内活体荧光成像药物中的应用。
[0013]本发明所述的叶酸介导的多功能金纳米星用于光热和光动联合抗肿瘤的药物传递系统，可以负载化疗药物。金纳米星具有光热转换特性和产生活性氧能力，结合肿瘤部位对其进行激光照射，利用金纳米星作为热敏剂，在激光照射下产热可促使药物在肿瘤部位靶向释放，从而实现热疗和化疗联合抗肿瘤的作用；本发明体物理化学稳定性良好，制备工艺简单且原料来源丰富，成本低，毒副作用小，能有效抑制肿瘤细胞增殖，是抗肿瘤靶向治疗中药物载体上的创新。
【具体实施方式】
[0014]以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0015]本发明在具体实施中，可由以下实施例给出。
[0016]实施例1
本发明在具体实施中，可由以下步骤实现:
(!)制备氨基化的金纳米星溶液:在25°C，540r/min的磁力搅拌条件下，加入浓度为50 μ g/mL的金纳米星溶液20mL，然后加入浓度为lmg/mL的NH2-PEG2000_SH溶液lmL，室温避光搅拌反应12h，再1000rpm高速离心30min，得沉淀，沉淀用超纯水21mL复溶，得氨基化的金纳米星(GNSTs-PEG)溶液；
(2)制备具有靶向性的金纳米星:分别称取叶酸19.91mg、N,N’-二环己基碳酰亚胺13.94mg、N-轻基琥?白酰亚胺10.36mg (即重量比:叶酸:N, N，- 二环己基碳酰亚胺:N-轻基琥珀酰亚胺=1: 0.7: 0.52)，然后依次加入4mL 二甲基亚砜中，混匀溶解，再进行活化羧基，即在50°C、480r/min下避光磁力搅拌反应12h，然后将所得溶液1000rpm高速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，加入步骤(I)制备的氨基化金纳米星溶液中进行酰化反应，室温避光搅拌反应24h，再10000 rpm高速离心30min，去除游离的小分子，得到末端含有氨基的叶酸靶向金纳米星(GNSTs-PEG-FA)溶液；
(3)制备具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液:取Img荧光探针吲哚-5.5-菁-N-羟基琥珀酰亚胺(cy5.5-HNS)溶解于ImL的二甲基亚砜中，加入步骤(2)制备的叶酸靶向金纳米星溶液中进行酰胺反应，室温避光搅拌反应24h，再1000rpm超速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水0.5mL复溶，得以金纳米星为载体具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星(GNS-PEG-FA-cy5.5)溶液；
(4)制备负载阿霉素的金纳米星溶液:将步骤(3)制备的具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液经冷冻干燥得粉末，将粉末和阿霉素以质量比1:2依次加到24mL的二甲基亚砜中，在氮气保护下，超声溶解，在25 °C下480r/min避光搅拌反应24h，得混合溶液，再将得到的混合溶液以1000rpm超速离心30min (去掉未反应的阿霉素和二甲基亚砜)，得沉淀，沉淀用超纯水复溶，用冷冻干燥即得光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统(GNSTs/DOX-PEG-FA-cy5.5)粉末。
[0017]实施例2
本发明在具体实施中，可由以下步骤实现:
(1)制备氨基化的金纳米星:在20°C，600r/min的磁力搅拌条件下，加入浓度为50μ g/mL的金纳米星溶液15mL，然后加入浓度为5mg/mL的PE1-SH 3mL，进行避光搅拌反应8h，再10000 rpm高速离心30min，然后用超纯水复溶得到氨基化金纳米星溶液；
(2)制备具有靶向性的金纳米星:分别称取叶酸18mg、N，N’- 二环己基碳酰亚胺12mg、N-羟基琥珀酰亚胺9mg，然后依次加入4mL磷酸盐缓冲液中，混匀溶解，再进行活化羧基，即在45°C、500r/min下避光磁力搅拌反应16h，然后将所得溶液10000 rpm高速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，加入步骤(I)制备的氨基化金纳米星溶液中进行酰化反应，室温避光搅拌反应16h，再10000 rpm高速离心30min，去除游离的小分子，得到末端含有氨基的叶酸靶向金纳米星溶液；
(3)制备具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液:取1.5mg荧光探针吲哚-5-菁溶解于0.8mL的磷酸盐缓冲液中，加入步骤(2)制备的叶酸靶向金纳米星溶液中进行酰胺反应，室温避光搅拌反应16h，再1000rpm超速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水0.8mL复溶，得到以金纳米星为载体具有靶向性和近红外荧光成像的抗肿瘤药物传递系统；
(4)制备负载阿霉素的金纳米星溶液:将步骤(3)制备的具有近红外荧光成像的靶向金纳米星溶液经真空干燥得粉末，将粉末和阿霉素以质量比1:2.5依次加到35mL的磷酸盐缓冲液中，在氮气保护下，超声溶解，在20°C下600r/min避光搅拌反应30h，得混合溶液，再将得到的混合溶液以1000rpm超速离心30min (去掉未反应的阿霉素和磷酸盐缓冲液)，得沉淀，沉淀用超纯水复溶，真空干燥即得光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统粉末。
[0018]实施例3
本发明在具体实施中，还可由以下步骤实现:
(1)制备氨基化的金纳米星:在21°C，510r/min的磁力搅拌条件下，加入浓度为50μ g/mL的金纳米星溶液15mL，然后加入浓度为5.0mg/mL的氨基化合物3mL，进行避光搅拌反应9h，再10000 rpm高速离心30min，然后用超纯水复溶得到氨基化金纳米星溶液；
(2)制备具有靶向性的金纳米星:分别称取叶酸17.5mg、N，N’ - 二环己基碳酰亚胺
12.5mg、N-羟基琥珀酰亚胺9mg，然后依次加入3.5mL反应溶液中，混匀溶解，再进行活化羧基，即在45°C、510r/min下避光磁力搅拌反应16h，然后将所得溶液10000 rpm高速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，加入步骤(I)制备的氨基化金纳米星溶液中进行酰化反应，室温避光搅拌反应18h，再10000 rpm高速离心30min，去除游离的小分子，得到末端含有氨基的叶酸靶向金纳米星溶液；
(3)制备具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液:取Img荧光探针溶解于0.5mL的反应溶剂中，加入步骤(2)制备的叶酸靶向金纳米星溶液中进行酰胺反应，室温避光搅拌反应18h，再1000rpm超速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水0.5mL复溶，得到以金纳米星为载体具有靶向性和近红外荧光成像的抗肿瘤药物传递系统；
(4)制备负载阿霉素的金纳米星溶液:将步骤(3)制备的具有近红外荧光成像的靶向金纳米星溶液经干燥得粉末，将粉末和阿霉素以质量比1:1.7依次加到25mL的反应溶剂中，在氮气保护下，超声溶解，在21°C下510r/min避光搅拌反应36h，得混合溶液，再将得到的混合溶液以1000rpm超速离心30min (去掉未反应的阿霉素和反应溶剂)，得沉淀，沉淀用超纯水复溶，干燥即得光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统粉末。
[0019]实施例4
本发明在具体实施中，还可由以下步骤实现:
Cl)制备氨基化的金纳米星:在20-22°C，500-600r/min的磁力搅拌条件下，加入浓度为50 μ g/mL的金纳米星溶液13-17mL，然后加入浓度为6_8mg/mL的氨基化合物2_3mL，进行避光搅拌反应8-10 h，再10000 rpm高速离心30min，然后用超纯水复溶得到氨基化金纳米星溶液；
(2)制备具有靶向性的金纳米星:分别称取叶酸17-18mg、N，N’- 二环己基碳酰亚胺12-13mg、N-羟基琥珀酰亚胺8-9.5mg，然后依次加入3_4mL反应溶液中，混匀溶解，再进行活化羧基，即在43-47°C、500-600r/min下避光磁力搅拌反应12_20h，然后将所得溶液10000 rpm高速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，加入步骤(I)制备的氨基化金纳米星溶液中进行酰化反应，室温避光搅拌反应16-20h，再10000 rpm高速离心30min，去除游离的小分子，得到末端含有氨基的叶酸靶向金纳米星溶液；
(3)制备具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液:取0.8-1.2mg荧光探针溶解于0.4-0.6mL的反应溶剂中，加入步骤(2)制备的叶酸靶向金纳米星溶液中进行酰胺反应，室温避光搅拌反应16-20h，再1000rpm超速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水0.4-0.6mL复溶，得到以金纳米星为载体具有靶向性和近红外荧光成像的抗肿瘤药物传递系统；
(4)制备负载阿霉素的金纳米星溶液:将步骤(3)制备的具有近红外荧光成像的靶向金纳米星溶液经干燥得粉末，将粉末和阿霉素以质量比1:1.8-2.2依次加到20-30mL的反应溶剂中，在氮气保护下，超声溶解，在20-22°C下50