一种多甲氧基黄酮在制备治疗银屑病的药物上的应用的制作方法

本发明涉及多甲氧基黄酮的制药应用，具体涉及一种多甲氧基黄酮在制备治疗银屑病的药物上的应用。

背景技术：

银屑病是一种多因素导致的慢性炎症性疾病，表现为红色斑疹、丘疹或斑块，上面覆盖有多层银白色的鳞屑，是一种目前很常见的皮肤病，由于该病难以根治，常需反复治疗，给患者及其家庭带来了沉重的经济负担和精神压力。据统计，单卵双生同时患病的概率为72％，异卵双生同时患病的概率为30％，对孪生胎银屑病发病情况的调查结果强有力的证明了是遗传因素决定了银屑病的发生[wuepperkd,coultersn,habermana.psoriasisvulgaris:ageneticapproach.[j].journalofinvestigativedermatology,1990,95(5):2s.]。也有一些学者通过调查发现，银屑病的发生与链球菌的感染有关，并认为银屑病是机体表皮抵御病原微生物入侵的一种防御机制[wilsonagm,clarki,heardsr,etal.immunoblottingofstreptococcalantigensinguttatepsoriasis[j].britishjournalofdermatology,1993,128(2):151-8.]。在我国，银屑病的发病率为0.13％～1.23％，在西方国家发病率为2.2％[王懿娜.紫杉醇溶液外用治疗银屑病样动物模型的疗效观察及研究[d].浙江大学,2003.]。

目前，国内外治疗银屑病的药物主要有皮质类固醇类、免疫抑制剂类、维甲酸、钙泊三醇、蒽林、焦油类等，这些系统及局部治疗的药物种类、数量虽然不少，但疗效都非常有限，常需要长期、反复甚至终身给药，而且药物具有不同程度的副作用[宋庆宇.香鳞毛蕨治疗银屑病的药效物质基础研究[d].黑龙江大学,2009.]。因此，此病至今仍被列为重点研究对象，是皮肤界急需解决的难题。

多甲氧基黄酮是一类含有多个甲氧基、低极性、具有较强生物活性的黄酮类化合物，在陈皮、青皮、橘红、佛手、枳实等药材中存在。多甲氧基黄酮具有抗癌、抗炎、抗氧化、抗诱变、预防心血管炎症等生物活性。我国柑橘品种多、产量大，每年柑橘加工产生大量的橘皮，大多作为垃圾直接填埋。对于柑橘中多甲氧基黄酮的开发利用，能够延长柑橘加工的产业链，具有重大的经济价值和社会效益。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种多甲氧基黄酮在制备治疗银屑病的药物上的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

本发明通过研究发现了多甲氧基黄酮能够明显减轻银屑病病变部位的炎症程度，并发现了多甲氧基黄酮具有较强的肝肾功能保护作用。因此，多甲氧基黄酮可用于制备治疗银屑病的药物和保护肝、肾功能的药物。

所述的多甲氧基黄酮包括所有两个或两个以上甲氧基取代的黄酮，其中一个或一个以上的甲氧基被羟基取代。优选的，所述的多甲氧基黄酮为3,5,6,7,8,3'-六甲氧基黄酮、5,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮(川陈皮素，nobiletin，nob)、3,5,6,7,3',4'-六甲氧基黄酮、5,6,7,8,4'-五甲氧基黄酮(桔黄酮，tangeretin，tan)、5,6,7,3',4'-五甲氧基黄酮(甜橙黄酮，sinensetin，sin)、5,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮、3,5,6,7,4'-五甲氧基黄酮、5,7,8,4'-四甲氧基黄酮(tetra-o-methylisoscutellarein)、5,6,7,4'-四甲氧基黄酮(黄芩素，scutellarein，scu)、5,7,3',4'-四甲氧基黄酮、3-羟基-5,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮(柚皮黄素，natsudaidai，nat)、3-羟基-5,6,7,8,4'-五甲氧基黄酮(3-羟基-桔黄酮)、3-羟基-5,6,7,4'-四甲氧基黄酮、5-羟基-3,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮、5-羟基-3,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮(5-去甲基川陈皮素)、5-羟基-6,7,8,4'-四甲氧基黄酮(5-去甲基桔黄酮)、5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮、5-羟基-7,8,3',4'-四甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮、7-羟基-3,5,6,8,3',4'-六甲氧基黄酮、7-羟基-3,5,6,3',4'-五甲氧基黄酮、5,7-羟基-3,6,8,3',4'-五甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基环黄酮、5,6,7,4'-四甲氧基黄酮、3'-羟基-5,6,7,8,4'-五甲氧基黄酮(3'-去甲基川陈皮素)、4'-羟基-5,6,7,8,3'-五甲氧基黄酮(4'-去甲基川陈皮素)、3',4'-羟基-5,6,7,8-四甲氧基黄酮(3',4'-去甲基川陈皮素)中的任意一种、两种或多种。

更优选的，所述的多甲氧基黄酮为5,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮。5,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮的使用浓度优选为1μmol/l-40μmol/l。

本发明具有的有益效果：多甲氧基黄酮是柑橘等芸香科植物果皮中的主要活性成分，属于植物天然化合物，提取分离工艺成熟，也能够直接从试剂公司购买。与tpa诱导组相比，1μmol/l、5μmol/l和10μmol/l浓度的多甲氧基黄酮处理后，所处理部位的表皮角质层变薄，表皮突延伸形成钉突状，皮脂腺增多，真皮层血管丰富，炎性细胞侵染情况减轻，皮损组织病理有明显改变。实验结果表明，多甲氧基黄酮对银屑病的治疗效果显著。血清生化分析结果显示，tpa诱导组的尿素氮、血肌酐、谷丙转氨酶和谷草转氨酶值显著升高，多甲氧基黄酮处理组的相应值降低，说明多甲氧基黄酮对肝肾具有保护作用(没有副作用)，可以长期服用，对治疗银屑病有广阔的应用前景。本发明可指导开发新的皮肤银屑病治疗方法，为今后开发利用多甲氧基黄酮类化合物提供了新的方向和策略。

附图说明

图1是川陈皮素的分子结构图。

图2是各处理组大鼠耳部炎症组织he染色后的显微观察图。

图3是各处理组耳圈重和耳圈厚的统计结果图。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1川陈皮素对sd大鼠寻常型银屑病模型的药效实验

准确称取0.0364mgtpa(佛波酯，又称为十四烷酰佛波醇乙酸酯，12-o-tetradecanoyl-phorbol13-acetate)，用200μl丙酮溶解后配制成100nmol/200μl的tpa贮备液。使用前，取0.1ml100nmol/200μl的tpa贮备液，加入1.9ml丙酮，稀释成5nmol/200μl的tpa使用液。

准确称取4.02mg川陈皮素(分子结构如图1所示)，用100ml丙酮溶解后，配制成100μmol/l的川陈皮素储备液。使用前，取1.0ml100μmol/l的川陈皮素，加入9.0ml丙酮，稀释成10μmol/l的川陈皮素使用液；取1.0ml10μmol/l的川陈皮素，加入1.0ml丙酮，稀释成5μmol/l的川陈皮素使用液；取1.0ml10μmol/l的川陈皮素，加入9.0ml丙酮，稀释成1μmol/l的川陈皮素使用液。

tpa和川陈皮素均为现配现用。

将sd大鼠按6只/笼随机分配至各个笼子，二笼为一组(即每组均有12只)，共分为空白对照组、tpa诱导组、1μmol/l川陈皮素处理组、5μmol/l川陈皮素处理组和10μmol/l川陈皮素处理组。实验用sd大鼠购自湖北省疾病控制中心(许可证号为：scxk(鄂)2015-0018)，适应饲养一周后，在双耳两侧各涂抹15μl浓度为5nmol/200μl的tpa(空白对照组涂抹相同体积的丙酮)。30分钟后，在1μmol/l川陈皮素处理组sd大鼠双耳tpa处理后的相同部位各涂抹15μl浓度为1μmol/l的川陈皮素；在5μmol/l川陈皮素处理组sd大鼠双耳tpa处理后的相同部位各涂抹15μl浓度为5μmol/l的川陈皮素；在10μmol/l川陈皮素处理组sd大鼠双耳tpa处理后的相同部位各涂抹15μl浓度为10μmol/l的川陈皮素；tpa诱导组sd大鼠双耳tpa处理后的相同部位涂抹15μl丙酮；空白对照组sd大鼠双耳丙酮处理后的相同部位涂抹15μl丙酮。连续处理4天后处死小鼠(即每天涂tpa后再涂川陈皮素)，心脏采血法抽取血液，按试剂盒说明书所提供的方法，检测血清中尿素氮(南京建成生物工程研究所尿素氮(bun)测试盒，货号：c013-2)、肌酐(南京建成生物工程研究所肌酐(cr)测定试剂盒，货号：c011-2)、谷丙转氨酶(南京建成生物工程研究所丙氨酸氨基转移酶测试盒(alt/gpt)测试盒，货号：c009-2)和谷草转氨酶(南京建成生物工程研究所天门冬氨酸氨基转移酶测试盒(ast/got)测试盒，货号：c010-2)的浓度或活力。取大小为1.5cm×1.5cm×0.3cm大小的耳部炎症组织，在10％中性福尔马林液中固定1-2天之后，按常规步骤脱水浸蜡包埋制作石蜡切片，he染色判断川陈皮素对tpa诱导银屑病的抑制作用。用直径为0.6cm的打孔器取各组小鼠耳部涂药部位的组织(耳圈)，用分析天平称量各耳圈的重量，用游标卡尺测量各耳圈的厚度。

he染色检测结果(图2)表明，tpa诱导组耳部皮肤表皮层增厚，表皮角质层角化过度，皮脂腺增多，炎性细胞浸润；川陈皮素处理后，所处理部位的表皮角质层较薄，表皮突延伸形成钉突状，皮脂腺增多，真皮层组织局部有血管充血扩张。对打孔器所取组织的测量结果(图3)显示，川陈皮素处理组耳圈的厚度和重量与tpa诱导组相比显著降低，说明处理部位炎症程度明显减轻，川陈皮素对tpa诱导的发炎反应有较强的抑制作用。单因素方差分析显示，tpa诱导组的尿素氮、血肌酐、谷丙转氨酶和谷草转氨酶等值显著增高，而三种浓度的川陈皮素处理后，均能够降低尿素氮、血肌酐、谷丙转氨酶和谷草转氨酶等值，说明川陈皮素具有较强的肝肾功能保护作用(表1)。

表1川陈皮素对sd大鼠肝肾功能的影响(n＝12)

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。