本发明涉及一种脂肪酶可湿性粉剂及其在蚕业养殖中的应用。
背景技术：
脂肪酶(lipase，ec3.1.1.3)，即三酰基甘油酰基水解酶，是一类能催化长链脂肪酸甘油酯水解、也可以催化该反应的逆反应—酯化反应的酶。脂肪酶在生物体内具有重要的生理功能，外源脂肪需要经过脂肪酶消化分解后才能透过细胞膜，体内脂肪的储藏和动用也少不了脂肪酶，脂肪酶也参与了细胞内脂类代谢。脂肪酶分解三酰甘油所产生的单酰甘油、脂肪酸和甘油除了作为生物体的能源外，还是合成磷脂、鞘脂等具有重要生理功能类脂的前体。脂肪酶不但有利于外源脂肪消化吸收，还能使饲料原料中含有的脂肪释放出来，满足动物对脂肪的需要。脂肪酶因具有无污染、反应条件温和等优点，现已被洗涤、制革、食品、饲料等传统领域广泛应用。
目前脂肪酶作为饲料添加剂已经获得了国家批准，国内外约十多家公司在生产饲料级脂肪酶。通过脂肪酶在饲料中的应用，可以在很大程度上改善动物内源性消化酶匮乏的缺点，并且促进脂肪的消化以及动物的快速生长，因此脂肪酶在动物饲料中的应用前景肯定会愈加宽广。
蚕是一种有巨大经济效益和社会效益的经济昆虫，在纺织、食品、医药等行业有重要的应用价值。蚕的品种包括桑蚕、柞蚕、蓖麻蚕、木薯蚕、马桑蚕、惠利蚕、天蚕、琥珀蚕、樟蚕、栗蚕、樗蚕、乌桕蚕、柳蚕等。目前应用于蚕养殖中的产品大部分为蚕饲料，所添加物质为氨基酸、维生素、抗菌剂等物质，一直存在叶丝转化率低(10％左右)的问题，同时每年因蚕病发生导致的蚕茧损失量达10％以上，因此如何提高叶丝转化率，减少蚕病的发生率是蚕业生产上面临的重要课题。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明提出了一种脂肪酶可湿性粉剂，并将其创新性的应用于蚕业养殖中，明显促进了蚕的生长发育，提高了蚕的抗病性和蚕茧产量。
发明人在研究过程中发现，脂肪酶为中性或碱性脂肪酶，一般在碱性环境下酶活较高且较为稳定，而蚕属于昆虫，与一般动物消化系统不同，其消化液呈碱性，因此脂肪酶的性质适合在蚕的养殖中应用，脂肪酶对提高叶片在蚕体内的转化率、减少蚕病的发生率、提高蚕丝产量和品质具有显著的作用。
然而，蚕对脂肪酶的取食量是保障脂肪酶应用效果的一个关键问题。由于蚕主要是取食桑叶、柞树叶等来完成生长发育的，因此如何提高脂肪酶在叶片上残留量，提高抗雨水冲刷和阳光照射能力是提高脂肪酶应用效果的一个关键技术，同时如何简便快捷的施用脂肪酶也显得尤其重要。众所周知，脂肪酶原粉不易溶于水，在使用过程中溶解性不好造成喷施时不均匀，喷施后大部分酶液顺着叶片滴到地上，延展性和渗透性不好，不能粘附到叶片上，抗雨水冲刷能力弱，原酶主要成分是蛋白质，阳光照射后酶活性易损失。
针对上述的问题，本发明借鉴农药制剂的加工方式，提出了一种脂肪酶可湿性粉剂。
本发明所述的一种脂肪酶可湿性粉剂，以质量百分比计，其原料组成为：脂肪酶原粉75-85％，润湿剂5-12％，分散剂5-12％，稳定剂1-3％，保护剂1-3％。
本发明所述的润湿剂选自烷基多糖苷或司盘或吐温或其混合物。
所述分散剂为木质素磺酸钙或木质素磺酸钠或白炭黑或其混合物。
所述稳定剂为na2co3或k2hpo4或羧甲基淀粉或黄原胶或柠檬酸钠或其混合物；所述保护剂为抗坏血酸或羧甲基纤维素或糊精或其混合物。
所述的脂肪酶原粉来源于动物或植物或微生物中的脂肪酶，优选来源于野生型微生物或基因工程微生物产生的碱性脂肪酶。脂肪酶原粉可通过各种商业途径购买得到，本领域所属技术人员也可按照文献中所公开的方法制备得到脂肪酶原粉。
所述的脂肪酶原粉是经喷雾干燥、冷冻干燥获得的粉状脂肪酶。
所述的脂肪酶可湿性粉剂中，起主要作用的是润湿剂，润湿剂是一类能降低液固界面张力，增加液体对固体表面的接触或增加对固体表面的润湿和扩展的物质。润湿剂的作用主要是提高药剂在水中的润湿分散性、改善药液的渗透性以及在处理对象上的延展性。抗阳光照射能力主要是通过添加稳定剂和保护剂来实现。本发明所述的各个成分综合作用，提高了脂肪酶在叶片上的残留量，提高了抗雨水冲刷和阳光照射的能力。
将脂肪酶原粉制成可湿性粉剂的形式可以使其应用简便快捷，比起单纯的粉剂，可湿性粉剂中添加了润湿剂和分散剂，加到水中后能被水湿润、分散、形成悬浮液，喷洒施用过程中保证喷施的更均匀，同时喷施后附着性强，飘移少，能够更好的发挥作用。
本发明所述的脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、润湿剂、分散剂、稳定剂和保护剂按比例混合均匀后，过筛，去除大颗粒，用气流粉碎机进行粉碎，混合均匀后即得脂肪酶制剂。
脂肪酶作为一种生物催化剂能够作用于柞树叶等的叶表面，水解叶片表面不易被蚕分解的结构，水解叶片中的脂肪，提高叶片中营养成分的利用率，进而提高蚕茧产量，同时提高蚕的抗病能力，提高健蛹率。
将所述的脂肪酶可湿性粉剂应用于蚕业养殖中的，具体步骤为：将脂肪酶可湿性粉剂按照实际使用量兑水稀释50倍-200倍，搅拌至全部溶解后喷雾于田间桑叶或柞树叶上，晾干后采摘喂食蚕；或将溶解后的脂肪酶可湿性粉剂喷雾于适量叶上，摊开晾干叶片后饲喂蚕。
其中，所述晾干为自然干燥。待叶片自然晾干后添食饲喂蚕，可避免蚕食入过多水分，影响叶片的消化和吸收，喂食量视蚕取食量决定。
本发明具有以下优点：
(1)本发明创新性的提出脂肪酶作为添加剂应用于蚕业养殖上，对于提高蚕是生长发育，提高蚕茧量、健蛹率等因素具有显著效果，并且适用于所有养殖的蚕的品种和所有龄期，具有通用性。
(2)本发明公开的脂肪酶可湿性粉剂特别适用于叶片喷雾使用，能够增加脂肪酶在叶片上的附着性，并且能延长在田间自然条件下的持效性。
(3)本发明的脂肪酶可湿性粉剂的制备方法具有工艺简单、成本低廉和易于工业化生产等特点，脂肪酶制剂对环境、人畜安全无毒、无残留；使用方法简便、施用剂量小、增产效果明显、易于推广应用等优点。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
实施例1
一种脂肪酶可湿性粉剂，每100g所述脂肪酶可湿性粉剂中含有脂肪酶原粉75.0g，司盘-805.0g、吐温-805.0g、白炭黑5.36g、木质素磺酸钠5.6g、磷酸氢二钾1.04g、柠檬酸钠1.0g、糊精2.0g。
上述脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、司盘-80、吐温-80、白炭黑、木质素磺酸钠、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、糊精等原料按比例配制好后倒入搅拌机中搅拌均匀，然后过80目筛，去除大颗粒后经300目气流粉碎机粉碎，混合均匀。
实施例2
一种脂肪酶可湿性粉剂，每100g所述脂肪酶可湿性粉剂中含有脂肪酶原粉78.5g，烷基多糖苷(apg-1214)6.9g、木质素磺酸钠5g、白炭黑4g、碳酸钠1.6g、柠檬酸钠1g、羧甲基纤维素3g。
上述脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木质素磺酸钠、碳酸钠、柠檬酸钠、羧甲基纤维素等原料按比例配制好后倒入搅拌机中搅拌均匀，然后过80目筛，去除大颗粒后经300目气流粉碎机粉碎，混合均匀。
实施例3
一种脂肪酶可湿性粉剂，每100g所述脂肪酶制剂中含有脂肪酶原粉80.0g，烷基多糖苷(apg-1214)5.04g、白炭黑3.36g、木质素磺酸钙5.6g、羧甲基淀粉2.0g、黄原胶1.0g、抗坏血酸3.0g。
上述脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木质素磺酸钙、黄原胶、羧甲基淀粉、抗坏血酸等原料按比例倒入搅拌机中搅拌均匀，然后过80目筛去除大颗粒，用300目气流粉碎机粉碎后混合均匀。
实施例4
一种脂肪酶可湿性粉剂，每100g所述脂肪酶可湿性粉剂中含有脂肪酶原粉81.5g，烷基多糖苷(apg-1214)5.8g、白炭黑3.4g、木质素磺酸钙4.8g、羧甲基纤维素钠1.5g、碳酸钠1.0g、羧甲基淀粉2.0g。
上述脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木质素磺酸钙、羧甲基纤维素钠、碳酸钠、羧甲基淀粉等原料按比例配制好后倒入搅拌机中搅拌均匀，然后过80目筛，去除大颗粒后经300目气流粉碎机粉碎，混合均匀。
实施例5
一种脂肪酶可湿性粉剂，每100g所述脂肪酶可湿性粉剂中含有脂肪酶原粉85g，司盘-805.5g、木质素磺酸钙6.3g、羧甲基淀粉1.5g、羧甲基纤维素钠1.7g。
上述脂肪酶可湿性粉剂通过以下方法加工而成：将脂肪酶原粉、司盘-80、木质素磺酸钙、羧甲基淀粉、羧甲基纤维素钠等原料按比例配制好后倒入搅拌机中搅拌均匀，然后过80目筛，去除大颗粒后经300目气流粉碎机粉碎，混合均匀。
实验例1脂肪酶制剂在3龄起桑蚕养殖上的应用
实验样品为实施例1制备的脂肪酶制剂100g，分别兑水5kg、10kg和20kg稀释50倍、100倍和200倍成3个系列浓度。从桑树上采集健康的桑叶，浸渍于以上述不同浓度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分别对3龄起家蚕饲喂处理后的桑叶，直至结茧；以用清水浸渍处理后晾干的桑叶饲喂家蚕为空白对照(ck)。家蚕结茧后5-7d后进行收集，分别称量并计算单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标。
从表1中的实验结果来看，从3龄起饲喂脂肪酶制剂对家蚕的生长发育具有显著影响，与对照相比，单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标均有较大的提高，说明脂肪酶制剂对全茧量增产效果明显，增产率达8％左右。
实验例2脂肪酶制剂在4龄起桑蚕养殖上的应用
实验样品为实施例2制备的脂肪酶制剂100g，分别兑水5kg、10kg和20kg稀释成3个系列浓度。从桑树上采集健康的桑叶，浸渍于以上述不同浓度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分别对4龄起家蚕饲喂处理后的桑叶，直至结茧；以用清水浸渍处理后晾干的桑叶饲喂家蚕为空白对照(ck)。家蚕结茧后5-7d后进行收集，分别称量并计算全茧量、茧层量、蛹体重量和健蛹率等指标。
从表2中的实验结果来看，从4龄起饲喂脂肪酶制剂对家蚕的生长发育具有明显影响，与对照相比，单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标均有较大的提高，说明脂肪酶制剂对全茧量增产效果明显，增产率达7％左右。
实验例3脂肪酶制剂在5龄起桑蚕养殖上的应用
实验样品为实施例3制备的脂肪酶制剂100g，分别兑水5kg、10kg和20kg稀释成3个系列浓度。从桑树上采集健康的桑叶，浸渍于以上述不同浓度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分别对5龄起家蚕饲喂处理后的桑叶，直至结茧；以用清水浸渍处理后晾干的桑叶饲喂家蚕为空白对照(ck)。家蚕结茧后5-7d后进行收集，分别称量并计算全茧量、茧层量、蛹体重量和健蛹率等指标。
从表3中的实验结果来看，从5龄起饲喂脂肪酶制剂对家蚕的生长发育具有明显影响，与对照相比，单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标均有较大的提高，说明脂肪酶制剂对全茧量增产效果明显，增产率达5％左右。
实验例4脂肪酶制剂在4龄起柞蚕养殖上的应用
实验样品为实施例4制备的脂肪酶制剂100g兑水10kg，搅拌均匀后配制成悬浊液。喷雾于柞树上，4龄起柞蚕取食处理后的柞树叶片，直至结茧；以用喷雾清水处理后的柞树饲喂柞蚕为空白对照(ck)。柞蚕结茧5-7d后进行收集，分别称量并计算单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标。
从表4中的实验结果来看，从4龄起饲喂脂肪酶制剂对柞蚕的生长发育具有显著影响，与对照相比单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标均有较大的提高，说明脂肪酶制剂对全茧量增产效果明显，增产率达14％左右。
实验例5脂肪酶制剂在5龄起柞蚕养殖上的应用
实验样品为实施例5制备的脂肪酶制剂100g兑水10kg，搅拌均匀后配制成悬浊液。喷雾于柞树上，5龄起柞蚕取食处理后的柞树叶片，直至结茧；以用喷雾清水处理后的柞树饲喂柞蚕为空白对照(ck)。柞蚕结茧5-7d后进行收集，分别称量并计算单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标。
从表5中的实验结果来看，从5龄起饲喂脂肪酶制剂对柞蚕的生长发育具有显著影响，与对照相比单粒全茧重、单粒茧层重和健蛹率等指标均有较大的提高，说明脂肪酶制剂对全茧量增产效果明显，增产率达11％左右。
表1脂肪酶制剂对3龄起家蚕全茧量、茧层量和健蛹率的影响
表2脂肪酶制剂对4龄起家蚕全茧量、茧层量和健蛹率的影响
表3脂肪酶制剂对5龄起家蚕全茧量、茧层量和健蛹率的影响
表4脂肪酶制剂对4龄起柞蚕全茧量、茧层量和健蛹率的影响
表5脂肪酶制剂对5龄起柞蚕全茧量、茧层量和健蛹率的影响