含有非天然氨基酸的药物递送缀合物以及其使用方法
【专利说明】
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请根据35U.S.C. § 119(e)要求2012年10月16日提交的美国临时申请序列 号61/714,565、2013年3月15日提交的美国临时申请序列号61/790,234、2013年8月13 日提交的美国临时申请序列号61/865, 382以及2013年9月13日提交的美国临时申请序 列号61/877, 317的优先权。本申请根据35U. S. C. § 365 (c)要求2013年3月15日提交的 美国专利申请序列号13/837, 539的优先权。所有以上引用的申请的披露内容通过引用以 其全部内容结合在此。
技术领域
[0003] 在此描述的本发明涉及用于靶向疗法的药物递送缀合物。具体地说，在此描述的 本发明涉及包含含有一个或多个非天然氨基酸的多价接头的药物递送缀合物。
[0004] 发明背景与概述
[0005] 哺乳动物免疫系统提供一种用于识别并消除病原细胞如肿瘤细胞以及其他侵入 性外源性病原体的手段。虽然免疫系统通常提供强大的抵御防线，但是存在很多病原细胞 如癌细胞和其他感染原逃避宿主免疫反应并增殖或者持续存在伴随宿主的致病性的情况。 已开发化学治疗剂和放射性疗法消除例如复制的赘生物。然而，很多目前可用的化学治疗 剂和放射性治疗方案具有不良副作用，因为它们缺乏对优选破坏病原细胞的足够选择性并 且因此还可损害正常的宿主细胞如造血系统的细胞和其他非病原细胞。这些抗癌药物的不 良副作用突显需要开发具有对病原细胞群的选择性并且具有减小的宿主毒性的新疗法。
[0006] 在此发现包含由一个或多个非天然氨基酸形成的多价接头的药物递送缀合物可 有效治疗病原细胞群并且表现出低宿主动物毒性。
[0007] 在本发明的一个说明性且非限制性的实施例中，在此描述了多种具有以下化学式 的化合物
[0008] B-L-Dx
[0009] 其中B、L、D、以及X各自是在此所述的不同实施例和方面所定义的。
[0010] 在另一个实施例中，在此还描述了含有一种或多种这些化合物的药物组合物。在 一个方面，这些组合物包含用于治疗患有癌症、炎症等的患者的治疗有效量的这一种或多 种化合物。应理解，这些组合物可以包含其他组分和/或成分，包括但不限于其他治疗活性 的化合物和/或一种或多种载体、稀释剂、赋形剂等以及其组合。在另一个实施例中，在此 还描述了用于使用这些化合物和药物组合物以用于治疗患有癌症、炎症等的患者或宿主动 物的多种方法。在一个方面，这些方法包括向患有癌症、炎症等的一位患者给予在此所述的 这些化合物和/或组合物中的一种或多种的步骤。在另一个方面，这些方法包括给予治疗 有效量的在此所述的这一种或多种化合物和/或组合物，以用于治疗患有癌症、炎症等的 患者。在另一个实施例中，在此还描述了这些化合物和组合物在制造用于治疗患有癌症、炎 症等的患者的药物中的用途。在一个方面，这些药物包含用于治疗患有癌症、炎症等的患者 的治疗有效量的这一种或多种化合物和/或组合物。
[0011] 附图简述
[0012] 图IA示出了 EC1669在KB细胞中（在37°C下lh)的相对亲和力。图IB示出了 EC1669在CHO-β细胞中（在37°C下Ih)的相对亲和力。
[0013] 图2示出EC1669对于RAW264. 7细胞的抑制细胞作用，如通过在2h和72h下的 XTT细胞活性所确定的。
[0014] 图3A示出与以lOOymol/kg联合给药EC1456和EC0923(A)以及未治疗（PBS) 对照（)相比，在持续连续两周以I ymol/kg每周给药三次（M/W/F) (TIW)的nu/nu小 鼠中EC1456针对KB肿瘤的体内活性（#)。垂直虚线表示最终剂量的那天。图3B示出 EC1456不会引起任何可观察的整体动物毒性，如通过动物体重确定的。
[0015] 图4A示出EC1663在具有皮下KB肿瘤的nu/nu小鼠中的活性，其中EC1663在第7 天开始用〇. 5 μπιο?/kg静脉内给予（▲)，持续2周的时段每周三次（M/W/F)，并且与未治 疗对照（)相比，每个群体N = 5只动物。垂直虚线=最终给药的那天。图4A示出测试 动物中的4/4PR。图4B示出EC1663不会表现出显著的宿主动物毒性。
[0016] 图5A示出EC1456针对建立的皮下MDA-MB-231肿瘤的活性。具有皮下MDA-MB-231 肿瘤（94-145mm 3)的动物在第17天开始用2 μ mol/kg (图A) EC1456治疗（鲁），持续2周 的时段每周三次（M/W/F)，并且与未治疗动物（)相比，如图5A所示的，每个群组N = 5 只动物。垂直虚线=最终剂量的那天。图5B示出EC1456不会引起任何可观察的整体动物 总毒性，如通过重量变化％确定的。
[0017] 图6A示出EC1456在具有皮下KB-CR2000 (顺铂抗性）肿瘤（98-148mm3)的nu/nu 小鼠中的活性，其中EC1456在第6天开始用2 μ mol/kg静脉内给予（鲁），持续2周的时段 每周三次（M/W/F)，或者用3mg/kg顺铂给予（▲)，持续2周的时段每周两次（T/Th)，并且 与未治疗对照（)相比，每个群组N = 5只动物。垂直虚线=最终给药的那天。图6B示 出EC1456不会表现出显著的宿主动物毒性。相反，顺铂治疗在给药时段过程中引起大量的 宿主动物毒性。
[0018] 图7示出EC1496针对佐剂诱导的关节炎的体内功效。箭头指示治疗天数，（a)健 康对照，（b)未治疗对照，（c)EC1496,（d)EC1496+过量EC0923(比较剂/竞争物化合物）。
[0019] 图8A示出EC1669针对关节炎的体内功效，（a)健康对照，（a)未治疗对照，（b) EC1669(375nmol/kg)，（c)EC1669+500x EC0923。图 8B 示出 EC1669 不会表现出整体动物毒 性，（a)未治疗对照，（b)EC1669(375nmol/kg)，（c)EC1669+500x EC0923,（d)健康对照。
[0020] 图9A示出EC1669针对关节炎的体内功效，如通过脚爪肿胀度确定的。图9B示出 EC1669针对关节炎的体内功效，如通过骨放射线照相术确定的。
[0021] 图IOA示出在AIA大鼠中单独的EC1669和EC1669加上骁悉（CellC印t)组合的 联合疗法的体内功效，其中在第〇天是诱导后的9天，并且箭头指示治疗天数，（a)健康对 照，（b)未治疗对照，（c)EC1669(1000nmol/kg，siw，sc)，（d)骑悉 ?(30mg/kg，po, qdx5)， (e)EC1669+骁悉?。图IOB示出与对照相比对于每个给予方案的整体动物毒性。
[0022] 图11示出在AIA大鼠中单独的EC1669和EC1669加上骁悉组合的联合疗法的体 内功效，如通过脚爪肿胀度来确定的。
[0023] 图12A示出EC1669针对EAU(两只眼睛的总葡萄膜炎得分）的体内功效。动物在 EAU诱导之后第8天开始每隔一天用EC1669 ( )、EC1669加上EC0923 ( □)、以及MTX ( ?) 治疗或者来自未治疗的动物（鲁）。第O天是诱导后的8天，并且箭头指示治疗的天数。图 12B示出EC1669不会引起整体动物毒性。
[0024] 图13A示出EC1496针对EAU(两只眼睛的总葡萄膜炎得分）的体内功效，（a)葡萄 膜炎未治疗对照，（b)EC1496(375nmol/kg)，（c)EC1496+过量 EC0923。图 13B 示出 EC1496 针对EAU的体内功效，如通过组织学确定的。
[0025] 图14A示出EC1669针对EAE的体内功效，（a)未治疗EAE对照，（b) EC1669(250nmol/kg)，（c)EC1669+过量EC0923。动物在EAE诱导之后第8天开始每隔一天 治疗（如通过箭头指示），并且与未治疗对照相比。图14B示出体重的变化百分比（B)，对 每个组取平均值。
[0026] 图15示出EC1496针对EAE的体内功效。示出来自未治疗动物和在EAE诱导之后 第8天开始每隔一天用EC1496和EC1496加上EC0923治疗的动物的单个EAE得分，并且将 其与未治疗对照相比。
[0027] 图16A示出EC1496(500nmol/kg，s. c)的药代动力学以及氨喋呤和氨喋呤酰肼的 体内产生。图16B示出EC0746(比较剂化合物，500nmol/kg，s. c)的药代动力学以及氨喋 呤和氨喋呤酰肼的体内产生。
[0028] 图17示出在小鼠中3H-EC1669的药代动力学生物分布，图（A)、图（C)和图（E);以 及 3H-甲氨蝶呤的药代动力学生物分布，图（B)、图⑶和图（F)。以500nmol/kg向Balb/ c小鼠静脉内给予测试化合物。
[0029] 图18示出小鼠中3H-EC1669 ( )和3H-MTX ( ▼)的RBC摄取的比较，如放射性随 着时间的测量值。
[0030] 图 19 示出（b)EC1496(3 ymol/kg)与（