本发明属于新药研发技术领域，具体涉及一种乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型缓释胶囊的制备方法。
背景技术
急性心肌梗塞(ami)与血栓栓塞性疾病的发病率与死亡率均甚高，研究防治此类疾病的药物为世人所瞩目。自20世纪60年代发现乙酰水杨酸(acetylsalicylicacid，asa)具显著的抗血小板聚集作用，70年代即用于ami的治疗和预防，循证医学研究证明asa是预防和治疗卒中、心绞痛、心梗、老年性痴呆、偏头痛等疾病的有效药物，其可减少心、脑及外周血管等血栓和栓塞事件达25％，然而口服asa普通片剂，药物在胃内迅速释放，局部浓度过高，对胃肠道粘膜有刺激作用，尤其对于需要长期服药的病人顺应性较差，临床常用的肠溶片能够减轻胃粘膜损伤，但不降低消化道出血发生率，从而严重妨碍了asa的更为广泛应用。为此，国内外尝试了大量的研究工作，旨在改善asa的性质，尤其近年来这方面的研究报道较多，其研究基本点集中于asa在传统缓释材料下的释放特性研究或将asa和小分子物质成盐、酯，但大多仅限于体外研究，临床数据不充分，实际应用效果尚无定论。晚近又将氯吡格雷与asa合用，至于疗效如何也有争议。因此，迄今采取何种措施提高asa的临床疗效、降低不良反应、扩大其应用范围，仍是医药界研究的热点之一。
很难想象不能维持足够的胃肠道滞留时间和稳定性的缓释释药系统能够产生满意的生物利用度和临床疗效，更难想象不能确实解决水溶性药物突释问题的缓释释药系统能够降低肠粘膜损伤、减少消化道出血发生率，产生令人满意的体内效应，因此，我们认为研制asa结肠定位生物粘附型缓释给药系统，应在有效控制asa释放速度、克服水溶性药物突释倾向的同时，必须保证asa在肠道运行中的稳定性及足够的胃肠滞留时间。如何研发一种乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型缓释胶囊的制备方法，具有重要的现实意义。
技术实现要素：
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型缓释胶囊的制备方法。
本发明采取的技术方案为：
一种乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型缓释胶囊的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
(1)先溶解得到浓度是1％-20％的药物缓释材料溶液，在搅拌条件下将药物缓释材料溶液与乙酰水杨酸(asa)混合，乙酰水杨酸(asa)的添加量是药物缓释材料的0.1-5倍；
(2)将药物缓释材料溶液倾入到分散相溶液中，药物缓释材料溶液的体积是分散相的1/6-1/24，向其中加入乳化剂，调节溶液ph为1-12，高压均质充分乳化，真空脱泡；
(3)将步骤(2)中的产物导入喷雾干燥制粒机，通过调节喷雾干燥参数，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球；
(4)将步骤(3)中的乙酰水杨酸缓释粉末微球过80-100目筛之后，其与载体辅料、填充剂按照质量比为1-40:1-20:1-10进行混合均匀，再用浓度为75％的乙醇作湿润剂制成颗粒；
(5)步骤(4)中的颗粒经整粒、低温真空干燥，装入肠溶空心胶囊，包装即得。
考虑到asa水溶性较高，缓释胶囊制剂易于出现药物突释现象，采用了具有生物粘附和药物缓释双重作用和易与糖蛋白寡糖联上的糖残基形成氢键、产生较强的粘液凝胶网状结构、与胃粘膜糖蛋白具较强的粘附作用的载体辅料，使胶囊性能更加稳定，选择具有生物粘附和药物缓释双重作用载体辅料，所述步骤(1)中药物缓释材料为阿拉伯胶、明胶、β-环糊精、壳聚糖、羧甲基壳聚糖、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、壳聚糖季氨盐、聚乙烯醇接枝壳聚糖中的一种或两种，当使用其中两种混合时缓释材料的质量比为1-15:1-15。
进一步的，所述步骤(2)中分散相为去离子水、稀盐酸溶液、稀醋酸溶液或稀乙醇溶液中的任意一种。
进一步的，所述步骤(2)中乳化剂为吐温80、司盘或十二烷基硫酸钠。
进一步的，所述步骤(2)中调节ph的试剂为10％碳酸氢铵，氢氧化钠、氨水、氢氧化钾，盐酸或醋酸中的任意一种。
进一步的，所述步骤(2)中均质压力为10-50mpa，均质时间为30-120s，均质温度为5-60℃，脱泡时间5-15min。
更进一步的，所述步骤(2)中均质压力为40-70mpa，为了使混合溶液充分乳化，
均质时间为90-180s，均质温度为5-60℃，为了使溶液充分脱泡，脱泡时间为8-15min。
进一步的，所述步骤(3)中喷雾干燥参数的喷雾条件为：进样温度为10-70℃，进样流量为50-500ml/min，进风温度为100-300℃，出风温度为10-100℃。
进一步的，所述步骤(4)中填充剂为微晶纤维素、可溶性淀粉、碳酸钙、磷酸氢钙、葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇中的一种或多种。
进一步的，所述步骤(4)中载体辅料为羟丙基甲基纤维素(hpmc)、羧甲基纤维素(cmc)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(hpmcp)、乙基纤维素(ec)、羟乙基纤维素(hec)、pvpk30、卡波姆，其添加量与药物缓释材料的质量比为1:10-1:20。
本发明的有益效果为：
本发明采用asa和一种或多种的药用缓释和生物粘附材料为主要原料，首先将asa和一种或多种药用缓释材料混合均匀，经过喷雾干燥得到asa缓释粉末微球，过筛之后与具有生物粘附和药物缓释双重作用的载体辅料、填充剂混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入肠溶空心胶囊，包装即得asa结肠定位生物粘附型缓释胶囊，其按质量百分比计由以下组分组成：asa1-30％，缓释材料1-40％，生物粘附材料1-20％，余量为填充剂。经查新证明国内外无类同报告，该研究对于提高asa的生物利用度和心血管疾病防治效果、降低不良反应并为开发理想的asa新制剂提供了新的制造技术，具有巨大的社会效益及经济效益。
本发明具有操作方便，制备技术工艺简便稳定和制造成本低廉等优点。本发明对原材料有广泛的适用性，所有能够较好地通过喷雾干燥包裹药物，并能达到缓慢释放效果的药用缓释材料均可以适用。因此，本发明的原料来源十分广泛。本发明的重要意义还在于asa结肠定位生物粘附型缓释胶囊制备中采用了具有生物粘附和药物缓释双重作用和易与糖蛋白寡糖联上的糖残基形成氢键、产生较强的粘液凝胶网状结构、与肠粘膜糖蛋白具较强的粘附作用的载体辅料，结果使制备的胶囊性能更加稳定，结肠粘附性更强，达到结肠内asa定位释放，克服了水溶性药物缓释制剂易出现的突释现象，减弱了对胃肠道粘膜的刺激作用。本发明采用的材料安全无毒副作用、具有良好的生物相容性、生物可降解性等特点。本发明有望开发一种治疗和预防心血管疾病的理想药物，具有良好的研究和开发应用前景。因此，该发明技术具有很好经济开发潜力。
附图说明
图1为乙酰水杨酸缓释粉末微球的扫描电镜图。
图2为各实验组大鼠给药后asa血药浓度曲线图。
具体实施方式
下面结合附图进一步说明本发明。
本发明的目的是提供一种以药用药物缓释和生物粘附材料为主要载体辅料制备asa结肠定位生物粘附型缓释胶囊的方法，以弥补已有技术的不足。
本发明采用asa和一种或多种药物缓释材料和生物粘附剂为主要原料，其具体方法是先将药物缓释材料溶解，在搅拌条件下将药物缓释材料溶液和asa原料药混合后，倾入到分散相溶液中，并向其中加入乳化剂等溶液，高压均质充分乳化，真空脱泡，导入喷雾干燥制粒机，通过控制反应温度、体系酸碱度、均质压力和乳化和脱泡时间以及喷雾干燥制粒机进风温度、出风温度、进料流量、进样温度等，即得到asa缓释粉末微球，过筛之后与具有生物粘附和药物缓释双重作用载体辅料、填充剂混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例1
先将β-环糊精和阿拉伯胶分别充分溶解，β-环糊精和阿拉伯胶按照质量比为15:1配成浓度为10％的溶液，在搅拌条件下将β-环糊精/阿拉伯胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为10:1混合后，倾入到稀盐酸溶液中，并向其中加入一定量的吐温80溶液，调节溶液ph3，均质压力为10mpa，均质时间为90s，均质温度为45℃，均质充分乳化，真空脱泡5min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度10℃、进样流量50ml/min、进风温度100℃、出风温度10℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过80目筛之后与羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(hpmcp)、卡波姆、微晶纤维素、混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例2
先将β-环糊精和明胶分别充分溶解，β-环糊精和明胶按照质量比为1:15配成浓度为15％的溶液，在搅拌条件下将β-环糊精和明胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为5:1混合后，倾入到去离子水溶液中，并向其中加入一定量的十二烷基硫酸钠溶液，调节ph6，均质压力为30mpa，均质时间为120s，均质温度为50℃，均质充分乳化，真空脱泡8min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度20℃、进样流量100ml/min、进风温度150℃、出风温度30℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过100目筛之后与羟丙基甲基纤维素(hpmc)、pvpk30、可溶性淀粉混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例3
先将阿拉伯胶和明胶分别充分溶解，阿拉伯胶和明胶按照质量比为3:1配成浓度为8％的溶液，在搅拌条件下将阿拉伯胶和明胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为8:1混合后，倾入到稀乙醇溶液中，并向其中加入一定量的司盘溶液，调节ph9，均质压力为50mpa，均质时间为150s，均质温度为40℃，均质充分乳化，真空脱泡10min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度30℃、进样流量200ml/min、进风温度200℃、出风温度60℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过80目筛之后与羟乙基纤维素(hec)、羧甲基纤维素、碳酸钙混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例4
先将壳聚糖和明胶别充分溶解，二者按照质量比为1:10混合制备得到浓度为10％的溶液，在搅拌条件下将壳聚糖和明胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为15:1混合后，倾入到稀醋酸溶液中，并向其中加入一定量的吐温80溶液，调节ph5，均质压力为60mpa，均质时间为160s，均质温度为35℃，均质充分乳化，真空脱泡15min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度40℃、进样流量300ml/min、进风温度250℃、出风温度70℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过100目筛之后与羟丙基甲基纤维素(hpmc)、卡波姆、碳酸氢钙混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例5
先将β-环糊精和阿拉伯胶别充分溶解，二者按照质量比为10:1混合制备得到浓度为15％的溶液，在搅拌条件下将壳聚糖和明胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为20:1混合后，倾入到去离子水溶液中，并向其中加入一定量的司盘溶液，调节ph12，均质压力为70mpa，均质时间为30s，均质温度为5℃，均质充分乳化，真空脱泡13min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度20℃、进样流量400ml/min、进风温度280℃、出风温度30℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过100目筛之后与微晶纤维素、乙基纤维素(ec)、麦芽糖混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
实施例6
先将壳聚糖和阿拉伯胶别充分溶解，配成壳聚糖和阿拉伯胶质量比为5:1，浓度为20％的溶液，在搅拌条件下将壳聚糖和阿拉伯胶溶液与乙酰水杨酸原料药按质量比为10:1混合后，倾入到稀乙醇溶液中，并向其中加入一定量的十二烷基硫酸钠溶液，调节ph1，均质压力为50mpa，均质时间为180s，均质温度为60℃，均质充分乳化，真空脱泡12min，导入喷雾干燥制粒机，调节喷雾干燥参数为：进样温度70℃、进样流量500ml/min、进风温度300℃、出风温度100℃，即得到乙酰水杨酸缓释粉末微球，过100目筛之后与可溶性淀粉、羟乙基纤维素(hec)、甘露醇混合均匀，再用75％乙醇作湿润剂制成颗粒，经整粒、低温真空干燥，装入1号肠溶空心胶囊，包装即得本发明产品。
由图1可见，上述实施例中制备的乙酰水杨酸缓释粉末微球表面光滑圆整、致密、无裂隙及孔洞、无黏连现象。
实施例7
本发明提供的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型缓释胶囊在大鼠体为内的药物代谢动力学研究。
方法：wistar大鼠60只，♀♂兼用，体重220±12g，给药前禁食12h，不限饮水，随机分为乙酰水杨酸原料药组、乙酰水杨酸肠溶胶囊组、实施例1组，实施例2组，实施例3组，实施例4组，分别灌胃给与相同剂量的乙酰水杨酸原料药、乙酰水杨酸肠溶胶囊和实施例1，实施例2，实施例3，实施例4制备得到的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊(按乙酰水杨酸计50mg/kg)，分别于给药前及给药后0.25，0.5，1，2，4，8，12，16于眼眶后静脉丛各采血约0.5ml，肝素抗凝(125μ，ph7.0)，加入0.1mol·l-1抗坏血酸和0.1mol·l-1edta各10μl，0℃3000rpm离心10min分离血浆。取血浆100μl，加入冰乙腈400μl，旋涡混匀，14000rpm离心10min，吸取上清液20μl进样。利用hplc-紫外检测器测定乙酰水杨酸，色谱条件如下：色谱柱：
结果：采用随机分组单剂量给药的方案，测定了大鼠口服乙酰水杨酸原料药、市售乙酰水杨酸肠溶胶囊以及实施例1、实施例2、实施例3、实施例4制备得到的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的血药浓度，并计算了t1/2α，t1/2β，tmax，cmax，ka，auc0-t，auc0-∞，mrt0-t，mrt0-∞t等主要药动学参数，研究结果表明，本发明提供的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊显著改善了asa的药动学性质，具有缓释和长效的作用。与乙酰水杨酸原料药比，本发明提供的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的生物利用度得到了显著提高，并且实验结果还表明，本发明提供的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的生物利用度也明显高于市售乙酰水杨酸肠溶胶囊，尤其是实施例1制备得到的乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的生物利用度最高，取得了非常好的预料不到的技术效果。
上述实施例3，实施例4制备得到的asa结肠定位生物粘附型胶囊的药动学参数(
表1大鼠单剂量口服相同剂量的乙酰水杨酸原料药、乙酰水杨酸肠溶胶囊和实施例产品
如图2和表1所示，乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊与乙酰水杨酸肠溶胶囊和乙酰水杨酸原料药在大鼠体内的药动学特征差异具有显著性。乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的auc0-t，auc0-t值明显高于乙酰水杨酸肠溶胶囊和乙酰水杨酸原料药，以市售乙酰水杨酸肠溶胶囊为参比制剂，给药后16h内，计算实施例1-4的相对生物利用度分别提高了92.73％，22.53％，17.73％，44.45％，这与乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊具有的药物缓释效果有关，因而口服乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊后在体内可维持较长时间有效血药浓度。乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊达峰时间滞后于市售乙酰水杨酸肠溶胶囊和乙酰水杨酸原料药近2h，峰浓度仅为乙酰水杨酸原料药的34.48％-53.45％、市售乙酰水杨酸肠溶胶囊的57.14％-88.57％。乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊的ka值显著小于市售乙酰水杨酸肠溶胶囊和乙酰水杨酸原料药，体内mrt0-t，mrt0-∞显著延长，说明乙酰水杨酸结肠定位生物粘附型胶囊明显延长了asa在动物体内的存在过程，具有较好的滞留和缓释作用。
以上所述并非是对本发明的限制，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明实质范围的前提下，还可以做出若干变化、改型、添加或替换，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。