相关申请的交叉参考本申请根据35u.s.c.§119(e)要求2017年8月22日提交的美国临时申请号62/548,670的优先权，其通过参考以其全部结合至本文中。领域本公开涉及碳酸酐酶ix抑制剂的组合物和方法。本公开还涉及碳酸酐酶ix抑制剂的靶向缀合物。本公开还涉及碳酸酐酶ix抑制剂的靶向缀合物在治疗疾病的方法和疾病成像的方法中的用途。背景微环境可极大地影响肿瘤内癌细胞的表型。一种这样的微环境影响是由于肿瘤内存在的脉管系统形成不良而引起的缺氧(参见例如nomanmz,hasmimm,messaiy,terrys,kiedac,janjib,chouaibs.hypoxia:akeyplayerinanti-tumorimmuneresponse.areviewinthetheme:cellularresponsestohypoxia.amjphysiolcellphysiol.2015,309(1):c569-c579)。研究表明，所有基因的1%-1.5%受到缺氧调控(harrisal.hypoxia-akeyregulatoryfactorintumourgrowth.natrevcancer.2002.2(1):38-47)。那么不足为奇的是，缺氧癌细胞可呈现出明显不同的基因表达模式。在缺氧的微环境中时，这些变化可能导致对化学治疗的敏感性差异，进而可导致癌症的侵袭性和复发性增加(yamadas,utsunomiyat,moriney,imuras,ikemotot,arakaway,kanamotom,iwahashis,saitoy,takasuc,ishikawad,shimadam.expressionsofhypoxia-induciblefactor-1andepithelialcelladhesionmoleculearelinkedwithaggressivelocalrecurrenceofhepatocellular)。由于缺氧的影响，已经做出努力以鉴定癌症特异性的缺氧标志物以用于选择性成像。一种这样的标志物为碳酸酐酶ix(本文也称为caix)，其经缺氧诱导因子-1(hif-1)的激活而表达。caix为一组金属蛋白的成员，通常含有催化二氧化碳可逆水合的锌((co2+h2o↔hco3-+h+)。caix在用于co2水合反应的最活跃的ca中，并且基于序列相似性含有4个结构域：n-末端蛋白聚糖样(pg)结构域、ca催化结构域、跨膜区段(tm)和胞质内(ic)部分。caix在许多癌症中均有表达，包括肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌和口腔癌。另外，由于导致hif-1的组成性激活的vhl基因的突变所致，已经显示癌症(比如肾脏透明细胞癌)可将caix上调至基础水平的多达150倍。然而，在正常细胞中，caix仅在胃和胆囊的上皮细胞中表达，而在那里其似乎没有催化活性。由于caix被吹捧为显像剂特异性递送的极佳靶标，因此已经创建了小分子-缀合物和抗体-缀合物两者以对缺氧肿瘤进行成像。例如，caix特异性配体已用于对结肠癌、肾癌和宫颈癌的小鼠异种移植模型进行成像。除了患有透明细胞肾癌的人类患者之外，caix特异性抗体已用于对透明细胞肾癌、头颈癌、结肠癌和宫颈癌的小鼠异种移植模型进行成像。此外，尽管针对靶向caix的显像剂已经做出很多努力，但相反，针对表达caix的癌症的靶向治疗的研究却很少。caix靶向治疗的少数报道涉及使用抗caix抗体，这些抗体直接用治疗性放射性核素标记(muselaersch,oosterwijke,bosdl,oyenwj,mulderspf,boermanoc.optimizainglutetium177-anti-carbonicanhydraseixradioimmunotherapyinanintraperitonealclearcellrenalcellcarcinomaxenograftmodel.molimaging.2014.13:1-7)，或与含有药物的脂质体缀合(wongbc,zhangh,qinl,chenh,fangc,lua,yangz.carbonicanhydraseix-directedimmunoliposomesfortargeteddrugdeliverytohumanlungcancercellsinvitro.drugdesdevelther.2014,8:993-1001)。据我们所知，在体内小鼠异种移植模型中，尚未报道直接与高效抗癌药物缀合的小分子caix配体的功效。尽管小分子缀合物已主要使用pet和荧光对缺氧肿瘤进行成像，但仍需要开发其他选择性显像剂。此外，开发caix靶向治疗的需求尚未得到满足。概述在一些实施方案中，本公开提供包含通过接头与至少一种选自治疗剂和显像剂的试剂共价结合的caix配体的缀合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本公开提供包含与至少一种选自治疗剂和显像剂的试剂共价结合的caix配体的缀合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本公开提供式b-l-a的缀合物，其中b为碳酸酐酶ix的结合配体，l为任选的接头，和a为治疗剂或显像剂。在这些实施方案的一些方面，caix配体为含芳基磺酰胺的化合物。在其他实施方案中，本公开提供在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者有效量的包含通过接头与至少一种显像剂共价结合的caix配体的缀合物或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本公开提供在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者有效量的式b-l-a的缀合物，其中b为碳酸酐酶ix的结合配体，l为任选的接头，和a为显像剂。在这些实施方案的一些方面，caix配体为含有芳基磺酰胺的化合物。在这些实施方案的一些方面，caix配体具有下式：其中ra、rb和m如本文定义。在其他实施方案中，本公开提供一种组合物，其包含如本文所述的缀合物或其药学上可接受的盐以及任选至少一种药学上可接受的赋形剂。在其他实施方案中，本公开提供如本文所述的缀合物，其用于在受试者中对细胞群进行成像的方法。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括给予受试者有效地对细胞进行成像的量的缀合物。在其他实施方案中，本公开提供如本文所述的缀合物在制备可用于在受试者中对细胞群进行成像的药物中的用途。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括给予受试者有效地对细胞进行成像的量的缀合物。在其他实施方案中，本公开提供在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括：a.给予受试者有效量的本文所述的缀合物或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，所述方法进一步包括：b.通过成像针对治疗鉴定患者。在这些实施方案的一些方面，成像包括：c.给予患者有效量的缀合物，其中试剂为如本文所述的显像剂；和d.鉴定患者为患有表达caix的癌症。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在其他实施方案中，本公开提供如本文所述的缀合物，其用于在受试者中治疗癌症的方法。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括给予受试者有效治疗癌症的量的缀合物。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在其他实施方案中，本公开提供如本文所述的缀合物在制备可用于在受试者中治疗癌症的药物中的用途。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括给予受试者有效治疗细胞的量的缀合物。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在一些实施方案中，本公开提供一种组合物，其包含如本文所述的缀合物或其药学上可接受的盐以及任选至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，本公开提供在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；b.通过用近红外波长的光照射来照射与细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从细胞发出的光。在一些实施方案中，本公开提供在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物。在一些实施方案中，本公开提供在受试者中对癌症进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的癌细胞结合的缀合物；b.用近红外波长的光照射与癌细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从癌细胞发出的光。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在一些实施方案中，本公开提供在受试者中对癌症进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的癌细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与癌细胞结合的缀合物。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在其他实施方案中，本公开提供用于在患者中对癌症进行成像的方法的本公开的缀合物或其药学上可接受的盐。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括：a.给予患者缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的癌细胞结合的缀合物；b.用近红外波长的光照射与癌细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从癌细胞发出的光。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在一些实施方案中，本公开提供本公开的化合物或其药学上可接受的盐在制备可用于在患者中对癌症进行成像的药物中的用途。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括：a.给予患者缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物。在这些实施方案的一些方面，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的癌细胞结合的缀合物；b.用近红外波长的光照射与癌细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从癌细胞发出的光。在这些实施方案的一些方面，癌症选自肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、卵巢癌、脑癌、头颈癌、口腔癌和肾癌。在一些实施方案中，本公开提供体外对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.使细胞与本公开的缀合物接触以提供标记的细胞，和b.用荧光光源可视化标记细胞。在一些实施方案中，本公开提供体外对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.使细胞与本公开的缀合物接触以提供标记细胞，b.用近红外波长的光照射与细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从细胞发出的光。在一些实施方案中，本公开提供在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；b.检测与缀合物结合的放射性核素。本发明的实施方案通过以下列举的条款进一步描述。应当理解，本文所述的任何实施方案可连同本文所述的任何其他实施方案一起，在实施方案彼此不矛盾的程度上进行使用。1.式b-l-a的缀合物或其药学上可接受的盐，其中b为下式的碳酸酐酶ix的结合配体：其中每个ra独立地选自h、卤素、-or1、-oc(o)r1、-oc(o)nr1r2、-os(o)r1、-os(o)2r1、-sr1、-s(o)r1、-s(o)2r1、-s(o)nr1r2、-s(o)2nr1r2、-os(o)nr1r2、-os(o)2nr1r2、-nr1r2、-nr1c(o)r1、-nr1c(o)or2、-nr1c(o)nr1r2、-nr1s(o)r2、-nr1s(o)2r2、-nr1s(o)nr1r2、-nr1s(o)2nr1r2、-c(o)r1、-c(o)or1和-c(o)nr1r2；rb为-or3、-sr3、-nr3r4、-s(o)2r3、-nr4c(o)r3或-nr4c(o)nr3r4；r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-n(r5)-*、-n(r5)-c1-c6烷基-n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*、-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；和c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基中每个其余的氢原子独立地任选地被以下取代：c1-c10烷基、c2-c10烯基、卤素、-or1、-oc(o)r1、-oc(o)nr1r2、-os(o)r1、-os(o)2r1、-sr1、-s(o)r1、-s(o)2r1、-s(o)nr1r2、-s(o)2nr1r2、-os(o)nr1r2、-os(o)2nr1r2、-nr1r2、-nr1c(o)r1、-nr1c(o)or2、-nr1c(o)nr1r2、-nr1s(o)r2、-nr1s(o)2r2、-nr1s(o)nr1r2、-nr1s(o)2nr1r2、-c(o)r1、-c(o)or1和-c(o)nr1r2；每个r1、r2、r4、r5和r6独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c9环烷基；l为任选的接头；a为治疗剂或显像剂；m为1-5的整数；和*表示与l或a的连接点。2.条款1的缀合物或其药学上可接受的盐，其中所述碳酸酐酶ix配体具有下式：其中rb为-or3、-sr3、-nr3r4、-s(o)2r3、-nr4c(o)r3或-nr4c(o)nr3r4；r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-nr5-*、-n(r5)-c1-c6烷基-n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*、-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；每个r1、r2、r4、r5和r6独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c9环烷基；和*表示与l或a的连接点。3.条款1或2的缀合物或其药学上可接受的盐，其中所述碳酸酐酶ix配体为：其中*表示与缀合物其余部分的连接点。4.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含选自以下的部分：-c(o)(c1-c12烷基)c(o)-、-nh-c1-c12烷基-nh-、-n(c1-c6烷基)-c1-c12烷基-n(c1-c6烷基)-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qnh-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qn(c1-c6烷基)-、-(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-、-nh(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-和-n(c1-c6烷基)(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-；其中q为1-40的整数。5.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含至少一个氨基酸。6.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含至少一个选自以下的氨基酸：3-氨基丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸和精氨酸。7.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含可释放接头。8.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含二硫化物部分。9.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含肼部分。10.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中接头包含下式的接头部分：其中每个r7和r8独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个x独立地为c1-c6烷基或c6-c10芳基-(c1-c6烷基)，其中c1-c6烷基和c6-c10芳基-(c1-c6烷基)中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个r9、r10、r11和r12独立地选自h、c1-c7烷基、c2-c7烯基、c2-c7炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基；和每个*表示与缀合物其余部分的共价键。11.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的连接点。12.条款1-10中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。13.条款1-10中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。14.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含具有氨基酸序列3-氨基丙氨酸-asp-cys的接头部分。15.条款1-13中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含具有氨基酸序列asp-arg-asp-3-氨基丙氨酸-asp-cys的接头部分。16.条款4-15中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中q为2。17.条款4-15中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中q为4。18.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a为显像剂。19.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a为荧光染料。20.前述条款中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a为下式的荧光素染料：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。21.选自以下的条款1的缀合物或其药学上可接受的盐：和。22.条款1-18中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a为放射性显像剂。23.条款1-18中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a包含与螯合基团配位的金属的放射性同位素。24.条款1-18、22或23中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含选自111in、99mtc、64cu、67cu、67ga和68ga的放射性金属。25.条款1-18或22-24中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含放射性金属64cu。26.条款1-18或22-25中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含选自以下基团的螯合基团：dota、nota、teta、dotaga、nodaga、dtpa、pcta和neta。27.条款1-18或22-26中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含为nodaga基团的螯合基团。28.条款1-18或22-27中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含下式的螯合基团：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。29.条款1-18或22-28中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其包含下式：。30.条款1-17中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中a为治疗剂。31.条款1-17中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中治疗剂为微管溶素(tubulysin)。32.选自以下的条款1的缀合物或其药学上可接受的盐：或。33.条款1-17中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐，其中治疗剂为美登素。34.具有下式的条款1的缀合物或其药学上可接受的盐：。35.一种在受试者中对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.给予受试者有效量的式b-l-a的缀合物，其中b为下式的碳酸酐酶ix配体：其中每个ra独立地选自h、卤素、-or1、-oc(o)r1、-oc(o)nr1r2、-os(o)r1、-os(o)2r1、-sr1、-s(o)r1、-s(o)2r1、-s(o)nr1r2、-s(o)2nr1r2、-os(o)nr1r2、-os(o)2nr1r2、-nr1r2、-nr1c(o)r1、-nr1c(o)or2、-nr1c(o)nr1r2、-nr1s(o)r2、-nr1s(o)2r2、-nr1s(o)nr1r2、-nr1s(o)2nr1r2、-c(o)r1、-c(o)or1和-c(o)nr1r2；rb为-or3、-sr3、-nr3r4、-s(o)2r3、-nr4c(o)r3或-nr4c(o)nr3r4；r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-nr5-*、-n(r5)-c1-c6烷基-n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*、-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；每个r1、r2、r4、r5和r6独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c9环烷基；l为任选的接头；a为治疗剂或显像剂；m为1-5的整数；和*表示与l或a的连接点。36.条款35的方法，其中碳酸酐酶ix配体具有下式：其中rb为-or3、-sr3、-nr3r4、-s(o)2r3、-nr4c(o)r3或-nr4c(o)nr3r4；r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-nr5-*、-n(r5)-c1-c6烷基-n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*、-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；每个r1、r2、r4、r5和r6独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c9环烷基；和*表示与l或a的连接点。37.条款35或36的方法或其药学上可接受的盐，其中碳酸酐酶ix配体为：其中*表示与缀合物其余部分的连接点。38.条款35-37中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含选自以下的部分：-c(o)(c1-c12烷基)c(o)-、-nh-c1-c12烷基-nh-、-n(c1-c6烷基)-c1-c12烷基-n(c1-c6烷基)-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qnh-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qn(c1-c6烷基)-、-(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-、-nh(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-和-n(c1-c6烷基)(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-；其中q为1-40的整数。39.条款35-38中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含至少一个氨基酸。40.条款35-39中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含至少一个选自以下的氨基酸：3-氨基丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸和精氨酸。41.条款35-40中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含可释放接头。42.条款35-41中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含二硫化物接头部分。43.条款35-42中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含肼接头部分。44.条款35-43中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中接头包含下式的接头部分：其中每个r7和r8独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个x独立地为c1-c6烷基或c6-c10芳基-(c1-c6烷基)，其中c1-c6烷基和c6-c10芳基-(c1-c6烷基)中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个r9、r10、r11和r12独立地选自h、c1-c7烷基、c2-c7烯基、c2-c7炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基；和每个*表示与缀合物其余部分的共价键。45.条款35-44中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的连接点。46.条款35-44中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。47.条款35-44中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含下式：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。48.条款35-47中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含具有氨基酸序列3-氨基丙氨酸-asp-cys的接头部分。49.条款35-48中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含具有氨基酸序列asp-arg-asp-3-氨基丙氨酸-asp-cys的接头部分。50.条款38的方法或其药学上可接受的盐，其中q为2。51.条款38的方法或其药学上可接受的盐，其中q为4。52.条款35-51中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中a为显像剂。53.条款35-52中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中a为荧光染料。54.条款35-53中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中a为下式的荧光素染料：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。55.条款35的方法，其中缀合物选自：和，或其药学上可接受的盐。56.条款35-52中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中a为放射性显像剂。57.条款35-52或56中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其中a包含与螯合基团配位的金属的放射性同位素。58.条款35-52、56或57中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含选自111in、99mtc、64cu、67cu、67ga和68ga的放射性金属。59.条款35-52或56-58中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含放射性金属64cu。60.条款35-52或56-59中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含选自以下基团的螯合基团：dota、nota、teta、dotaga、nodaga、dtpa、pcta和neta。61.条款35-52或56-60中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含为nodaga基团的螯合基团。62.条款35-52或56-61中任何一项的方法或其药学上可接受的盐，其包含下式的螯合基团：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。63.条款35的方法或其药学上可接受的盐，其包含下式：。64.一种组合物，其包含条款1-34中任何一项的缀合物或其药学上可接受的盐以及任选至少一种药学上可接受的赋形剂。65.条款1-29中任何一项的缀合物，其用于在受试者中对细胞群进行成像的方法。66.条款65的缀合物，其中所述方法包括给予受试者有效地对所述细胞进行成像的量的缀合物。67.条款1-29中任何一项的缀合物在制备可用于在受试者中对细胞群进行成像的药物中的用途。68.条款67的用途，其中所述方法包括给予受试者有效地对所述细胞进行成像的量的缀合物。69.一种在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括给予受试者治疗有效量的条款1-17或30-34中任何一项的缀合物。70.条款1-17或30-34中任何一项的缀合物，其用于在受试者中治疗癌症的方法。71.条款1-17或30-34中任何一项的缀合物在制备可用于在受试者中治疗癌症的药物中的用途。72.一种体外对细胞群进行成像的方法，所述方法包括：a.使细胞与条款1-29中任何一项的缀合物接触以提供标记细胞，和b.用荧光光源或合适的检测器来可视化标记细胞。附图简述图1a-f显示细胞的图像，其中图1a和b为25nmfbsa-peg2-fitc缀合物(缀合物5)的白光和荧光共聚焦显微术，其中图1c和d显示25nmfitc缀合物5加100倍过量caix抑制剂(化合物3，3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸)的竞争对照的白光和荧光共聚焦显微术；其中图1e和f仅显示skrc52细胞的白光和荧光共聚焦显微术；和其中fitc缀合物5结合细胞并在存在过量未缀合抑制剂的情况下竞争，表明存在特异性的受体特异性结合事件。图2显示caixfitc缀合物5、7和9在hek293-ca9细胞中的结合亲和力，并且显示peg2接头在17.94nm下具有结合亲和力。(●)缀合物5，kd=17.94nm；(▲)缀合物7，kd=55.2nm；(♦)缀合物9，kd=215.7nm。图3显示caixfitc缀合物5、7和9在skrc52细胞中的结合亲和力，并且显示peg2接头在1.28nm下具有结合亲和力。(●)缀合物5，kd=1.28nm；(▲)缀合物7，kd=4.57nm;(♦)缀合物9，kd=40.89nm。图4显示caixfitc缀合物5在ht-29细胞中的结合亲和力，显示缀合物结合细胞并在存在100倍过量未缀合抑制剂的情况下竞争，表明存在特异性的受体特异性结合事件。(▼)竞争；(●)缀合物5，kd=4.553nm。图5显示caixfitc缀合物7在hek293-ca9细胞中的结合亲和力，显示缀合物结合细胞并在存在100倍过量未缀合抑制剂的情况下竞争，表明存在特异性的受体特异性结合事件。(▲)竞争；(●)缀合物7，kd=55.2nm。图6显示caixfitc缀合物5在有或没有缺氧的skrc52细胞中的结合亲和力，显示缀合物5与caix结合而与是否存在缺氧无关。(●)常氧skrc52，4.57nm；(▲)缺氧skrc52，kd=4.72nm。图7显示caixfitc缀合物5在a549细胞中的结合亲和力。(▼)竞争；(●)缀合物5，kd=6.044nm。图8显示缀合物14的体外细胞毒性，其中将各种浓度的缀合物14与hek或hek-ca9细胞一起温育4小时。洗涤之后，将细胞温育66-72小时，并经3h-胸苷摄取确定其生存力。(●)hek293-ca9；(▲)hek293。图9显示放射性标记的缀合物17在skrc52细胞中的体外结合。(●)缀合物17，kd=5.87nm；(■)竞争。图10显示放射性标记的缀合物17在a549细胞中的体外结合。(●)缀合物17，kd=6.04nm；(■)竞争。图11显示缀合物12(tiw)在ht-29异种移植物中的体内功效(对于缀合物12组，n=3，以及对于竞争组，n=2)，其中竞争组用100倍过量的化合物3治疗，并且用2umol/kg缀合物12治疗的小鼠显示出肿瘤缩小，而未治疗的对照则生长。(●)缀合物12；(■)竞争。图12显示用缀合物12治疗的ht-29异种移植小鼠的全身质量，显示在治疗的第6天体重减轻不超过10%。用100倍过量的化合物3治疗竞争组，其中对于缀合物12组，n=3，以及对于竞争组，n=2。图13显示缀合物14在ht-29异种移植物中的体内剂量递增功效(每种剂量n=1)，其中在肿瘤消失之后，再用一剂治疗小鼠，并且最后一次治疗对于小鼠1、2、3和4/5分别为第6、8、12和14天，剂量2、1.5和1umole/kg均使肿瘤缩小，但是1umole/kg显示肿瘤在第16天开始再度出现。小鼠剂量水平：(●)2µmole/kg；(■)1.5µmole/kg；(▲)1µmole/kg；(▼)0.5µmole/kg；(♦)0.25µmole/kg。图14显示用各种剂量的缀合物14治疗的ht-29异种移植小鼠的全身质量(每种剂量n=1)，其中最高剂量的缀合物14仍然显示出体重减轻至缀合物12(图10)，但其他剂量显示出可接受的体重状况。小鼠剂量水平：(●)2µmole/kg；(■)1.5µmole/kg；(▲)1µmole/kg；(▼)0.5µmole/kg；(♦)0.25µmole/kg。图15显示缀合物14在ht-29异种移植物中的体内功效(每组n=5)，其中以1.25umole/kg的缀合物14和竞争组1.25umole/kg的缀合物14与100倍过量的化合物15给予tiw治疗3周，其中在第16天根据研究的人道指南处死竞争和仅有肿瘤组，并且其中治疗组在治疗停止前表现出稳定的肿瘤消退和疾病稳定。(●)缀合物14；(■)竞争；(▲)仅有肿瘤。图16显示用1.25umole/kg的缀合物14和竞争组1.25umole/kg的缀合物14与100倍过量的化合物15治疗的ht-29异种移植小鼠的全身质量。(●)缀合物14；(■)竞争；(▲)仅有肿瘤。图17显示缀合物14在a549异种移植物中的体内功效，其中以1.25umole/kg的缀合物14和竞争组1.25umole/kg的缀合物14与100倍过量的化合物15给予tiw治疗3周，其中在第16天根据研究的人道指南处死竞争和仅有肿瘤组，并且其中治疗组在治疗停止前表现出稳定的肿瘤消退和疾病稳定。(●)缀合物14；(■)竞争。图18显示用1.25umole/kg的缀合物14和竞争组1.25umole/kg的缀合物14与100倍过量的化合物15治疗的a549异种移植小鼠的全身质量。(●)缀合物14；(■)竞争。图19显示放射性标记的缀合物17在具有a549异种移植物的小鼠中的生物分布时程研究。对于注射后的每个时间点，左条=肿瘤；中条=胃；右条=肾脏。图20显示放射性标记的缀合物17在a549异种移植模型中的生物分布研究。对于图中所示的每种组织类型，左条=缀合物17；右条=竞争。图21显示放射性标记的缀合物17在skrc52异种移植模型中的生物分布。对于图中所示的每种组织类型，左条=缀合物17；右条=竞争。图22显示放射性标记的缀合物17在ht29异种移植模型中的生物分布。图23a和23b显示放射性标记的缀合物17在skrc52异种移植模型中的pet/ct。图23a，整只小鼠。图23b，提取的。图24显示放射性标记的缀合物17在a549异种移植模型中的pet/ct。定义本文所用的术语“烷基”包括碳原子链，其任选地为分支的并且含有1-20个碳原子。应当进一步理解，在某些实施方案中，烷基可有利地具有有限长度，包括c1-c12、c1-c10、c1-c9、c1-c8、c1-c7、c1-c6和c1-c4，说明性地，这种特别有限长度的烷基(包括c1-c8、c1-c7、c1-c6和c1-c4等)可称为“低级烷基”。说明性的烷基包括(但不限于)甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、3-戊基、新戊基、己基、庚基、辛基等。烷基可为取代或未取代的。典型的取代基包括环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环族、羟基、烷氧基、芳氧基、巯基、烷硫基、芳硫基、氰基、卤代、羰基、氧代、(=o)、硫代羰基、o-氨基甲酰基、n-氨基甲酰基、o-硫代氨基甲酰基、n-硫代氨基甲酰基、c-酰氨基、n-酰氨基、c-羧基、o-羧基、硝基和氨基，或如本文提供的各种实施方案所述。应当理解，“烷基”可与其他基团(比如以上提供的那些基团)组合，以形成官能化的烷基。举例来说，如本文所述的“烷基”基团与“羧基”基团的组合可称为“羧基烷基”基团。其他非限制性实例包括羟基烷基、氨基烷基等。本文使用的术语“烯基”包括碳原子链，其任选地为分支的，并且含有2-20个碳原子，并且还包含至少一个碳-碳双键(即c=c)。应当理解，在某些实施方案中，烯基可有利地具有有限长度，包括c2-c12、c2-c9、c2-c8、c2-c7、c2-c6和c2-c4。说明性地，这种特别有限长度的烯基(包括c2-c8、c2-c7、c2-c6和c2-c4)可称为“低级烯基”。烯基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。说明性的烯基包括(但不限于)乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。本文使用的术语“炔基”包括碳原子链，其任选地为分支的，并且含有2-20个碳原子，并且还包含至少一个碳-碳叁键(即c≡c)。应当理解，在某些实施方案中，炔基各自可有利地具有有限长度，包括c2-c12、c2-c9、c2-c8、c2-c7、c2-c6和c2-c4。说明性地，这种特别有限长度的炔基(包括c2-c8、c2-c7、c2-c6和c2-c4)可称为“低级炔基”。烯基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。说明性的烯基包括(但不限于)乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。本文使用的术语“芳基”是指具有完全共轭的π电子系统的6-12个碳原子的全碳单环或稠环多环基团。应当理解，在某些实施方案中，芳基可有利地具有有限大小，比如c6-c10芳基。说明性的芳基包括(但不限于)苯基、萘基和蒽基。芳基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。本文使用的术语“环烷基”是指3-15元全碳单环、全碳5元/6元或6元/6元稠合双环或者多环稠环(“稠合”环系统意指系统中的每个环与系统中的每个其他环共享相邻的碳原子对)基团，其中一个或多个环可含有一个或多个双键，但环烷基不含完全共轭的π电子系统。应当理解，在某些实施方案中，环烷基可有利地具有有限大小，比如c3-c13、c3-c6、c3-c6和c4-c6。环烷基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。说明性的环烷基包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、环庚基、金刚烷基、降冰片基、降冰片烯基、9h-芴-9-基等。本文使用的术语“杂环烷基”是指在一个或多个环中具有3-12个环原子的单环或稠环基团，其中至少一个环原子为杂原子(比如氮、氧或硫)，其余的环原子为碳原子。杂环烷基可任选地含有1、2、3或4个杂原子。杂环烷基还可具有多种双键中的一种，包括与氮的双键(例如c=n或n=n)，但是不含完全共轭的π电子系统。应当理解，在某些实施方案中，杂环烷基可有利地具有有限大小，比如3-至7-元杂环烷基、5-至7-元杂环烷基等。杂环烷基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。说明性的杂环烷基包括(但不限于)环氧乙烷基、噻烷芳基(thianaryl)、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、哌啶基、1,4-二氧杂环己烷基、吗啉基、1,4-二硫杂环己烷基、哌嗪基、氧杂环庚烷基、3,4-二氢-2h-吡喃基、5,6-二氢-2h-吡喃基、2h-吡喃基、1,2,3,4-四氢吡啶基等。本文使用的术语“杂芳基”是指含有1、2、3或4个选自氮、氧和硫的环杂原子，其余的环原子为碳原子，并且还具有完全共轭的π电子系统的5-12个环原子的单环或稠环基团。应当理解，在某些实施方案中，杂芳基可有利地具有有限大小，比如3-至9-元杂芳基、3-至7-元杂芳基、5-至7-元杂芳基、5-至9-元杂芳基等。杂芳基可为未取代的，或者如对于烷基所述或如本文提供的各种实施方案所述进行取代。说明性的杂芳基包括(但不限于)吡咯基、呋喃基、噻吩基(thiophenyl)、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、四唑基、三嗪基、吡嗪基、四嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、噻吩基(thienyl)、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、吲哚基和咔唑酰基(carbazoloyl)等。本文使用的“羟基(hydroxy)”或“羟基(hydroxyl)”是指-oh基团。本文使用的“烷氧基”是指-o-(烷基)或-o-(未取代的环烷基)基团两者。代表性的实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。本文使用的“芳氧基”是指-o-芳基或-o-杂芳基。代表性的实例包括(但不限于)苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等。本文使用的“巯基”是指-sh基团。本文使用的“烷硫基”是指-s-(烷基)或-s-(未取代的环烷基)基团。代表性的实例包括(但不限于)甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、环丙硫基、环丁硫基、环戊硫基、环己硫基等。本文使用的“芳硫基”是指-s-芳基或-s-杂芳基。代表性的实例包括(但不限于)苯硫基(phenylthio)、吡啶硫基、呋喃硫基、噻吩硫基(thienylthio)、嘧啶硫基等。本文使用的“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘。本文使用的“三卤甲基”是指具有3个卤代取代基的甲基，比如三氟甲基。本文使用的“氰基”是指-cn基团。本文使用的“亚磺酰基”是指-s(o)r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团，或者r”可为羟基。本文使用的“磺酰基”是指-s(o)2r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团，或者r”可为羟基。本文使用的“s-磺酰氨基”是指-s(o)2nr”r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“n-磺酰氨基”是指-nr”s(o)2r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“o-氨基甲酰基”是指-oc(o)nr”r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“n-氨基甲酰基”是指r”oc(o)nr”-基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“o-硫代氨基甲酰基”是指-oc(s)nr”r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“n-硫代氨基甲酰基是指r”oc(s)nr”-基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“氨基”是指-nr”r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“c-酰氨基”是指-c(o)nr”r”基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“n-酰氨基”是指r”c(o)nr”-基团，其中r”为如本文提供的各种实施方案所述的任何r基团。本文使用的“硝基”是指-no2基团。本文使用的“键”是指共价键。本文使用的“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或状况可能但不必发生，并且该描述包括其中事件或状况发生的情况和其中没有发生的情况。例如，“任选地用烷基取代的杂环基”意指烷基可能但不必存在，并且该描述包括其中杂环基用烷基取代的情况和其中杂环基没有用烷基取代的情况。本文使用的“独立地”意指随后描述的事件或状况相对于其他类似事件或状况应自行阅读。例如，在其中几种等效氢基团任选地被该状况中所述的另一基团取代的状况下，使用“独立地任选地”意指基团上氢原子的每个实例可被另一基团取代，其中取代每个氢原子的基团可以相同或不同。或者例如，在存在多个组，所有这些组均可选自一组可能性的情况下，使用“独立地”意指每组可选自与任何其他组分开的可能性组，并且在这种状况下所选择的组可以相同或不同。本文使用的“氨基酸”(也称为“aa”)意指包含共价键合于氨基和酸基的α-碳原子的任何分子。酸基可包括羧基。“氨基酸”可包括具有下式之一的分子：其中r’为侧基，和φ包含至少3个碳原子。“氨基酸”包括立体异构体，比如d-氨基酸和l-氨基酸形式。说明性的氨基酸基团包括(但不限于)20种内源性人类氨基酸及其衍生物，比如赖氨酸(lys)、天冬酰胺(asn)、苏氨酸(thr)、丝氨酸(ser)、异亮氨酸(ile)、甲硫氨酸(met)、脯氨酸(pro)、组氨酸(his)、谷氨酰胺(gln)、精氨酸(arg)、甘氨酸(gly)、天冬氨酸(asp)、谷氨酸(glu)、丙氨酸(ala)、缬氨酸(val)、苯丙氨酸(phe)、亮氨酸(leu)、酪氨酸(tyr)、半胱氨酸(cys)、色氨酸(trp)、磷酸丝氨酸(pser)、磺基-半胱氨酸、精氨琥珀酸(asa)、羟基脯氨酸、磷酸乙醇胺(pea)、肌氨酸(sarc)、牛磺酸(tau)、肌肽(carn)、瓜氨酸(cit)、鹅肌肽(ans)、1,3-甲基组氨酸(me-his)、α-氨基己二酸(aaa)、β-丙氨酸(bala)、乙醇胺(etn)、γ-氨基-丁酸(gaba)、β-氨基-异丁酸(baia)、α-氨基-丁酸(baba)、l-别胱硫醚(胱硫醚-a；cysta-a)、l-胱硫醚(胱硫醚-b；cysta-b)、胱氨酸、别异亮氨酸(allo-ile)、dl-羟基赖氨酸(羟基赖氨酸(i))、dl-别羟基赖氨酸(羟基赖氨酸(2))、鸟氨酸(orn)、高胱氨酸(hcy)及其衍生物。连同本文所述的实施方案一起，氨基酸可通过其α-氨基和羧基官能团(即以肽键构型)或通过其侧链官能团(比如谷氨酸中的侧链羧基)及其α-氨基或羧基官能团共价连接于本文所述缀合物的其他部分。应当理解，当氨基酸连同本文所述的缀合物一起使用时，其可作为两性离子存在于其中掺入它们的缀合物中。本文使用的“前药”是指可以没有药理学活性形式给予受试者，然后可通过正常代谢过程(比如噁唑烷的水解)转化为药理学活性形式的化合物。应当理解，前药可通过其转化为活性药物的代谢过程包括(但不限于)一种或多种自发化学反应、酶催化化学反应和/或其他代谢化学反应或其组合。应当意识到，本领域已知多种代谢过程，并且本文所述的前药通过其转化为活性药物的代谢过程为非限制性的。前药可为对受试者具有治疗作用的药物的前体化合物。本文使用的术语“治疗有效量”是指在受试者(即组织系统、动物或人类)中引起研究人员、兽医、医生或其他临床医师所寻求的生物或药物反应(包括(但不限于)减轻所治疗疾病或障碍的症状)的药物或药剂的量。一方面，治疗有效量为可以适用于任何医学治疗的合理的益处/风险比来治疗或减轻疾病或疾病症状的活性物质的量。在另一方面，治疗有效量为当通过正常代谢过程转化时产生能够在受试者中引起所寻求的生物或药物反应的活性药物的量的无活性前药的量。还应当意识到，无论指涉单一治疗还是组合治疗，有利地参考在给予本文所述的一种或多种缀合物期间可能发生的任何毒性或其他不期望的副作用来选择剂量。进一步地，应当意识到，本文所述的协同治疗可使得能够给予较低剂量的显示出这种毒性或其他不期望的副作用的缀合物，其中那些较低剂量低于毒性阈值或在治疗窗中低于在没有协同治疗的情况下给予的剂量。本文使用的“给予”包括将本文所述的缀合物和组合物引入到宿主动物的所有方式，包括(但不限于)口服(po)、静脉内(iv)、肌内(im)、皮下(sc)、经皮、吸入、颊、眼、舌下、阴道、直肠等。本文所述的缀合物和组合物可以含有常规非毒性药学上可接受的载体、佐剂和/或媒介物的单位剂型和/或制剂给予。本文使用的“药用组合物”或“组合物”是指本文所述的一种或多种缀合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物与其他化学组分(比如药学上可接受的赋形剂)的混合物。药用组合物的目的为促进将缀合物给予受试者。适合于递送所述缀合物的药用组合物及其制备方法为本领域技术人员易于显而易见的。这种组合物及其制备方法可例如在‘remington’spharmaceuticalsciences’,第19版(mackpublishingcompany,1995)中找到。如本文和所附权利要求中使用的单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”包括复数指涉，除非上下文另外明确指明。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。尽管与本文所述的那些相似或等同的任何方法、装置和材料均可用于本发明的实践或测试，但现在描述优选的方法、装置和材料。详述根据本文所述的申请人的公开，考虑将以上概述中提供的编号条款的实施方案或其任何组合与本专利申请的详述部分所述的任何实施方案相组合。在每个前述和每个以下实施方案中，应当理解，化学式不仅包括和表示缀合物的所有药学上可接受的盐，而且还包括缀合物化学式的任何和所有水合物和/或溶剂合物。应当意识到，某些官能团(比如羟基、氨基和类似基团)，以缀合物的各种物理形式与水和/或各种溶剂形成复合物和/或配位缀合物。因此，上式应理解为包括和表示那些各种水合物和/或溶剂合物。还应当理解，缀合物化学式的非水合物和/或非溶剂合物由这种化学式以及缀合物化学式的水合物和/或溶剂合物描述。在一些实施方案中，本公开提供式b-l-a的缀合物，其中b为碳酸酐酶ix的结合配体，l为任选的接头，和a为治疗剂和显像剂。应当意识到，可连同本公开一起使用的caix配体不受结构的特别限制。有用的caix抑制剂可为对caix显示结合亲和力的任何药物或化合物，比如caix抑制剂、caix激动剂或caix拮抗剂。在这些实施方案的一些方面，caix配体为含有芳基磺酰胺的化合物。在这些实施方案的一些方面，caix配体具有下式：其中每个ra独立地选自h、卤素、-or1、-oc(o)r1、-oc(o)nr1r2、-os(o)r1、-os(o)2r1、-sr1、-s(o)r1、-s(o)2r1、-s(o)nr1r2、-s(o)2nr1r2、-os(o)nr1r2、-os(o)2nr1r2、-nr1r2、-nr1c(o)r1、-nr1c(o)or2、-nr1c(o)nr1r2、-nr1s(o)r2、-nr1s(o)2r2、-nr1s(o)nr1r2、-nr1s(o)2nr1r2、-c(o)r1、-c(o)or1和-c(o)nr1r2；rb为-or3、-sr3、-nr3r4、-s(o)2r3、-nr4c(o)r3或-nr4c(o)nr3r4；r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-nr5-*、-nr5(ch2)m2n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*、-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；每个r1、r2、r4、r5和r6独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c9环烷基；l为任选的接头；a为治疗剂或显像剂；m为1-5的整数；和*表示与缀合物其余部分的连接点。在一些实施方案中，每个ra选自卤素、-s(o)2nr1r2和-nr1r2。在一些实施方案中，一个ra为-s(o)2nr1r2。在一些实施方案中，一个ra为-s(o)2nr1r2，其中r1和r2为h。在一些实施方案中，一个ra为-nr1r2。在一些实施方案中，一个ra为-nr1r2，其中r1为h，和r2为c3-c9环烷基。在一些实施方案中，一个ra为-nr1r2，其中r1为h，和r2为c3-c9环辛基。在一些实施方案中，一个ra为-s(o)2nr1r2，和一个ra为-nr1r2。在一些实施方案中，一个ra为-s(o)2nr1r2，其中r1和r2为h，和一个ra为-nr1r2，其中r1为h，和r2为c3-c9环烷基。在一些实施方案中，一个ra为-s(o)2nr1r2，其中r1和r2为h，和一个ra为-nr1r2，其中r1为h，和r2为环辛基。在一些实施方案中，caix配体具有下式：其中每个ra、rb、r1和r2如本文定义。在一些实施方案中，r1和r2为h。在一些实施方案中，caix配体具有下式：其中rb、r1和r2如本文定义。在一些实施方案中，r1为h，和r2为环辛基。在一些实施方案中，rb为-s(o)2r3。在一些实施方案中，rb为-s(o)2r3，和一个ra为-s(o)2nr1r2。在一些实施方案中，rb为-s(o)2r3，一个ra为-s(o)2nr1r2，和一个ra为-nr1r2。在一些实施方案中，rb为-s(o)2r3，一个ra为-s(o)2nr1r2r1，其中r1和r2为h，和一个ra为-nr1r2，其中r1为h，和r2为c3-c9环烷基。在一些实施方案中，caix配体具有下式：其中每个ra、r1、r2和r3如本文定义。在一些实施方案中，caix配体具有下式：其中r1、r2和r3如本文定义。在一些实施方案中，caix配体具有下式：其中r3如本文定义。在一些实施方案中，r3独立地为c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基，每一个独立地用一个选自以下的取代基取代：-nr5-*、-nr5(ch2)m2n(r6)-*、-oc(o)-*、-oc(o)n(r5)-*、-c(o)-*,-c(o)o-*和-c(o)n(r5)-*；和c1-c10烷基、c2-c10烯基或苯基中每个其余的氢原子独立地任选地被以下取代：c1-c10烷基、c2-c10烯基、卤素、-or1、-oc(o)r1、-oc(o)nr1r2、-os(o)r1、-os(o)2r1、-sr1、-s(o)r1、-s(o)2r1、-s(o)nr1r2、-s(o)2nr1r2、-os(o)nr1r2、-os(o)2nr1r2、-nr1r2、-nr1c(o)r1、-nr1c(o)or2,-nr1c(o)nr1r2,-nr1s(o)r2、-nr1s(o)2r2、-nr1s(o)nr1r2、-nr1s(o)2nr1r2、-c(o)r1、-c(o)or1和-c(o)nr1r2。在一些实施方案中，r3为用一个选自以下的取代基取代的c1-c10烷基：-c(o)n(r5)-*和-c(o)-*，其中r5如本文定义，和*表示与缀合物其余部分的连接点。应当意识到，可连同本公开一起使用的接头不受结构的特别限制。接头可为长度约2-约100个原子的任何接头，并且由将caix配体共价连接于试剂的包括c、n、o和s的元素组成。在一些实施方案中，接头可为沿着接头原子链长度为10-75个原子的任何接头。在一些实施方案中，接头可为沿着接头原子链长度为15-60个原子的任何接头。应当意识到，就链中原子数而言本文针对接头长度提供的范围可包括2-100之间(并且包括2和100)的任何边界数量，比如5、10、15、20、25、35、45、60、75、80和100。在一些实施方案中，接头可为长度为5å-约100å的任何接头。在一些实施方案中，接头可为长度为5å-约50å的任何接头。在一些实施方案中，接头可为长度为5å-约40å的任何接头。在一些实施方案中，接头可为长度为15å-约25å的任何接头。应当意识到，本文针对接头长度提供的范围可包括5-100之间(并且包括5和100)的任何边界数量。在一些实施方案中，接头包含可释放接头，其中术语“可释放接头”是指包含至少一个可在生理条件下断裂的键(比如ph不稳定、酸不稳定、碱不稳、氧化不稳定、代谢不稳定、生物化学不稳定或酶不稳定的键)的接头。应当意识到，导致键断裂的这种生理条件不一定包括生物或代谢过程，而是可包括标准化学反应，比如水解反应，例如在生理ph下或者由于区室化成细胞器(比如ph低于胞质ph的内体)所致。在一些实施方案中，可释放接头包含二硫键。在一些实施方案中，接头包含二硫化物接头部分。在一些实施方案中，接头包含肼接头部分。在一些实施方案中，可释放接头包含具有下式的部分：其中每个r7和r8独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个x独立地为c1-c6烷基或c6-c10芳基-(c1-c6烷基)，其中c1-c6烷基和c6-c10芳基-(c1-c6烷基)中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个r9、r10、r11和r12独立地选自h、c1-c7烷基、c2-c7烯基、c2-c7炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基；和每个*表示与缀合物其余部分的共价键。在一些实施方案中，每个r7和r8为h。在一些实施方案中，x为c1-c6烷基。在一些实施方案中，接头包含下式的部分：其中r7和r8各自独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个x独立地为c1-c6烷基或c6-c10芳基-(c1-c6烷基)，其中c1-c6烷基和c6-c10芳基-(c1-c6烷基)中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or9、-oc(o)r9、-oc(o)nr9r10、-os(o)r9、-os(o)2r9、-sr9、-s(o)r9、-s(o)2r9、-s(o)nr9r10、-s(o)2nr9r10、-os(o)nr9r10、-os(o)2nr9r10、-nr9r10、-nr9c(o)r10、-nr9c(o)or10、-nr9c(o)nr11r12、-nr9s(o)r10、-nr9s(o)2r10、-nr9s(o)nr11r12、-nr9s(o)2nr11r12、-c(o)r9、-c(o)or9或-c(o)nr9r10；每个r9、r10、r11和r12独立地选自h、c1-c7烷基、c2-c7烯基、c2-c7炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基；和每个*表示与缀合物其余部分的共价键)。在一些实施方案中，每个r7和r8为h。在一些实施方案中，x为c1-c6烷基。在一些实施方案中，接头可包含一个或多个间隔接头部分。应当意识到，本公开缀合物中包含的间隔接头部分的结构在结构上不受特别限制。在一些实施方案中，接头包含简单的基团，比如烷基链部分、醚部分(例如peg)、长链胺部分、氨基酸链部分、肼部分等及其组合。在一些实施方案中，可连同本公开一起使用的接头包含至少一个选自以下的部分：-c(o)(c1-c12烷基)c(o)-、-nh-c1-c12烷基-nh-、-n(c1-c6烷基)-c1-c12烷基-n(c1-c6烷基)-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qnh-、-c(o)ch2ch2(och2ch2)qn(c1-c6烷基)-、-(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-、-nh(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-和-n(c1-c6烷基)(ch2ch2o)qch2ch2c(o)-；其中q为1-40的整数。在一些实施方案中，q为2。在一些实施方案中，q为4。在一些实施方案中，q为6。在一些实施方案中，q为20。应当意识到，q值不受特别限制，并且可为1-约40之间的任何数值。在一些实施方案中，接头可包含氨基酸链。在一些实施方案中，接头可包含二肽、三肽、四肽、五肽或六肽。在一些实施方案中，接头可包含天然存在的氨基酸。在一些实施方案中，接头可包含非天然氨基酸。在一些实施方案中，接头包含至少一个选自以下的氨基酸：3-氨基丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸和精氨酸。在一些实施方案中，接头包含具有氨基酸序列3-氨基丙氨酸-asp-cys的部分。在一些实施方案中，接头包含具有氨基酸序列asp-arg-asp-3-氨基丙氨酸-asp-cys的部分。在一些实施方案中，接头包含缀合物的一部分，其包含具有下式的部分：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。连同本文所述的任何缀合物一起使用的试剂可为能够调节或者以其他方式改变细胞功能的任何分子(包括药用活性化合物(例如治疗剂))，或者能够为成像或可视化细胞或组织提供可测量信号的任何分子(例如显像剂)。可用作治疗剂的合适分子包括(但不限于)肽、寡肽、逆反寡肽、蛋白、其中至少一个非肽键取代肽键的蛋白类似物、载脂蛋白、糖蛋白、酶、辅酶、酶抑制剂、氨基酸及其衍生物、受体和其他膜蛋白；抗原及其抗体；半抗原及其抗体；激素、脂质、磷脂、脂质体；细胞毒剂，比如微管抑制剂；抗生素；镇痛药；支气管扩张剂；β受体阻滞剂；抗微生物剂；抗高血压药；心血管药物，包括抗心律失常药、强心苷类、抗心绞痛药和血管扩张剂；中枢神经系统药物，包括兴奋剂、精神药物、抗躁狂药和抑制剂；抗病毒药；抗组胺药；癌症药物，包括化学治疗剂；镇静剂；抗抑郁药；h-2拮抗剂；抗惊厥药；止恶心药；前列腺素类和前列腺素类似物；肌肉松弛剂；抗炎物质；兴奋剂；减充血剂；止吐药；利尿药；解痉药；抗哮喘药；抗帕金森药；祛痰药；镇咳药；粘液溶解药；以及矿物质和营养添加剂。在一些实施方案中，治疗剂可为微管溶素。天然微管溶素通常为线性四肽，由n-甲基哌可酸(mep)、异亮氨酸(ile)、称为管式缬氨酸(tubuvaline，tuv)的非天然氨基酸和称为管式酪氨酸(tubutyrosine，tut，酪氨酸的类似物)的非天然氨基酸或称为管式苯丙氨酸(tubuphenylalanine，tup，苯丙氨酸的类似物)的非天然氨基酸组成。在一些实施方案中，治疗剂为下式的四肽：其中r1a、r3a、r3a’和r3a’’各自独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基和c3-c6环烷基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-or13a、-oc(o)r13a、-oc(o)nr13ar13a’、-os(o)r13a、-os(o)2r13a、-sr13a、-sc(o)r13a、-s(o)r13a、-s(o)2r13a、-s(o)2or13a、-s(o)nr13ar13a’、-s(o)2nr13ar13a’、-os(o)nr13ar13a’、-os(o)2nr13ar13a’、-nr13ar13a’、-nr13ac(o)r14a、-nr13ac(o)or14a、-nr13ac(o)nr14ar14a’、-nr13as(o)r14a、-nr13as(o)2r14a、-nr13as(o)nr13ar14a’、-nr13as(o)2nr14ar14a’、-p(o)(or13a)2、-c(o)r13a、-c(o)or13a或-c(o)nr13ar13a’；r2a、r4a和r12a各自独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基；r5a和r6a各自独立地选自h、卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、-or15a、-sr15a和-nr15ar15a’，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基和c2-c6炔基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、-or16a、-sr16a、-nr16ar16a’、-c(o)r16a、-c(o)or16a或-c(o)nr16ar16a’；或者r5a和r6a与它们连接的碳原子一起形成-c(o)-；每个r7a、r8a、r9a、r10a和r11a独立地选自h、卤素、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、-cn、-no2、-nco、-or17a、-sr17a、-s(o)2or17a、-nr17ar17a’、-p(o)(or17a)2、-c(o)r17a、-c(o)or17a和-c(o)nr17ar17a’，其中c1-c6烷基、c2-c6烯基和c2-c6炔基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、-or18a、-sr18a、-nr18ar18a’、-c(o)r18a、-c(o)or18a或-c(o)nr18ar18a’；每个r13a、r13a’、r14a、r14a’、r15a、r15a’、r16a、r16a’、r17a和r17a’独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基，其中c1-c7烷基、c2-c7烯基、c2-c7炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基或5-至7-元杂芳基中的每个氢原子独立地任选地被以下取代：卤素、-oh、-sh、-nh2或-co2h；每个r18a和r18a’独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基、-c(o)r19a、-p(o)(or19a)2和-s(o)2or19a，每个r19a独立地选自h、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c6环烷基、3-至7-元杂环烷基、c6-c10芳基和5-至7-元杂芳基；a为1、2或3；和*表示与缀合物其余部分的共价键。在一些实施方案中，治疗剂具有下式：其中r1a、r2a、r3a、r3a’、r3a’’、r4a、r5a、r7a、r8a、r9a、r10a、r11a和r12a如本文定义，和*表示与缀合物其余部分的共价键。在另一个实施方案中，治疗剂可为以下通式的天然存在的微管溶素或其类似物或衍生物：其中r9a和r13a如本文定义，和*表示与缀合物其余部分的共价键。本文描述每种前述微管溶素的缀合物。在一些实施方案中，治疗剂可为以下通式的天然存在的微管溶素：因子r13ar9aa(ch3)2chch2ohbch3(ch2)2ohcch3ch2ohd(ch3)2chch2hech3(ch2)2hfch2ch3hg(ch3)2c=chohhch3hich3oh和*表示与缀合物其余部分的共价键。在一些实施方案中，治疗剂为美登素生物碱类(maytansinoids)，包括美登醇和美登醇类似物。美登素生物碱类为抑制微管形成并对哺乳动物细胞高度毒性的化合物。合适的美登醇类似物的实例包括具有修饰的芳环的那些和在其他位置具有修饰的那些类似物。这种美登素生物碱类描述于例如美国专利4,256,746、4,294,757、4,307,016、4,313,946、4,315,929、4,322,348、4,331,598、4,361,650、4,362,663、4,364,866、4,424,219、4,371,533、4,450,254、5,475,092、5,585,499、5,846,545和6,333,410中。具有修饰的芳环的美登醇类似物的实例包括(但不限于)c-19-脱氯(美国专利4,256,746)、c-20-羟基(或c-20-脱甲基)+/-c-19-脱氯(美国专利4,361,650和4,307,016)和c-20-脱甲氧基、c-20-酰氧基(-ocor)、+/-脱氯(美国专利4,294,757)。具有除芳环以外的位置修饰的美登醇类似物的实例包括(但不限于)c-9-sh(美国专利4,424,219)、c-14-烷氧基甲基(脱甲氧基/ch2or)(美国专利4,331,598)、c-14-羟甲基或酰氧基甲基(ch2oh或ch2oac)(美国专利4,450,254)、c-15-羟基/酰氧基(美国专利4,364,866)、c-15-甲氧基(美国专利4,313,946和4,315,929)、c-18-n-脱甲基(美国专利4,362,663和4,322,348)和4,5-脱氧(美国专利4,371,533)。在一些实施方案中，缀合物包含含有硫醇的美登素生物碱dm1，也称为n2’-脱乙酰基-n2’-(3-巯基-1-氧代丙基)-美登素作为细胞毒剂。dm1的结构由以下式(i)表示：在一些实施方案中，缀合物包含含有硫醇的美登素生物碱dm4，也称为n2’-脱乙酰基-n2’-(4-甲基-4-巯基-1-氧代戊基)-美登素作为细胞毒剂。dm4的结构由以下式(ii)表示：其他美登素可连同本公开一起使用，比如在带有硫原子的碳原子上带有单或二烷基取代的含有硫醇和二硫化物的美登素生物碱类。特别优选的为在c-3位具有(a)c-14羟甲基、c-15羟基或c-20脱甲基官能团，和(b)具有带有受阻巯基的酰基的酰化氨基酸侧链的美登素生物碱，其中带有硫醇官能团的酰基碳原子具有一或两个取代基，所述取代基为ch3、c2h5、具有1-10个碳原子的线性或分支烷基或烯基、具有3-10个碳原子的环状烷基或烯基、苯基、取代的苯基或杂环芳基或杂环烷基，并且进一步地其中取代基之一可为h，和其中酰基在羰基官能团和硫原子之间具有至少3个碳原子的线性链长。用于本发明上下文中的另外美登素包括由以下式(iii)表示的化合物：其中y’表示(cr1br2b)p(cr3b=cr4b)p1c=cp2ap3(cr5bp6b)p4dp5(cr7b=cr8b)p6(c=c)p7bp8(cr9br10b)p9cr11br12bsz，a、b、d各自独立地为c3-c9-环烷基或c3-c9-环烯基、c6-c10芳基、5-至7-元杂芳基或5-至7-元杂脂环基，其中r1b、r2b、r3b、r4b、r5b、r6b、r7b、r8b、r9b、r10b、r11b和r12b中的每一个独立地为h、c1-c6烷基、c1-c6烯基、c6-c10芳基、或5-至7-元杂芳基或5-至7-元杂脂环基，其中p1、p2、p3、p4、p5、p6、p7、p8和p9各自独立地为零或1-5的整数，条件是p1、p2、p3、p4、p5、p6、p7、p8和p9中至少两个在任何一个时间均不为零。可用作显像剂的合适分子包括(但不限于)染料(比如荧光素染料、罗丹明染料、近红外染料)以及spect显像剂(比如本领域已知的任何放射性核螯合剂(radionucleichelator))。罗丹明染料的实例包括(但不限于)5-羧基四甲基罗丹明(5-tamra)、罗丹明b、罗丹明6g、tritc、德克萨斯红(texasred)、罗丹明123、磺基罗丹明101等。罗丹明染料的实例包括(但不限于)荧光素、5-氨基荧光素、6-氨基荧光素、异氰酸荧光素(fitc)、荧光素-5-马来酰亚胺、nhs-荧光素、俄勒冈绿(oregongreen、东京绿(tokyogreen)、新加坡绿(singaporegreen)、费城绿(philadelphiagreen)等。近红外染料的实例包括s-0456。放射性核螯合剂的实例包括(但不限于)wo03/092742所述的那些。在一些实施方案中，a为下式的荧光素染料：其中*表示与缀合物其余部分的共价键。在其他实施方案中，本文所述的合适显像剂包括(但不限于)pet或spect显像剂，比如包含至少一种与螯合基团配位的金属的放射性同位素(也称为放射性核素)的放射性显像剂。说明性的放射性金属同位素包括锝、铼、镓、钆、铟、铜等的同位素。在一些实施方案中，合适的放射性核素包括(但不限于)111in、99mtc、64cu、67cu、67ga、68ga等。可连同本公开一起使用的说明性的螯合基团包括(但不限于)以下基团：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(dota)、1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(nota)、1,4,8,11-四氮杂环十四烷-1,4,8,11-四乙酸(teta)、2-(4,7,10-三(羧甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基)戊二酸(dotaga)、2-(4,7-双(羧甲基)-1,4,7-三氮杂环壬烷(triazonan)-1-基)戊二酸(nodaga)、二亚乙基三胺五乙酸(dtpa)、2,2’,2”-(3,6,9-三氮杂-1-(2,6)-吡啶环葵蕃(pyridinacyclodecaphane)-3,6,9-三基)三乙酸(pcta)、2,2’-((2-(4,7-双(羧甲基)-1,4,7-三氮杂环壬烷(triazonan)-1-基)乙基)氮烷二基(azanediyl))二乙酸(neta)等。放射性核素显像剂的另外说明性实例描述于美国专利第9193763号中，其公开通过参考结合至本文中。在一个实施方案中，本文所述的方法可作为“受试者”用于人类临床医学和兽医应用两方面。因此，“受试者”可给予本文所述的缀合物，并且可为人类(“患者”)，或者在兽医应用的情况下可为实验室、农用、家养或野生动物。一方面，受试者可为人类患者、实验动物(比如啮齿动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠等)、兔、猴、黑猩猩)、家畜(比如狗、猫和兔)、农用动物(比如牛、马、猪、绵羊、山羊)以及圈养野生动物(比如熊、熊猫、狮、虎、豹、象、斑马、长颈鹿、大猩猩、海豚和鲸鱼)。在各种实施方案中，本文所述的癌症可为致瘤性的癌细胞群，包括良性肿瘤和恶性肿瘤，或者癌症可为非致瘤性的。癌症可自发产生，或者通过过程比如患者种系中存在的突变或体细胞突变产生，或者癌症可为化学、病毒或放射诱导的。适用于本文所述发明的癌症包括(但不限于)癌、肉瘤、淋巴瘤、黑素瘤、间皮瘤、鼻咽癌、白血病、腺癌和骨髓瘤。在一些方面，癌症可为肺癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头癌、颈部癌、皮肤黑素瘤、眼内黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、子宫内膜癌、平滑肌肉瘤、直肠癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、三阴性乳腺癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状腺癌、甲状旁腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性白血病、急性白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、胸膜间皮瘤、膀胱癌、伯基特淋巴瘤、输尿管癌、肾癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(cns)肿瘤、原发性cns淋巴瘤、脊髓轴肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、胆管癌、hurthle细胞甲状腺癌或胃食管交界处腺癌。在一些实施方案中，本公开涉及靶向的nir成像，其中本公开的缀合物提供表达caix蛋白的细胞和组织的选择性成像。应当意识到，连同本公开缀合物一起使用的体外或体内成像方法没有特别限制，并且可为本领域已知的任何常规体外或体内成像方法。此外，可使用本领域已知的任何仪器或测定试剂盒来进行本领域已知的这种成像方法，包括(但不限于)荧光显微术系统(比如nikon90i)、体内荧光成像系统(比如caliperivisluminaii成像工作站(通常耦合于摄像机，比如isoon5160andornikon摄像机)等。在一些实施方案中，本公开提供用于在体外或体内对细胞群或组织进行成像的方法。应当意识到，这种体外方法可通过本领域已知的任何方法进行。在一些实施方案中，本文所述的体外成像方法可包括：a.使细胞群与本公开的缀合物接触以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物。应当意识到，通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物可包括以激发波长照射和以发射波长检测。因此，在一些实施方案中，本文所述的体外成像方法可包括：a.使细胞群与本公开的缀合物接触以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物，b.用近红外波长的光照射与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从癌细胞发出的光。在一些实施方案中，可根据本文所述的方法对组织(比如癌性肿瘤)进行成像。例如，在一些实施方案中，本文所述的体内成像方法可包括：a.给予患者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；和b.通过用近红外波长的光照射来可视化与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物。应当意识到，通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物可包括以激发波长照射和以发射波长检测。因此，在一些实施方案中，本文所述的体内成像方法可包括：a.给予患者本公开的缀合物或其药学上可接受的盐，以提供与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物；b.用近红外波长的光照射与表达caix蛋白的细胞结合的缀合物，和c.在发射波长处检测从癌细胞发出的光。应当意识到，可使用本领域已知的任何已知nir成像技术(诊断性或其他方式)或仪器进行通过用近红外波长的光照射来可视化与细胞结合的缀合物。连同本文所述的成像方法一起使用的光的波长可在近红外波长范围内，比如在约600nm-约2500nm的范围内。这种波长可为波长范围或单一波长。在一些实施方案中，激发波长可在约600nm-约2500nm的范围内。在一些实施方案中，激发波长可在约600nm-约900nm的范围内。在一些实施方案中，激发波长可在约700nm-约750nm的范围内。在一些实施方案中，激发波长可为约745nm。在一些实施方案中，发射波长可在约600nm-约2500nm的范围内。在一些实施方案中，发射波长可在约750nm-约900nm的范围内。在一些实施方案中，发射波长可在约750nm-约790nm的范围内。在一些实施方案中，发射波长可为约790nm。在一些实施方案中，发射波长可为icg(也称为吲哚菁绿染料)的发射波长。在本文所述方法的其他实施方案中，提供本文所述缀合物的药学上可接受的盐。本文所述缀合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐。合适的酸加成盐由形成非毒性盐的酸形成。说明性的实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、枸橼酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。本文所述缀合物的合适的碱盐由形成非毒性盐的碱形成。说明性的实例包括精氨酸、苄星青霉素、钙、胆碱、二乙胺、二醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。还可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。根据本文所述的癌症类型、给予途径和/或缀合物为局部还是全身给予，本文考虑宽范围的容许剂量，包括落在约1μg/kg-约1g/kg范围内的剂量。在其他实施方案中，可使用落在约0.001μmol/kg-约1μmol/kg范围内的剂量。剂量可为单一或分开的，并且可根据各种方案(包括每天四次、每天两次、每天三次或者甚至隔天一次、每两周一次(b.i.w.)、每周一次、每周四次、每月一次、每季度一次等)给予。在这些情况的每一种中，应当理解，本文所述的治疗有效量对应于给予的情况，或者对应于由给药方案确定的每天、每周、每月或每季度的总剂量。可使用用于给予本文所述缀合物的任何有效方案。例如，本文所述的缀合物可作为单一剂量给予，或者可将剂量分开并作为每日多剂量方案给予。进一步地，可将交错方案例如每周1-5天用作每日治疗的备选方案，并且出于本文所述方法的目的，这种间歇或交错的每日方案被认为等同于每天治疗并且加以考虑。在一个说明性的实施方案中，用本文所述缀合物的多次注射治疗患者以治疗癌症。在一个实施方案中，例如以12-72小时的间隔或以48-72小时的间隔向患者注射多次(优选地约2至多达约50次)本文所述的缀合物。可在初次注射之后以数天或数月的间隔给予患者本文所述缀合物的另外注射，并且另外注射可预防癌症的复发。在一个实施方案中，本文所述的缀合物可与一种或多种药学上可接受的载体一起作为制剂给予。载体可为赋形剂。载体的选择在很大程度上取决于多种因素，比如特定的给予方式、载体对溶解度和稳定性的影响以及剂型的性质。适合于递送如本文所述缀合物的药用组合物及其制备方法为本领域技术人员易于显而易见的。这种组合物及其制备方法可例如在通过参考结合至本文中的remington:thescience&practiceofpharmacy,第21版(lippincottwilliams&wilkins,2005)中找到。在一个说明性的方面，药学上可接受的载体包括生理学上相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等及其组合。在一些实施方案中，载体适合于胃肠外给予。药学上可接受的载体包括无菌水溶液剂或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液剂或分散液的无菌粉剂。补充性活性化合物也可掺入到本发明的组合物中。在各种实施方案中，液体制剂可包括混悬剂和溶液剂。这种制剂可包含载体(例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或合适的油)以及一种或多种乳化剂和/或助悬剂。液体制剂也可通过固体重构来制备。在一个实施方案中，水性混悬剂可含有与适当的赋形剂混合的活性材料。这种赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；可为天然存在的磷脂的分散或润湿剂，例如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇)；环氧乙烷与衍生于脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(比如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯)；或环氧乙烷与衍生于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。水性混悬剂还可含有一种或多种防腐剂(例如抗坏血酸、乙基、正丙基或对羟基苯甲酸酯)；或一种或多种着色剂。在一个说明性的实施方案中，适合于通过添加水制备水性混悬剂的可分散粉剂和颗粒剂提供与分散或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。也可存在另外的赋形剂，例如着色剂。在其他实施方案中，组合物中可包含等渗剂，例如糖类、多元醇(比如甘露醇、山梨醇)或氯化钠。通过在组合物中包含延迟吸收的物质(例如单硬脂酸盐和明胶)，可实现可注射组合物的延长吸收。用于口服给予的说明性形式包括片剂、胶囊剂、酏剂、糖浆剂等。一方面，可将本文所述的缀合物直接给予到血流、肌肉或内脏器官中。用于这种胃肠外给予的合适途径包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、硬膜外、脑室内、尿道内、胸骨内、颅内、肿瘤内、肌内和皮下递送。用于胃肠外给予的合适方式包括针头(包括微针头)注射器、无针注射器和输注技术。在一个说明性的方面，胃肠外制剂一般地为水溶液剂，其可含有载体或赋形剂，比如盐、碳水化合物和缓冲剂(优选地在3-9的ph下)，但是对于一些应用，它们可更合适地配制为无菌非水溶液剂或干燥形式，以连同合适的媒介物(比如无菌无热原的水)一起使用。在其他实施方案中，本文所述的任何液体制剂可适合于胃肠外给予本文所述的缀合物。胃肠外制剂在无菌条件下的制备，例如通过在无菌条件下冻干，可使用本领域技术人员众所周知的标准制药技术易于完成。在一个实施方案中，可通过使用适当的配制技术，比如掺入溶解度增强剂，来提高用于胃肠外制剂制备的如本文所述的缀合物的溶解度。在各种实施方案中，可配制用于胃肠外给予的制剂以进行立即和/或调节释放。在一个说明性的方面，本发明的活性剂(即本文所述的缀合物)可以时间释放制剂，例如以包含缓慢释放聚合物的组合物给予。可将活性剂与保护缀合物免于快速释放的载体一起制备，比如控释制剂，包括植入物和微囊化递送系统。可使用可生物降解的生物相容性聚合物，比如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原蛋白、聚原酸酯、聚乳酸和聚乳酸、聚乙醇酸共聚物(pgla)。用于制备这种制剂的方法为本领域技术人员通常已知的。在另一个实施方案中，在适当情况下，可连续给予本文所述的缀合物或包含所述缀合物的组合物。在一个实施方案中，提供一种试剂盒。如果要给予如本文所述的活性缀合物的组合，则可以适合于组合物的依序给予或共同给予的试剂盒形式组合两种或更多种药用组合物。这种试剂盒包含两种或更多种单独的药用组合物(其中至少一种含有本文所述的缀合物)，以及用于分别保留组合物的装置(比如容器、分开的瓶子或分开的箔包装)。在另一个实施方案中，提供在具有标签的容器中包含一种或多种本文所述的缀合物的组合物，所述标签提供将如本文所述的缀合物用于患者选择和/或治疗的说明。在一个实施方案中，可通过如下方式制备无菌可注射溶液剂：将所需量的活性剂与上述成分中的一种或组合(根据需要)掺入适当的溶剂中，然后过滤灭菌。一般地，通过将缀合物掺入到含有分散介质和上述那些的任何另外成分的无菌媒介物中来制备分散液。在用于制备无菌可注射溶液剂的无菌粉剂的情况下，优选的制备方法为真空干燥和冷冻干燥，这从其先前无菌过滤的溶液中产生活性成分加任何另外期望的成分的粉剂，或者这些成分可一起无菌过滤。可将组合物配制成溶液剂、微乳剂、脂质体或其他适合于高药物浓度的有序结构。载体可为溶剂或分散介质，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)及其合适的混合物。在一个实施方案中，可例如通过使用包衣(比如卵磷脂)，在分散液的情况下通过维持所需的粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。本文所述的缀合物可含有一个或多个手性中心，或者可以其他方式能够作为多种立体异构体存在。因此，应当理解，本发明包括纯的立体异构体以及立体异构体的混合物，比如对映异构体、非对映异构体以及富含对映异构体或非对映异构体的混合物。本文所述的缀合物可能作为几何异构体存在。因此，应当理解，本发明包括纯的几何异构体或几何异构体的混合物。应当意识到，本文所述的缀合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并且包括在本发明的范围内。本文所述的缀合物可以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于本发明考虑的用途是等同的，并且旨在处于本发明的范围内。在另一个实施方案中，由本文所述的缀合物制备用于给予本文所述缀合物的组合物和/或剂型，所述缀合物的纯度为至少约90%、或约95%、或约96%、或约97%、或约98%、或约99%、或约99.5%。在另一个实施方案中，由本文所述的缀合物制备用于给予本文所述缀合物的组合物和/或剂型，所述缀合物的纯度为至少90%、或至少95%、或至少96%、或至少97%、或至少98%、或至少99%、或至少99.5%。实施例以下数据可能表明碳酸酐酶靶向配体的治疗性和放射性成像应用。配体(fbsa，方案1，化合物3)由daumantasmatulis,等人(j.med.chem.2014,57,9435-9446)开发。如本文所述，数据表明，peg2接头长度或其变体可有助于表观结合亲和力。一些数据可能还建议设计基于fbsa靶向的小分子治疗性缀合物，比如微管溶素缀合物(缀合物12(fbsa-peg2-微管溶素b)和缀合物14(带有亲水性接头的fbsa-微管溶素b缀合物))。缩写本文所述的实施例使用的材料包括(但不限于)由本领域技术人员已知的以下缩写描述的那些材料：fbsa氟化苯磺酰胺peg聚乙二醇ml毫升m摩尔thf四氢呋喃℃摄氏度g克mg毫克mp熔点ir红外辐射cm厘米asym不对称的sym对称的tea三乙胺μl微升meoh甲醇h2o2过氧化氢lc-ms液相色谱质谱dmso二甲基亚砜nmole纳摩尔umole或µmole微摩尔mmole毫摩尔umole/kg或µmol/kg微摩尔/千克i-proh异丙醇fmoc芴基甲氧基羰基hatu1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐dipean,n-二异丙基乙胺hplc高效液相色谱lrms低分辨率质谱hplc高效液相色谱dmf二甲基甲酰胺boc叔丁氧基羰基spect/ct单光子发射计算机断层成像thf四氢呋喃nm纳摩尔dmem杜尔贝科改良伊格尔培养基(dulbecco’smodifiedeaglemedium)μci/ml或uci/ml微居里/毫升μci或uci微居里h或hr小时实施例1碳酸酐酶的合成方案1.fbsa(化合物3，一种高亲和力碳酸酐酶小分子靶向配体)的合成.五氟苯磺酰胺1的合成.使用冰/nacl冷却浴将五氟苯磺酰氯(2.60ml)在四氢呋喃中的搅拌着的混合物冷却至-10℃。然后滴加3.5m氨的甲醇/乙醇溶液(6.00ml)。然后使反应物温热至室温并搅拌3.5小时。然后在真空下去除溶剂并在水中重结晶。产量：2.7404g,mp:153.2-154.8°c(lit:156℃),ir(cm-1):3343.00(-nh2,asym),3264(-nh2,sym)。实施例23-((2,3,5,6-四氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸2的合成.将五氟苯磺酰胺(950.4mg)、三乙胺(1.400ml)和3-巯基丙酸(368μl)加入到搅拌着的甲醇(40ml)溶液中。然后使反应物回流24小时，然后真空干燥。然后将所得残余物分别溶解于乙酸与水的2:1混合物中。然后将该混合物加热至70℃，并且每两小时加入2ml份的30%过氧化氢，直至加入的过氧化物的总体积达到10ml。然后使反应物在70℃下搅拌总共24小时。在真空下去除乙酸，并将所得沉淀过滤且用水洗涤。产量：0.5679g,lc-ms(m+h2o):383.0。参考文献：robson,p.;smith,t.a.;stephens,r.;tatlow,j.c.,691.aromaticpolyfluoro-compounds.partxiii.derivativesofpenta-and2,3,5,6-tetra-fluorothiophenol.journalofthechemicalsociety(恢复的)1963,(0),3692-3703。实施例33-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸3的合成.将化合物2(400mg)溶解于dmso(2ml)中，并然后加入环辛胺(2当量)，且将反应混合物在室温下搅拌24小时。用水和浓氯化铵淬灭反应。所得沉淀用乙酸乙酯萃取并经硫酸钠干燥。然后将萃取物在二氧化硅上干燥并通过快速色谱法纯化。产量：0.1662g,lc-ms(m+1):473.2。实施例4(3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰基)半胱氨酸4的合成通过以下固相方法合成化合物4。将h-cys(trt)-2-氯三苯甲基树脂(100mg,0.64mmole/g)先后用3ml二氯甲烷(dcm)和3ml二甲基甲酰胺(dmf)进行溶胀。在dmf中溶胀树脂之后，加入3-[2-[2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙氧基]乙氧基]丙酸(51.1mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸(33.3mg,0.074mmole)、hatu(24.3mg,0.064mmole)和dipea(0.034ml,0.192mmole)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。使用三氟乙酸:三异丙基硅烷:h2o:乙二硫醇(95:2.5:2.5:2.5)的混合物从树脂上裂解化合物4，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并真空干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品缀合物，得到为澄清油的产物(54%)。lrms-lc/ms(m/z):c27h41f3n4o10s3的[m+h]+理论值,734.19;实测值,735.2。2-(((1-(3-羧基-4-(6-羟基-3-氧代-3h-呫吨-9-基)苯基)-2,5-二氧代吡咯烷-3-基)硫代)甲基)-16-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-4,14-二氧代-7,10-二氧杂-3,13-二氮杂十六烷酸5的合成.向化合物4(5mg,0.0068mmole)在dmf(1ml)中的溶液中加入荧光素-5-马来酰亚胺(3.2mg,0.0075mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.006ml,0.034mmole)，并在室温下搅拌1小时。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品反应混合物，得到为黄色粉末的产物(61%)。lrms-lc/ms(m/z):c51h54f3n5o17s3的[m+h]+理论值,1161.26;实测值,1162.2。实施例5(2r,5s,8s)-8-氨基-5-(羧基甲基)-29-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-2-(巯基甲基)-4,7,11,27-四氧代-14,17,20,23-四氧杂-3,6,10,26-四氮杂二十九烷酸6的合成.通过以下固相方法合成化合物6。将h-cys(trt)-2-氯三苯甲基树脂(100mg,0.64mmole/g)先后用3ml二氯甲烷(dcm)和3ml二甲基甲酰胺(dmf)进行溶胀。在dmf中溶胀树脂之后，加入fmoc-asp(tbu)-oh(52.7mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入boc-dap(fmoc)-oh(54.6mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入3-[2-[2-[2-[2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(62.4mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸(33.3mg,0.074mmole)、hatu(24.3mg,0.064mmole)和dipea(0.034ml,0.192mmole)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。使用三氟乙酸:三异丙基硅烷:h2o:乙二硫醇(95:2.5:2.5:2.5)的混合物从树脂上裂解化合物3，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并真空干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品化合物6，得到为澄清油的产物(62%)。lrms-lc/ms(m/z):c38h60f3n7o16s3的[m+h]+理论值,1023.32;实测值,1024.3。5-(3-(((2r,5s,8s)-8-氨基-2-羧基-5-(羧基甲基)-29-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-4,7,11,27-四氧代-14,17,20,23-四氧杂-3,6,10,26-四氮杂二十九烷酰)硫代))-2,5-二氧代吡咯烷-1-基)-2-(6-羟基-3-氧代-3h-呫吨-9-基)苯甲酸7的合成.向化合物6(2mg,0.002mmole)在dmf(1ml)中的溶液中加入荧光素-5-马来酰亚胺(0.85mg,0.002mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.002ml,0.01mmole)，并在室温下搅拌1小时。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品反应混合物，得到为黄色粉末的缀合物7(76%)。lrms-lc/ms(m/z):c62h73f3n8o23s3的[m+h]+理论值,1450.39;实测值,1451.3。实施例6(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯8的合成.向3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸(20mg,0.042mmole)在dmf(2ml)中的溶液中加入(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(7.40mg,0.0462mmole)，并使得在氩气下于室温下搅拌10分钟。然后加入1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(16mg,0.042mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.022ml,0.126mmole)。搅拌反应物1小时，之后用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x25ml)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥。在真空下浓缩溶剂，并将粗品混合物在硅胶上使用10%甲醇/二氯甲烷纯化，得到为无色油的化合物8(21.4mg,83%)。lrms-lc/ms(m/z):c24h37f3n4o7s2的[m+h]+理论值,614.21;实测值,615.2。实施例75-(3-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙基)硫脲基)-2-(6-羟基-3-氧代-3h-呫吨-9-基)苯甲酸9的合成.用tfa/dcm(20%,2ml)的混合物去除化合物8(10mg,0.008mmole)的叔丁氧基羰基保护基，持续30分钟。在真空下去除tfa/dcm混合物，并且产物不经纯化直接转入下一步。向含有脱保护化合物5的小瓶中加入dmf(1ml)和n,n-二异丙基乙胺(0.007ml,0.04mmole)，并使得搅拌5分钟，之后加入荧光素-5-马来酰亚胺(3.8mg,0.0088mmole)，并使得搅拌另外一小时。通过纯化的反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]在没有后处理情况下纯化粗品混合物，得到为黄色粉末的产物(76%)。lrms-lc/ms(m/z):c40h40f3n5o10s3的[m+h]+理论值,903.19;实测值,904.2。实施例8(2r,5s,8s)-8-氨基-5-(羧基甲基)-23-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-2-(巯基甲基)-4,7,11,21-四氧代-14,17-二氧杂-3,6,10,20-四氮杂二十三烷酸10的合成.通过以下固相方法合成化合物10。将h-cys(trt)-2-氯三苯甲基树脂(100mg,0.64mmole/g)先后用3ml二氯甲烷(dcm)和3ml二甲基甲酰胺(dmf)进行溶胀。在dmf中溶胀树脂之后，加入fmoc-asp(tbu)-oh(52.7mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入boc-dap(fmoc)-oh(54.6mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入fmoc-9-氨基-4,7-二氧杂壬酸(51.12mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。加入3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸(化合物3,33.3mg,0.074mmole)、hatu(24.3mg,0.064mmole)和dipea(0.034ml,0.192mmole)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。使用三氟乙酸:三异丙基硅烷:h2o:乙二硫醇(95:2.5:2.5:2.5)的混合物从树脂上裂解化合物10，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并在真空下干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品缀合物，得到为澄清油的产物(62%)。lrms-lc/ms(m/z):c34h52f3n7o14s3的[m+h]+理论值,935.27;实测值,935.2。请注意，化合物10可用作缀合物12的前体，或者也可用作99mtc的螯合剂，并且可作为缀合物10用于spect/ct成像应用。实施例9(3r,5s,16r,19s)-1-(2-((1r,3r)-1-乙酰氧基-3-((2s,3s)-n-((丁酰氧基)甲基)-3-甲基-2-(1-甲基哌啶-2-甲酰氨基)戊酰氨基)-4-甲基戊基)噻唑-4-基)-19-((s)-16-氨基-1-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-3,13-二氧代-7,10-二氧杂-4,14-二氮杂十七烷-17-酰氨基)-16-羧基-3-(4-羟基苄基)-5-甲基-1,6,9,18-四氧代-10-氧杂-13,14-二硫杂-2,7,8,17-四氮杂二十一烷-21-酸12的合成.将饱和碳酸氢钠(10ml)在蒸馏水中的溶液连续鼓入氩气30分钟。将化合物9(1.5mg,0.0016mmol)溶解于氩气吹扫的hplc级水(2.0ml)中，并使用氩气吹扫的碳酸氢钠将反应混合物的ph增加至7。然后将由endocyte供给的二硫化物活化的微管溶素b(化合物11,1.86mg,0.018mmol)在thf(0.5ml)中的溶液加入到反应混合物中。使用分析型lcms监测反应的进程，并在搅拌30分钟之后，发现反应已完成。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化缀合物12，得到所需产物。lrms-lc/ms(m/z):c79h119f3n14o25s5的[m+h]+理论值,1881.70;实测值,1881.5。实施例10(2r,5s,8s)-8-氨基-5,12-双(羧基甲基)-18-(3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰氨基)-15-(3-胍基丙基)-2-(巯基甲基)-4,7,11,14,17-五氧代-3,6,10,13,16-五氮杂二十烷二酸13的合成.通过以下固相方法合成化合物13。将h-cys(trt)-2-氯三苯甲基树脂(100mg,0.64mmole/g)先后用3ml二氯甲烷(dcm)和3ml二甲基甲酰胺(dmf)进行溶胀。在dmf中溶胀树脂之后，加入fmoc-asp(tbu)-oh(52.7mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。其余步骤遵循相同的方案。使用三氟乙酸:三异丙基硅烷:h2o:乙二硫醇(95:2.5:2.5:2.5)的混合物从树脂上裂解化合物13，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并在真空下干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品缀合物，得到为澄清油的产物(62%)。lrms-lc/ms(m/z):c48h74f3n13o21s3的[m+h]+理论值,1322.42;实测值,1322.38。请注意，化合物13不仅用作缀合物14的前体，而且本身还被设计为99mtc的螯合剂，并可作为缀合物13用于spect/ct成像应用。实施例11(2r,5s,8s)-2-((11s,13r)-15-(2-((1r,3r)-1-乙酰氧基-3-((2s,3s)-n-((丁酰氧基)甲基)-3-甲基-2-(1-甲基哌啶-2-甲酰氨基)戊酰氨基)-4-甲基戊基)噻唑-4-基)-13-(4-羟基苄基)-11-甲基-7,10,15-三氧代-6-氧杂-2,3-二硫杂-8,9,14-三氮杂十五烷基)-8-氨基-5,12-双(羧基甲基)-18-(3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰氨基)-15-(3-胍基丙基)-4,7,11,14,17-五氧代-3,6,10,13,16-五氮杂二十烷二酸14的合成.将饱和碳酸氢钠(10ml)在蒸馏水中的溶液连续鼓入氩气30分钟(min)。将化合物13(1.2mg,0.0009mmol)溶解于氩气吹扫的hplc级水(2.0ml)中，并使用氩气吹扫的碳酸氢钠将反应混合物的ph增加至7。然后将由endocyte供给的二硫化物活化的微管溶素b(化合物11,1.27mg,0.0012mmol)在thf(0.5ml)中的溶液加入到反应混合物中。使用分析型lcms监测反应的进程，并在搅拌30分钟之后，发现反应已完成。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化缀合物14，得到所需产物。lrms-lc/ms(m/z):c93h141f3n20o3s5的[m+h]+理论值,2267.86;实测值,1134.57(一半质量)。实施例12((2s)-2-氨基-3-(3-羧基-2-(2-(3-羧基-2-(3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰氨基)丙酰氨基-5-胍基戊酰氨基)丙酰氨基)丙酰基)-l-天冬氨酸15的合成.通过以下固相方法合成化合物15。将h-cys(trt)-2-氯三苯甲基树脂(100mg,0.64mmole/g)先后用3ml二氯甲烷(dcm)和3ml二甲基甲酰胺(dmf)进行溶胀。在dmf中溶胀树脂之后，加入boc-dap(fmoc)-oh(54.6mg,0.128mmole)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.8mg,0.16mmole)和n,n-二异丙基乙胺(0.056ml,0.32mmole)在dmf(3ml)中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用3mldmf洗涤3次和用3mli-proh洗涤3次。使用相同的化学计量学添加其他残基。使用三氟乙酸:三异丙基硅烷:h2o:乙二硫醇(95:2.5:2.5:2.5)的混合物从树脂上裂解化合物15，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并在真空下干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到100%b]纯化粗品缀合物，得到为澄清油的产物(62%)。lrms-lc/ms(m/z):c45h69f3n12o20s2的[m+h]+理论值,1219.41;实测值,1219.09。请注意，化合物15在竞争性实验中用作缀合物14的竞争者。实施例13n-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺(16)通过以下固相方法合成n-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺：在用dmf(3ml)和dcm(3ml)溶胀1,2-二氨基乙烷三苯甲基聚苯乙烯树脂(100mg,1.7mmol/g)之后，加入1-(9h-芴-9-基)-3-氧代-2,7,10-三氧杂-4-氮杂十三烷-13-酸(136mg,0.34mmol)、hatu(162mg,0.43mmol)和dipea(0.09ml,0.51mmol)在dmf(3ml)中的溶液。反应混合物鼓入氩气2小时，并用dmf(3x3ml)和dcm(3x3ml)洗涤树脂。用哌啶溶液(在dmf中20%，3x5ml)去除fmoc，并且树脂用dmf(3x3ml)和dcm(3x3ml)洗涤。加入3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸(179mg,0.425mmol)、hatu(162mg,0.43mmol)和dipea(0.09ml,0.51mmol)在dmf中的溶液。鼓入氩气2小时，并且树脂用dmf(3x3ml)和dcm(3x3ml)洗涤。使用tfa:tips:h2o:edt混合物(95:2.5:2.5:2.5)从树脂上裂解n-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺，并在真空下浓缩。将浓缩的产物在乙醚中沉淀并在真空下干燥。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到40%b]纯化粗品缀合物，得到为白色固体的产物。lrms-lc/ms(m/z):674.3[m+h]+。实施例142,2’-(7-(21-羧基-1-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)-3,13,18-三氧代-7,10-二氧杂-4,14,17-三氮杂二十一烷-21-基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4-二基)二乙酸向n-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺(3mg,0.003mmol)在dmf(1ml)中的溶液中加入2,2’-(7-(1-羧基-4-((2,4-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)-4-氧代丁基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4-二基)二乙酸(nodaga-nhs,1.4mg,0.009mmol)和dipea(0.0016ml,0.034mmol)，并在室温下搅拌1小时。通过反相hplc[a=2mm乙酸铵缓冲液(ph7.0)，b=ch3cn，溶剂梯度：30分钟内从0%b到20%b]纯化粗品反应混合物，得到为白色粉末的产物(缀合物17,产率83%)。lrms-lc/ms(m/z):1031.5[m+h]+。实施例15用64cu放射性标记缀合物17的一般程序使用0.1nhcl中的64cucl2，通过将其与50倍过量的缀合物17在乙酸钠缓冲液(ph10.5)中混合，并在使用之前于室温下温育最少15分钟，进行放射性标记。为了评价螯合的放射化学纯度，使用配备有带有lauraacademia软件的lablogicflow-ram放射性hplc检测器和c18柱的agilent1260infinityii，使用以下方法分析溶液：溶剂a=0.1%tfa，溶剂b=acn，溶剂梯度：15分钟内从0%b到100%b]。在证实放射化学纯度>95%之后，将放射性标记的缀合物在稀释至适当溶剂(用于体外实验的细胞培养基)和(用于体内实验的pbs，ph7.4)中之后，无需纯化即可使用。表1：fbsa-nodaga与铜-64的示例性螯合条件。体外实验细胞系和细胞培养使用含有10%热灭活胎牛血清和1%青霉素链霉素的rpmi-1640培养基，在潮湿的5%co2气氛下，于37℃下培养a549、ht29和skrc52细胞。实施例16fbsa-peg2-fitc缀合物(缀合物5)的荧光显微术.将转移性人类肾细胞癌(skrc52)细胞(105)接种到腔室盖玻片板中，并使得在24小时(hr)内生长至汇合。用过的培养基用0.5ml新鲜培养基更换，后者含有10%胎牛血清白蛋白和25nm浓度的单独的fitc缀合物(缀合物5)或染料缀合物加上100倍过量的caix抑制剂(化合物3，3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸)。在37℃下温育1小时之后，将细胞用1ml培养基冲洗两次，以去除未结合的荧光，并将0.5ml新鲜的温育培养基添加至孔中。使用共聚焦显微术(fv1000,olympus)获取图像。结果如图1所示。fitc缀合物5结合细胞，并在存在过量未缀合抑制剂的情况下竞争，表明特异性的受体特异性结合事件。实施例17caixfitc缀合物结合亲和力测定的一般程序在存在或不存在100倍过量的caix抑制剂(化合物3，3-((2-(环辛基氨基)-3,5,6-三氟-4-氨磺酰基苯基)磺酰基)丙酸)的情况下，将用caix、skrc52、ht29或a549细胞(0.25x106)转染的hek293置入含有0.3ml新鲜dmem培养基的1.5ml离心管中，培养基含有渐增浓度的caixfitc缀合物。在25℃下温育1小时之后，将细胞用1ml培养基冲洗两次。将细胞转移至96孔板中，并使用流式细胞术(bdaccuric6,bdbiosciences)读取平均荧光强度(mfi)。通过使用graphpadprism4将mfi相对于fitc缀合物的浓度作图来计算表观kd。对于缺氧实验，将细胞在含有1%氧、5%二氧化碳和94%氮的气氛下于缺氧室中温育24-48小时。对caixfitc的结合亲和力结果如表2所示。表2.caixfitc缀合物在用caix转染的hek293或skrc52中的结合亲和力。实施例18通过3h-胸苷摄取测定法测定体外细胞毒性的一般程序将ht-29细胞接种于胺包被的24孔板上，并使得形成单层。将每孔中用过的培养基更换为含有各种浓度缀合物12的新鲜培养基(0.5ml)。在37℃下温育2小时之后，将细胞用新鲜培养基冲洗3次，并然后在37℃下于新鲜培养基中再温育66小时。将每孔中用过的培养基再次更换为含有3h-胸苷(1μci/ml)的新鲜培养基(0.5ml)，并将细胞再温育4小时。在细胞用培养基洗涤3次之后，将其溶解于0.5ml的0.25mnaoh中。然后，通过使用闪烁计数器(packard,packardinstrumentcompany)对细胞相关的放射性进行计数来确定胸苷的掺入。使用graphpadprism4和tablecurve2d软件从3h-胸苷掺入百分比相对于对数浓度的曲线图得出ic50值。结果如图8所示，并且表明缀合物的ic50为5.045nm。实施例19放射性标记的缀合物17的体外结合亲和力将skrc52、ht29、a549细胞(~0.25x106)接种于24孔板中，并使得生长过夜。在存在或不存在100倍过量的fbsa竞争化合物的情况下，添加如在实施例17中制备的含有渐增浓度的放射性标记的缀合物17的新鲜培养基。所有浓度一式两份或一式三份进行检查。在25℃下温育1小时之后，用pbs(3x0.5ml)洗涤细胞。向每孔加入0.5mnaoh。10分钟之后，去除0.45ml的naoh，并用γ计数器(packard,packardinstrumentcompany)测量放射性。表观结合亲和力通过用graphpadprism4将所结合的放射性相对于放射性标记的缀合物浓度作图来计算。如图9和10可见，使用skrc52和a549细胞将放射性标记的17的表观结合亲和力确立为低nm值(在skrc52中kd＝5.87nm，和在a549中kd＝6.04nm)，并在约75nm达到饱和。竞争对照(用浓度增加的放射性标记的缀合物17与100倍过量的竞争配体(未标记的fbsa-cooh)处理的细胞)显示出结合放射性明显更低。不受理论的束缚，似乎放射性标记的17与细胞的结合为受体特异性事件。体内实验动物饲养无胸腺nu/nu小鼠购自harlanlaboratories(envigo)，以标准12小时明暗周期在无菌环境中饲养，并保持正常的啮齿动物食物。所有动物程序均已根据国立卫生研究院(nationalinstitutesofhealth)指南由purdue动物护理和使用委员会(purdueanimalcareandusecommittee)批准。实施例20微管溶素缀合物12在ht29异种移植肿瘤中的体内功效.将细胞(ht-29细胞)(4.25×106)皮下注射到5-6周龄的雌性nu/nu小鼠的肩部。用游标卡尺每周3次以两个垂直方向测量肿瘤，其体积计算为0.5xlxw2，其中l为最长轴(以毫米为单位)，和w为垂直于l的轴(以毫米为单位)。当皮下肿瘤的体积达到∼100-275mm3时，开始给药缀合物12。以盐水制备给药溶液，并通过0.22μm过滤器过滤。经尾静脉注射或腹膜内给予溶液。每只小鼠每次注射接受2μmol/kg缀合物12。每隔一天给予注射，并同时将小鼠称重。结果如图11-12所示。如图11所示，治疗小鼠停止了肿瘤生长，并且异种移植物在本公开之时处于缩小的过程中。在所有情况下，均未观察到严重毒性，并且在该给药水平下观察到体重减轻不到10%(图12)。如图13-16所示，使用缀合物14代替缀合物12进行类似实验。使用缀合物14对a549细胞而不是ht-29细胞进行类似的实验(图17和18)。实施例21小鼠异种移植模型中放射性标记的17的全身成像和生物分布将skrc52、ht29或a549细胞(每只小鼠~3x106个细胞)皮下注射到雌性无胸腺nu/nu小鼠的肩部。以两个垂直方向测量肿瘤的生长，肿瘤体积计算为0.5xlxw2(l=最长轴，和w=垂直于l的轴，以毫米为单位)。一旦肿瘤的体积达到最小500mm3，经尾静脉注射向动物注射pbs(100μl,ph7.4)中的放射性标记的缀合物17(250μci)。为了获得全身图像，将小鼠用异氟烷麻醉，并用kodakimagingstation(in-vivofx,eastmankodakcompany)与ccd摄像机和kodak分子成像软件(4.0版)组合且屏蔽肾脏来采集图像。使用以下参数获取放射图像：放射性同位素照明源、3分钟采集时间、f制光圈(f-stop)=4、焦平面=5、fov=160、分箱=8。使用以下参数获取白光图像：白光透射照明源、0.175s采集时间、f制光圈=16、焦平面=5、fov=160和无分箱。采集全身成像之后，将小鼠用co2窒息处死，并在尸检后将组织置入预先称重的γ计数管中。以γ计数器(packard,packardinstrumentcompany)测量组织和一部分注射剂量的放射性。针对衰减时间校正每分钟计数(cpm)值，并将结果计算为每克湿组织注射剂量的百分比(%id/g)。将250μci放射性标记的缀合物17注射到带有源自a549细胞系的异种移植物的小鼠尾静脉中。在表3所示的各时间点，从小鼠取出组织(每个时间点n=1)，称重，并在γ计数器上对放射性进行量化。由于铜-64在511kev下以36%的丰度发出γ射线，因此可使用γ检测方法。结果如图19所示。时间(hr)肿瘤:胃肿瘤:肾脏10.10.330.10.261.31.894.03.6121.82.3154.52.8186.32.2表3：a549异种移植物中放射性标记的缀合物17的时间-过程研究中的肿瘤：组织比率。如表3可见，最初在胃和肾脏中缀合物的摄取非常高。注射后6小时之后，肿瘤开始显示出比胃和肾脏更高的组织摄取。在9小时时显示出最高的肿瘤：组织比率。在随后的所有其他测试时间，肿瘤均保持这种较高摄取。注射后18小时，放射性标记的缀合物17的完整组织生物分布如图20所示。在证实6-18小时之间的组织摄取值没有急剧变化之后，主要为了后勤便利，该实验在18小时进行。肿瘤的高摄取在18小时仍然保持，并且最重要的是，与非竞争小鼠相比较，竞争小鼠(用250μci放射性标记的缀合物17+100倍摩尔过量的竞争分子共同注射的小鼠)在肿瘤部位的辐射计数要低得多。不受理论的束缚，这表明放射性标记的缀合物17以受体介导的方式与肿瘤细胞特异性结合。图21和图22显示在注射之后18小时使用skrc52和ht29异种移植物的这些实验的生物分布数据。skrc52实验用竞争对照进行，表明肿瘤的放射性为受体介导的。ht29异种移植物未用竞争对照进行测试。因为ht29细胞在细胞表面表达的caix受体少得多，因此肿瘤与背景组织比率在18小时不是很好。图23a和23b显示在注射放射性标记的17之后带有caix阳性异种移植物的小鼠的全身图像。具体而言，其显示在注射250µci放射性标记的缀合物17并在注射之后5小时获取麻醉小鼠的全身图像之后，用带有skrc52异种移植物的小鼠进行的竞争实验。在图23a所示实验的情况下，注射有靶向pet成像缀合物的小鼠在肿瘤部位显示出明亮的摄取。然而，左侧显示的注射有100倍过量的竞争配体(fbsa-cooh)结合250µci放射性标记的缀合物17的两只小鼠，在对该图像选择的阈值下未呈现出任何肿瘤摄取。将肿瘤从小鼠取出，并如图23b所示，再次显示出相对于竞争小鼠，靶向小鼠的肿瘤摄取更高。使用上述方法并获取全身图像，在其他肿瘤模型中也显示出放射性标记的缀合物17的功效。例如，如图24所示，靶向小鼠显示出比竞争小鼠高得多肿瘤摄取。该数据还在带有ht29异种移植物的小鼠得到证实(数据未显示)。当前第1页12当前第1页12