地平印迹聚合物及非印迹聚合物 在0.75~2. 75mmol/L范围内的吸附等温线。具体操作步骤如下：a.同上述方法(实施例1)合成左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物MIP1，非印迹聚合物 NIPl不加模板分子左旋氨氯地平外，其余步骤同左旋氨氯地平分子印迹聚合物的合成。
[0023] b.分别称取干燥的左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物和非印迹聚合物20. 0mg 放入5 mL离心管中，加入3. 0 mL浓度在0. 75~2. 75 mmol/L的左旋氨氯地平乙腈溶液， 放入振荡器中（功率100W)，室温下振荡5h，然后将混合液转入高速离心机中以8000 r/ min离心15min，取100 ML的离心上清液，用乙腈稀释至10mL，用分光光度法在238nm波 长下测定左旋氨氯地平的平衡浓度。
[0024] 根据结合前后溶液中左旋氨氯地平浓度的变化计算含有液晶单体的左旋氨氯地 平分子印迹聚合物和非印迹聚合物对左旋氨氯地平的结合吸附量Qe，计算公式为：
仏（mmol/g)为聚合物吸附左旋氨氯地平的量，C；、C； (mmol/1)分别为左旋氨氯地平 溶液的初始浓度和达平衡时的浓度，V为加入的吸附母液的体积，M为实验中使用的MIP 和NIP的质量。平行测定3次，取平均值。
[0025] 以Qe对C 4乍图即可得左旋氨氯地平分子印迹聚合物吸附等温线。
[0026] 结果表明，随着吸附母液6；浓度的增大，左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物和非 印迹聚合物左旋氨氯地平的吸附量趋于稳定，且液晶分子印迹聚合物对于左旋氨氯地平的 吸附量明显大于非印迹聚合物(见图2)。说明左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物对模板分 子左旋氨氯地平有特异性吸附和明显的印迹效果（印迹因子=2. 25)，且加入液晶单体的 左旋氨氯地平分子印迹聚合物的吸附效果最好。
[0027] 实施例3 药物体外释放实验研宄左氨氯地平液晶分子印迹聚合物释放药物的动力学的模型。为 了考察药物的释放模型，测定了左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物及非印迹聚合物在一定 时间内的释放的药物总量。具体操作步骤如下： a.同上述方法(实施例1)合成左旋氧氨氯地平液晶分子印迹聚合物MIP1，非印迹聚 合物NIPl的合成除不加模板分子左旋氨氯地平外，其余步骤同左旋氨氯地平分子印迹聚 合物的合成。
[0028] b.将合成好的左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物和非印迹聚合物置于左旋氨氯 地平的乙腈溶液中浸泡，然后用乙腈洗两次，室温下晾干；准确称取载药的左旋氨氯地平分 子印迹聚合物和非印迹聚合物分别置于透析袋(截留分子量6-8kDa，宽度35mm)中， 置于IOOmL乙腈溶液中，室温下搅拌，50rp/min;-定时间间隔，用紫外分光光度法测定药 物释放量。
[0029] 以累积释放的药量对时间作图，绘制药物的释放曲线(见图3,a、b、c三种浓度)， 结果表明含有液晶单体的MIP载体控释效果良好，证明加入液晶单体的左旋氨氯地平分子 印迹聚合物对左旋氨氯地平具有良好的控释效果。
[0030] 实施例4体内药物释放 药物体内释放实验研宄左氨氯地平液晶分子印迹聚合物在大鼠胃内滞留漂浮缓释的 作用。为了考察药物在大鼠胃内滞留效果，通过测定了左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物 及非印迹聚合物一定时间内在大鼠血药浓度。
[0031] 具体操作步骤如下： a.同上述方法(实施例1)合成左旋氧氨氯地平液晶分子印迹聚合物MIPl和左旋氧氨 氯地平普通分子印迹聚合物MIP2,非印迹聚合物NIPl、NIP2的合成除不加模板分子左旋氨 氯地平外，其余步骤同左旋氨氯地平分子印迹聚合物的合成。
[0032] b.对照组商品药左旋苯磺酸氨氯地平(浙江为康制药有限公司），购于天津市老百 姓大药房连锁有限公司 c.将合成好的左旋氨氯地平液晶分子印迹聚合物和非印迹聚合物置于左旋氨氯地平 的乙腈溶液中浸泡，然后用乙腈洗两次，室温下晾干；准确称取载药的左旋氨氯地平液晶分 子印迹聚合物MIPl和左旋氧氨氯地平普通分子印迹聚合物MIP2、非印迹聚合物NIPl和 NIP2以及左旋苯磺酸氨氯地平商品药混悬于生理盐水中；另取健康雄性大鼠3只，体重 约200g，编号1、2、3,将上述药物按lmg/kg的剂量灌胃给药。于灌胃后20、40、60、90、120、 150、180、240、360、420、480min眼眶采血200ul，在每次取血后再向大鼠体内灌水2ml，以保 持漂浮性能，有利于药物在胃内的滞留。将血样用肝素抗凝，13000r/min离心制成血浆。
[0033] f.取血衆上清液50ul，加入150ul乙腈，混勾，再次离心5min，转速13000r/ min，取上清液150ul，自然挥干，待挥干后加50ul流动相，超声溶解混匀，取20ul进样，用 HPLC测定药物释放量。
[0034] 以血药浓度对时间作图，绘制药物的药时曲线(见图4a、图4b、图4c)，由于加入液 晶单体之后，聚合物载体具有漂浮性能，在体内滞留时间长达8h，而不加液晶单体的左旋氨 氯地平分子印迹聚合物和商品药不具有漂浮性能，在4h血药浓度已降为零，证明加入液晶 单体后左旋氨氯地平分子印迹聚合物的漂浮性能，是造成体内药时曲线差异的主要原因； 此外，减少实验时灌水次数，血药浓度的达峰时间缩短，说明漂浮性能引起的胃内滞留，可 增加药物吸收。
[0035] 本发明提供了一种漂浮缓释型胃内滞留液晶分子印迹药物载体，液晶单体的加入 使印迹聚合物具有漂浮性能，且能够持续漂浮24h以上，而普通印迹聚合物2h就已完全沉 降；同时液晶单体具有刚性的液晶基元，可以起到强化和固定聚合物骨架的作用，即含有液 晶单体的低交联度分子印迹聚合物漂浮型药物缓控释载体，在低水平的交联度20% (交联 度=摩尔数JirewA摩尔数(65?+摩尔数iM^XlOO%，已足够印迹和识别模板。液晶单体的加 入，使分子印迹聚合物（MIPs)在传统MIPs独具特异性吸附模板分子的分子识别性能基础 上，同时兼具漂浮性能。甚至在更低交联度（5%的交联剂)下尚能保持印迹效果及缓释性能。 这两种特殊性能使得本发明的药物载体可作为新型胃滞留-漂浮型给药系统。
【主权项】
1. 一种漂浮缓释型胃内滞留液晶分子印迹药物载体材料，其特征在于它的原料的质量 组成： 模板分子左旋氨氯地平I. 91%-6. 91% 液晶单体 25. 07%-33. 90% 甲基丙烯酸2. 91%-3. 07% 二甲基丙烯酸乙二醇酯3. 56%-10. 56% 偶氣^异丁臆 0. 38%-〇. 40% 甲苯 40.85%-43.04% 异辛烷 13. 64%-14. 37% 上述的各原料的质量组成之和为100 %。2. 左旋氨氯地平漂浮缓释型液晶分子印迹药物载体材料，其特征在于它的原料的质量 组成： 左旋氛氣地平3. 51% 液晶单体29. 65% 甲基丙烯酸3. 01% 二甲基丙烯酸乙二醇酯6. 96% 偶氣二异丁腈〇. 39% 甲苯42. 33% 异辛烷14. 15%。3. 按照权利要求1或2所述的液晶分子印迹聚合物药物载体材料，其特征在于所述的 液晶单体为4-甲基苯基双环己基乙烯或者4-氰基苯基环己基己烯。4. 权利要求1或2所述的缓释液晶分子印迹聚合物药物载体材料的制备方法，其特征 在于经过下列步骤： 1) 按计量分别将模板分子左旋氨氯地平、甲基丙烯酸、液晶单体、引发剂偶氮二异丁 腈、交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯溶于致孔剂为甲苯与异辛烷为致孔剂的溶液中；超声溶 解30min，使之均匀、澄清，除去液体中氧气，封口，于53 °C水浴中反应24h; 2) 上述得到的分子印迹聚合物于研钵中研细，先用甲醇：乙酸，v/v，9:1，索氏提取48 小时，除去未反应的残留杂质和冲洗除去左旋氨氯地平，直到用紫外分光光度法检测不到 模板分子；再用甲醇索氏提取12小时，洗脱残留的乙酸；得到的左旋氨氯地平分子印迹聚 合物，室温下晾干。
【专利摘要】本发明涉及一种漂浮缓释型胃内滞留液晶分子印迹药物载体及其制备。它的原料的质量组成：模板分子左旋氨氯地平1.91%-6.91%；液晶单体25.07%-33.90%；甲基丙烯酸2.91%-3.07%；二甲基丙烯酸乙二醇酯3.56%-10.56%；偶氮二异丁腈0.38%-0.40%；甲苯40.85%-43.04%；异辛烷 13.64%-14.37%。按计量分别将左旋氨氯地平、甲基丙烯酸、液晶单体、偶氮二异丁腈、二甲基丙烯酸乙二醇酯溶于致孔剂的溶液中；于53℃水浴中反应24h；研细，先用甲醇:乙酸索氏提取48小时，除去未反应的残留杂质和冲洗除去左旋氨氯地平，再用甲醇索氏提取，洗涤，室温下晾干。本发明制备的药物载体物理和化学性质稳定，印迹效果明显，作为药物载体有明显的缓控释效果，同时相比普通印迹聚合物，其独具的漂浮性能，可延长药物胃内滞留时间，提高药物生物利用度。
【IPC分类】A61K47/32, A61K31/4422
【公开号】CN104906093
【申请号】CN201510251826
【发明人】黄艳萍, 刘照胜, 张莉萍, 庞茜茜
【申请人】天津医科大学
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月18日