上清液IV;
[0162] f、上清液IV用纯化水稀释1倍后，均匀搅拌下用10%氢氧化钠溶液调节稀释液的 pH值至7. 2,过滤得滤液；
[0163] 5)活性炭处理：
[0164] 将活性炭粉加入滤液的总质量0. 2%的针剂用活性炭粉加入滤液I中，室温下均 匀搅拌20分钟后，用2层滤纸过滤，再经0. 22ym滤膜过滤，即得质量稳定的胆木注射用 溶液437g。
[0165] 对比组1:
[0166] 参照申请号为200510087735. 3的专利实施例1的制备方法
[0167] 提取物的制备：取5kg胆木，切片，粉碎成粗粉，加水10倍煎煮三次，第一次2小 时，第二次1. 5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1. 18 (55°C)的 清膏，加4倍量的熟石膏粉，混匀，75减压干燥，粉碎成50目粉，加乙醇使含醇量达85 %，搅 拌提取三次，冷藏温度为l〇°C，静置24小时，取上清液，回收乙醇，加注射用水至相对密度 为1. 02 (55°C)，冷至室温，用10 %盐酸溶液调节pH值至2. 0,冷藏于10°C，静置24小时，滤 过，滤液用20 %氢氧化钠溶液调节pH值至7. 2,冷藏于KTC，静置12小时，滤过，得胆木提 取物341g。
[0168] 对比组2:
[0169] 参照申请号为：200610097689.X的专利实施例1的制备方法
[0170] 一种胆木提取物，其步骤如下：
[0171] I) 5kg胆木片状心材、枝、皮混合物，干燥，粉碎，用85 %乙醇回流提取4次，提取液 每次用量12倍；合并提取液，冷藏12小时，滤过，回收乙醇；然后加入到20倍量4mol/L的 氢氧化钠溶液中，搅拌，冷藏，用5mol/L的HCL调节PH至4,冷藏，过滤，滤液另置，取沉淀再 加至10%氢氧化钠溶液中，搅拌溶解，静置，再以20%盐酸溶液调节PH至4,冷藏12小时， 静置，过滤，弃去滤渣，滤液与另置滤液合并；即得粗提取物溶液；
[0172]2)取粗提取物溶液以HPD100大孔树脂吸附，弃流出液，再以水洗脱，再以35%乙 醇梯度洗脱，每个梯度洗脱体积为15个大孔树脂柱/床体积，弃去洗脱液；再以70%乙醇 洗脱，洗脱体积为20个大孔树脂柱/床体积，收集洗脱液，浓缩，干燥，得黄色固体物质；
[0173] 3)取黄色固体物质以30 %乙醇溶解，过滤，浓缩，过滤至滤液澄清，滤液静置放 冷，收集析出物，干燥即得胆木提取物53克。
[0174]
[0175] 各活性成分的检测方法：
[0176] (1)黄酮类化合物照紫外-可见分光光度法（中国药典2010 -部附录VA)检测芦 丁类物质
[0177] (2)异长春花苷内酰胺参考高效液相色谱法（中华人民共和国药典一部附录VID) 测定异长春花苷内酰胺类生物碱。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-磷酸 (30 :70 1)为流动相；检测波长为226nm。理论板数按异长春花苷内酰胺峰计算应不低 于 5000。
[0178] (3)原儿茶酸参考高效液相色谱法（中华人民共和国药典一部附录VID)测定，条 件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以〇.OlOmol/L的磷酸-甲醇（95:5)为洗脱液；检 测波长280nm;理论塔板数按原儿茶酸计算应不低于2000.
[0179] 本发明方法获得的胆木注射用溶液的量远远高于对比组，且本发明所获得的胆木 注射用溶液在治疗急性扁桃体炎、急性咽喉炎、急性结膜炎、上呼吸道感染、肺炎、支气管炎 等呼吸系统疾病上具有显著功效，原因在于其含有较高质量的黄酮类物质、异长春花苷内 酰胺、酚酸类物质，其中的黄酮类物质可以用于清热、解毒、消炎；异长春花苷内酰胺可以用 于抗菌、抗病毒，酚酸类物质可以用于消炎、解毒，而且本发明方法获得的胆木注射用溶液 的在灭菌后的稳定性良好，不产生沉淀。
[0180] 对比组1与实验组1相比较，实验组1获得的胆木注射液溶液各有效成分（如黄 酮类物质、异长春花苷内酰胺、酚酸类物质）显著高于对比组1。
[0181] 对比组2与实验组1相比较，由于对比组2的目的是制取异长春花苷内酰胺，而其 他有效成分（如黄酮类物质、酚酸类物质）显著低于实验组1。
[0182] 以上所揭露的仅为本发明的几种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之 权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。
【主权项】
1. 一种胆木注射用溶液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 浸膏制备： a、 取胆木粉碎，加胆木粉质量的8-12倍水，煎煮1-2小时，过滤，收集滤渣和煎液； b、 向a步骤中滤渣加入所述滤渣质量的6-10倍水，煎煮1-1. 5小时，过滤，收集滤渣和 煎液； c、 向b步骤中滤渣加入其质量的6-8倍水，煎煮0. 8-1小时，过滤，收集煎液； d、 合并步骤a-c收集的煎液，在温度为50°C-60°C条件下过滤，浓缩至相对密度为 1. 18-1. 19,过滤，冷却至20°C-25°C即得浸膏； 2) 醇提操作： a、 在醇提罐中注入乙醇溶液，搅拌，将步骤1)所得浸膏加入到乙醇溶液中，控制乙醇 浓度为80 % -85 %，继续搅拌18-25分钟，静置分层，提取上层乙醇溶液； b、 向醇提罐中加入40°C~100°C水，搅拌溶解后注入乙醇溶液，继续搅拌，控制乙醇浓 度为80% -85%，再继续搅拌18-25分钟，静置分层，提取上层乙醇溶液； c、 重复b步骤2~3次； d、 向醇提罐中加入乙醇溶液，搅拌溶解，经离心处理后，回收上层乙醇溶液； e、 合并步骤a-d中的上层乙醇溶液； 3) 醇液浓缩： 将步骤2)e步骤中的上层乙醇溶液在温度为60°C-70°C、压力为-0. 07-0. 09mpa的条 件下浓缩，再加入注射用纯化水，继续浓缩至无乙醇蒸出为止，冷却，过滤，得到醇浓缩水稀 释液； 4) 醇提液的酸和明胶处理： a、 将步骤3)所得的醇浓缩水稀释液加入20 %盐酸溶液，搅拌，调节pH值为1-2,在 6°C-KTC冰柜中放置4-12小时，静置分层，过滤得上清液I; b、 用20%氢氧化钠溶液调节该上清液IpH值至4-6,加1% -2%明胶溶液，搅拌，在 6°C-10 °C冰柜中放置4-12小时，静置分层，过滤的上清液II; c、 向上清液II中加乙醇溶液，搅拌，使含醇量达到80% -85%，放置2-4小时，静置分 层，过滤得上清液III; d、 上清液III在60°C-70°C、-0? 07mpa-0. 09mpa的条件下，回收乙醇至无醇味，滤纸过 滤，得明胶处理液，调节PH值至1-2,在6°C-KTC冰柜中放置4-12小时，静置分层，过滤得 上清液IV， e、 将上清液IV稀释1-2倍，搅拌，调pH值至7. 2-7. 6,过滤得滤液； 5) 活性炭处理： 将活性炭粉加入滤液中，搅拌20-30分钟，过滤，即得胆木注射用溶液。2. 根据权利要求1所述的一种胆木注射用溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤1) 中a步骤中加胆木粉质量为12倍的水、煎煮2小时；b步骤所加滤渣质量为10倍的水，煎 煮1. 5小时；c步骤所加滤渣质量为8倍的水，煎煮1小时。3. 根据权利要求1所述的一种胆木注射用溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤2) 中a步骤、b步骤中，控制乙醇浓度为85%，搅拌25分钟。4. 根据权利要求1所述的一种胆木注射用溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤4) 中，a步骤、e步骤中调节pH值为2，b步骤中pH值调节为5,加入2%明胶溶液，f步骤中调 节pH值为7. 6。5.根据权利要求1所述的一种胆木注射用溶液的制备方法，其特征在于，所述离心处 理为在转速为3000r/min的防爆离心机离心10-20分钟。
【专利摘要】本发明是提供一种胆木注射用溶液的制备方法，其主要制备方法为：将胆木粉碎后水煮提取得到流浸膏，将浸膏用醇充分提取，将醇提液浓缩稀释过滤后，调至较强酸性沉降两次、明胶处理一次，过滤后再加活性炭于室温搅拌后滤过，调节溶液的pH值至偏碱性，加注射用水稀释到浓度要求的范围即得。此方法不仅大大提高了药效成分的提取收率，且产品质量能保持稳定，还明显缩短了生产周期，有效降低了生产成本。
【IPC分类】A61K36/74, A61P11/00, A61P31/00, A61K9/08
【公开号】CN104887787
【申请号】CN201510235586
【发明人】蒲含林, 李秀峰, 赖潜, 李武
【申请人】海南制药厂有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月11日