专利名称：取代的苯二羧酸二胍酰胺类、其制法、作为医药或诊断剂的用途、和含有它们的医药的制作方法
技术领域：
本发明涉及式I的苯二羧酸二胍酰胺类和其药理学可耐受盐
其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，-OR(32)，-NR(33)R(34)或CF3；R(32)，R(33)和R(34)相互独立地是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(2)是氢，F，Cl，Br，I，OH，-CN，CF3，-CO-N＝C(NH2)2，具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基，具有2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，-CF3，甲基，甲氧基和-NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)是氢或-CH3；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；
R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢或具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基；或R(35)和R(36)一起是4-7个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-，-NCH3或-N-苄基置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)，-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，CF3，CH3，甲氧基，羟基，氨基，甲基氨基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，CF3，CH3，甲氧基，羟基，氨基，甲基氨基和二甲基氨基的取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是如R(25)定义的或者是氢或具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基；R(4)是CF3，具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基，具有2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烯基，-(C3-C8)-环烷基或-(CH2)mR(14)；m是1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，-CF3，甲基，甲氧基和-NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)是氢或-CH3；或R(4)是苯基，它是未取代的或被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基，甲氧基和-
NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)相互独立地是氢或-CH3。优选的式I化合物和其药理学可耐受盐是这类化合物，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，-OR(32)或-CF3；R(32)是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(2)是氢，F，Cl，Br，I，OH，-CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，具有2，3或4个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)或-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，-CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是氢或者具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它是被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
特别优选的式I化合物和其药理学可耐受盐是这类化合物，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，羟基，甲氧基或-CF3；R(2)是氢，F，Cl，OH，-CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，具有2，3或4个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)或-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是氢或者具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
非常优选的式I化合物和其药理学可耐受盐是这类化合物，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，OH，甲氧基或-CF3；R(2)是氢，F，Cl，OH，-CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基或-(CH2)mR(14)；
m是零，1或2；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢或-OR(25)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3和甲氧基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，-CF3，CH3和甲氧基的取代基取代；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
所说的烷基可以是直链或支链的。
(C1-C9)-杂芳基被理解为从苯基或萘基衍生的基团，其中一个或多个CH基被N置换，和/或其中至少两个相邻的CH基(形成五元芳环)被S，NH或O置换。另外，双环基的缩合位置的一个或两个原子(如在中氮茚基中)也可以是N原子。
杂芳基特别是，呋喃基，噻吩基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，三唑基，四唑基，噁唑基，异噁唑基，噻唑基，异噻唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，吲哚基，吲唑基，喹啉基，异喹啉基，2，3-二氮杂萘基，喹喔啉基，喹唑啉基，噌啉基。
如果取代基R(1)至R(5)之一含有一个或多个不对称中心，可以彼此独立地存在S或R构型。化合物可以光学异构体，非对映异构体，外消旋体或其混合物存在。
本发明进一步涉及制备化合物I的方法，其特征在于，使式II化合物与胍反应。
其中R(1′)至R(5′)具有与前面对R(1)至R(5)指出的意义，但取代基R(1′)至R(5′)的至少一个是所说的COL基，其中L是可以容易地被亲核取代的离去基。
其中L是烷氧基，优选甲氧基或苯氧基，苯硫基，甲硫基或2-吡啶硫基，或氮杂环，优选1-咪唑基的式II活化的酸衍生物可有利地以已知方法从下面的羰基氯化物(式II，L＝Cl)得到，而该羰基氯化物本身又可以用已知方法依次从下面的羧酸(式II，L＝OH)例如与亚硫酰氨制备。除了式II的羰基氯化物(L＝Cl)之外，其它式II的活化的酸衍生物可以已知的方法直接从下面的苯二羧酸衍生物(式II，L＝OH)制备，如，例如，其中L＝OCH3的式II的甲基酯，通过用甲醇中的气体HCl处理制备，式II的咪唑化物通过用羰基二咪唑[L＝1-咪唑基，Staab，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1，351-367(1962)]处理，混合的酐II用Cl-COOC2H5或甲苯磺酰氯在三乙胺的存在下在惰性溶剂中处理，以及苯二羧酸用二环己基碳二亚胺(DCC)或用O-[(氰基)乙氧羰基)亚甲基)氨基]-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐](“TOTU”)[Proceedings of the 21stEuropean Peptide Symposium，Peptides1990，Editors E.Giralt andD.Andreu，Escom，Leiden，1991]处理制备。大量用于制备式II的活化的羧酸衍生物的合适方法在J.March，Advanced Organic Chemistry，ThirdEdition(John Wiley&Sons，1985)，p.350中指出。
式I的活化的羧酸衍生物与胍的反应以已知的方法在非质子的极性的但是惰性的溶剂中进行。在苯二羧酸甲基酯(II，L＝OMe)与胍反应的情况下，选用甲醇，异丙醇或THF在20℃和这些溶剂的沸点之间的温度已被证明是合适的。化合物II与无盐的胍的大多数反应有利地在惰性溶剂如THF，二甲氧基乙烷，二噁烷或异丙醇中进行。然而，水也可以用作溶剂。
如果L＝Cl，反应最好在加入缚酸剂的情况下进行，例如以过量的胍的形式结合氢卤酸。在苯基部分被硫，氧或氮取代的化合物引入亲核试剂，通过对于苯二羧酸二烷基酯衍生物的亲核取代文献已知的方法进行。在此取代中，苯二羧酸衍生物上的合适离去基已被证明是卤根和三氟甲磺酸根。反应最好在偶极非质子溶剂如DMF或TMU中，在0℃至溶剂的沸点，优选80℃至溶剂的沸点的温度下进行。所用的缚酸剂最好是碱金属或碱土金属与高碱性和低亲核性阴离子的盐，例如K2CO3或CsCO3。
烷基或芳基取代基通过文献已知的方法，对于钯-介导的芳基卤化物与例如有机锌化合物，有机锡烷，有机硼酸或有机硼烷的交叉偶合被引入。
一般地，苯二羧酸二胍酰胺I是弱碱并可以结合酸，同时形成盐。可能的酸加成盐是所有药理可耐受的酸的盐，例如卤化物盐尤其是盐酸盐，抗坏血酸盐，乳酸盐，硫酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，乙酸盐，磷酸盐，甲磺酸盐和对甲苯磺酸盐。
美国专利5091394(HOE89/F288)和欧洲公开说明书0556674(HOE92/F034)描述了苯甲酰胍，但没有苯二羧酸二胍酰胺。WO94/26709公开了在5-位含有硝基苯基取代基的苯甲酰胍。然而，其中既没有公开多取代的5-苯基苯甲酰胍，也没有建议过。
考虑其药理性质，该化合物杰出地适于作为具有心脏保护成分的抗心律不齐药，用于梗塞预防和梗塞治疗，并用于治疗心绞痛，其中它们也预防性地抑制或大大减少在局部缺血诱导的损伤，尤其是在局部缺血诱导的心律不齐的诱导中的病理过程。因为其对病理性缺氧和局部缺血状况的保护作用，作为细胞的Na+/H+交换机制抑制的结果，本发明式I化合物可以被用作治疗所有急性或慢性的由局部缺血引起的损伤或由其第一或第二诱导的疾病的药物。这涉及其作为用于外科手术，例如在器官移植中的医药的用途，其中该化合物可以被用于在取出之前和过程中保护供体中的器官，例如在用其治疗的过程中或在生理浴液中贮存时，也可以在转移到接受者身体内时以保护取出的器官。该化合物也是在进行外科手术，例如在心脏以及周围血管手术时具有保护作用的有用药物。根据其对局部缺血诱导的损伤的保护作用，该化合物也适于作为用于治疗神经系统，尤其是CNS的局部缺血的药物，其中它们适于例如治疗中风或脑水肿。而且，本发明式I化合物也适于治疗休克，例如，变应性，心原性，血容量减少性和细菌性休克。
本发明式I化合物更杰出的是其对细胞增生，例如纤维细胞增生和血管平滑肌细胞增生的有力抑制作用。式I化合物因此适合作为其中细胞增生是第一或第二原因的疾病的治疗剂，因此可以作为抗动脉粥样硬化药剂，抗糖尿病后期并发症，癌症，纤维性疾病如肺纤维化，肝纤维化或肾纤维化，器官肥大和增生，尤其是前列腺增生或前列腺肥大的药。
本发明的化合物是细胞的钠-质子对输剂(Na+/H+交换剂)的有效抑制剂，该对输剂在许多疾病中(原发性高血压，动脉粥样硬化，糖尿病等等)升高，甚至在那些容易测量的细胞中，如，在红血球，血小板或白血球中。本发明化合物因此适于作为杰出的和简单的科学工具，例如在其作为诊断剂用于确定和区分某些高血压的形式，以及动脉粥样硬化，糖尿病，增生性疾病等等的用途。式I化合物进一步适合预防性治疗，用于防止高血压，例如原发性高血压的发生。
与公知的化合物相比，本发明化合物具有显著改进的水溶性。因此它们明显地更适于静脉内给药。
与已知的易溶于水的化合物相比，本发明化合物在其生物学药效率和药物动力学上是杰出的。
含有化合物I的药物可以口服，非肠胃，静脉内，直肠或吸入给药，优选的给药形式取决于疾病的特定临床状况。化合物可以单独使用或与药物辅助剂一起使用，用于例如兽医以及人的医药中。
基于其专业知识，本专业技术人员熟知哪些辅助剂适合制备药物制剂。除溶剂之外，例如，胶凝剂，栓基，片剂辅助剂和其他活性化合物赋形剂，抗氧化剂，分散剂，乳化剂，消泡剂，矫味剂，防腐剂，稳定剂或着色剂可被应用。对于口服给药的形式，活性化合物与适合此目的的添加剂如赋形剂，稳定剂或惰性稀释剂混合，并由常规方法变成适当的给药形式如片剂，包衣片剂，硬胶囊，水，醇或油溶液。可被应用的惰性赋形剂有例如阿拉伯胶，氧化镁，碳酸镁，磷酸钾，乳糖，葡萄糖或淀粉，尤其是玉米淀粉。在此情况下，可以制备干或湿的颗粒。合适的油性赋形剂或溶剂有例如植物或动物油，如葵花籽油或鱼肝油。
对于皮下或静脉内给药，活性化合物被导入溶液，悬浮液或乳化液中，如果需要，与用于此目的的常规物质如增溶剂，乳化剂或其他辅助剂一起配成。可能的溶剂有例如水，生理食盐水溶液或醇类，例如乙醇，丙醇，甘油，也可额外有糖溶液如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或各种所述溶剂的混合物。
适于以气雾剂或喷雾剂形式给药的药物制剂有，例如，式I的活性化合物在药用溶剂如，尤其是，乙醇或水，或这类溶剂的混合物中的溶液，悬浮液或乳化液。如果需要，制剂也可以还含有其他药物辅助剂如表面活性剂，乳化剂和稳定剂以及推进剂。这类制剂一般含有活性化合物的浓度为约0.1至10，尤其是约0.3至3％重量。
被给药的式I活性化合物的剂量和给药的频率依赖于所用化合物的作用强度和周期；也依赖于被治疗疾病的严重性和被治疗的哺乳动物的性别，年龄，体重和个体反应。平均地，在患者体重大约75kg的情况下，式I化合物的日剂量至少是0.001mg/kg体重，优选至少0.01mg/kg体重，最高10mg/kg体重，优选最多1mg/kg。在疾病急性发作时，例如在心肌梗塞发作之后，更高和更频繁的剂量也是必需的，例如高达每天4个单剂量。尤其是当静脉内给药时，例如在梗塞患者的情况下，以非常小心的单位高达每天100mg将是必需的。
缩写如下所列Bn 苄基Brine饱和NaCl水溶液CH2Cl2二氯甲烷DCl 解吸化学离子化DIP 二异丙基醚DMA 二甲基乙酰胺DME 二甲基乙烷DMF N，N-二甲基甲酰胺EA 乙酸乙酯(EtOAc)EI 电子轰击eq 当量ES 电子喷射离子化Et 乙基FAB 快速原子轰击HEP 正庚烷HOAc 乙酸Me 甲基MeOH 甲醇mp 熔点MTB 甲基叔丁基醚NBS N-溴代丁二酰亚胺NMP N-甲基吡咯烷酮RT 室温THF 四氢呋喃TMU N，N，N′，N′-四甲基脲Tol甲苯CNS中枢神经系统实验部分从苯二羧酸二烷基酯(II，L＝O-烷基)制备苯二羧酸二胍酰胺(I)的一般工艺5mmol式II的苯二羧酸二烷基酯和50mmol胍(游离碱)溶于5ml异丙醇中，并在回流下沸腾(典型的反应时间为5分钟至5小时)直至反应完成(薄层检测)。然后将混合物用150ml水稀释，抽滤产物。如果合适，用合适的洗脱剂例如EA/MeOH51进行硅胶层析。实施例15-叔丁基间苯二甲酸二胍酰胺
2.9g 5-叔丁基间苯二甲酸二甲酯根据用于制备苯二羧酸二胍酰胺(I)的一般工艺步骤反应(反应时间10分钟)。得到2.7g白色晶体，mp＞270℃。Rf(丙酮/水10∶1)＝0.13MS(ES)305(M+H)+实施例25-[3，5-二(三氟甲基)苯基]间苯二甲酸二胍酰胺
600mg 5-[3，5-二(三氟甲基)苯基]间苯二甲酸二甲酯根据用于制备苯二羧酸二胍酰胺(I)的一般工艺步骤反应(反应时间10分钟)。得到580mg白色晶体，mp248℃(分解)。Rf(丙酮/水10∶1)＝0.21MS(FAB)461(M+H)+2a5-[3，5-二(三氟甲基)苯基]间苯二甲酸二甲酯将3.73g5-溴代间苯二甲酸二甲基酯，2.74g3，5-二(三氟甲基)苯基硼酸，2.1gNa2CO3，25mg乙酸钯(II)和525mg三苯膦于100℃在100ml甲苯和20ml水中搅拌3小时。混合物被冷却，用200ml EA稀释，并每次用100ml饱和NaHCO3水溶液萃取两次。有机相用Na2SO4干燥，真空除去溶剂。用EA/HEP1∶8硅胶层析，产生1.3g浅黄色固体，mp151℃。Rf(EA/HEP1∶8)＝0.21 MS(FAB)407(M+H)+实施例3-5的标题化合物类似于实施例2合成，而二甲基酯前体类似于2a得到。实施例35-(3，5-二氯苯基)间苯二甲酸二胍酰胺
mp250℃(分解)Rf(丙酮/水10∶1)＝0.13MS(ES)393(M+H)+实施例45-(2，4-二氯苯基)间苯二甲酸二胍酰胺
mp＞250℃(分解)Rf(丙酮/水10∶1)＝0.15MS(ES)393(M+H)+实施例55-(3-氯-4-氟苯基)间苯二甲酸二胍酰胺
mp231℃(分解)Rf(丙酮/水10∶1)＝0.14MS(ES)377(M+H)+实施例65-环己基间苯二甲酸二胍酰胺
(a)5-环己基间苯二甲酸二甲酯22ml 2M氯化环己基镁的乙醚溶液被滴加到100ml氯化锌在THF中的0.5M溶液。混合物在50℃搅拌5小时，有机锌化合物直接作为溶液A反应。3.9g间苯二甲酸二甲酯，420mg氯化[1，1-二(二苯基膦)二茂铁]Pd(II)和130mg CuI被悬浮在70mlTHF中。然后将溶液A在室温下滴加，并在此温度搅拌8小时。反应混合物被倒入300ml饱和NaHCO3水溶液中，用100ml水稀释，滤除沉淀，每次用200mlEA萃取4次。有机相用Na2SO4干燥并真空除去溶剂。用EA/HEP1∶4硅胶层析，产生2.7g无色油状物。Rf(EA/HEP1∶4)＝0.40 MS(FAB)277(M+H)+b)5-环己基间苯二甲酸二胍酰胺5.3g盐酸胍被溶于55ml DMF，在RT滴加5.6g叔丁醇钾溶于50mlDMF的溶液。混合物随后在室温下搅拌2小时，然后滴加1.4g5-环己基间苯二甲酸二甲酯在15mlDMF中的溶液，并在室温下搅拌24小时。反应混合物被倒入1l水中，每次用100ml EA萃取3次。有机相用Na2SO4干燥并真空除去溶剂。剩余物悬浮于50mlEA中，用马来酸在EA中的饱和溶液调节至pH＝2-3。滤除晶状残渣，用50ml EA洗涤，随后溶于各自50ml的饱和Na2CO3水溶液，饱和NaHCO3水溶液和水中，游离碱通过每次用100mlEA萃取3次。有机相用Na2SO4干燥并真空除去溶剂。得到1.1g无色晶体，mp219-220℃Rf(丙酮/水10∶1)＝0.23MS(FAB)331(M+H)+药理数据兔红血球Na+/H+交换剂的抑制新西兰白兔(Ivanovas)用2％胆甾醇标准喂养六周以活化Na+/H+交换，这样可以通过火焰分光计测定Na+通过Na+/H+交换流入红血球的流量。血液取自耳动脉并用25IU肝素钾保持不凝。每个样品的一部分被用于通过离心重复测定血细胞比容。在每种情况下，100μl的等分试样被用于测量红血球的Na+起始含量。
为了测定咪吡嗪-敏感的钠流入，100μl的每种血液样品在各种情况下，在5ml容积高渗的盐-蔗糖培养基(mmol/l140NaCl，3KCl，150蔗糖，0.1哇巴因，20三-羟甲基氨基甲烷)中在pH7.4和37℃温育。红血球然后用冰冷的MgCl2哇巴因溶液(mmol/l12MgCl2，0.1哇巴因)洗涤，并在2.0ml蒸馏水中均化。细胞内的钠含量通过火焰分光计测定。
净的Na+流入从钠的起始值与温育后的钠含量之间的差计算。咪吡嗪可抑制的钠流入由在用与不用咪吡嗪3×10-4mol/l温育后的红血球钠含量之间的差产生。此过程也被用于本发明化合物的情况。结果Na+/H+交换剂的抑制
权利要求
1.式I的苯二羧酸二胍酰胺类有其药理学上可耐受盐
其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，-OR(32)，-NR(33)R(34)或CF3；R(32)，R(33)和R(34)相互独立地是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(2)是氢，F，Cl，Br，I，OH，-CN，CF3，-CO-N＝C(NH2)2，具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基，具有2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，-CF3，甲基，甲氧基和-NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)是氢或-CH3；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢或具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基；或R(35)和R(36)一起是4-7个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-，-NCH3或-N-苄基置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)，-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，CF3，CH3，甲氧基，羟基，氨基，甲基氨基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，CF3，CH3，甲氧基，羟基，氨基，甲基氨基和二甲基氨基的取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是如R(25)定义的或者是氢或具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基；R(4)是CF3，具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烷基，具有2，3，4，5，6，7或8个碳原子的烯基，-(C3-C8)-环烷基或-(CH2)mR(14)；m是1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-3个选自F和Cl，-CF3，甲基，甲氧基和-NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)是氢或-CH3；或R(4)是苯基，它是未取代的或被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基，甲氧基和-NR(15)R(16)的取代基取代；R(15)和R(16)相互独立地是氢或-CH3。
2.如权利要求1的式I化合物及其药理学可耐受盐，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，-OR(32)或-CF3；R(32)是氢，具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(2)是氢，F，Cl，Br，I，OH，CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，具有2，3或4个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)或-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，-CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基组成的一组取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是氢或者是具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它是被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
3.如权利要求1或2的式I化合物及其药理学可耐受盐，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，羟基，甲氧基或-CF3；R(2)是氢，F，Cl，OH，-CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基，具有2，3或4个碳原子的烯基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C3-C8)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是R(22)-SO2-，R(23)R(24)N-CO-，R(28)-CO-或R(29)R(30)N-SO2-；R(22)和R(28)相互独立地是甲基或-CF3；R(23)，R(24)，R(29)和R(30)相互独立地是氢或甲基；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢，-SR(25)，-OR(25)，-NR(25)R(26)或-CR(25)R(26)R(27)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3，甲氧基和二甲基氨基的取代基取代；R(26)和R(27)相互独立地是氢或者是具有1，2，3或4个碳原子的烷基；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
4.如权利要求1至3的式I化合物及其药理学可耐受盐，其中基团R(1)，R(2)，R(3)和R(5)之一是-CO-N＝C(NH2)2；而R(1)，R(2)，R(3)和R(5)的其它基团在各种情况下是R(1)和R(5)相互独立地是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基，F，Cl，OH，甲氧基或-CF3；R(2)是氢，F，Cl，OH，-CF3，具有1，2，3或4个碳原子的烷基或-(CH2)mR(14)；m是零，1或2；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(2)是-OR(35)或-NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地是氢，甲基或乙基；或R(35)和R(36)一起是4-5个亚甲基，其中一个CH2基可被氧，-S-，-NH-或-NCH3置换；R(3)是氢或-OR(25)；R(25)是氢或具有1，2，3或4个碳原子的烷基或苯基；它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，CF3，CH3和甲氧基的取代基取代；或R(25)是-(C1-C9)-杂芳基，它是未取代的或被1-2个选自F，Cl，-CF3，CH3和甲氧基的取代基取代；R(4)是-CF3，具有1，2，3，4，5或6个碳原子的烷基，具有2，3，4，5或6个碳原子的烯基，-(C5-C6)-环烷基或-CH2R(14)；R(14)是-(C5-C6)-环烷基或苯基，它是未取代的或被1-2个选自F和Cl，-CF3，甲基和甲氧基的取代基取代；或R(4)是苯基，它被2，3，4或5个选自F，Cl，CF3，甲基和甲氧基的取代基取代。
5.制备如权利要求1中的化合物I的方法，其特征在于，使式II化合物与胍反应
其中R(1′)至R(5′)具有与前面对R(1)至R(5)指出的意义，而L是可以容易地被亲核取代的离去基。
6.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备用于治疗或预防由局部缺血引起的疾病的医药。
7.治疗或预防由局部缺血引起的疾病的方法，其特征在于，将有效量的如权利要求1中的化合物I与常规添加剂混合，并将其以合适的给药形式给药。
8.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗或预防心肌梗塞和心律失常的医药。
9.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗或预防心绞痛的医药。
10.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗或预防心脏局部缺血状态的药物。
11.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗或预防外周和中枢神经系统的和中风的局部缺血状态的医药。
12.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗或预防外周器官和四肢的局部缺血状态的医药。
13.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗休克状态的医药。
14.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种用于外科手术和器官移植的医药。
15.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种用于保藏和储存作为外科措施的移植物的医药。
16.如权利要求1中的化合物I的应用，用于制备一种治疗由于细胞纤维化作为第一和第二原因的疾病的医药，以及因此作为抗动脉粥样硬化药的应用，作为抗糖尿病后期并发症、癌症、纤维性疾病如肺纤维化、肝纤维化或肾纤维化、前列腺肥大的医药的应用。
17.权利要求1的化合物I的应用，用于制备一种抑制Na+/H+交换诊断低血压和增生性疾病的科学工具药。
18.医药、含有有效量的如权利要求1-4中一个或多个定义的化合物I。
全文摘要
式I的苯二羧酸二胍酰胺类其中R(1)至R(5)具有在权利要求书中给出的意义，它是有用的具有心脏保护成分的抗心律不齐药，也用于预防局部缺血诱导的损伤，尤其是在局部缺血诱导的心律不齐。作为细胞的Na
文档编号G01N33/49GK1153169SQ9611449
公开日1997年7月2日 申请日期1996年11月18日 优先权日1996年11月18日
发明者H-W·克里曼, J·布伦德尔, J-R·施沃克, A·威彻特, H·J·兰, U·阿尔伯斯, W·肖尔茨 申请人:赫彻斯特股份公司