本发明属于生物技术领域，具体涉及一种治疗哮喘和支气管炎等呼吸系统疾病的喷雾剂及其制备工艺，该喷雾剂主要活性成分包含栀子苷与多烯磷脂酰胆碱，以鼻腔吸入为主。
背景技术：
支气管哮喘(bronchialasthma)简称“哮喘”，是一种伴有免疫功能紊乱的变态反应性疾病，其发病率呈上升趋势，全世界约有1亿哮喘患者。哮喘发生机制复杂,是由气道内多种炎症细胞及其细胞组份参与的气道慢性炎症性疾病，气道高反应性和气道炎症是其重要病理特征。目前主要通过长期吸入糖皮质激素等以达到临床控制，还没有有效的根治支气管哮喘的方法，已成为严重威胁公众健康的一种主要慢性疾病。该病可发生于任何年龄，以1-6岁发病较多，大多在3岁以内发病。目前应用在小儿反复呼吸道感染及哮喘的常规用药，起效快，疗效显著，但同时存在着毒副作用明显，容易复发等问题。
哮喘发作时可引起肺表面活性物质（ps）量和功能异常，导致终末细支气管萎陷，气道阻力增加从而加重哮喘。研究表明给予外源性ps可以防治哮喘，已广泛应用到临床（肺表面活性物质对哮喘t细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响，张宏美等）。外源性的ps制剂价格较高，而多烯磷脂酰胆碱的化学结构与ps中的功能磷脂非常类似，可作为外源性ps制剂替代品（多烯磷脂酰胆碱雾化吸入对豚鼠实验性哮喘的预防作用，韦怀新等）。多烯磷脂酰胆碱(polyenephosphatidylcholine)是从大豆中高度浓缩提取的一种磷脂，含有丰富易吸收利用的多种多价不饱和脂肪酸(亚油酸、亚麻酸和油酸)。相关研究表明多烯磷脂酰胆碱注射液喷射雾化吸入确实能明显延长豚鼠诱喘潜伏期并减轻豚鼠哮喘发作症状。起效时间在0.5h内,有效时间至少持续到用药后3h，同时还具有一定的量效关系。
中药栀子系茜草科植物栀子(gardeniajasminoidesellis)的干燥成熟果实。栀子的使用历史非常悠久，具有极为广泛的药用价值，具有泻火除烦、凉血解毒、清热利尿的功效。常用于治疗黄疽尿赤、血淋涩痛、目赤肿痛等症。栀子含有环烯醚萜类(栀子苷类)、黄酮类(栀子素灯)、有机酸酯类(绿原酸、西红花酸类)等化学成分。栀子苷是栀子干燥成熟果实中最为重要的环烯醚萜苷类化合物之一，又称东尼平苷。栀子苷有多种用途，根据发酵的条件不同，可制成食用天然着色剂栀子蓝和栀子红，也是用于治疗心脑血管、肝胆等疾病及糖尿病的重要原料药物。最近研究发现（栀子苷对小鼠哮喘的保护作用及其机制研究，杨小丰等），腹腔注射栀子苷（80mg/kg）可显著调节ova触发的哮喘症状，通过缓减炎症过程保护ova（卵清蛋白）致小鼠过敏性哮喘。
栀子苷如作为注射剂使用，在临床应用方面存在着些许不足：采用注射给药需要患者到医院治疗，用药不便。这些不足使患者不能坚持用药，影响疗效，特别是小儿患者的顺应性差。
定量吸入气雾剂因具有靶向和局部给药的特点，已成为哮喘和慢性阻塞性肺病最有效的维持治疗方式。因此探求一种安全有效的控制或预防哮喘发作的新型栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的雾化剂具有极其重要的意义。
我们将提纯的栀子苷与多烯磷脂酰胆碱重新组合，提供一种安全有效的雾化剂的制备方法，能够治疗哮喘和支气管炎等呼吸系统疾病。该组合物可以协同有效的发挥药物疗效，显著优于单用同剂量栀子苷或多烯磷脂酰胆碱的效果，具有增强治疗效果、缩短用药周期等特点。
技术实现要素：
本发明的目的提供一种栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为主要活性成分的喷雾剂，以鼻腔吸入为主，是由栀子苷、多烯磷脂酰胆碱和药学上可接受的辅料制成的药物组合物。所述栀子苷与多烯磷脂酰胆碱的重量比为1:5-30，优选为1:10-20。
本发明的另一个目的是提供该喷雾剂的制备方法和用途。
本发明所涉及的喷雾剂可以采用手动泵将药液雾化后吸入给药，也可采用超声雾化器等仪器将药液雾化后吸入给药。通过鼻腔给药定量吸入栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的喷雾剂，直接将药物分布作用于鼻腔、气管与肺部，起到治疗哮喘和支气管炎等呼吸系统疾病的作用。具有副作用少、安全性高、服药方便等优点。
喷雾剂由栀子苷原粉、多烯磷脂酰胆碱原粉、溶剂及附加剂制成。
所述溶剂包括但不限于生理盐水，附加剂为防腐剂，所述防腐剂包括但不限于羟苯酯类、山梨酸类的一种或多种，羟苯酯类包括但不限于羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯，山梨酸类包括但不限于山梨酸钾、山梨酸钠，其中优选山梨酸钾。所述的附加剂还可以含有ph调节剂。
本发明所述栀子苷喷雾剂，用于预防和治疗呼吸道反复感染、哮喘，特别是小儿呼吸道反复感染、哮喘。
本发明的有益效果：（1）本发明所述的以栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的喷雾剂具有较好的疗效，服药方便；（2）本发明所述药物组合物以协同有效的发挥药物疗效，显著优于单用同剂量栀子苷或多烯磷脂酰胆碱的效果，缩短了用药周期；（3）本发明所得喷雾剂解决了栀子苷与多烯磷脂酰胆碱二者性质差异大、不易组合使用的技术问题；（4）本发明所得药物制剂安全、可靠，副作用小。
根据本发明的上述内容，本领域的技术人员在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1
以栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的药物组合物的吸入喷雾剂的制备，可采用超声雾化器等仪器将该配方药液雾化后吸入，成人一次雾化处方为：
栀子苷原粉20mg
多烯磷脂酰胆碱250mg
羟苯乙酯30mg
制备方法：栀子苷原粉与多烯磷脂酰胆碱及羟苯乙酯溶解在100ml生理盐水中，过滤后将滤液灌入喷瓶备用。
实施例2
以栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的药物组合物的吸入喷雾剂的制备，可采用超声雾化器等仪器将该配方药液雾化后吸入，成人一次雾化处方为：
栀子苷原粉20mg
多烯磷脂酰胆碱250mg
山梨酸钾5mg
制备方法：栀子苷原粉与多烯磷脂酰胆碱及山梨酸钾溶解在100ml生理盐水中，过滤后将滤液灌入喷瓶备用。
实施例3
以栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的药物组合物的吸入喷雾剂的制备，可采用超声雾化器等仪器将该配方药液雾化后吸入，成人一次雾化处方为：
栀子苷原粉20mg
多烯磷脂酰胆碱250mg
苯甲醇45mg
制备方法：栀子苷原粉与多烯磷脂酰胆碱及苯甲醇溶解在100ml生理盐水中，过滤后将滤液灌入喷瓶备用。
为了更好的理解本发明，将通过以下动物实验说明本发明的技术效果。
实验动物：选用6～8周龄，体重20~24g的spf级健康balb/c雌性小鼠。在恒温、安静、相对避光的环境中使用非卵蛋白饲养一周后，按随机数字表法将小鼠随机均分为8组：正常对照组、哮喘组、实验组（实施例1、实施例2、实施例3药物组合）、栀子苷对照组、多烯磷脂酰胆碱对照组、阳性对照组（地塞米松），每组10只。
哮喘模型的建立及各组给药方法：1、正常对照组：致敏过程以pbs代替ova（鸡卵清蛋白）注射，激发过程以等量生理盐水雾化吸入，相关参数与哮喘组相同。
2、哮喘组：在实验第1、14天腹腔注射ova混悬液200μl（含有ova10ug,氢氧化铝20mg）致敏；在实验第21天将小鼠放入自制的玻璃雾化吸入箱，用生理盐水配制1％浓度ova的雾化液，每天1次将20ml的雾化液经超声雾化器雾化吸入激发，每次30min，连续7天。
3、实验组3组（本发明实施例1、实施例2、实施例3）：哮喘模型建立同哮喘组。但于每次激发后立即以实施例中喷雾剂成分1ml加生理盐水共20ml雾化吸入30min，每日一次，连续7天。
4、栀子苷对照组：哮喘模型建立同哮喘组。按实施例1配方制备雾化液，其中不加多烯磷脂酰胆碱。每次激发后立即以喷雾剂1ml加生理盐水共20ml雾化吸入30min，每日一次，连续7天。
5、多烯磷脂酰胆碱对照组：哮喘模型建立同哮喘组。按实施例1配方制备雾化液，其中不加栀子苷。每次激发后立即以喷雾剂1ml加生理盐水共20ml雾化吸入30min，每日一次，连续7天。
6、阳性对照组（地塞米松）：哮喘模型建立同哮喘组。将0.05mg地塞米松稀释到20ml的生理盐水中配制成阳性对照药物雾化液。在实验第21天将小鼠放入自制的玻璃雾化吸入箱，每天进行致敏激发前1h，将20ml的阳性对照药物雾化液经超声雾化器雾化吸入，每次30min，连续7天。
标本收集及检测:各组小鼠于末次雾化激发24h后通过眼眶采血和放血，在气管中插入连接注射器的胶管，注入37℃的0.5mlpbs溶液进行支气管肺泡灌洗，反复3次，获得支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,balf)。混均收集的balf,1500r/min离心10min，转移上清液，分装于试管中，封闭，-20℃保存，待测细胞因子。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(elisa)检测balf中ifn-γ、il-4elisa水平变化。
表1各组小鼠balf中ifn-γ、il-4的比较（n=10，
哮喘组小鼠balf中ifn-γ水平显著低于对照组，il-4水平明显高于对照组，表明造模成功。经过实验组药物、栀子苷对照组、多烯磷脂酰胆碱对照组、地塞米松干预后，哮喘小鼠balf中ifn-γ水平则显著增高，而il-4水平明显降低。结果表明，本发明的栀子苷与多烯磷脂酰胆碱为活性成分的喷雾剂与哮喘组对比有显著差异，表明本发明的喷雾剂对哮喘有显著治疗效果。其中各实施例实验组药物（实施例1、实施例2、实施例3药物组合）与栀子苷对照组、多烯磷脂酰胆碱对照组比较，升高ifn-γ水平和降低il-4水平更明显。说明该组合物可以协同有效的发挥药物疗效，显著优于单用同剂量栀子苷或多烯磷脂酰胆碱的效果。对哮喘具有更好的保护作品用。