一种用于促进外伤愈合的中药油提剂及其制备方法与流程

本发明涉及中药制剂技术领域，具体涉及一种用于促进外伤愈合的中药油提剂及其制备方法。

背景技术：

皮肤是人体的最外面的一层结构，是人体最大的一个器官，指身体表面包在肌肉外面的组织。主要承担着保护身体、排汗、感觉冷热和压力的功能。皮肤覆盖全身，它使体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭。人和高等动物的皮肤由表皮、真皮、皮下组织三层组成。皮肤既是神经系统的感觉器，又是效应器，冷、热、疼、情绪变化等机械和化学刺激都能反射性地引起血管收缩和舒张、立毛肌收缩、汗腺分泌、皮肤毛细血管通透性的改变。皮肤总重量占体重的5%～15%，总面积为1.5～2平方米，厚度因人或部位而异，为0.5毫米～4毫米。皮肤覆盖全身，它使体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭。皮肤具有两个方面的屏障作用：一方面防止体内水份、电解质、其他物质丢失；另一方面阻止外界有害物质的侵入。皮肤保持着人体内环境的稳定，同时皮肤也参与人体的代谢过程。皮肤有几种颜色（白、黄、红、棕、黑色等），主要因人种、年龄及部位不同而异。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成，并含有附属器官（汗腺、皮脂腺、指甲、趾甲）以及血管、淋巴管、神经和肌肉等。

由此可见，皮肤是人体的重要器官之一，必须很好的保护。但由于它处于人体的最外层，所以日常生活会受到撕咬、挤压、摩擦、摔碰等情况是很难避免的。通常会出现割伤、抓伤、瘀血、砸伤、挤伤、擦伤、裂伤、刺伤、蚊虫咬伤、烧烫等伤情，在医院中还有手术伤ロ等外伤，出现这些伤情后，必须及时处理，否则会由于病原细菌的侵入发生化脓性感染，也会造成局部出现红、肿、热、痛和功能障碍，严重时由于细菌及毒素进入血液循环可引起毒血症、败血症及破伤风等病症，会造成十分严重的后果。

外伤愈合是一个高度进化过程，最轻度的创伤仅限于皮肤表皮层，可通过上皮再生愈合。稍重者有皮肤和皮下组织断裂，并出现伤口；严重的创伤可有肌肉、肌键、神经的断裂及骨折。皮肤附属器（毛囊、汗腺及皮脂腺）如遭完全破坏，则不能完全再生，而出现瘢痕修复。肌腱断裂后，初期也是瘢痕修复，但随着功能锻炼而不断改建，胶原纤维可按原来肌腱纤维方向排列，达到完全再生。缺失和受损组织的替换会受到多种因素的影响，伤口不能充分愈合形成疤痕或难愈伤口，严重影响患者的生活质量。防治伤口感染、坏死和形成慢性难愈合的最好办法是加速伤口的愈合。

技术实现要素：

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种用于促进外伤愈合的中药油提剂及其制备方法，既能快速处理伤口，又能使伤口愈合进程加快且不留斑痕。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种用于促进外伤愈合的中药油提剂，是由按照质量体积百分比计的以下物质制备得到的：贯叶连翘油提物2.5%-8%、维生素E 0.5%-5%，其余为橄榄油。

进一步的，上述的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂，是由按照质量体积百分比计的以下物质制备得到的：贯叶连翘油提物3%-6%、维生素E 1%-4%，其余为橄榄油。

进一步的，上述的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂，是由按照质量体积百分比计的以下物质制备得到的：贯叶连翘油提物5%、维生素E 2.5%，其余为橄榄油。

进一步的，上述的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂，所述贯叶连翘油提物的制备方法为：贯叶连翘生药，超微粉碎，200目筛过筛，取50克，加入橄榄油制备成5.33%的贯叶连翘橄榄油溶液，搅拌混匀后采取CO₂超临界萃取方法进行萃取得到贯叶连翘油提物，萃取压力为25MPa，萃取温度为35℃，萃取时间为6h。

进一步的，上述的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂，所述中药油提剂为外用油性涂抹剂。

本发明的第二个目的是提供了上述一种用于促进外伤愈合的中药油提剂的制备方法，包括以下步骤：

1）按照配比称取贯叶连翘生药，超微粉碎，200目筛过筛，取50克加入橄榄油制备成5.33%的贯叶连翘橄榄油溶液，搅拌混匀后采取CO₂超临界萃取方法进行萃取得到贯叶连翘油提物，萃取压力为25MPa，萃取温度为35℃，萃取时间为6h；

2）在容器中按照配比加入维生素E溶液，缓慢加入橄榄油并搅拌，维生素E：橄榄油的质量比为2：5，搅拌5分钟后，维生素E完全混匀，加入步骤1）得到的贯叶连翘油提物，常温下搅拌至混匀，加入橄榄油定容，制备成含有维生素E2.5%和贯叶连翘5%的混合液，即为用于促进外伤愈合的中药油提剂。

进一步的，上述的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂的制备方法，所述步骤2）得到的混合液置于棕色瓶中，盖好瓶盖后经钴-60照射杀菌10秒，即可得到外用油性涂抹剂。

与现有技术相比，本发明提供的一种用于促进外伤愈合的中药油提剂及其制备方法具有如下有益效果：

（1）使用极方便，油性介质容易被皮肤创伤面吸收，油性涂抹剂涂抹在伤口创伤面后形成一层油性膜，具有良好的透气性和防水渗透的作用，不妨碍创伤面分泌液体，还具备抑制或杀死导致感染的金黄葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌等病原菌的作用，能够起到预防感染、抗感染的功效；

（2）具有止血镇痛功效，同时还具备活化细胞、修复受损细胞的作用，促进组织、细胞的修复与再生，促进伤口快速愈合，不易产生斑痕，与皮肤有良好的相容性；

（3）不含刺激类、麻醉类和激素类物质，产品绿色安全，且所含的三种物质能发挥加快伤口愈合的协同作用，对外伤的治疗可发挥高效巨大的功能作用。

附图说明

图1为试验大鼠血清5-HT变化趋势图。

图2为试验大鼠血清变化趋势图。

图3为试验大鼠血清组胺变化趋势图。

具体实施方式

实施例1-5：

本发明提供的用于促进外伤愈合的中药油提剂的制备：

中药油提剂组方组成如表1所示，表1中数据为质量体积百分比。

表1

制备方法：

（1）贯叶连翘生药，超微粉碎，加入橄榄油，搅拌混匀，随后采取CO₂超临界萃取方法，萃取压力25MPa，萃取温度为35℃，萃取时间为6h；

（2）在容器中加入维生素E油溶液，缓慢加入橄榄油并搅拌，搅拌5分钟后，维生素E完全混匀，加入步骤（1）的贯叶连翘油提物，常温下搅拌至混匀，加入橄榄油定容，得混合液即为用于外伤愈合的中药油提剂。

所述用于外伤愈合的中药油提剂的制备方法，其中将步骤（2）所述混合液装在棕色瓶中，安好瓶盖，经钴-60照射杀菌，得到外用油性涂抹剂。

对比实施例：

处方组成：维生素E 2.5%，其余为橄榄油。

制备方法：在容器中加入维生素E油溶液，缓慢加入橄榄油并搅拌，常温下搅拌搅拌5分钟至混匀，维生素E完全混匀，加入橄榄油定容，得混合油剂。

实施例6：

本发明的中药促外伤愈合油提剂促进肛周脓肿术后大鼠模型创面愈合的试验研究：

清洁级SPF Wistar大鼠160只，雌雄各半，体重160±20g，用3%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉。电推剔除大鼠背部下段毛发至两侧腋中线，碘伏消毒。于大鼠脊柱尾侧靠右区域做直径1cm圆形切口，切口深至肌层。止血后于创面滴加粪便上清液0.5mL(正常成人粪便添加生理盐水混匀，离心，取上清液，现配现用)，对照组大鼠滴加生理盐水0.5mL。所有大鼠术后油纱覆盖，胶带固定，48h后创面出现脓性分泌物渗出为造模成功。

将模型大鼠分为对照组、试验1组、试验2组、试验3组，每组40只大鼠。各组大鼠采用生理盐水清洗伤口，碘伏消毒，包扎敷料。试验组每日换药，换药前30分钟用粪便上清液滴加创面，模拟肛周脓肿患者每日排便的粪便污染；对照组每日换药，换药前30分钟滴加生理盐水，两组均换药至创面愈合。

其中，对照组按照青霉素钠14万单位/kg体重腹腔注射给药，同时于每日早中晚分别用生理盐水清洗伤口。试验1组、试验2组除按照青霉素钠14万单位/kg体重腹腔注射给药外，同时分别施用实施例1、3制备的中药促外伤愈合油提剂治疗，每日早中晚各一次。试验3组除按青霉素钠14万单位/kg体重腹腔注射给药外，同时施用对比实施例制备的混合油剂治疗，每日早中晚各一次。

在造模后第3、7、10、14d，分4批（每批每组随机选取10只大鼠）处死大鼠，无菌条件下进行标本采集，在创缘切取0.5cm×0.5cm肉芽组织，放入4%甲醛溶液固定，常规脱水，石蜡包埋后连续切片，切片厚度3μm，常规HE染色，使用免疫组化CD34法检测肉芽组织中毛细血管数，免疫组化36kDa法检测成纤维细胞数，均经4%多聚甲醛固定，取5个视野，400倍光镜下观察计数。炎症介质检测：采用ELISA法对大鼠血清进行检测，在3、7、10、14d随机选取的10只大鼠处死前，取腹股沟动脉血，常规离心存放，使用大鼠5-HT、PGE₂、组胺检测试剂盒检测。4组大鼠均换药至创面愈合，记录造模后至创面愈合所用时间。

创面闭合指数的计算公式：

创面闭合指数=（1-治疗后创面面积/原始创面面积）×100%。

各组创面闭合指数比较结果如表2所示。每个标本观察5个视野，计数肉芽组织中新生毛细管数和成纤维细胞数，并求均值，各组创面肉芽组织中成纤维细胞数和毛细血管数的比较结果如表3所示。炎症介质5-HT、PGE₂、组胺检测结果如图1-3所示。大鼠创面愈合时间比较（d，MEAN±SD）如表4所示。

创面愈合是一个较为复杂的过程，在临床中几乎影响大部分外科疾病的治疗康复。影响创面愈合的因素非常多，其主要靠肉芽组织生长、新生血管及成纤维细胞的生长促进愈合，创面初期为炎症期，主要表现为白细胞渗出、吞噬作用，大量的滋生细菌被巨噬细胞吞噬，并释放多种活性物质进行辅助，肛周脓肿术后创面由于细菌量大、种类多，因此炎症期时间较长，此时PEG₂等因子也会引发周围血管扩张，导致创面部位水肿。在随后的增生期主要依靠肉芽组织形成、纤维组织增生来促进创面愈合，成纤维细胞起到了重要作用，其提供了愈合过程中重要的胶原蛋白，为组织修复提供足够张力；心生毛细血管的形成也促进了创面血运重建。在最终塑形期，成纤维细胞提供的胶原蛋白也起到重要作用，创面组织逐渐形成瘢痕，细胞及血管修复减少，创面的收缩主要依靠成纤维细胞及胶原蛋白重排列的共同作用。

根据表2和表3的试验结果可以看出，试验1、2组与模型对照组相比，在大鼠创面愈合指数、成纤维细胞数和毛细血管数等方面具有显著性差异（P<0.05）或极显著差异（P<0.01），这说明本发明的中药促外伤愈合油提剂可提高创面肉芽组织成纤维细胞的含量，从而有效地快速促进创面愈合。

表2

表3

表4

通过以上大量实验验证得出，本发明的中药促外伤愈合油提剂具有如下优点：

（1）为创面提供了良好的愈合环境。当中药促外伤愈合油提剂涂抹在创面时，对伤口有很好的亲和性。会在创伤面行程一层油性的保护膜，由于油提剂属于液态，具有一定流动性，而油性剂型又具有良好的附着性，不仅能够对不齐的创面完全覆盖，还能形成一种保护层，阻止真菌、细菌等有害微生物及赃物与创伤面直接接触。油性保护膜具有很好的透气性、透湿性，为创伤面组织提供了适合生长的良好环境，从而加速伤口的愈合。

（2）提供皮肤所需的组成物质。维生素E具有全面、高效的抗氧化作用，能保护细胞膜上的多不饱和脂肪酸免受自由基的攻击，维持细胞的完整性。维生素E能够被皮肤吸收，提高局部免疫调节作用，增强抗感染能力，可加速伤口的愈合。

（3）能够抗菌消炎，防治创面感染。本发明的油提剂对黄色短杆菌、经黄色葡萄球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌、苏云金杆菌等有很强的抑菌和杀菌作用。对临床常见抗生素有耐药性的革兰氏阳性菌株均有较强的抑菌和杀菌作用。当油提剂中的活性成分与伤口接触时，附着在伤口表面和伤口中的病原菌将被抑杀，防止伤口感染。

（4）促进细胞再生，修护损伤细胞，加速伤口愈合。

（5）具有止血镇痛作用。

（6）促进皮肤组织修复和愈合。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。