1.一种灭活的寨卡病毒疫苗,其特征在于,寨卡病毒抗原含量为100-1600U/ml,且总蛋白含量低于20μg/ml。
2.如权利要求1所述的灭活的寨卡病毒疫苗,其特征在于,寨卡病毒抗原含量为800U/ml。
3.如权利要求1所述的灭活的寨卡病毒疫苗,其特征在于,通过以下步骤制备得到:
(1)利用为载体培养细胞技术培养Vero细胞,当细胞生长成致密单层时,接种寨卡病毒工作种子,培养;
(2)将病毒培养液澄清过滤后收获病毒液,灭活;
(3)灭活的病毒液超滤浓缩,浓缩后的病毒液采用蔗糖密度区带离心;
(4)离心产物超滤脱糖,得到脱糖液;将脱糖液进行离子交换,得到层析液;层析液进行浓缩、除菌即为原液;
(5)将原液稀释,加入佐剂,得到疫苗半成品。
4.如权利要求3所述疫苗,其特征在于,步骤(2)所述的病毒培养液为M199与DMEM/F12按照体积比1:1混合得到。
5.一种制备灭活的寨卡病毒疫苗的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)利用为载体培养细胞技术培养Vero细胞,当细胞生长成致密单层时,接种寨卡病毒工作种子,培养;
(2)将病毒培养液澄清过滤后收获病毒液,灭活;
(3)灭活的病毒液超滤浓缩,浓缩后的病毒液采用蔗糖密度区带离心;
(4)离心产物超滤脱糖,得到脱糖液;将脱糖液进行离子交换,得到层析液;层析液进行浓缩、除菌即为原液;
(5)将原液稀释,加入佐剂,得到疫苗半成品。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(1)当细胞生长成致密单层时,按照MOI为0.05-0.3接种寨卡病毒工作种子,培养温度为35-37℃,培养时间为72-96小时。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中灭活方法为单次收获液中加入终浓度为100-400μg/ml的甲醛,37℃,灭活4-7天。
8.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(3)病毒液浓缩倍数为10-100倍,膜包可截留分子质量为100-300KD。
9.如权利要求4-7任一所述的方法,其特征在于,步骤(3)的蔗糖密度区带离心方法为:依次从离心机边孔以50-100rpm依次泵入超离缓冲液,超滤浓缩后的病毒液,低浓度蔗糖溶液,最后以50-150rpm泵入高浓度蔗糖溶液直至中孔流出液体离心转速为28000-35000rpm,离心时间为:6-20小时,离心温度为2-8℃;
低浓度蔗糖溶液蔗糖质量百分比为25%-45%,高浓度蔗糖溶液蔗糖质量百分比为55%-60%,超离缓冲液为0.01-0.05MPBS,pH值为:6.0-7.5。
10.如权利要求4-7任一所述的方法,其特征在于,将原液稀释至200-3200U/ml,与佐剂按照1:1等体积混匀。