一种具有胃粘膜保护功能的组合物及制剂的制作方法

本发明属于保健食品及药品领域，具体地涉及一种药食同源的中药组合物及制剂在酒精所导致胃粘膜损伤保护作用的应用。

背景技术：

现代人工作、生活节奏加快，饮食无规律，饮酒日益严重，频频出现胃部灼烧感、反酸、胃粘膜损伤等情况。胃粘膜损伤已是严重影响生活质量的一个因素。饮酒成为许多人进行社会交际、应酬中不可缺少的方式和手段，近年来酒精依赖的人群数量呈现显著上升的趋势，由此，酒精所造成的急慢性胃粘膜损伤类疾病的发生数量也在临床上增加。酒精会对胃粘膜组织造成不同程度的损伤，其损伤程度与饮酒年限、频数、饮用量以及酒精度具有密切关系，长期或大量饮用高度酒极易引起胃粘膜病变。乙醇对胃粘膜组织具有腐蚀性，因此会导致胃粘膜上皮细胞、粘膜下血管的直接损伤，上皮细胞及血管内皮的损伤又会进一步导致粘膜局部产生大量炎性介质，引起中性粒细胞浸润而加重局部损伤的程度，目前研究结果表明酒精可通过多种途径导致胃粘膜充血、水肿以及糜烂出血等严重的后果。中医通常将胃粘膜损伤性疾病归结为“胃院痛”、“反胃”、“嗜杂”、“吞酸”的范畴，属于西医的胃炎、胃溃疡等疾病，临床常见胃疼、反酸、恶心、呕吐、烧心等症状。中医药在预防和治疗胃粘膜损伤方面具有明显优势，认为酒精所致急性胃粘膜损伤的中医症候可主要归为饮食伤胃、淤血停胃两种情况，中药的治疗主要涉及补气药、活血化瘀药、理气健脾药等。

人参为名贵药用植物，具有悠久的应用历史，其药用价值早已经被世人所公认，素有“百草之王”的美誉。人参中含有人参皂苷、糖类、氨基酸、维生素、多肽以及各种微量元素等。《神农本草经》就有人参“主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目开心益智，久服轻身延年。”的记载。同时，现代医学的研究也表明，人参具有抗癌、抗衰老、提高免疫力、抑制细胞凋亡、调节内分泌等作用。

山药块茎中含有丰富营养成分，除蛋白质(18种氨基酸)、维生素、多糖和矿质元素外，尚含有多种药用保健成分，如粘液蛋白(多糖与蛋白质的复合体)、淀粉酶、尿囊素、薯蕷皂苷(水解后可得薯蓣苷元)、脱氧表雄酮、胆碱、盐酸多巴胺以及多种有机物。现代药理学研究表明，调剂机体免疫力、抗衰老、抗肿瘤、降血脂、降血糖等作用。

大枣为鼠李科的成熟果实，与桃、李、栗、杏并称为古代五果。大枣富含蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。我国的第一部中药学专著《神农本草经》将大枣列为上品，称其有“安中养脾，助十二经，平胃气，通九窍，，补少气”等功效。大枣中含有多种生物活性物质，如大枣多糖、皂苷类、黄酮类、三萜类、生物碱类、环磷酸腺苷等，对人体有多种保健功效。

甘草的主要有效成分是三萜类化合物和黄酮类化合物，另外，还从甘草中分离得到香豆素类、氨基酸、生物碱、雌激素和有机酸等化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、保肝等多种药理活性。

以上四种中药均列入国家卫生计生委于2014年11月颁布的“101种药食同源品种目录”。

目前，尚未有采用上述四种药食同源品种制备胃粘膜保护功能组合物的报道。

技术实现要素：

本发明的目的提供一种疗效确切的具有胃粘膜保护功能的组合物。

本发明的第二个目的是提供疗效确切的具有胃粘膜保护功能的组合物在制备预防酒精所导致胃黏膜损伤保健食品的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种具有胃粘膜保护功能的组合物，按重量用下述组份制成：山药原粉4-12份；人参提取物0.4-4.4份；大枣挥发油1-5份；大枣提取物1-5份；甘草提取物1-3份；改性山药淀粉1-3份，酸味剂1-3份。

山药原粉8份；人参提取物1份；大枣挥发油2份；大枣提取物4份；甘草提取物2份；改性山药淀粉为3份，酸味剂1-3份。

山药原粉用下述方法制成：新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.2-0.6％维生素C水溶液中护色5-15min，切片，蒸制30-60min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120-200目筛网，得山药原粉。

大枣挥发油及大枣提取物用下述方法制成：

(1)大枣去核粉碎，加5-8倍质量蒸馏水浸泡30-60min，水蒸气蒸馏2-4h，分离得到大枣挥发油、蒸馏液和药渣；

(2)将所述药渣加8-10倍质量蒸馏水煎煮2次，每次1-2h，过滤，滤液与步骤(1)获得的蒸馏液合并，浓缩后喷雾干燥得到大枣提取物。

山药改性淀粉用下述方法制成：

(1)新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.2-0.6％维生素C水溶液中护色5-15min，切片，蒸制30-60min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120-200目筛网；

(2)取步骤(1)获得的山药原粉，加2.5-4.0质量倍蒸馏水，混匀，于60-80℃水浴中搅拌10-30min；按照1克山药原粉与50～70U的比例加入α-淀粉酶酶，调节pH值为5.0-6.0，反应40-60min；降温到40-50℃，调节pH为4.5-5.5，按照1克山药原粉与3-5U的比例加入普鲁兰酶，搅拌18-32h；得酶解液，将酶解液于4℃冷藏10-20h；

(3)按体积比为1：1～2的比例，向冷藏后的酶解液中加入无水乙醇，震荡15-30min，离心，除去乙醇，沉淀用用蒸馏水洗涤2-3次，干燥粉碎后过120-200目筛，得到酶改性山药抗性淀粉。

酸味剂是柠檬酸、苹果酸、富马酸、酒石酸、抗坏血酸、柠檬酸钠、苹果酸钠、富马酸钠、酒石酸钠和抗坏血酸钠中的至少一种。

一种具有胃粘膜保护功能的组合物在制备预防酒精所导致胃黏膜损伤保健食品的应用。

保健食品的制剂为口服固体制剂或口服液体制剂。

口服固体制剂的剂型为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、咀嚼片或膜剂，以及其它的口服固体制剂。

口服液体制剂的剂型为合剂、糖浆剂、溶液剂、胶体溶液或乳剂，以及其它的口服液体制剂。

本发明利用现代食品加工技术，通过在本发明的具有胃粘膜保护功能的组合物中加入食品可接受的辅料，制备出散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂或膜剂等固体制剂；或制备出合剂、糖浆剂、溶液剂、胶体溶液或乳剂等液体制剂，使各个制剂口感细腻，甜味适中，爽口，产品易保存、携带方便，实验证明，在饮酒前食用能够保护胃粘膜，预防酒精所导致胃粘膜损伤。

附图说明

图1为实施例10、11、12对90％乙醇诱导的急性胃黏膜损伤的预防作用。

图2实施例10、11、12对乙醇致急性胃黏膜损伤的病理学影响(H&E染色).A×40倍；B×100倍。

图3实施例10、11、12对50％乙醇引起的慢性胃黏膜损伤的保护作用。

图4实施例10、11、12对50％乙醇致慢性胃黏膜损伤的病理学影响(H&E染色).A×40倍；B×100倍。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，本发明的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发明作任何限制。

各实施例使用的人参提取物采用国家食品药品监督管理局发布的人参提取物技术要求(征求意见稿)人参提取物的提取制备方法，取人参，粉碎成粗粉，加70％～75％乙醇回流提取3次，每次1h，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇至相对密度为1.10～1.15(80℃)浸膏，喷雾干燥，即得。

甘草提取物根据2010版药典中甘草浸膏的制备方法，甘草药材粉碎成粗粉，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，浓缩后喷雾干燥。

实施例1

山药原粉的制备：

新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.4％维生素C水溶液中护色10min，切成2-5mm片，蒸制45min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120目筛网，得山药原粉。

实施例2

山药原粉的制备：

新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.2％维生素C溶液中护色15min，切成2-5mm片，蒸制30min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120目筛网，得山药原粉。

实施例3

山药原粉的制备：

新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.6％维生素C溶液中护色5min，切成2-5mm片，蒸制60min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过200目筛网，得山药原粉。

实施例4

大枣挥发油及大枣提取物的制备：

(1)大枣去核粉碎，加6倍质量蒸馏水浸泡45min，水蒸气蒸馏3h，分离得到大枣挥发油、蒸馏液和药渣；

(2)将药渣加9倍质量蒸馏水煎煮2次，每次1.5h，过滤，滤液与步骤(1)获得的蒸馏液合并，浓缩后喷雾干燥得到大枣提取物。

实施例5

大枣挥发油及大枣提取物的制备：

(1)大枣去核粉碎，加5倍质量蒸馏水浸泡60min，水蒸气蒸馏2h，分离得到大枣挥发油、蒸馏液和药渣；

(2)将所述药渣加8倍质量蒸馏水煎煮2次，每次2h，过滤，滤液与步骤(1)获得的蒸馏液合并，浓缩后喷雾干燥得到大枣提取物。

实施例6

大枣挥发油及大枣提取物的制备：

(1)大枣去核粉碎，加8倍质量蒸馏水浸泡30min，水蒸气蒸馏4h，分离得到大枣挥发油、蒸馏液和药渣；

(2)将所述药渣加10倍质量蒸馏水煎煮2次，每次1h，过滤，滤液与步骤(1)获得的蒸馏液合并，浓缩后喷雾干燥得到大枣提取物。

实施例7

山药改性淀粉的制备：

(1)新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.4％维生素C水溶液中护色10min，切成2-5mm片，蒸制45min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120目筛网；

(2)取步骤(1)获得的山药原粉，加3.5质量倍蒸馏水，混匀，于70℃水浴中搅拌20min；按照1克山药原粉与60U的比例加入α-淀粉酶酶，调节pH值为5.5，反应50min；降温到45℃，调节pH为5，按照1克山药原粉与4U的比例加入普鲁兰酶，搅拌25h；得酶解液，将酶解液于4℃冷藏15h；

(3)按体积比为1：1.5的比例，向冷藏后的酶解液中加入无水乙醇，震荡22min，离心，除去乙醇，沉淀用用蒸馏水洗涤3次，干燥粉碎后过120目筛，得到酶改性山药抗性淀粉。

实施例8

山药改性淀粉的制备：

(1)新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.2％维生素C水溶液中护色15min，切成2-5mm片，蒸制30min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过120目筛网；

(2)取步骤(1)获得的山药原粉，加2.5质量倍蒸馏水，混匀，于60℃水浴中搅拌30min；按照1克山药原粉与50U的比例加入α-淀粉酶酶，调节pH值为5.0，反应60min；降温到40℃，调节pH为4.5，按照1克山药原粉与3U的比例加入普鲁兰酶，搅拌32h；得酶解液，将酶解液于4℃冷藏10h；

(3)按体积比为1：1的比例，向冷藏后的酶解液中加入无水乙醇，震荡30min，离心，除去乙醇，沉淀用用蒸馏水洗涤2次，干燥粉碎后过120目筛，得到酶改性山药抗性淀粉。

实施例9

山药改性淀粉的制备：

(1)新鲜山药去皮，浸入质量百分比为0.6％维生素C水溶液中护色5min，切成2-5mm片，蒸制60min，干燥至含水质量低于10％，粉碎，过200目筛网；

(2)取步骤(1)获得的山药原粉，加4.0质量倍蒸馏水，混匀，于80℃水浴中搅拌10min；按照1克山药原粉与70U的比例加入α-淀粉酶酶，调节pH值为6.0，反应40min；降温到50℃，调节pH为5.5，按照1克山药原粉与5U的比例加入普鲁兰酶，搅拌18h；得酶解液，将酶解液于4℃冷藏20h；

(3)按体积比为1：2的比例，向冷藏后的酶解液中加入无水乙醇，震荡15min，离心，除去乙醇，沉淀用用蒸馏水洗涤3次，干燥粉碎后过200目筛，得到酶改性山药抗性淀粉。

实施例10

一种具有胃粘膜保护功能的组合物，按重量用下述组份制成：实施例1制备的山药原粉8份；人参提取物1份；实施例4制备的大枣挥发油2份；实施例4制备的大枣提取物4份；甘草提取物2份；实施例7制备的改性山药淀粉3份，柠檬酸2份。

用柠檬酸钠替代本实施例的柠檬酸，其它同本实施例，组成具有胃粘膜保护功能的组合物。

实施例11

一种具有胃粘膜保护功能的组合物，按重量用下述组份制成：实施例2制备的山药原粉4份；人参提取物4.4份；实施例5制备的大枣挥发油1份；实施例5制备的大枣提取物5份；甘草提取物1份；实施例8制备的改性山药淀粉3份，苹果酸1份。

用苹果酸钠替代本实施例的苹果酸，其它同本实施例，组成具有胃粘膜保护功能的组合物。

实施例12

一种具有胃粘膜保护功能的组合物，按重量用下述组份制成：实施例3制备的山药原粉12份；人参提取物0.4份；实施例6制备的大枣挥发油5份；实施例6制备的大枣提取物1份；甘草提取物3份；实施例9制备的改性山药淀粉1份，富马酸1份，酒石酸1份、抗坏血酸1份。

用富马酸钠、酒石酸钠和抗坏血酸钠替代本实施例中的富马酸，酒石酸和抗坏血酸，其它同本实施例，组成具有胃粘膜保护功能的组合物。

将实施例10、11、12的组合物加入食品可接受的辅料，按常规技术制备口服固体制剂或口服液体制剂。

口服固体制剂的剂型如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、咀嚼片或膜剂。

口服液体制剂的剂型如合剂、糖浆剂、溶液剂、胶体溶液或乳剂。

实验部分

本实验采用两个不同浓度乙醇(50％和90％)建立小鼠胃黏膜慢性及急性损伤模型，用胃黏膜损伤指数及胃组织病理学评价胃黏膜损伤模型建立成功与否，探讨本发明的组合物对高浓度乙醇所致的急性胃黏膜损伤的预防作用和长期中浓度乙醇所致慢性胃黏膜损伤的保护作用。

1.实施例10、11、12对90％乙醇诱导的急性胃黏膜损伤的作用

60只昆明种雄性小鼠，按体重大小随机分为6组，苦味酸标记：

空白组(Control)、

模型组(Model)、

达喜阳性对照组(Talcid 8mg/kg)、

实施例10、11、12组，各给药组按体重0.2mL/20g连续灌胃给药7天，空白组和模型组给予相同量的蒸馏水，造模前禁食24h。末次给药30min后，除空白组外，每只小鼠灌胃给予90％乙醇0.12mL/20g，l h后即建立起小鼠急性胃黏膜损伤模型，处死小鼠，取材，观察实施例10、11、12组对大剂量乙醇引起的急性胃黏膜损伤的作用。

2.实施例10、11、12对50％乙醇诱导的慢性胃黏膜损伤的作用

60只昆明种雄性小鼠常规适应性饲养一周，按体重大小随机分为6组，苦味酸标记：

空白组(Control)、

模型组(Model)、

达喜阳性对照组(Talcid 8mg/kg)、

实施例10、11、12组。各给药组小鼠先按体重0.2mL/20g灌胃给予各药物，空白组和模型组给予等量蒸馏水，30min后，除空白组外，均灌胃给药50％乙醇(0.2mL/20g)。连续给药4周，观察实施例10、11、12组对长期乙醇造成的慢性胃黏膜损伤的作用。

3.胃黏膜损伤评分

小鼠脱颈椎处死，解剖，结扎幽门、贲门，剪下胃体，注入1％甲醛溶液0.3mL，并于该甲醛溶液中浸泡30min后，取出组织，沿胃大弯剪开，生理盐水冲洗胃内容物，平铺组织，在显微镜下观察胃黏膜损伤情况。根据文献的报道的方法计算胃溃疡指数，评价乙醇诱导的胃黏膜损伤程度。通过观察胃黏膜组织中的糜烂、出血灶的长度累积计分：正常：0分，损伤：a<1mm为1分，1<b<3mm为2分，c>3mm为3分，按公式(2-1)和(2-2)分别计算溃疡指数和溃疡抑制率。

UI＝∑{1(a)+2(b)+3(c)}； (2-1)

溃疡抑制率(％)＝(UI_模型组-UI_实验组)/UI_模型组×100％ (2-2)

4.胃黏膜病理学观察--H&E

取小鼠胃，病灶处剪取0.3×0.3cm大小的胃组织，将其迅速置于10％的中性福尔马林固定液中固定。固定48h后，取出组织，用PBS冲洗组织30min，冲洗3次，去掉多余的固定液及与组织结合的固定物和沉淀物；将组织经梯度乙醇脱水，脱水程序依次为：70％乙醇1h，80％乙醇2h，90％乙醇2h，95％乙醇2h，无水乙醇Ⅰ2h，无水乙醇Ⅱ2h；再将组织分别浸入二甲苯Ⅰ30min，二甲苯Ⅱ30min，二甲苯Ⅲ30min中透明；已透明的组织先后浸入不同温度的石蜡中，56℃石蜡Ⅰ、58℃石蜡Ⅱ和60℃石蜡Ⅲ各1h，取出，将组织迅速放于注入石蜡Ⅲ液的包埋磨具中；待石蜡块干燥后，用切片机将其切成7μm厚的薄片，置于温水中展片，并用涂有多聚赖氨酸的载玻片捞片，晾干；60℃烤片2h，脱蜡染色：将切片置入苏木素中染色3-5min，流水冲洗数分钟，再放入1％盐酸酒精分化10-15s，流水冲洗10-15min，伊红染色2-3min，流水冲洗数分钟后，梯度脱水，二甲苯透明；中性树胶封片；在显微镜下观察小鼠胃黏膜组织的病理形态学变化。

5.结果

小鼠灌胃给予大剂量乙醇1h后，小鼠出现明显的胃黏膜损伤现象。90％乙醇诱导的急性胃黏膜损伤及给予实施例后的预防情况如图1所示，HE病理切片结果见图2。肉眼观察，空白组小鼠未见明显异常，模型组小鼠胃部损伤较严重，出现黏膜充血水肿、出血及糜烂。实施例10、11、12给药组可见明显修复作用。较于模型组，实施例10、11、12给药组胃组织中条状损伤减少，出血斑点较少。黏膜损伤评分分别为：空白组积分为0，模型组积分为21.00±4.47，阳性药Talcid组积分为8.17±2.23，实施例10组积分为6.50±1.87，实施例11组积分为7.83±2.20，实施例12组积分为9.60±1.20；对胃溃疡的抑制率分别为Talcid 61.11％，实施例10组69.05％，实施例11组62.70％，实施例12组54.29％(表1)。结果显示，实施例10、11、12对高浓度乙醇诱导的急性胃黏膜损伤的具有较好的保护作用，并呈现剂量依赖性。

表1实施例10、11、12组对90％乙醇诱导的急性胃黏膜损伤的抑制率(n＝6)

与模型组相比：*p<0.05,**p<0.01

实验小鼠连续长期灌胃给予50％乙醇后，胃黏膜亦出现一定的损伤，从损伤指数看，小剂量乙醇长期口服的胃损伤程度较大剂量乙醇急性损伤小。给予实施例后对50％乙醇引起的慢性胃黏膜损伤的保护作用实验结果见图3，HE病理切片结果见图4，参数分析见表2。从宏观上看，空白组小鼠胃组织黏膜未见异常，模型组小鼠胃组织黏膜则出现明显的充血、水肿、出血、糜烂等损伤。实施例给药组，小鼠胃黏膜组织损伤较模型组小鼠得到明显改善。与模型组小鼠胃组织黏膜相比，实施例给药组的胃组织中出血斑点及条状损伤显著减少，其对胃溃疡的抑制率分别为49.97％、55.86％和35.66％。从该实验结果可以看出，实施例给药组对长期给予小浓度乙醇致慢性胃黏膜损伤具有明显的保护作用。该实验结果表明，在胃黏膜受到长期的酒精或其他药物的刺激时，长期服用适当剂量的实施例可能有助于调节胃肠道功能，提高胃肠道对有害因子的防御功能，保护胃肠道。

表2实施例10、11、12组对50％乙醇诱导慢性胃黏膜损伤的抑制率(n＝6)

与模型组相比：*p<0.05,**p<0.01

空白组小鼠胃黏膜上皮细胞排列整齐，未见黏膜缺损。模型组小鼠胃黏膜表层上皮脱落严重，可见固有层严重出血(暗红色)、淋巴细胞浸润、水肿。胃肠安丸给药组具有明显改善作用，表现在胃黏膜表层上皮较模型组连接紧密，腺体结构正常，无出血现象。从实验结果可看出，实施例10、11、12对小鼠的胃组织具有保护作用。