一种ε-聚赖氨酸-对羟基苯丙酸抗菌水凝胶敷料及其制备方法_2

文档序号:8534625阅读:来源:国知局
保护范围之内。
[0032]有益效果:该抗菌水凝胶材料来源为天然生物高分子聚赖氨酸,采用酶催化原位凝胶的方法在常温中性条件下制得,制备过程不含任何化学交联剂。本发明制得的抗菌水凝胶敷料对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有优良的抑制作用,能有效防止伤口感染,且具有优良的生物相容性和生物可降解性。
【附图说明】
[0033]图1为本发明的反应原理示意图;
[0034]图2为聚赖氨酸-对羟基苯丙酸的核磁共振氢谱(1H-NMR),溶剂为D2O ;
[0035]图3为水凝胶在不同浓度的聚合物和酶催化反应条件下的成胶时间;
[0036]图4为水凝胶在不同过氧化氢(H2O2)浓度下的弹性模量;
[0037]图5为聚赖氨酸水凝胶的扫描电镜图片(SEM);
[0038]图6为聚赖氨酸水凝胶抗菌敷料对大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)的定性(抑菌圈实验)和不同浓度EPL-HPA的抗菌效果。
【具体实施方式】
[0039]下面通过实施例对本发明作进一步的说明,其目的仅在于更好的理解本发明而非限制本发明保护的范围。
[0040]以下实施例所用试剂来源如下:
[0041]ε -聚赖氨酸:购于南京轩凯生物科技有限公司;分子量2000?5500Da。
[0042]PBS (磷酸缓冲盐溶液),HPA (对羟基苯丙酸),EDC (1-(3_ 二甲基氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺),NHS (N-羟基琥珀酰亚胺),HRP (辣根过氧化物酶),H2O2 (过氧化氢)购自Sigma-Aldrich 公司。
[0043]以下实施例所用设备来源如下:
[0044]磁力搅拌器:型号85-2C,上海扭航仪器设备有限公司。
[0045]冷冻干燥机:型号FD-1C-50,北京博医康实验仪器有限公司。
[0046]真空干燥箱:型号YZG-600,南京焱泰电热设备有限公司。
[0047]核磁共振仪:型号AVANCE AV-500,美国 fcuker Daltonics 公司。
[0048]扫描电子显微镜:型号JEOL,JSM-6380,日本电子(JEOL)。
[0049]实施例1
[0050]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的ε -聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应 15h。各物质的摩尔比如下:EPL(NH2):HPA = 1:1,EDC:HPA = 1:1,EDC:NHS = 1:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为45%。
[0051]实施例2
[0052]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下:EPL(NH2):HPA = 1:3,EDC:HPA= 1:1,EDC:NHS = 1:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为87 %。
[0053]实施例3
[0054]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下:EPL(NH2):HPA = 1:5,EDC:HPA= 1:1,EDC:NHS = 1:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为63 %。
[0055]实施例4
[0056]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下:EPL(NH2):HPA = 1:3,EDC:HPA = 3:1,EDC:NHS = 1:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为90%。并对产物进行核磁氢谱表征,结果如图2所示,产物EPL-HPA的核磁氢谱在6.8ppm和7.0ppm出现HPA的特征峰,表明HPA成功接枝EPL。
[0057]实施例5
[0058]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下:EPL (NH2):HPA = 1: 3,EDC:HPA = 5: 1,EDC:NHS = 1:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为85 %。
[0059]实施例6
[0060]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下 -EPL(NH2):HPA = 1:3,EDC:HPA = 3:1, EDC:NHS = 2:1。将反应后的溶液转移至透析袋中,置于RO水中透析5天。将得到的透析后的纯化溶液冷冻干燥得到EPL-HPA共聚物,产率为79%。
[0061]实施例7
[0062]将对羟基苯丙酸溶解于N,N- 二甲基甲酰胺(DMF)和去离子水(R0水)的共混溶剂中,DMF与RO水的体积比是1:3,对羟基苯丙酸的用量为lg/100mL共混溶剂,搅拌混合均匀。加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),在冰浴条件下活化5h。将RO水溶解的聚赖氨酸加入到活化后的体系中,室温条件下反应15ho 各物质的摩尔比如下 -EPL(NH2):HPA = 1:3,EDC:HPA = 3:1, EDC:NHS = 3.5:1。将反应后的溶液转移
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