苷类化合物。苷元为槲皮素，糖基为吡喃半乳糖 ，由槲皮素的3位O原子以β糖苷键与糖基相连。金丝桃苷分布广泛，具有抗炎、解痉、利尿、止咳、降压、降低胆固醇、蛋白同化、局部和中枢镇痛以及对心、脑血管的保护作用等多种生理活性，是一种重要的天然产物。本发明是利用化学方法从照山白叶中提取分离敢纯度金丝桃苷，可以作为制备注射剂用原料。照山白药材资源丰富，叶中金丝桃苷含量也高(0.8-1.3%)，这样对于我们降低原料成本非常有益。结合我们药理实验，发现金丝桃苷对冠心病治疗和预防有明显的作用，所以我们结合现有技术开发成金丝桃苷注射剂。
发明内容
本发明目的就是为了提供一种金丝桃苷原料药的提取分离和静脉注射液的制备方法。本发明是通过以下技术方案实现的:
一种金丝桃苷原料药的提取分离方法，包括以下步骤:
(1)将照山白叶子用其重量10-30倍的10-95%的乙醇加热回流提取，提取2-3次，每次提取时间1-4小时，醇提液减压回收乙醇，浓缩成浸膏；
(2)将上述浸膏再以乙酸乙酯提取2-3次，每次用量为浸膏的8-12倍，每次提取时间为1-2小时，回收乙酸乙酯，得到乙酸乙酯浸膏；
(3)将上述乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析，洗脱溶剂为氯仿-甲醇(9:1-6:4)梯度洗脱，收集含金丝桃苷的流份，回收溶剂，得到粗品金丝桃苷；
(4)将上述粗品金丝桃苷用甲醇进行重结晶2-3次，每次用量为粗品金丝桃苷的8-10倍，得金丝桃苷纯品，含量大于98%。一种金丝桃苷静脉注射液的制备方法，包括以下步骤:
取上述金丝桃苷纯品，与焦亚硫酸钠混合，加入注射用水，溶解，过滤，灭菌，灌装，每支9-10ml ;所述的注射用水和金丝桃苷纯品、焦亚硫酸钠的体积重量比为，每I升注射用水含金丝桃苷纯品2-3g、焦亚硫酸钠2-3g。本发明的优点是:
本发明所用柱层析为硅胶柱，其分离化学成分可以作为注射剂要求，为生产注射用金丝桃苷原料药提供了高效、可行且适用于工业应用的方法，为进一步进行开发注射剂研究打下了基础，本发明生产的金丝桃苷对冠心病治疗和预防有明显的作用。
具体实施例方式实施例1
取照山白叶5000克，将25倍75%的乙醇溶液分2次回流，每次2小时，将所得的滤液合并，于70°C以下减压回收乙醇至无醇味，以浸膏量20倍的乙酸乙酯分2次加热提取，每次2小时，合并乙酸乙酯提取液，回收得乙酸乙酯浸膏，上硅胶柱层析(80X 1200mm),以氯仿-甲醇(9:1)_ (6: 4)，每种比例洗脱体积为柱体积的2倍，收集含有金丝桃苷的洗脱流份，回收溶剂，得到粗品金丝桃苷。粗品金丝桃苷以甲醇10倍量进行重结晶，2-3次后，金丝桃苷纯度可以达到98%以上(HPLC检测)。产量为20g。金丝桃苷注射剂的制备:
取原料金丝桃苷2g，焦亚硫酸钠2g，加入注射用水到1000ml，溶解，过滤，灭菌，灌装，每支10ml。 实施例2:
取照山白叶5000克，将20倍85%的乙醇溶液分2次回流，每次1.5小时，将所得的滤液合并，于70°C以下减压回收乙醇至无醇味，以浸膏量25倍的乙酸乙酯分2次加热提取，每次2小时，合并乙酸乙酯提取液，回收得乙酸乙酯浸膏，上硅胶柱层析(80X 1200mm),以氯仿-甲醇(9:1)_ (6: 4)，每种比例洗脱体积为柱体积的2倍，收集含有金丝桃苷的洗脱流份，回收溶剂，得到粗品金丝桃苷。粗品金丝桃苷以甲醇8倍量进行重结晶，2-3次后，金丝桃苷纯度可以达到98%以上(HPLC检测)。产量为21.5g。金丝桃苷注射剂的制备:
取原料金丝桃苷2g，焦亚硫酸钠3g，加入注射用水到1000ml，溶解，过滤，灭菌，灌装，每支10ml。
权利要求
1.一种金丝桃苷原料药的提取分离方法，其特征在于包括以下步骤 (1)将照山白叶子用其重量10-30倍的10-95%的乙醇加热回流提取，提取2-3次，每次提取时间1-4小时，醇提液减压回收乙醇，浓缩成浸膏； (2)将上述浸膏再以乙酸乙酯提取2-3次，每次用量为浸膏的8-12倍，每次提取时间为1-2小时，回收乙酸乙酯，得到乙酸乙酯浸膏。
2.根据权利要求1所述的金丝桃苷原料药的提取分离方法，其特征在于:继续进行以下步骤: (1)将上述乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析，洗脱溶剂为氯仿-甲醇(9:1-6:4)梯度洗脱，收集含金丝桃苷的流份，回收溶剂，得到粗品金丝桃苷； (2)将上述粗品金丝桃苷用甲醇进行重结晶2-3次，每次用量为粗品金丝桃苷的8-10倍，得金丝桃苷纯品，含量大于98%。
3.—种如权利要求1所述的金丝桃苷静脉注射液的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 取金丝桃苷纯品，与焦亚硫酸钠混合，加入注射用水，溶解，过滤，灭菌，灌装，每支9-10ml ;所述的注射用水和金丝桃苷纯品、焦亚硫酸钠的体积重量比为，每I升注射用水含金丝桃苷纯品2-3g、 焦亚硫酸钠2-3g。
全文摘要
本发明公开了一种金丝桃苷原料药的提取分离和静脉注射液的制备方法，包括以下步骤将照山白叶子用乙醇加热回流提取，醇提液减压回收乙醇，浓缩成浸膏；将上述浸膏再以乙酸乙酯提取2-3次，每次用量为浸膏的8-12倍，每次提取时间为1-2小时，回收乙酸乙酯，得到乙酸乙酯浸膏；进行硅胶柱层析，进行重结晶，得金丝桃苷纯品，制成静脉注射液，本发明所用柱层析为硅胶柱，其分离化学成分可以作为注射剂要求，为生产注射用金丝桃苷原料药提供了高效、可行且适用于工业应用的方法，为进一步进行开发注射剂研究打下了基础，本发明生产的金丝桃苷对冠心病治疗和预防有明显的作用。
文档编号A61P9/10GK103224540SQ201310114419
公开日2013年7月31日 申请日期2013年4月3日 优先权日2013年4月3日
发明者曹明成, 杜安全, 周正华 申请人:合肥创新医药技术有限公司