本发明涉及一种具有促进创面愈合作用的中药有效部位组合物及其制备方法，具体地说是从猪皮、黄芪、黄柏、乳香和没药中提取的中药有效部位组合物及其制备方法，属于中药领域。
背景技术：
：皮肤是人体面积最大的器官，也是最重要的器官之一，承受着多种理化损伤、感染、炎症等损伤性刺激。皮肤损伤修复是指皮肤在遭受到不同程度的破坏和缺损时，由多种生长因子、细胞因子及修复细胞共同参与，通过再生和重建进行修复的病理生理过程。而创伤愈合也是外科术后的基本问题之一，是机体组织对损伤刺激的生理反应，包括三个阶段：出/凝血及炎症反应阶段，细胞增殖分化与肉芽组织生长阶段和组织重建阶段。其中炎症反应阶段是创面修复必经的重要过程，炎症反应是机体针对损伤因子所产生的正常防御反应，伴有红、肿、热、痛的局部临床特征。红、热是由于炎症局部血管扩张，血流加快所致；肿胀是因为局部炎症性充血，血液成分渗出所引起的；由于渗出物压迫与某些炎症介质直接作用于神经末梢而引起的疼痛，再加上术后创口血管、淋巴管损伤，回流障碍又加重肿胀与疼痛。给患者带来极大的痛苦，影响患者工作与生活中的各个方面。现代西医外科学对手术造成的创伤创面的处理方法是，对创面灭菌、消毒，应用抗生素防止感染，缝合创面后用医用纱布包扎的方法。缝合具有闭合创面，促进止血及组织愈合作用，是现代外科最基本的技术，因此手工缝合是目前应用最广泛的方法。另外，现代外科不在创面上用药，创面的愈合是靠机体自身的组织来修复的。一般在术后2-3天，患者更换一次敷料，目的是为观察和清洁创面。由此可见，西医对于术后创面的愈合完全依靠患者本身的组织修复能力，创面愈合缓慢，且增加了患者感染的风险。目前，国内外医学方面研究已深入到细胞、分子和基因水平，虽然一些生长因子有较强的通过促进细胞增殖而促进创伤愈合的作用，但由于创面的愈合需要多种生长因子共同参与，配伍复杂，并且细胞过度增殖有可能形成增殖性瘢痕甚至引起癌变，给使用者带来不良的心理反应和生活方面的伤害与影响。此外，现有的促进创口愈合的药物多含有抗生素——青霉素，可能会引起过敏，不适合对青霉素过敏的患者使用，这也局限了药物的使用范围并增加了用药的风险和对患者身体的伤害和影响。中医中药治疗皮肤损伤历史悠久，对如何促进创面修复有着独特的理解和丰富的经验。中药外用对促进损伤修复的主要治疗原则是“行气活血、推陈致新、燥湿收脓、排脓生肌、酸湿收口、生肌收口”。临床上皮肤损伤常用的外治方法主要有化腐生肌、行气通络、益气祛疲和活血化瘀。运用中医药来治疗皮肤损伤，促进创口愈合是以中医基本理论为指导的，并遵循整体观念之中医理论的精髓，同时中草药为纯天然的药物，无明显毒副作用，具有安全性高等特点。皮肤与结缔组织中最主要的蛋白质是胶原蛋白，手术等创伤造成皮肤损伤，加速胶原蛋白的破坏与流失，及时给予一定量的胶原蛋白肽对于加速创面愈合具有明显效果。现代研究证明，猪皮化学成分研究表明，其含水分70％，羟脯氨酸7％，灰分0.6％及硫酸皮肤素(dermatansulfate)即硫酸软骨素(chondroitinsulfate)b，猪皮中的蛋白质主要为胶原蛋白，含量为87.7％，同时还含有少量角质蛋白和弹性蛋白，具有止血、促组织修复等性能，并能诱导、调节细胞生长。传统的具有促进创口愈合作用的复方因有效成分含量低，用量大，效果不明显等缺陷已渐渐失去市场竞争力，消费者也较少购买此类产品。而相较于传统复方，具有促进创口愈合功效的中草药有效部位的组合物具有天然无毒副作用的好处，又因是纯化了的有效部位，所以用量少且治疗效果好。专利内容本发明的一个目的在于提供一种具有促进创口愈合作用的中药有效部位组合物；本发明的另一个目的在于提供上述中药组合物的制备方法和用途。本发明的第一目的：以猪皮胶原小肽及从黄芪中提取的黄芪总皂苷、从黄柏中提取的黄柏总生物碱和从乳香、没药中提取的总挥发油为原料，加入适当药用辅料，制成相关的剂型。本发明药物的组合物的原料药的组成及配比为：猪皮胶原小肽3～9重量份、黄芪总皂苷4～10重量份、黄柏总生物碱2～8重量份、乳香、没药总挥发油2～4重量份。本发明中药药物组合物优选的组成及配比为：猪皮胶原小肽6重量份、黄芪总皂苷6重量份、黄柏总生物碱5重量份、乳香、没药总挥发油3重量份。上述猪皮胶原小肽有效部位中猪皮胶原小肽的含量不低于50％，总皂苷有效部位中总皂苷含量不低于提取物的50％(w/w)，总生物碱有效部位中总生物碱含量不低于提取物的50％(w/w)，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率为85％。药物组合物可以加入相应辅料，制成外用乳膏剂、凝胶剂中的任一种。然后可以再加入其他具有祛皱美白的有效部位、有效成分、化学合成品或者半合成品，然后再加入相应辅料，制成外用乳膏剂、凝胶剂中的任一种。本发明中药组合物的制备方法包括以下步骤：①猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽；其中猪皮胶原小肽的含量不低于50％；②黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量不得低于总提取物的50％；③黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.015～1.017(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量不得低于总提取物的50％；④乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物。⑤按照比例取上述胶原小肽、总黄酮，不加辅料或加入辅料，制成药学上可以接受的剂型。增加：树脂型号可以是：hpd500、hpd600、hpd300、d101、d301、ab-8等。①猪皮胶原小肽含量测定方法为：照紫外－可见分光光度法(《中国药典》2010年版一部附录va)测定。对照品溶液的制备取牛血清白蛋白对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含0.22mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取上述猪皮胶原小肽粉末约0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加水80ml，超声处理30min，放冷，加水至刻度，摇匀，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，再以微孔滤膜(0.22μm)滤过，即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置具塞试管中，各加水至1.0ml，再分别加入碱性铜试液1.0ml，摇匀，各加入福林酚试液[取福林试液储备液(1→16)]4.0ml，立即混匀，置55℃水浴中反应5min，取出，置冷水浴中冷却10min，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅴa)，以0号管为空白，在650nm波长处迅速测定吸光度。以吸光度为纵坐标，牛血清白蛋白含量为横坐标，绘制标准曲线，并计算线性回归方程。测定法精密量取供试品溶液0.6ml，照标准曲线的制备项下自“加入碱性铜试液1.0ml”起，依法测定吸光度，从回归方程中计算总肽的含量。本品含总肽量以牛血清白蛋白计不得低于50％。②黄芪总皂苷含量测定方法：照高效液相色谱法(附录ⅵd)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32：68)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过d101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱高为12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含黄芪甲苷(c41h68o14)不得少于0.040％。③黄柏总生物碱含量测定方法：照高效液色谱法(附录ⅵd)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(每100ml加十二烷基磺酸钠0.2g)(36：64)为流动相；检测波长为284nm。理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于6000。对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。供试品溶液制备取本品粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，称定重量，超声处理(功率250w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含黄柏碱以盐酸黄柏碱(c20h23no4·hcl)计，不得少于0.34％。经过发明人的对比优选后，确定了上述有效部位的最佳重量配比为：猪皮胶原小肽6重量份、黄芪总皂苷6重量份、黄柏总生物碱5重量份、乳香、没药总挥发油3重量份。按照比例取上述猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷、黄柏总生物碱、乳香、没药总挥发油，不加辅料或加入药剂学常规辅料，制成药学上可以接受的剂型。本发明药物组合物可制成的剂型为外用乳膏剂、凝胶剂。以上所说的药剂学常规辅料包括硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、液状石蜡、凡士林、三乙醇胺、丙二醇、尼泊金乙酯，表面活性剂，如十六烷醉、十二烷基硫酸钠，聚乙二醇类、卡波姆、西黄蓍胶、明胶、甘油、甲基纤维素和羧甲基纤维素钠，蒸馏水等。本发明有效部位组合物用于促进创面愈合。有益效果本发明中药组合物，是按传统中医药理论同时结合现代医学研究成果组方而成，具备中医学特色，同时符合现代医学的治疗原则。创伤愈合是由多种生长因子、细胞因子、炎症细胞及修复细胞共同参与的复杂而又高度协调的过程，目前对其研究已深入到细胞、分子与基因水平。创伤后的愈合是一个复杂的生物学过程。研究表明，创面愈合的过程一般通常分为炎性反应、肉芽组织形成、再上皮化及伤口闭合后塑形三个阶段，这三个阶段是一个有序的变化过程。止血和炎症阶段：创伤后造成血管损伤，基底膜暴露，血小板活化和聚集，释放出凝血因子，析出纤维蛋白，形成血凝块。血小板的激活导致其分泌各种趋化因子和生长因子，这些都可引发进一步的炎症反应，并影响参与损伤愈合的其它细胞。纤维蛋白因其互相交叉且包裹着血小板，则可作为愈合过程中细胞移动的支架。在止血过程的同时，血管内皮细胞受趋化因子的刺激表达粘附因子，如icam、p-选择素和e-选择素等；同时中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞也在其作用下附壁、渗出。中性粒细胞分泌释放多种介质和酶，有助于单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞的趋化迁移和基质结构的降解。48小时后单核细胞活化变成在损伤愈合过程中占有不可替代地位的巨细胞，通过释放tgf-p、pdgf吸引平滑肌细胞核成纤维细胞来到伤口，同时清除损伤的细胞、纤维蛋白、基质和病原体。增殖阶段：细胞增殖阶段主要表现为角质、内皮、成纤维细胞的迁移、增殖和分化，然后达到再上皮化，最终形成肉芽组织。成熟和重塑阶段：胶原合成：细胞外基质的主要成分是胶原，它提供了组织的结构、强度和细胞迁移的基质。胶原是正常皮肤的主要成分，肉芽组织和成熟的瘤痕的合成主要由其完成。胶原合成这一过程始于损伤后的3-5天，持续2-4周。基质成分一胶原纤维的减少与收縮：细胞外基质的成分还包括蛋白多糖、纤维连接蛋白和弹性蛋白，主要有成纤维细胞合成，交联粘多糖构成蛋白支架。伤口边缘在肌成纤维细胞的作用下，在损伤后的4-5天开始向中心移动收缩，以消除创面。症痕形成：损伤愈合的最终阶段是疱痕的形成。胶原是沉积还是降解，它们之间的平衡状态决定了症痕的形成和消退。成纤维细胞与胶原纤维的沉积是症痕形成的形态学特征，成纤维细胞产生的胶原代谢异常是其生化与分子生物学特征。损伤的修复是由于一系列细胞作用的结果，此过程主要有炎症细胞(如中性粒细胞、单核巨唾细胞、t、b淋巴细胞)和修复细胞(如成纤维细胞、角阮细胞和血管内皮细胞[18])参与。在修复过程中，修复细胞分泌的细胞外基质是组成肉芽的重要部分，可以直接参与缺损的填充。炎症细胞具有指导作用，为修复细胞的活动创造条件。本发明以传统中医理论为指导思想，同时结合国内外的相关研究成果，在促进创面愈合方面效果显著。方中以猪皮为君药，猪皮味甘、性凉；现代研究证明猪皮胶原肽具有促进皮肤愈合作用，且由于活性位点大多暴露出来，使得其相应的活性更强；黄芪味甘，微温，归肺、脾经，黄芪，“乃疮家之圣药”，具有益气升阳，托毒生肌，利水消肿，益卫固表等功效，现代研究表明黄芪甲苷可促进角质形成细胞的增殖和迁移，即加快创面愈合过程中的上皮化进程，因此，具有治疗创面愈合的功效；黄柏苦，寒。为清热燥湿药,研究证明黄柏外用可促进皮下渗血的吸收,促进血管新生,迅速消除炎性水肿,改善创面微循环,促进肉芽生长以及加速伤口的愈合；上两味药物辅助君药起主要治疗作用,为方中臣药；乳香、没药为临床常用的活血散瘀、消肿止痛对药,乳香辛温香窜,以行气活血为主；没药苦泄力强,以活血散瘀为要,二药配伍,气血兼顾,相互促进,取效尤捷,同为方中佐药。以上五味配伍后外用可达到清热解毒,凉血散疲,消肿止痛,止血生肌的功效,同时也体现了“标本兼治”的治疗原则。本发明产品成分明确，疗效稳定，用量小，安全性高，不仅符合传统中医药促进创面愈合的组方原则，而且符合中药现代化的发展要求，对推动医药产业从仿制向自主创新转变以及对推动我国中药国际化具有重要意义。经查阅相关文献和专利，未检索到以猪皮胶原小肽及黄芪、黄柏和乳香、没药有效部位做为原料，生产加工并制成适宜药物制剂用于促进创面愈合的报道。为进一步验证本发明的药理作用，用本发明片剂进行动物药效学实验。试验内容：1试剂、样品和动物1.1试剂消毒水：2％碘酊，京万红软膏(天津达仁堂京万红药业有限公司生产)1.2供试样品样品1(本发明乳膏剂)取新鲜猪皮5kg，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量58.6％)；取黄芪药材5kg，粉碎成粗粉，加入药材重量8倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h,先以8倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量60.4％；取黄柏药材5kg，粉碎成粗粉，加入药材重量10倍量的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h,用50％乙醇洗脱,速度1.5bv/h,收集6bv洗脱液,回收乙醇,减压浓缩至1.5g生药/ml,其相对密度为1.10～1.15(70℃),放置室温,浓盐酸调节ph0.2～0.4,冷藏放置24h,离心,沉淀低温减压干燥,得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量54.1％；取乳香、没药药材4kg，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物；其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率88.5％；取猪皮胶原小肽60g，黄芪总皂苷60g，黄柏总生物碱50g，乳香、没药总挥发油30g，取硬脂酸60g、单硬脂酸甘油酯18g、液状石蜡30g、凡士林5g、乳香、没药总挥发油有效部位置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺2g、丙二醇50g、尼泊金乙酯5g、猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷，黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。样品2：(本发明凝胶剂)采用样品1制备的有效部位原料。取猪皮胶原小肽120g，黄芪总皂苷120g，黄柏总生物碱100g，乳香、没药总挥发油60g，取卡波姆94010g与聚山梨酯-802g及蒸馏水300ml混合均匀,氢氧化钠4g用适量蒸馏水溶解后加入上液，搅拌均匀，再将尼泊金乙酯1g溶于50g乙醇后逐渐加入搅匀，再加入猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷，黄柏总生物碱，乳香、没药总挥发油有效部位并搅拌均匀，即得凝胶剂。样品3：采用样品1制备的有效部位原料。取猪皮胶原小肽15g，黄芪总皂苷100g，黄柏总生物碱3g，乳香、没药总挥发油2g，取硬脂酸15g、单硬脂酸甘油酯5g、液状石蜡8g、凡士林1g、乳香、没药总挥发油有效部位置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺0.5g、丙二醇13g、尼泊金乙酯1g、猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷，黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。样品4：采用样品1制备的有效部位原料。取猪皮胶原小肽120g，黄芩总黄酮160g，黄芪总皂苷120g，黄柏总生物碱100g，取硬脂酸120g、单硬脂酸甘油酯36g、液状石蜡60g、凡士林10g置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺4g、丙二醇100g、尼泊金乙酯10g、猪皮胶原小肽，黄芩总黄酮，黄芪总皂苷，黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。给药前，取上述相应制剂，加相应基质配制成所需要的药物浓度。1.3实验动物wistar大鼠120只，体重180±20g，由山东中医药大学试验动物中心提供。2实验方法wistar大鼠(180±20g)120只，随机分六组，每组20只，四个供试样品组，阳性对照组和空白对照组。用乙醚麻醉后，在两侧背部用10％na2s脱毛，用打孔器造圆形缺损创，至筋膜深层直径2cm。造模成功后单笼饲养，四个供试样品组分别对造模大鼠伤口涂本发明组①②③④，每天一次，约厚2mm；阳性对照组创口每天涂京万红软膏一次，约厚2mm；空白对照组每天常规消毒，涂2％碘酊。用药后1d、3d、7d、14d分别观察创伤愈合率、创面色泽、创面渗出物的量、肉芽组织的生长状况，并做好记录。3实验结果所有大鼠造模后全身情况良好，无腹泻、拒食等不良反应，在试验初期精神沉郁，3d后活动正常，实验期间无大鼠死亡。造模后所有创面均有出血、渗出和周围组织水肿。血液和渗出物迅速凝固形成血凝块充填创面。3d后本发明组①②③④和阳性对照组创面大部分仍为血凝块覆盖，但在创缘可见部分颗粒状肉芽，创面周围组织水肿有所减轻，创面湿润，本发明组①②③④和阳性对照组之间没有明显的区别；空白对照组创面几乎全部为血凝块覆盖，颗粒状肉芽很少，创面周围组织水肿仍较为明显，创面干燥。7d后本发明组①②③④和阳性对照组创面较为湿润，分泌物较多，创面有较多的肉芽组织充填，但①②组最为明显大约50％，创面鲜红，创面边缘可见部分薄层上皮生长，创面面积明显缩小；空白组创面较为干燥，分泌物较少，创面仅有37％为肉芽组织充填，并有结痂现象。14d后本发明组①②③④和阳性对照组创面几乎完全为肉芽组织充填并有上皮生长，可见有较多毛发长出，①②组中药组大鼠创面基本痊愈，仅留下较小的疤痕区没长出毛发；空白组创面仅90％为肉芽组织充填，上皮生长较少，毛发长出较少。各组创面愈合率经统计学处理结果见表1表1各组大鼠创面愈合率的动态变化(％)结果表明：本发明组(③④)与本发明组(①②)有显著性差异，说明本发明药物所优选的处方组成和配比是具有突出特点的，本发明药物的处方组成不是简单的药味加减，而是起到协同增强的作用，有显著的促进创面愈合的效果。具体实施方式以下通过具体实施例来进一步阐明本发明的技术方案，但是本发明申请所要保护的内容不仅仅如此。实际生产中的用量不仅限于实例中的药物用量，可以用吨、千克、克等计量单位，但是各原料药物的用量配比仍依据本方明的技术方案。实施例1：处方：猪皮胶原小肽30g，黄芪总皂苷40g，黄柏总生物碱20g，乳香、没药总挥发油20g制法：猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量65.1％)；黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量56.3％；黄芪甲苷含量为1.44％；黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.10～1.15(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量55.8％；其中盐酸黄柏碱含量为12.3％；乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物；其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率80.6％；取上述各有效部位，另取硬脂酸60g、单硬脂酸甘油酯18g、液状石蜡30g、凡士林5g、乳香没药总挥发油置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺2g、丙二醇50g、尼泊金乙酯5g、猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷、黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。实施例2：处方：猪皮胶原小肽90g，黄芪总皂苷100g，黄柏总生物碱80g，乳香、没药总挥发油40g制法：猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量50.6％)；黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量51.6％；黄芪甲苷含量为0.08％；黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.10～1.15(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量62.0％；其中盐酸黄柏碱含量为4.8％；乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物；其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率86.8％；取上述各有效部位，另取卡波姆94010g与聚山梨酯-802g及蒸馏水300ml混合均匀,氢氧化钠4g用适量蒸馏水溶解后加入上液，搅拌均匀，再将尼泊金乙酯1g溶于50g乙醇后逐渐加入搅匀，再加入猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷，黄柏总生物碱，乳香、没药总挥发油有效部位并搅拌均匀，即得凝胶剂。实施例3：处方：猪皮胶原小肽600g，黄芪总皂苷600g，黄柏总生物碱500g，乳香、没药总挥发油300g制法：猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量65.1％)；黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量56.5％；黄芪甲苷含量为0.68％；黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.10～1.15(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量63.5％；其中盐酸黄柏碱含量为3.5％；乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物，其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率84.5％；取上述各有效部位，另取硬脂酸1200g、单硬脂酸甘油酯360g、液状石蜡600g、凡士林100g、乳香没药总挥发油置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺40g、丙二醇1000g、尼泊金乙酯100g、猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷、黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。实施例4：处方：猪皮胶原小肽6kg，黄芪总皂苷6kg，黄柏总生物碱5kg，乳香、没药总挥发油3kg制法:猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量55.2％)；黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量62.5％；黄芪甲苷含量为1.13％黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.10～1.15(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量52.8％；其中盐酸黄柏碱含量为2.18％；乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物，其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率86.0％；取上述各有效部位，另取硬脂酸12kg、单硬脂酸甘油酯3.6kg、液状石蜡6kg、凡士林1kg、乳香没药总挥发油置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺400g、丙二醇10kg、尼泊金乙酯1kg、猪皮胶原小肽，黄芪总皂苷、黄柏总生物碱有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。实施例5:处方：猪皮胶原小肽400g，黄芪总皂苷600g，黄柏总生物碱300g，乳香、没药总挥发油100g制法：猪皮胶原小肽的制备：取新鲜猪皮，刮去脂肪层，洗净，-10℃冷冻24h，切片机切碎，加入10倍量2％碳酸钠溶液脱脂5h，滤去溶液，水洗至中性，加10倍量水加热煮沸15min，匀浆5min，待冷至约40℃，以10％盐酸调节ph1.5～2.0，加入底物量5％左右胃蛋白酶，在40℃条件下保温酶解4h，然后以10％氢氧化钠溶液调节ph7.5～8.0，加入底物量5％左右的胰蛋白酶，在50℃条件下保温酶解4h，时时搅拌并调节ph在7.5～8.0范围内，酶解完毕后继续升温煮沸10min，离心，取上清液加硅藻土至浓度为5g/l，搅匀，以1μm微孔滤膜滤过，滤液用相对分子质量为3kda的中空纤维膜进行超滤，收集相对分子质量小于3kda的酶解液，超滤液减压浓缩至肽浓度为20g/l时，以10％盐酸调ph4.5～5.5，控制操作电压为30v，上样流速为50l/h进行电渗析脱盐处理，肽脱盐液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15，干燥，得猪皮胶原小肽(含量63.1％)；黄芪总皂苷的制备：取黄芪药材，粉碎成粗粉，加入药材重量6～10倍的70％乙醇，加热回流2次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，吸附流速0.5bv/h，先以5～10倍量去离子水洗脱，洗脱流速为1bv/h，再用0.1％naoh以流速1bv/h进行洗脱，最后用4bv80％乙醇洗脱，洗脱流速为1bv/h，收集4bv的洗脱液，减压条件下浓缩，蒸干，得黄芪总皂苷；其中，总皂苷含量58.2％；黄芪甲苷含量为0.72％；黄柏总生物碱的制备：取黄柏药材，粉碎成粗粉，加入药材重量8～12倍的70％乙醇，加热回流3次，每次2小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至每1ml含1g生药，按照树脂量与药液比例为1:1通过大孔树脂柱，上样速度为2bv/h，用50％乙醇洗脱，速度1.5bv/h，收集6bv洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至1.5g生药/ml，其相对密度为1.10～1.15(70℃)，放置室温，浓盐酸调节ph0.2～0.4，冷藏放置12～24h，离心，沉淀低温减压干燥，得黄柏总生物碱；其中，总生物碱含量不得低于总提取物的50％；其中盐酸黄柏碱含量为5.3％；乳香、没药总挥发油的制备：取乳香、没药药材，粉碎成粗粉，加6倍量水加热回流，用挥发油提取器收集挥发油5～10小时，得乳香、没药总挥发油，按照乳香、没药挥发油与β-环糊精的比例1:8～12置研钵中，再加入2倍量β-环糊精的水，搅拌研磨2～4小时，至呈均匀白色糊状，得乳香、没药总挥发油包合物，其中，乳香、没药挥发油包合物中挥发油包封率84.6％；取上述各有效部位，另取硬脂酸1200g、单硬脂酸甘油酯360g、液状石蜡600g、凡士林100g置容器内，加热至熔化，继续加热至70℃～80℃，作为油相；另取三乙醇胺40g、丙二醇1000g、尼泊金乙酯100g、猪皮胶原小肽，黄芩、甘草、葛根总黄酮有效部位及蒸馏水，加热至70℃～80℃，保持恒温，作为水相；将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌，至乳化完全，放冷，即得乳膏剂。实施例6：取实施例1所制乳膏剂治疗12位皮肤有创伤的患者。治疗方案：将乳膏于皮肤有创伤部位外涂，每日早晚各涂1次，3d、7d及14d时进行创面愈合率评价，结果见表2。表2实施例1乳膏创面愈合率的动态变化(％)组别3d7d14d实施例113.36±2.4548.62±2.75b98.38±1.54b结果表明：实施例1乳膏能有效促进患者创面愈合，达到显著效果。当前第1页12