本发明涉及化合物分离方法,具体涉及一种辣木叶中生物碱的分离方法,属药品技术领域。
背景技术:
辣木为辣木科辣木属植物,是一种有独特经济价值的热带落叶乔木,因其异常丰富和全面的营养成分及活性成分,引起了全世界的关注,被誉为“21世纪最具营养价值的纯天然植物”和“母亲最好的朋友”、被科学家成为“奇迹之树”、被日本誉为“不可思议之树”、被非洲誉为“穷人的牛奶”、被我国台湾称作“21世纪的人体保镖”,与中国灵芝和美国的西洋参并称为“世界三宝”。辣木的产地位于印度的西北部,现广泛种植于亚洲、非洲和中美洲的30多个热带、亚热带国家或地区,我国在上世纪60年代初引入辣木进行栽培种植,但近几年才开始进行研究开发。
辣木叶有许多医学效用,如消炎抑菌、抗氧化、降血糖、降血压、抗肿瘤等,其有效成分主要有生物碱、黄铜、多糖、水溶性蛋白质等,其中生物碱分布在叶内的含量显著高于茎,总生物碱最高为4.62mg/g,特别是印度辣木素具有明显的杀菌作用,可开发成天然清洁剂和生物农药。
国内外关于印度辣木素研究的文献少之又少,目前尚无关于辣木叶中生物碱采用双向萃取法分离纯化的报道。生物碱一般采用水或无机酸水溶液,如0.1%~1%的硫酸或盐酸水溶液提取,再通过大孔吸附树脂进行分离纯化,操作繁琐,重复性较差,由于辣木叶中含有大量色素、蛋白质、多糖等水溶性物质,采用大孔吸附树脂分离纯化效果不好,且比较繁琐。我们采用双水相萃取法萃取辣木叶中生物碱,发现采用乙醇/磷酸氢二钾双水相萃取辣木叶中生物碱,可显著降低杂质含量,萃取率高达96%以上,比常规分离纯化方法高1倍以上,该体系稳定、分相快,且该方法操作简便、重现性好、不含有毒有机溶剂,能避免环境污染,操作连续,易于放大。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供了一种辣木叶中生物碱的分离方法。所述的辣木叶中生物碱的分离方法如下:称取一定量辣木叶,加10倍量水,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,滤液即为辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入适量磷酸氢二钾超声使溶解,再加入一定量乙醇,并调节适宜ph值,构建双水相体系,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行多级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。
本发明的辣木叶中生物碱的分离方法的创新点为采用乙醇/磷酸氢二钾双水相体系萃取辣木叶中生物碱。
优选的,所述双水相体系由无水乙醇和磷酸氢二钾组成。
优选的,所述无水乙醇含量比例为32%~49%。
优选的,所述磷酸氢二钾含量比例为10%~28%。
优选的,所述适宜ph值为6.8~7.2。
最优选的,所述萃取为3级错流萃取。
具体实施方式
实施例1称取辣木叶2g,加水20ml,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,得辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入7g磷酸氢二钾超声使溶解,再加入20ml乙醇,并调节ph值至7.0,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行3级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。测得萃取率为96.98%。
实施例2称取辣木叶2g,加水20ml,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,得辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入10g磷酸氢二钾超声使溶解,再加入20ml乙醇,并调节ph值至6.8,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行2级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。测得萃取率为98.60%。
实施例3称取辣木叶2g,加水20ml,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,滤液即为辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入10g磷酸氢二钾超声使溶解,再加入25ml乙醇,并调节ph值至7.0,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行3级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。测得萃取率为96.31%。
实施例4称取辣木叶1g,加水10ml,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,滤液即为辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入5g磷酸氢二钾超声使溶解,再加入12ml乙醇,并调节ph值至7.2,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行2级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。测得萃取率为96.07%。
实施例5称取辣木叶1g,加水10ml,在微波功率800w,温度90℃下提取30min,趁热过滤,滤液即为辣木叶水提取物。在辣木叶水提物中加入4g磷酸氢二钾超声使溶解,再加入10ml乙醇,并调节ph值至7.0,于40℃下,搅拌萃取10min,转入分液漏斗中,静置分层,取出上层相并更换新鲜上相,进行3级错流萃取,合并上层液,减压干燥即得。测得萃取率为97.12%。