专利名称：用红景天提取物制备一种治疗贫血及促白细胞增生的药物的制作方法
用红景天提取物制备一种治疗贫血及促白细胞增生的药物本发明涉及一种药物制品，该制品可用于治疗贫血并有促白细胞增升作用。该制品是由红景天提取物和药物可接受的载体组成的。
红景天为一种藏族常用的中草药，属景天科红景天属植物，其药用部位是根和茎，经提取后的提取物可以用来治疗肺炎咳嗽，咳血咯血，妇女白带，外用治疗跌打损伤，烫火烧伤。(引自《西藏常用中草药》第74页)近年研究表明红景天有强壮，抗缺氧，抗寒冷抗疲劳，抗微波辐射及兴奋人的大脑和脊髓作用。(《高原医学杂志》1984(2)37《国外医学》中医中药分册1979(3)142)可以提高体力和脑力劳动的工作效率，延缓机体衰老，防治老年疾病等功能。用红景天的根和茎制备的中药成药也已在市场出现，其作用和功效均如上述所述，贫血为一种由失血，造血机能障碍或溶血引起的外周血红细胞或血红蛋白数低于正常值并伴随各种临床症状的疾病。临床上对该病的治疗有多种方式，较常用的有用促进造血机能的药物治疗，用补充血液成分的药物治疗等。
白细胞减少症是由各种物理和化学因素(如放疗，化疗)对骨髓造血机能的破坏引起的血中白细胞数低于正常值并伴有临床症状的疾病。对此病的治疗目前多用病因疗法和使用刺激白细胞增生的药物。
本发明在于发现了红景天根和茎的提取物有促进骨髓造血功能的作用，可用该提取物制备一种治疗由造血机能障碍引起的贫血和白细胞数降低的药物。
本发明发现了红景天提取物对造血系统CFU-GM，CFU-E，BFU-E均有明显的提高作用，对由辐射或化学物质所致外周血细胞数降低有明显的改善作用以及对再生障碍性贫血有治疗作用，而且，实验发现红景天提取物在增加造血祖细胞数及外周血细胞数的一些指标上优于常用中药制品再障生血片。
红景天提取物的制备方法如下所述1，药材预处理
新鲜生药去除枝叶，取根茎，去泥土，粉碎，晾干备用。
2，取处理好的生药，加入6倍量的70%乙醇，浸泡过夜，加热回流1小时，趁热过滤。储存好醇液，将药渣加入4倍量的70%乙醇加热回流1小时趁热过滤，存好醇液将药渣加入4倍量的70%乙醇加热回流1小时趁热过滤。用挤压机挤尽醇液，合并上述醇液，经减压蒸馏，真空干燥得醇提干浸膏。此干浸膏即为红景天提取物。(提取物与生药量之比为1∶4，即4份量红景天生药经提取可得1份量的红景天提取物)。
以下为红景天提取物对造血系统作用的实验说明动物实验动物上海种小鼠，雌雄均有，体重18-22g药物红景天提取物，用水配成混悬液。
实验一红景天提取物对正常小鼠造血功能的作用实验方法取小鼠20只随机分为两组，每组10只，组别为红景天提取物组，生理盐水对照组。给药前先测定小鼠外周血红细胞数，白细胞数，血小板数，随后灌胃给药七天，给药量为2mg/0.2ml/只，第八天测外周血的血象，另作CFU-GM，CFU-E，BFU-E细胞培养。
CFU-GM，CFU-E，BFU-E细胞培养方法如下原理成熟的血细胞是由造血祖细胞转化来的，造血祖细胞在体外培养条件下能形成可辩认的各系细胞，其中主要为红系祖细胞(BFU-E，CFU-E)粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)，在这些细胞增多时表明骨髓造血功能增强。
培养方法无菌条件下取小鼠股骨，用1640培养液冲出骨髓，制成单细胞悬液备用。
1，粒-巨系培养用PRMI1640培养液4ml。马血清2ml，肌浸液0.8ml，小鼠骨髓细胞为1*105个有核细胞/ml，最后加入5%琼脂0.4ml，混匀后在每个培养皿内加入1ml，置于37℃，饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养，六天后观察细胞培养结果。
2,红系培养用MECOY’S 5A培养液，二巯基乙醇10-40.2ml，3%L-谷氨酰胺0.03ml，马血清0.5ml，EPO0.2ml，BPA0.1ml，有核细胞数0.5*105/0.2ml，2.7%甲基纤维素0.7ml，混匀后在每个培养板小孔内种入0.2ml，置于37℃，饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养。分别于第三天和第七天观察BFU-E，CFU-E的结果。
实验结果如下对外周血血液成分的影响组别给药前RBC(万/mm3) WBC(万/mm3) PT(万/mm3)对照组874±90.212900±109029.8±1.4红景天组827±9611410±46028.2±1.9给药后RBC(万/mm3) WBC(万/mm3) PT(万/mm3)对照组909.2±72.712520±65029.2±0.7红景天组1062±81.814430±91037.5±1.2对骨髓造血功能的影响组别 CFU-E.(个/105) BFU-E(个/105) CFU-GM(个/105)对照组60.3±4.149.3±3.5112.5±5.4红景天组88±3.561.7±7.4180.5±3.7在一项红景天提取物和再障生血片对CFU-E和CFU-GM的影响的对照实验中可看到如下结果此项实验的实验方法与实验一相同，再障生血片的给药量与红景天提取物一样。
组别 CFU-E(个/105) CFU-GM(个/105)生理对照组60.3±4.1112.5±5.4红景天组88.0±3.5180.5±3.7再障生血片组74.3±2.8160.7±7.7
实验二红景天提取物对Co60γ-射线照射小鼠的造血功能的作用实验方法取小鼠30只，随机分为三组，每组10只，分别为生理盐水组，生理盐水照射组，红景天组。给药前测外周血象，随后给药组腹腔注射给以红景天提取物4mg/0.2ml/支，其余各组给以生理盐水，随之照射Co60γ-射线，照射剂量为350rad，时间为2小时23分9秒，照射后第三天再分别给药一次，第六天测外周血白细胞，第七天称体重后处死小鼠，取脾称重，取股骨作CFU-GM，CFU-E，BFU-E细胞培养。实验结果如下对照射小鼠脾重的影响组别脾重(g)对照组159.8±15.1照射对照组55.9±9.4红景天组117.1±13.2脾脏为重要的造血器官，放射线照射后导致造血功能低下使脾脏重量降低，红景天提取物可明显对抗放射线照射后引起的脾重降低。
对小鼠外周血白细胞的影响组别外周血白细胞(个/mm3)对照组19770±22.9照射对照组8860±9.3红景天组20600±16.8对小鼠股骨造血祖细胞的影响:
组别 CFU-GM(个/105) CFU-E(个/105) BFU-E(个/105)对照组138±4.9117.3±7.970.0±3.5照射对照组26.4±2.940.2±2.016.7±2.6红景天组74±6.9102.6±8.957.2±3.1
实验三红景天提取物对环磷酰胺所致造血功能障碍的作用实验方法取小鼠20只，分为两组，每组10只，分别为环磷酰胺+生理盐水组，环磷酰胺+红景天组，领取小鼠后三天，测各组小鼠的外周血的白细胞，红细胞，血小板数，然后腹腔注射环磷酰胺5mg/0.2ml/只，次日开始灌胃给药，剂量为2mg/0.2ml/只，连续七天，每天一次，第八天测小鼠外周血血象并作CFU-GM，CFU-E，BFU-E细胞培养。实验结果如下对小鼠外周血白细胞计数的影响组别给药前WBC(个/mm3) RBC(万/mm3) PT(万/mm3)环磷酰胺+10320±1170878.3±57.230.9±1.8生理盐水环磷酰胺+12910±880703.5±61.534.1±2.5红景天给药后WBC(个/mm3) RBC(万/mm3) PT(万/mm3)环磷酰胺+8770±670794.8±54.524.7±2.3生理盐水环磷酰胺+20090±1650934.7±29.238.1±3.9红景天对小鼠股骨造血祖细胞的影响组别 CFU-GM(个/105) CFU-E(个/105) BFU-E(个/105)环磷酰胺+64.2±7.929.3±3.717.3±1.7生理盐水环磷酰胺+103.0±3.485.0±5.651.7±2.6红景天在一项红景天提取物和再障生血片的对照实验中可看到如下结果此项实验的实验方法与实验三相同，再障生血片的给药量与红景天一样。
对白细胞的作用组别给药前WBC(个/mm3) 给药后WBC(个/mm3)环磷酰胺+10320±11708770±670生理盐水环磷酰胺+12910±88020090±1650红景天环磷酰胺+11970±92013400±340再障生血片对CFU-GM的作用组别 CFU-GM(个/105)环磷酰胺+64.2±7.9生理盐水环磷酰胺+103.0±3.4红景天环磷酰胺+84.5±6.7再障生血片人体实验以下是一项服用红景天提取物制成的药物使人血红蛋白浓度提高的实验。
实验方法及结果如下受试对象长跑运动员，人数12名，男7名，女5名实验分两组，分别为服药组和对照组，其中服药组7人，对照组5人服药时间连续服药5周剂量每天服用一粒胶囊，每粒胶囊含红景天提取物280mg
血红蛋白的测定取指血20微升，用高铁氰化钾法进行比色测定。
结果组别服药前服药后第四周服药后第五周g%g%g%试验组13.5±0.7514.5±0.6814.6±0.67对照组13.8±0.9713.5±0.7313.4±0.74服药后两组间有显著差异。
以下是用红景天提取物胶囊治疗再生障碍性贫血的临床资料病例4例，其中男性3例，女性1例，均为慢性再生障碍性贫血病人年龄12-59岁病程1-4.5年，服药方法每天服用9粒胶囊，分三次服用，每粒胶囊含红景天提取物280mg，连续服药8周。
诊断和判断标准按1987年全国再生障碍性贫血会议修订的标准。
治疗结果如下病例HbWBCBPC骨髓象(增生程度)(g/l) (109/l) (109/l)治疗前治疗后治疗前治疗后治疗前治疗后治疗前治疗后1621253.74.63597减低正常2581212.94.53182减低正常323671.12.36958减低正常4471281.53.82738减低正常另外第3例和第4例病人治疗后的网织红细胞和骨髓巨核细胞在数量上均有明显的上升。以上病例经疗效评价第1例和第2例病人为基本治愈，第3例和第4例病人为明显进步。
以下为用红景天提取物制备药物制品的实施例胶囊剂:红景天提取物280mg
将上述提取物粉碎过筛后按规定量填充胶囊即得。
片剂:红景天提取物300mg淀粉100mg硬酯酸镁8mg将上述组份混合制成颗粒后压片即得。
口服糖浆剂:红景天提取物300mg蔗糖200mg50%乙醇1ml柠檬酸5mg苯甲酸钠3mg水加至10ml将上述组分加入水中调至所需量,混匀后装瓶即可。
颗粒剂:红景天提取物300mg蔗糖500mg橘子香精10mg食用色素适量将上述组分混合后制成颗粒，包装。
本发明涉及的红景天提取物的急性毒性实验结果如下雌性小鼠的口服LD50在10.39g/kg以上，雄性小鼠的口服LD50在9.93g/kg以上，雌性小鼠腹腔注射LD50为4.55g/kg，雄性小鼠腹腔注射LD50为4.23g/kg。
从以上实验可以看出，红景天提取物有提高骨髓造血功能的作用，可使外周血细胞数低下者的血象恢复正常，其作用在一些指标上优于常用中药制品再障生血片。红景天胶囊有治疗再生障碍性贫血的作用并有较低的毒性，由以上结果可知用红景天提取物制备的药物能够治疗贫血并能够促进白细胞增生。
权利要求
1.用红景天提取物制备一种治疗贫血及促白细胞增生的药物，所述的红景天提取物由下述方法制备将红景天的根和茎用溶剂提取一至数次，提取液经过蒸发，浓缩，得到浸膏，该浸膏即红景天提取物。所述的溶剂是水，乙醇，乙醚，乙酸乙酯，丙酮。
2.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药是作为口服应用的。
3.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药为口服液。
4.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药为片剂。
5.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药为胶囊剂。
6.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药为颗粒剂。
7.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药能治疗因化疗或放疗导致的人血中红细胞，白细胞，血小板数量下降引起的疾病。
8.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药有刺激骨髓造血功能的作用。
9.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药可使人血中低于正常值的红细胞，白细胞，血小板数量恢复到正常。
10.按权力要求1所述的药物，其特征在于该药可使骨髓造血功能低下病人的骨髓造血功能恢复正常。
全文摘要
本发明涉及用红景天提取物制备一种治疗由造血机能障碍引起的贫血和白细胞下降的药物，用红景天提取物制备的药物通常用来治疗肺炎咳嗽，咳血咯血，妇女白带，跌打损伤，烫火烧伤，以及抗疲劳抗缺氧等，并有滋补强壮作用。本发明发现了红景天提取物有抗贫血和促白细胞增升作用，可用于防治由辐射或化疗引起的造血机能障碍引起的疾病，从而增加了该药物的适应症。
文档编号A61P7/06GK1101847SQ93118728
公开日1995年4月26日 申请日期1993年10月21日 优先权日1993年10月21日
发明者高月, 刘秀珍, 葛忠良 申请人:军事医学科学院放射医学研究所