一种用于生殖系统的复合益生菌及其制备方法和用途与流程

文档序号:12323180阅读:711来源:国知局

本发明涉及护理用品技术领域,具体涉及一种用于生殖系统的复合益生菌及其制备方法和用途。



背景技术:

益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,是定植于人体肠道、生殖系统内,能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。生殖系统,包括男性生殖器系统和女性生殖器系统。准确的说,是指在复杂生物体上任何与有性繁殖及组成生殖系统有关的组织,由于免疫力下降等各种因素,可能导致生殖系统感染,尤其是女性。女性阴道因正常的微生态(有益菌群、完整的生理结构、有效的分泌调节功能)而保持其强大的抑制外来病菌入侵的能力,使阴道免于病菌感染,然而,因为生理、性活动、分娩和卫生习惯等多种因素影响,破坏了微生态的平衡,导致阴道非常容易发生多种感染。在维持阴道微生态平衡的因素中,雌激素、乳酸杆菌及阴道酸碱度起着至关重要的作用。

目前市场上针对男女生殖系统的护理产品多种多样,其中包括在护理产品中添加功能性益生菌的技术方案,例如申请公布号为CN 105663172 A的发明专利,提供一种生态妇科外用药物组合物及其制备方法,该组合物由葡萄糖、吐温80、磷酸氢二钾、乙酸钠、7分子结晶水硫酸镁、硫酸锰、柠檬酸三铵、可溶性淀粉、酵母膏经灭菌,接种益生菌菌液,经发酵后,得乳酸菌发酵培养物;在培养物中加入一种或多种医药上可接受的添加剂,即得到所述的生态妇科外用药物组合物。所述的生态妇科外用药物组合物可用于调节妇女外生殖道生态平衡、预防和治疗妇女阴道炎。经实验,本发明的药物组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌均具有抑杀作用,对皮肤无刺激性,未见皮肤变态反应。但该配方的药物组合物,其原料成分中还需添加防腐剂、赋形剂等添加剂,其长期直接作用于人的生殖系统,会产生刺激性,不利于人体健康。同时该配方的药物组合物针对人体生殖系统的保健效果仍不足,不能有效增强生殖系统的免疫力,提高其修复能力。

由此可见,能否基于现有技术中的不足,提供一种含有益生菌的且用于生殖系统的复合益生菌及其制备方法,使其原料成分取自纯天然产物,针对人体不具有任何刺激性作用,且有效针对该原料成分提供相应的制备工艺,得到含有益生菌的用于生殖系统的复合益生菌,使其含菌量适宜,使用效果最佳,有效针对人体生殖系统起到护理和保健的作用,成为本领域技术人员亟待解决的技术难题。



技术实现要素:

本发明为了解决上述技术问题,提供一种用于生殖系统的复合益生菌及其制备方法和用途,其针对生殖系统的保健效果佳,有效抵抗细菌病毒的感染以及预防治疗某些疾病的功能,增强生殖系统免疫力,且其原料成分安全无副作用。

为了达到上述技术效果,本发明包括以下技术方案:

一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:5~50份的植物乳杆菌粉、1~10份的酵素粉、1~20份的大豆纤维和0.5~5份的蔗糖。

进一步优选地,所述用于生殖系统的复合益生菌包括以下重量份数的原料组分:10~18份的植物乳杆菌粉、2~3份的酵素粉、2~5份的大豆纤维和2~3份的蔗糖。

本发明各原料成分配伍合理,有效调节男女生殖系统内微生态平衡,同时还能在发酵过程中产生营养物质,抵抗细菌病毒的感染以及预防治疗某些疾病的功能,提高生殖系统的免疫功能,本发明配方属天然原料组成,可长期使用、无毒副作用和耐药性产生。其中植物乳杆菌具有很多的保健作用,如下:1、有一定的免疫调节作用;2、对致病菌有抑制作用;3、降低血清胆固醇含量和预防心血管疾病;4、维持肠道内菌群平衡;5、促进营养物质吸收;6、缓解乳糖不耐症;7、抑制肿瘤细胞的形成等。

其中大豆纤维主要包括纤维素、果胶质、木聚糖、甘露糖等提供足够蛋白质以有效增加活菌量;酵素粉和蔗糖均用于发酵,酵素粉有增强免疫力,提高抵抗力,消炎杀菌,提供蛋白质催化活菌量。

进一步的,所述用于生殖系统的复合益生菌还包括以下重量份数的原料组分:2~30份麦芽粉、10~50份的丁香和0.5~10份的金银花。

其中麦芽粉为膳食纤维的补充剂,富含丰富的蛋白质、维他命,作为植物乳杆菌粉发酵原料能够产生更多的活菌数量,提升发酵效率。

进一步优选地,所述用于生殖系统的复合益生菌还包括以下重量份数的原料组分:8~15份麦芽粉、15~30份的丁香和3~5份的金银花。

丁香醇浸出物对鼠疫杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌、枯草杆菌及金黄色葡萄球菌等有抑制作用。丁香的水、醇、乙醚浸出液及挥发油对致病性真菌均呈非常明显的抗菌作用。金银花自古以来就以它的药用价值广泛而著名。其功效主要是清热解毒,主治温病发热、热毒血痢、痈疽疔毒等。现代研究证明,金银花含有绿原酸、木犀草素苷等药理活性成分,对溶血性链球菌、金黄葡萄球菌等多种致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有较强的抑制力,另外还可增强免疫力、抗早孕、护肝、抗肿瘤、消炎、解热、止血(凝血)、抑制肠道吸收胆固醇等,其临床用途非常广泛,其与本发明成分相配伍用于治疗急性泌尿系统、生殖系统感染等病症,同时能够提高生殖系统的免疫力。

进一步的,所述用于生殖系统的复合益生菌还包括重量份数为0.1~2份的川椒壳。

川椒壳,即川椒,去除川椒目(川椒种),川椒(花椒)外壳,其具有温中止痛、杀虫止痒的作用。

进一步优选地,所述用于生殖系统的复合益生菌还包括重量份数为0.5~0.8份的川椒壳。

进一步的,所述用于生殖系统的复合益生菌还包括以下重量份数的原料组分:1~20份的穿心莲、1~20份的黄柏、1~20份的五味子、1~20份的山楂、1~20份的白头翁、1~20份的小麦纤维和0.1~5份的葡萄糖中的一种以上。

进一步的,所述的植物乳杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2015年11月30日,保藏号为CGMCC No.11763;

所述用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为7×1011~9×1011cfu/g。

一种上述用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:取大豆纤维粉碎成颗粒后加入水,经浸泡处理后制备成原料储备液,搅拌,加入蔗糖,继续搅拌、静放再搅拌,加入酵素粉,搅拌、静放再次搅拌,升温经有氧发酵处理后得到有氧发酵处理液,向所述有氧发酵处理液中加入植物乳杆菌,搅拌后密封发酵得到用于生殖系统的复合益生菌。

进一步的,所述的原液储备液中还包括麦芽粉、丁香和金银花,取麦芽粉、丁香和金银花粉碎成颗粒,与大豆纤维的粉碎颗粒一同加入水中,经浸泡处理后制成原料储备液。

进一步的,在加入蔗糖时还向原料储备液中添加葡萄糖;

所述的原液储备液中还包括穿心莲、黄柏、五味子、山楂、白头翁和小麦纤维中的一种以上;取穿心莲、黄柏、五味子、山楂、白头翁和小麦纤维中的一种以上粉碎成颗粒,与大豆纤维的粉碎颗粒一同加入水中,经浸泡处理后制成原料储备液;

所述麦芽粉、大豆纤维和小麦纤维的粉碎方法为经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;所述金银花、丁香、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁的粉碎方法为于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm。

进一步的,经有氧发酵处理后,先向所述有氧发酵处理液加入经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌、发酵处理后加入植物乳杆菌,搅拌、密封发酵得到用于生殖系统的复合益生菌;所述川椒壳的粉碎方法为于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm。

本发明提供的制备方法基于各原料成分的特点设计出的,其具有制备工艺步骤合理,制备的用于生殖系统的复合益生菌保健、杀菌效果好,且制备成本低的优点。有氧发酵后加入川椒壳进行发酵可使川椒壳的配伍后产生最大的功效,功效保留完善,其外治湿疹、阴痒,杀虫,止痛等功效,能够完全溶于培养菌中,后加入植物乳杆菌密封发酵,以最大程度培养出活菌量。

一种上述用于生殖系统的复合益生菌在制备润滑剂、生殖系统清洗液、生殖系统护理凝胶、生殖系统护理喷剂或洗衣液中的应用。

采用上述技术方案,包括以下有益效果:本发明提供的一种用于生殖系统的复合益生菌及其制备方法和用途,本发明的用于生殖系统的复合益生菌其各原料成分配伍合理,有效调节男女生殖系统内微生态平衡,除此之外,还可以产生营养物质,抵抗细菌病毒的感染以及预防治疗某些疾病的功能,有助于生殖系统内的自我修复、活化、养护、清理、排减沉积物和增强生殖系统免疫力等。本发明的制备方法结合各原料配伍成分来确定,同时合理设计发酵步骤,使制备的成品针对生殖系统护理、保健效果更明显。本发明用于生殖系统的复合益生菌可以用于或添加在避孕套,人体润滑剂,私密洗液、凝胶、喷剂,洗衣液,以及部分治疗和护理男性或女性生殖器的产品。

具体实施方式

下面通过具体的实施例对本发明做进一步的详细描述。

实施例一:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:5份的植物乳杆菌粉、10份的酵素粉、1份的大豆纤维和5份的蔗糖。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

实施例二:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:10份的植物乳杆菌粉、8份的酵素粉、2份的大豆纤维和3份的蔗糖。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:取大豆纤维粉碎成颗粒后加入水,使水没过待浸泡原料组分即可,经浸泡处理后制备成原料储备液,搅拌,加入蔗糖,继续搅拌、静放再搅拌,加入酵素粉,搅拌、静放再次搅拌,升温经有氧发酵处理后得到有氧发酵处理液,向所述有氧发酵处理液中加入植物乳杆菌,搅拌后密封发酵得到用于生殖系统的复合益生菌。

由于水为制备本发明复合益生菌常规使用的溶剂,其使用剂量基于有限次实验均可得到。

所述用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为7×1011cfu/g。

实施例三:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:12份的植物乳杆菌粉、5份的酵素粉、4份的大豆纤维、2份的蔗糖、2份麦芽粉、50份的丁香和0.5份的金银花。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:取大豆纤维、麦芽粉、丁香和金银花粉碎成颗粒后加入水,经浸泡处理后制备成原料储备液,所述原料储备液内固体原料与水的体积比为0.05~2∶1搅拌,加入蔗糖,继续搅拌、静放再搅拌,加入酵素粉,搅拌、静放再次搅拌,升温经有氧发酵处理后得到有氧发酵处理液,向所述有氧发酵处理液中加入植物乳杆菌,搅拌后密封发酵得到用于生殖系统的复合益生菌。

实施例四:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:50份的植物乳杆菌粉、1份的酵素粉、20份的大豆纤维、0.5份的蔗糖、30份麦芽粉、10份的丁香、10份的金银花、0.1份的川椒壳。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉和大豆纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香和川椒壳于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、丁香和金银花粉碎成颗粒后加入水,使水没过各颗粒原料组分经浸泡处理后制备成原料储备液,搅拌,加入蔗糖,继续搅拌、静放再搅拌,加入酵素粉,搅拌、静放再次搅拌,升温经有氧发酵处理后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌、发酵处理后加入植物乳杆菌,搅拌、密封发酵得到用于生殖系统的复合益生菌。

所述用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为9×1011cfu/g。

实施例五:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:18份的植物乳杆菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纤维、3份的蔗糖、15份麦芽粉、30份的丁香、5份的金银花和0.8份的川椒壳。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉和大豆纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香和川椒壳于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、丁香和金银花粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。

其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为8.75×1011cfu/g。

实施例六:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:10份的植物乳杆菌粉、2份的酵素粉、2份的大豆纤维、2份的蔗糖、8份麦芽粉、15份的丁香、3份的金银花和0.5份的川椒壳。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉和大豆纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香和川椒壳于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、丁香和金银花粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为7.12×1011cfu/g。

实施例七:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:10份的植物乳杆菌粉、2份的酵素粉、2份的大豆纤维、2份的蔗糖、4份的穿心莲、20份的黄柏、1份的五味子、15份的山楂和5份的白头翁。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉和大豆纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香、川椒壳、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、丁香、金银花、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为7.01×1011cfu/g。

实施例八:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:18份的植物乳杆菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纤维、3份的蔗糖、15份麦芽粉、30份的丁香、5份的金银花、0.8份的川椒壳、10份的穿心莲、8份的黄柏、6份的五味子、10份的山楂、10份的白头翁、10份的小麦纤维和1份的葡萄糖。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉、大豆纤维和小麦纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香、川椒壳、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、小麦纤维、丁香、金银花、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖和葡萄糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为9×1011cfu/g。

实施例九:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:18份的植物乳杆菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纤维、3份的蔗糖、15份麦芽粉、30份的丁香、5份的金银花、0.8份的川椒壳、1份的穿心莲、20份的山楂、1份的白头翁、20份的小麦纤维和0.1份的葡萄糖。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉、大豆纤维和小麦纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香、川椒壳、穿心莲、山楂和白头翁于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、小麦纤维、丁香、金银花、穿心莲、山楂和白头翁粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖和葡萄糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为8.95×1011cfu/g。

实施例十:一种用于生殖系统的复合益生菌,包括以下重量份数的原料组分:18份的植物乳杆菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纤维、3份的蔗糖、15份麦芽粉、30份的丁香、5份的金银花、0.8份的川椒壳、20份的穿心莲、1份的黄柏、20份的五味子、1份的山楂、20份的白头翁、1份的小麦纤维和5份的葡萄糖。

本发明的复合益生菌还包括常规使用的溶剂,所述溶剂优选的为水,本领域技术人员能够基于有限次实验确定本发明溶剂种类和含量值。

一种用于生殖系统的复合益生菌的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:原料粉碎处理:取麦芽粉、大豆纤维和小麦纤维,经焙干后粉碎至粒径为1~2μm;取金银花、丁香、川椒壳、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁于零下20~25℃冰冻40~60min后立即粉碎至粒径为1~2μm;

步骤二:制备有氧发酵处理液:取步骤一经粉碎处理的大豆纤维、麦芽粉、小麦纤维、丁香、金银花、穿心莲、黄柏、五味子、山楂和白头翁粉碎成颗粒后加入水,经浸泡6h处理后制备成原料储备液,搅拌8~10min,加入蔗糖和葡萄糖,继续搅拌5min、静放6h再搅拌5min,加入酵素粉,搅拌5min、静放6h再次搅拌5min,升温至30℃,每6h搅拌5min,经有氧发酵处理10天后得到有氧发酵处理液;

步骤三:制备用于生殖系统的复合益生菌:向所述有氧发酵处理液中加入步骤一经粉碎成颗粒的川椒壳,搅拌5min、发酵处理24h后加入植物乳杆菌,搅拌5min、密封发酵15天得到用于生殖系统的复合益生菌。其中植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC No.11763按常规方法制备得到的。

上述制备的用于生殖系统的复合益生菌中的活菌含量为8.59×1011cfu/g。

本发明用于生殖系统的复合益生菌体外抗菌试验:

试验菌种:

挑选金黄色葡萄球菌,白色念珠菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和阴道滴虫。

菌种培养基:营养琼脂培养基和营养肉汤培养基。

仪器与试剂:

生化培养箱,型号为SPH-150,上海森信试验仪器有限公司

菌落计数器,型号为BOT-50A,北京中仪博腾科技有限公司

AE-240电子分析天平,梅特勒-托利仪器有限公司

UV-2401型分光光度计,日本岛津

试验分组:

抑菌试验分试验组和对照组,试验1组至8组分别选用实施例1至实施例8所述的复合益生菌,对照1组选用中国专利申请公布号为CN 105663 172 A中公开的生态妇科外用药物组合物,对照2组选用次氯酸消毒液。

试验内容:将上述四种菌种和阴道滴虫分别划线接种于五个琼脂培养基上,37℃培养24h后,分离出单个菌落,转接与肉汤培养基中,置于37℃恒温箱中培养24h。取1ml培养液,使用生理盐水以10倍稀释法依次进行稀释,选取适当浓度的0.1ml菌液置于平皿琼脂培养基上,涂匀,37℃恒温培养48h,计算菌落数。根据菌液稀释浓度计算每毫升菌液的活菌数,将菌液稀释为106个/ml,作为试验菌种。

取本发明实施例1至实施例8所述组合物各10g;加入20ml融化冷却至50-60℃的琼脂培养基,混匀,吸出10ml于另一平皿,余下10ml含药平皿中再加入10ml琼脂培养基,混匀、再吸出10ml于另一平皿中,重复上述步骤,使含药基质浓度为500、250、125、62.5、31.25、15.6、7.8、3.9mg/ml;并取中国专利申请公布为CN 105663 172 A中公开的生态妇科外用药物组合物,按照上述步骤,使含药基质浓度为500、250、125、62.5、31.25、15.6、7.8、3.9mg/ml;次氯酸消毒液6mL,加入34ml融化后冷却至45-50℃的琼脂培养基,混匀,按上述本发明药物平皿的稀释方法,是含有次氯酸消毒液的平皿最终浓度为450、225、112、56、28、14、7、2、1、0.5ug/ml,备用。

取前述备用菌液,每接种点接种2ul菌液于对应含药平皿上,同时接种相对应的次氯酸消毒液培养基,作为对照组1,接种不含药培养基中作为对照组2,于37℃下培养48小时观察结果。

采用平皿倍半掺入法测定组合物的体外对细菌半数抑菌浓度(MIC50),数据处理采用Bliss分析软件,结果见表1。

表1组合物在体外对细菌半数抑菌浓度(生药mg/ml)

“+”表示有菌生长,实施例与对照1组相比较具有显著性差异(Pa<0.01)

结论:由上述试验可知,本发明所提供的用于生殖系统的复合益生菌对金黄色葡萄球菌,白色念珠菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和阴道滴虫均有显著的抑制作用,除表皮葡萄球菌外,实施例五和实施例八的抗菌作用较其他实施例稍优异,两实施例的抗菌活性相对于对照组均具有显著性差异。

组合物对小鼠阴道粘膜刺激试验:

受试动物:

成年健康雌性SD大鼠40只,180-220g。

试验分组:

将65只雌性SD大鼠随机分配为13组,每组5只,试验1组至试验10组分别选用实施例1至实施例10所述的组合物,对照1组选用中国专利申请公布号为CN 105663172 A中公开的生态妇科外用药物组合物,科洗液,对照2组为生理盐水组;对照3组为空白组。

试验内容:

将试验组和对照1组的SD大鼠用适当大小的灭菌药棉浸以中药组合物水溶液,置于SD大鼠阴道内,对照2组以同样大小棉条浸灭菌生理盐水置于受试SD大鼠阴道内,均与动物阴道粘膜接触24小时,空白对照3组则不给予任何处理,24小时后处死动物,取出整个阴道,观察局部阴道组织的充血、水肿反应现象,进行刺激反应评价。

试验结果:

试验组与对照组SD大鼠局部阴道组织均未发现充血、水肿等异常反应,也未发现其他症状,阴道粘膜刺激指数+0.0;结果表明,本发明所述的用于生殖系统的复合益生菌对雌性SD大鼠的阴道粘膜刺激属于无刺激性。

临床试验:

诊断标准:根据《中西医学诊断学》所记载的外阴炎、阴道炎症、宫颈炎、皮包炎和龟头炎的症状,及临床检测结果。

试验病例:

1、皮包炎患者195例,年龄均在20-55之间,分配治疗1组66例、治疗2组65例、对照组64例。

2、龟头炎患者160例,年龄均在20-55之间,分配治疗1组54例、治疗2组53例、对照组52例。

3、霉菌性阴道炎患者108例,均在年龄18-60岁之间,分配治疗1组、治疗2组、对照组各36例。

4、细菌性阴道炎患者83例,均在年龄18-62岁之间,分配治疗1组28例、治疗2组28例、对照组27例。

5、滴虫性阴道炎患者97例,年龄均在20-55之间,分配治疗1组33例、治疗2组32例、对照组32例。

6、宫颈炎患者100例,均在年龄22-65岁之间,分配治疗1组33例、治疗2组34例、对照组33例。

疗效评定标准

以临床症状与局部体征为判断标准

痊愈:临床症状与局部体征消失,达到临床治愈标准;

显效:治疗后病情体征明显改善;

有效:治疗后病情体征有所改善;

无效:治疗前后无变化。

分组及给药:

以上治疗1组均给予本发明实施例5所述的组合物制成的外用制剂,治疗2组均给予本发明实施例8所述的组合物制成的外用制剂,对照组给予市售的常规生殖系统护理药物外用制剂,每天使用1.0g(生药量),连续使用20天。治疗效果见表2。

表2临床实验结果

由表2数据可知,针对最优选的实施例五和实施例八其治疗效果远远优于对照组,本发明实施例针对皮包炎、龟头炎、霉菌性阴道炎、细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和宫颈炎均有较好的治疗和护理作用。以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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