使用与羧胺三唑乳清酸盐的适时组合疗法增强细胞毒性药物敏感性的方法及组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及使用与羧胺三唑乳清酸盐的组合疗法通过靶向在肿瘤微环境中诱导的导致耐药性的细胞毒性药物的干扰机制来增强它们的敏感性。用羧三唑乳清酸盐滴定特定剂量的细胞毒性药物以改善细胞毒性药物的敏感性和抗癌活性。
【专利说明】使用与羧胺三唑乳清酸盐的适时组合疗法增强细胞毒性药 物敏感性的方法及组合物
[0001] 其他申请的交叉引用
[0002] 本申请是2010年9月3日提交的第12/807, 415号美国专利申请号的部分延续申 请，而该申请又为2009年9月4日提交的第12/584,448号美国专利申请号的部分延续申 请，它们的全部内容通过引用并入本文。 发明领域
[0003] 本发明涉及采用与羧胺三唑乳清酸盐（CT0)的组合疗法，通过靶向肿瘤微环境中 细胞毒性药物的初始机制来增强恶性肿瘤中细胞毒性化学治疗和生物药物（统称为"细胞 毒性"药物）的敏感性和/或耐药性的后续发展。更具体地，本发明涉及与多靶向小分子 CT0组合的特异性细胞毒性药物的方法和组合物，其用于改善细胞毒性药物的敏感性、调节 由肿瘤微环境中细胞毒性药物诱导的机制并防止或降低耐药性的发展，由此导致细胞毒性 药物效能的增强。此类精心设计的包括滴定量的细胞毒性药物和CT0的组合疗法实现最大 效能，而无需依靠与严重毒性有关的剂量密集策略。这样的组合治疗系统会改善患者的生 活质量。
[0004] 发明背景
[0005] 如今，在大多数癌症患者的治疗过程期间有时会使用细胞毒性药物。细胞毒性药 物可以治疗一些原发癌和转移癌，并在许多类型的癌症中有效降低肿瘤体积、治疗症状及 甚至延长寿命。癌症患者中细胞毒性药物的起始剂量是基于食品药品监督管理局对抗癌药 非临床评价（ICHS9)的指南所要求的、体外不同肿瘤细胞系和体内动物肿瘤模型中的治疗 剂量的临床前评价。实验性异种移植肿瘤模型中，剂量反应曲线通常在线性阶段较陡，并当 肿瘤处于剂量反应曲线的线性阶段时剂量降低，在观察到抗肿瘤活性降低之前通常会导致 有效治疗肿瘤的能力损失。尽管异种移植模型可能不代表人类恶性肿瘤的理想模型，但一 般原则已用于临床情况。这样的在剂量中的经验性修改代表了对患有药物敏感性肿瘤的、 接受佐剂或晚期疾病设定的化学治疗的患者治疗失效的主要原因。
[0006] 对接受细胞毒性药物的、患有药物敏感性肿瘤的患者治疗失效的另一原因是细胞 毒性药物对肿瘤微环境的效应，因为化学治疗可引起能够干扰其对肿瘤本身的抗肿瘤活性 的机制。本发明所提供的方法包括CT0以调节微环境中由细胞毒性药物诱导的早期和后期 的变化，从而最小化对其抗肿瘤活性的干扰以改善化学治疗的敏感性，从而实现治疗成功。 更具体地，选择CT0作为组合靶向药物以控制肿瘤微环境中诱导的干扰细胞毒性药物的敏 感性和效能的几种机制。
[0007] 由于在20世纪50年代和20世纪60年代中出现产生用于患有几种类型的实体瘤 和恶性血液病的患者的有疗效的治疗策略的化学治疗，因此对能够导致耐药性的遗传改变 的理解已提供了创新的治疗策略；但不幸的是，在此之前，在确定实现治疗成功所需的敏感 性和有效剂量方面，这些研究没有考虑到化学治疗对肿瘤微环境的早期效应。本发明提供 了方法，其用于i)评价细胞毒性药物对特定肿瘤类型的微环境的效应，ii)鉴别调节抗癌 活性或干扰抗癌活性的机制，iii)选择最小化或防止干扰抗癌活性的机制的组合药物，例 如CTO, iv)确定细胞毒性药物和与CTO的组合化学治疗之间的药效相互作用，以及v)确定 细胞毒性药物和CTO的最佳组合以实现最大效能和最小毒性。
[0008] 换言之，本发明提供了用于确定细胞毒性化学治疗的有效剂量的方法，该化学治 疗基于通过使其与羧胺三唑乳清酸盐（CT0)(-种羧胺三唑（CAI)的乳清酸盐）结合以增 强其敏感性。CAI是受体操纵性钙通道介导的钙流入的抑制剂，并在一些人类癌细胞系（包 括人成胶质细胞瘤细胞）中显示出具有抗增殖和防侵入作用（Ge等，2000)。通过中断作 为第二信使的钙代谢作用，CAI可以抑制钙敏感性信号转导通路，包括花生四烯酸及其代 谢产物的释放；一氧化氮的释放；肌醇磷酸盐的生成；和酪氨酸磷酸化（Ge等，2000 ;Kohn 等，1992)。CAI抑制细胞蛋白STATS和CrkL的磷酸化，并通过下调bcr-abl来诱导耐甲磺 酸伊马替尼的慢性骨髓性白血病细胞的凋亡（Alessandro等，2008)。CT0靶向肿瘤以及肿 瘤的微环境及可以诱导耐药性或干扰抗肿瘤活性的机制。
[0009] 基于对细胞毒性化学治疗对肿瘤微环境的效应的动力学和程度的理解，组合治疗 的时机和持续时间可以确定为细胞毒性药物化学治疗的开始或治疗方案期间的各个阶段。 目前指导化学治疗细胞毒性药物及其剂量的选择的原则不会考虑它们对肿瘤微环境的影 响。因此，所选的治疗癌症的剂量可能包括额外的量以克服微环境中的早期干扰，并因此可 能需要重新评价以实现最佳的治疗成功。
[0010]目前，所建立的细胞毒性药物的给药方案没有把这种干扰纳入细胞毒性药物敏感 性的因素，因此导致所用剂量的增加。剂量密集策略用来实现肿瘤收缩，但是这会在癌症患 者中引起严重的毒性并不利地影响他们的生活质量。亟需防止或降低这种敏感性干扰，而 不使用剂量密集方案。本发明提供了用于开发利用正在使用的现有药物的新药物治疗方案 或者用于开发设计细胞毒性药物和CT0组合的新药的示例，适用于最大化药物敏感性以实 现治疗成功而非采用剂量密集方法。
[0011] 使用细胞毒性药物的化学治疗目前用于四种主要临床情况：1)用于没有其他有 效治疗办法的重病或癌症的初级诱导治疗，2)用于呈现局限性疾病的患者的新辅助治疗， 对于所述患者而言局部形式的治疗如外科手术和/或辐射是不够的，3)用于局部治疗方 法（包括外科手术和/或放射疗法）的辅佐治疗，和4)直接滴注至聚药位点（sanctuary site)或通过身体直接受癌影响的特定区域的位点定向灌注。医生癌症化学治疗药品手册， 编辑E. Chu，V. T. DeVita，Jr，2010。本发明提供了用于在以上四种临床情况的每种情况中开 发新药治疗方案以提高一些细胞毒性药物的敏感性的示例。
[0012] 根据本发明的方法，1)必须鉴别肿瘤是否对特定细胞毒性药物有反应，2)鉴别肿 瘤微环境中可能潜在干扰抗癌活性的分子靶标的特性（profile)，和3)选择最合适的细胞 毒性药物和靶向化学治疗的组合方案，例如细胞毒性药物和CT0。目前与使用治疗癌症的细 胞毒性药物有关的问题是由于干扰抗癌活性的分子靶标不可控而导致的所需剂量高、对正 常细胞的毒性、缺乏选择性和敏感性、免疫抑制和耐药性。
[0013] 耐药性也可以由变得对药物有抗性的恶性细胞引起，并且很多细胞机制可能涉及 改变药物代谢、细胞对药物的渗透性或加速药物消除、改变抑制酶的特异性、或扩增涉及对 化学治疗或生物疗法的抗性的某些基因。这是在如上所述的多次药物暴露之后所观察到 的。
[0014] 例如，编码二氢叶酸还原酶的基因的扩增与对甲氨喋呤的抗性有关，而编码胸核 苷酸合酶的基因的扩增与对使用5-氟吡啶的治疗的抗性有关。
[0015] 替莫唑胺的治疗益处取决于其烷基化/甲基化DNA的能力，最通常发生在鸟嘌呤 残基的N-7或0-6位置。这种甲基化作用破坏DNA并触发肿瘤细胞的死亡。然而，一些肿 瘤细胞能够修复这种类型的DNA破坏，因此通过表达0-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 (MSMT)或0-6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（AGT或AGAT)来消除替莫唑胺的疗效。在一 些肿瘤中，MGMT/AGT基因的表观遗传沉默防止了这种酶的合成，因此这样的肿瘤对替莫唑 胺的杀灭敏感。相反，脑肿瘤中MGMT蛋白的存在预示对替莫唑胺的反应差,且这些患者没 有获得什么益处。但是对替莫唑胺的抗性也与其他因素有关。在GBM患者中，肿瘤起先对 替莫唑胺有反应，之后，即使增加剂量，几个疗程之后肿瘤也变成难治的。这表明其他干扰 因素可能会降低替莫唑胺对癌细胞的敏感性。
[0016] 因此，需要理解替莫唑胺抗性的机制可能与其他机制有关，因为它是少数穿过血 脑屏障的药物之一，并用于治疗恶性胶质瘤和多形性成胶质细胞瘤，但在几个疗程之后变 出现耐药性。
[0017] 存在一些证据，S卩，由阿霉素诱导的肿瘤微环境的改变可能妨碍其递送至肿瘤靶 标，因此阿霉素和CT0的组合方案可以提供保持阿霉素敏感性的解决方法。
[0018] 一些情况中，对药物的抗性可能与肿瘤微环境中干扰细胞毒性药物的敏感性和效 能的分子（例如细胞因子、钙通道信号转导、分子信号转导）的产量增加有关。因此，即使 最合理设想的药物分子也可能失效，这归因于其意欲靶标下游的突变性变化或肿瘤绝不允 许药物到达其靶标或触发针对药物分子的反馈机制的代谢特征。
[0019] 因此，癌症药物疗法和发展需要合理的方法，其依赖于使用细胞毒性药物的肿瘤 缩小的经验性证据、了解肿瘤微环境中化学治疗的实时作用机制、限定针对生物化学和分 子靶标的新的导向结构并使细胞毒性药物最佳运行。本发明满足这种的需求并且还提供 了额外的优势。本发明与现有技术有区别，因为没有一个现有技术解决了防止和/或降低 细胞毒性药物在肿瘤微环境中的影响的问题，所述影响干扰治疗早期的敏感性，然后更持 久的生化变化于治疗后期引发耐药性。本发明提供了与CT0的适时组合疗法，其靶向早期 干扰并因此保持或增强了细胞毒性药物的敏感性，由此避免增加剂量来获得最佳效能的需 求。
[0020] 诱导由CT0控制的一些分子靶标的细胞毒性药物与适当组合剂量和方案的CT0之 组合由此为新的成功的癌症治疗方案提供了更有效和更低毒性的示例，这也是本发明的主 要目标。上述参考的相关主题通过明确引用并入本文。
[0021] 发明概述
[0022] 本发明通过提供用于鉴别目前使用的细胞毒性药物或潜在的新候选物并且当与 最佳剂量的羧胺三唑乳清酸盐（CT0)组合使用时确定每种药物的最佳治疗剂量的方法，旨 在克服现有技术中固有的缺陷。组合疗法改进了细胞毒性药物对肿瘤细胞的敏感性，降低 了肿瘤微环境和肿瘤细胞中干扰和耐药性的发展，并增强了细胞毒性药物的效能。
[0023] 本发明提供了通过靶向肿瘤微环境以抑制对细胞毒性药物和CT0组合的适时组 合疗法的药物干扰和耐药性来增强细胞毒性药物敏感性的方法和组合物。
[0024] 本发明提供了用于开发基于临床前研究和临床研究的药物治疗方案的示例，其用 于提供i)病理类别的肿瘤对特定化学治疗药物的反应的先验知识，ii)对药物的细胞毒 性活性的细胞、生化和分子靶标的理解以及对肿瘤微环境中和耐药性肿瘤细胞中的抗性 机制的理解，和iii)对药物的药物代谢动力学和药效行为的认知和正常器官毒性的模式 (pattern)〇
[0025] 本发明提供了设计细胞毒性药物和靶向化学治疗（例如CTO)的适当组合方案的 示例，所述靶向化学治疗靶向细胞毒性药物的肿瘤微环境中的细胞、生化和分子靶标，从而 使组合方案增强细胞毒性药物的敏感性并防止和/或降低耐药性的发展。
[0026] 本发明提供了对开发组合药物方案的方法的改变，其通过要求在正常啮齿动物及 肿瘤模型的临床前研究中测试不同剂量的细胞毒性药物和靶向肿瘤微环境中负反馈的靶 向化学治疗（CT0)。目前，这样的组合基于从临床前研究和临床研究中使用单个药物进行 的研究而获得的历史数据，而这样的现有技术忽略了药物之间的药效和药代动力学相互作 用，因此使患者置于药物副作用的风险中。当使用细胞毒性药物的剂量密集策略时必须忍 受严重毒性的患者十分需要该方法。
[0027] 本发明的另一实施方案是开发组合方案，其使用生物治疗剂和靶向化学治疗剂 (例如CT0)以靶向由肿瘤微环境中生物制品诱导的负反馈，由此保持生物制品针对肿瘤细 胞的敏感性和效能。
[0028] 鉴于现有技术的上述情形，本发明提供了在临床前研究中药物组合的组合设计， 该临床前研究提供了在正常与荷瘤模型中组合方案的不同组合的关于毒性的可靠信息。换 言之，本发明将会降低在患者中最初的用药方案发展的风险并避免对患者的风险。
[0029] 本发明的目的是提供用于设计一种或多种细胞毒性药物和一种或多种靶向化学 治疗药物（例如CT0)的最佳组合的组合物的方法，其用于增加细胞毒性药物的敏感性、增 强治疗效果并通过采用最佳且通常较低的剂量来降低长期的毒性。换言之，本发明通过适 时组合策略提供剂量稀释的示例。亟需这样的通过稀释化学治疗剂量来改善患者生活质量 的策略。
[0030] 当一些细胞毒性药物与CT0结合时，在细胞毒性药物的敏感性和效能方面，上述 的这样的方法已经产生了出乎预料的对所述一些细胞毒性药物的重要发现。更重要的是， 发现将更低剂量的预先配置治疗剂量的细胞毒性药物与CT0组合，实际上导致更高的效 能。与目前使用的剂量密集策略相比，这种剂量稀释组合策略满足了对降低耐药性、增加敏 感性、提高效能并降低毒性的需求。本发明提供的重要且新颖的方法不仅使用更低剂量的 预先设定的治疗剂量获得更好的效能，而且还获得相关的毒性降低。
[0031] 附图简述
[0032] 图1示出SC植入LOX MVI人黑色素瘤对使用不同剂量CT0的治疗的反应。
[0033] 图2示出SC植入LOX IMVI人黑色素瘤对使用不同剂量替莫唑胺的治疗的反应。
[0034] 图3示出SC植入LOX MVI人黑色素瘤对使用不同剂量CT0和高剂量替莫唑胺 (90mg/kg/剂）的治疗的反应。
[0035] 图4示出SC植入LOX MVI人黑色素瘤对使用不同剂量CT0和低剂量替莫唑胺 (60mg/kg/剂）的治疗的反应。
[0036] 发明详述
[0037] 本发明是通过评价肿瘤微环境中细胞毒性药物的细胞、生化和分子靶标以及通过 利用与癌细胞对细胞毒性药物抗性有关的一些关键基因组和表型的变化而实现的。本发明 提供了用于以下的示例，i)选择用于特定癌症的细胞毒性药物，ii)评价该试剂在体外或 体内的肿瘤微环境中对细胞、生化和分子靶标的作用，iii)选择抑制肿瘤微环境中诱导的 靶标的组合化学治疗来抑制或防止靶标的抗性，用于在非肿瘤小鼠的临床前毒理学研究和 效能研究中用滴定法测量细胞毒性药物和靶向化学治疗（例如CTO)的不同组合，和iv)建 立其的人类起始剂量。
[0038] 这种用于开发治疗方案的示例的目标是为实现最大效能和最小药物相关毒性而 选择的两种或更多种药物的最优组合。这样的用于开发癌症治疗方案的方法迟来已久，并 且亟需该方法来确保成功的治疗以及通过防止细胞毒性癌症药物的过量给药而确保患者 的安全。
[0039] 一@癌症中化学治疗给药方案影响耐药件发展
[0040] 耐药性是在癌症的治疗中化学治疗失效的主要原因，并对绝大多数患有转移性晚 期癌症的患者的死亡负有责任。患者最初对化学治疗反应良好。然而，癌细胞具有显著可 塑性，并且已表明多个化学治疗周期挑选出固有抗性或治疗过程中已发展出抗性的肿瘤细 胞，最终，疾病变得不可医治。
[0041] 肿瘤微环塏中化学治疗的干扰和抗件
[0042] 耐药性可以由肿瘤微环境和癌细胞中的分子因素引起。诸如缺氧区、不规则血 流和供给、细胞外基质、肿瘤内高密度的细胞、高间隙液压（high intersticial fluid pressure)的问题可以产生药理的和物理的屏障，化学治疗药物不能扩散通过这些屏障并 到达肿瘤。或者，细胞膜药物流出运载体的上调可以阻碍药物递送至肿瘤细胞。MDR1基因 的产物，P-糖蛋白（P-gp)是导致癌多重耐药性的关键分子。越来越多的证据表明骨髓源 性细胞（BMDC)促成肿瘤的生长、血管生成和转移。重要地，在对细胞毒性化学治疗的急性 反应中，几种类型的BMDC迅速调动在肿瘤中。这些来自化学治疗处理的小鼠的BMDC和血 浆通过诱导基质金属蛋白酶-9 (MMP9)和上皮-至-间质转变而促进肿瘤细胞中的转移特 性。在静脉注射Lewis肺癌细胞的小鼠中，使用紫杉醇（细胞毒素剂）的治疗以能被MMP9 抑制剂阻断的方式促进转移。因此，通过使用紫杉醇和MMP9抑制剂的组合方案对MMP9进 行抑制可以抑制转移。
[0043] 类似地，一些血管生成疗法已显示出反常地增强血管功能。使用抗体靶向VEGF受 体导致血管功能的暂时改善，称为"血管正常化"，并且与降低的肿瘤缺氧和增加的放射敏 感性有关。然而，这种反应的短暂性使其难以转化为临床实践。VEGF的过表达与致癌信号 转导有关，并且VEGF诱导可以被通过磷酸肌醇-3激酶（PI3K)通路的RAS信号转导而触发。 特别地，由PI3激酶产生的信号转导在癌细胞信号转导中起主要作用。因此，与抗VEGF (例 如CT0)的组合疗法可以防止血管改善并改善抗血管生成疗法。类似地，具有化学治疗细胞 毒素的PI3激酶抑制剂（如CT0)可以改善细胞毒素向肿瘤的递送并提高效能。CT0通过抑 制PI2至PI3的转换而抑制PI3激酶活性。此外，CT0是钙信号转导和通道的抑制剂，其在 垂直靶向PI3激酶以及癌细胞增殖中是重要的。CT0是恶性黑色素瘤细胞生长所需的VEGF 的抑制剂。然而，使用VEGF阻断剂（如贝伐单抗或Aflibercept?)的靶向治疗作为单一 疗法未能降低肿瘤负荷且它们与细胞毒性药物的组合在黑色素瘤的治疗中也已失效。
[0044] 由分子因素产牛的化学治疗干扰和抗件
[0045] 当已对治疗反应的癌突然开始生长时，化学治疗抗性发生。换言之，癌细胞对化学 治疗的作用有抗性。这将需要改变药物或增加剂量。在分子水平的化学治疗抗性有几种可 能原因。没有被化学治疗杀死的一些癌细胞变异且变得耐药。一旦它们倍增，其会对化学 治疗更有抗性。另一原因是基因扩增。一个癌细胞可产生成百个特定基因的拷贝，这触发 了使化学治疗药物无效的蛋白质的过度产生。又一原因是癌细胞可能会使用P-糖蛋白从 细胞汲出药物，或者由于运输药物穿过细胞壁的蛋白停止工作，癌细胞停止摄取药物。又一 原因是癌细胞发展出钝化药物的机制或修补由药物引发的DNA破坏。换言之，当治疗癌症 时，最好的武器是药物敏感性和化学治疗抗性方面的最小可能的干扰。
[0046] 黑色素瘤是高度血管肿瘤，其中VEGF与黑色素瘤患者的发病机理和预后不良有 关。黑色素瘤中的分子不均一性使得难以保持BRAF抑制剂的反应，并且建议PI3激酶可以 限制BRAF突变体黑色素瘤保持对BRAF抑制剂的敏感程度。
[0047] -些药物本身是有毒的，但当与其他试剂组合使用时它们的毒性可能加强，该组 合可能与单独组分的毒性总和相比毒性更强。与化学治疗有关的组织损坏能够激活旁分泌 促存活分泌进程的想法建议抑制由IL-6激活的信号转导通路可能会加强常规化学治疗细 胞毒性的疗效。
[0048] 显现耐药件的化学治疗细朐毒件药物的实例
[0049] 替莫唑胺是已经用于治疗IV级星形细胞瘤（一种侵略性脑瘤，也称多形性成胶质 细胞瘤）的口服烷基化剂。其也用于治疗成人和儿童中的黑色素瘤（一种皮肤癌形式）、 III级多形性成胶质细胞瘤和少突神经胶质瘤及恶性胶质瘤。实验室研究和临床试验正在 调查其是否可能会通过使替莫唑胺与其他试剂组合而进一步增强其抗癌效力。
[0050] 本发明提供了进一步改善替莫唑胺抗肿瘤活性的方法和组合物。特别地，本发明 提供了替莫唑胺和CT0的组合治疗方案以增强敏感性和抗肿瘤活性。
[0051] 更具体地，将组合方案设计成首先用滴定法测量非肿瘤鼠中的两种药物以确定组 合的耐受剂量范围。
[0052] 示例中的下一步是在肿瘤鼠中使用耐受剂量并评价用于实现治疗效果的最有效 的组合。
[0053] 本发明描述了非常出乎预料且新颖的结果，其表明当使用更低剂量的细胞毒性药 物和更低剂量的CT0时观察到最好的组合治疗效果。与公开的文献和实际的临床实践相 反，本发明描述了基于剂量稀释以实现最大治疗效果的方法和组合物。
[0054] 本发明的目的是通过使用细胞毒性药物与CT0的组合方案来降低细胞毒性药物 在肿瘤微环境中引起的干扰，CT0是具有多功能靶标的小分子，其中的一些涉及细胞毒性药 物敏感性的损失和耐药性的发展，如以下详细例示的。 实施例
[0055] 实施例1. if常小鼠中纟目合治疗的滴定
[0056] 第一个实验的目的是评价雌性无胸腺NCr-nu/nu小鼠对5-氨基-1-(4-(4-氯苯 甲酰基）-3, 5-二氯苄基）-1，2, 3-三唑-4-羧酰胺乳清酸盐（CT0)与选自由替莫唑胺、 5-FU、甲氨喋呤、阿霉素和柔红霉素的细胞毒性化学治疗剂的组合治疗的耐受性。
[0057] 聚乙二醇（PEG400, MW400)购自 Aldrich Chemistry。去离子水购自 LabChem, Inc.。Klucel(轻丙基纤维素）购自Aldrich。盐水（生理盐水溶液，仅用于动 物）购自 Nova-Teck, Inc.。Tween80(T80,聚山梨醇酯 80)购自 Fisher Scientific。在收 到CT0(MW580· 76)时于室温下避光保存。CTO在40% PEG400的去离子水中以5L 3mg/mL 的浓度一周配置一次（在1和8天）。每天治疗时制备替莫峻胺? (替莫唑胺，Schering Co.，20mg/胶囊），通过添加几滴T80至粉末，并随后在盐水中加入0. 3% Klucel以得到 4. 5mg/mL的浓度。
[0058] 研究由四组构成，每组5只小鼠，第1天共25只小鼠。组1的动物用CT0与替莫唑 胺的组合治疗，CT0的剂量为513mg/kg/剂，每天一次，连续14天（Q1DX 14,第1-14天）， 替莫唑胺以90mg/kg/剂的剂量给药，每四天一次，共三次治疗（Q4DX3,第1、5和9天）。 组2的动物用CT0与替莫唑胺的组合治疗，CT0按照Q1DX 14时间表剂量为342mg/kg/剂， 替莫唑胺以90mg/kg/剂的剂量按照Q4DX3时间表给药。组3的动物用CT0与替莫唑胺的 组合治疗，CT0按照Q1DX 14时间表剂量为513mg/kg/剂，替莫唑胺以60mg/kg/剂的剂量 按照Q4DX 3时间表给药。组4的动物用CT0与替莫唑胺的组合治疗，CT0按照Q1DX 14时 间表剂量为342mg/kg/剂，替莫唑胺以60mg/kg/剂的剂量按照Q4DX3时间表给药。个体 体重示于表1中。
[0059] 表1-平均体重（g)
[0060]
【权利要求】
1. 提高对化学治疗药物的敏感性的方法，所述方法包括： 给予足够量的所述化学治疗药物， 鉴别肿瘤微环境中诱导的可干扰抗癌活性的机制， 选择靶向在所述肿瘤微环境中干扰所述抗癌活性的所述机制的组合药物， 测量所述化学治疗药物和所述组合药物之间的药效相互作用以选择给药时间和最佳 组合剂量方案，以及 给予所述组合剂量方案以实现最大效能、微环境中的最小干扰或对正常细胞的最小毒 性。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中以足够量选择性地与所述化学治疗药物一起给予 的所述组合药物是羧胺三唑乳清酸盐。
3. 根据权利要求2所述的方法，其中以足够量选择性地与羧胺三唑乳清酸盐一起给予 的所述化学治疗药物是替莫唑胺。
4. 根据权利要求2所述的方法，其中以足够量选择性地与羧胺三唑乳清酸盐一起给予 的所述化学治疗药物是甲磺酸伊马替尼。
5. 根据权利要求2所述的方法，其中以足够量选择性地与羧胺三唑乳清酸盐一起给予 的所述化学治疗药物是盐酸阿霉素。
6. 根据权利要求2所述的方法，其中以足够量选择性地与羧胺三唑乳清酸盐一起给予 的所述化学治疗药物是甲氨喋呤。
7. 提高对化学治疗药物的敏感性的方法，所述方法包括： 给予不同剂量的所述化学治疗药物以确定正常动物中的最大耐受剂量， 鉴别由所述化学治疗剂诱导的干扰化学治疗活性的机制， 选择靶向干扰所述化学治疗活性的所述机制的组合药物， 向所述不同剂量的所述化学治疗药物进一步给予不同剂量的所述组合药物， 测量所述化学治疗药物和所述组合药物之间的药效相互作用以选择正常动物耐受的 组合剂量方案，以及 在植有肿瘤的动物中测试所选的所述组合剂量方案以实现最大抗肿瘤活性和对正常 细胞的最小毒性。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中所选的所述组合方案代表了实现最大抗肿瘤活性 的所述化学治疗药物的剂量和所述组合药物的剂量。
9. 组合方案的药物组合物，其包含实现最大抗肿瘤活性的足够量的化学治疗药物和足 够量的组合药物。
10. 根据权利要求9所述的药物组合物，其中所述化学治疗药物是替莫唑胺，并且所述 组合药物是羧胺三唑乳清酸盐。
【文档编号】A61K31/505GK104125829SQ201380010220
【公开日】2014年10月29日 申请日期:2013年2月19日 优先权日:2012年2月21日
【发明者】拉希达·A·卡马利 申请人:巧妙疗法股份有限公司