氯硝柳胺在制备防治近视药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及氯硝柳胺在制备防治近视药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 近视是一种常见的屈光不正。正常情况下，眼的屈光系统及眼轴长度相互配合，使 得来自外界物体的平行光线（一般认为来自5m以外）经过眼的屈光系统，聚焦在视网膜的 黄斑中心凹上，形成清晰的物像，其要求的精确度达0. 1mm。当眼轴相对较长时，平行光线成 像于视网膜之前，形成近视。临床患者表现为能看清近处的物体而看不清远处的物体，往往 需要借助凹透镜校正。全世界有超过5亿的近视眼患者，单纯性近视给患者的生活带来不 便，而高度近视，特别是病理性近视则可能伴随各种严重的并发症，甚至致盲。近视己经成 为严重的公共卫生问题，世界卫生组织（WHO)已将近视眼的防治列入全球防盲计划。迄今 为止，近视发生发展的机制仍未明了，临床上无法获得有效的近视防治方法和手段。
[0003] 近视的药物治疗一直在研究之中，治疗的药物种类繁多，但疗效却不十分确切和 有效，真正应用于临床的药物有限。如大量研究已经证实了阿托品能防止近视的进展，但是 阿托品的副作用如畏光、视近模糊、眼压升高等限制了它的临床广泛应用。实验研究也证实 哌仑西平对近视的进展有抑制作用，但临床应用的观察时间较短，具体疗效不确定。针对不 同近视发病机理而产生的相应治疗药物，虽然在一定程度上的确对近视的防治起到了一定 的效果，但近视仍然没有从根本上得到攻克。
[0004] 氯硝柳胺（niclosamide)是WHO唯一保留推荐使用的灭螺药，广泛用于杀灭钉螺 预防血吸虫病，同时还是一种良好的临床驱除绦虫的药物，且对人、畜及植物的毒性较小， 临床不良反应轻微。目前氯硝柳胺在治疗近视方面的应用未见报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种氯硝柳胺在制备防治近 视药物中的应用，可通过抑制屈光度的近视性偏移、抑制近视性玻璃体腔深度的延长、抑制 近视性眼轴长度的延长等方面来实现防治近视的作用，且对正常眼的屈光参数发育影响不 大。
[0006] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0007] 氯硝柳胺在制备预防和/或治疗近视药物中的应用。
[0008] -实施例中：所述预防和/或治疗近视是指抑制屈光度的近视性偏移。
[0009] -实施例中：所述预防和/或治疗近视是指抑制近视性玻璃体腔深度的延长。
[0010] 一实施例中：所述预防和/或治疗近视是指抑制近视性眼轴长度的延长。
[0011] 一实施例中：所述氯硝柳胺为口服给药，日剂量为20~25mg/kg。
[0012] 本发明中所涉及的各类实验仪器、试剂及方法，除有特别说明外，均为本领域常规 技术。
[0013] 本技术方案与【背景技术】相比，它具有如下优点：
[0014] 1.在研的治疗近视的药物种类繁多，但大部分疗效有限，也都无法从根本上攻克 近视。氯硝柳胺作为传统意义上的灭螺药和驱除绦虫的药物，是首次发现其在眼科领域上 具有一定的药效，口服4周后，可以抑制小鼠近视的发生发展，包括抑制屈光度的近视性偏 移、近视性玻璃体腔深度的延长及近视性眼轴长度的延长等，效果明显，说明其具有作为预 防和治疗近视药物的研究前景。
[0015] 2.氯硝柳胺是被美国FDA批准用于治疗人肠道寄生绦虫感染的药物，已知的不良 反应多为轻微的头晕、胸闷、腹部不适等，具有良好的临床安全性。
[0016] 3.氯硝柳胺口服4周后，对正常小鼠的眼屈光参数影响不大，进一步佐证了其作 为近视防治药物的前景。
【附图说明】
[0017] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
[0018] 图1为氯硝柳胺对FDM小鼠屈光度影响示意图，图中Ctrl、Ctrl+Ni，FDM，FDM+Ni 分别对应对照组，对照+氯硝柳胺组，FDM组，FDM+氯硝柳胺组，OD为右眼（剥夺眼），OS为 左眼（对侧眼）。
[0019] 图2为氯硝柳胺对FDM小鼠玻璃体腔深度（V⑶）影响示意图，图中Ctrl、Ctrl+Ni， FDM，FDM+Ni分别对应对照组，对照+氯硝柳胺组，FDM组，FDM+氯硝柳胺组，OD为右眼（剥 夺眼），〇S为左眼（对侧眼）。
[0020] 图3为氯硝柳胺对FDM小鼠眼轴长度（AL)影响示意图，图中Ctrl、Ctrl+Ni，FDM， FDM+Ni分别对应对照组，对照+氯硝柳胺组，FDM组，FDM+氯硝柳胺组，OD为右眼（剥夺 眼），OS为左眼（对侧眼）。
[0021] 图4为APCMlVj、鼠与WT小鼠自出生至84天时屈光度变化示意图。
[0022] 图5为APCMlM、鼠与WT小鼠自出生至84天时玻璃体腔深度（VCD)变化示意图。
[0023] 图6为氯硝柳胺对APCMlM、鼠屈光度影响示意图，图中WT、APCMin，APCMin+Ni分别 对应WT组，APCffin组，APCMin+氯硝柳胺组。
[0024] 图7为氯硝柳胺对APCMlM、鼠玻璃体腔深度（V⑶）响示意图，图中WT、APCMin， APCMin+Ni分别对应WT组，APCMin组，APCMin+氯硝柳胺组。
[0025] 图8为氯硝柳胺对APCMlVJ、鼠眼轴长度（AL)影响示意图，图中WT、APCMin，APCMin+Ni 分别对应WT组，APCffin组，APCMin+氯硝柳胺组。
【具体实施方式】
[0026] 下面通过实施例具体说明本发明的内容：
[0027] 实施例1 :氯硝柳胺对FDM小鼠（小鼠形觉剥夺近视眼模型小鼠）屈光度的影响
[0028] 实验动物：SPF级雄性C57BL/6J小鼠（3-4周龄）购买于南京大学-南京生物医 药研究院。裂隙灯显微镜和红外偏心摄影验光仪（EIR)检查排除眼疾，除去小眼畸型，角 膜混浊，白内障和双眼屈参差的小鼠。所有小鼠在参与实验前均在SPF级条件下饲养，每 天给予12小时光照，笼周光照强度为5001ux，室温控制在（25±2°C)，给予充足的食物和 饮水。实验开始后转入普通级条件下饲养，自由摄食；室温控制在20-25°C，光照强度为 250-3001ux〇
[0029] 分组：小鼠随机分为：对照组，FDM组，对照+氯硝柳胺组，FDM+氯硝柳胺组。
[0030] 造模及给药：参照已报道的形觉剥夺诱导的小鼠近视模型造模方式（Tkatchenko TV,ShenYFau-TkatchenkoAV,TkatchenkoAV.Mouseexperimentalmyopiahas featuresofprimatemyopia等），将直径8mm，边缘1mm，透光率为0.6-0. 8%的半球形塑 料眼罩用胶水粘贴在FDM组和FDM+氯硝柳胺组小鼠眼球周围，小鼠眼睑可自由运动，颈部 套塑料项圈防止小鼠将眼罩剥离。对照组和对照+氯硝柳胺组小鼠颈部套塑料项圈，眼睛 不作任何处理。每天检查眼罩，如果发现有松动或脱落，用胶水及时粘好。在实验过程中或 实验结束后出现以下情况即排除：1)有严重的结膜炎、角膜混浊和进行性白内障等眼疾； 2)实验过程中眼罩经常脱落的小鼠，尤其是FDM造模一周以后；3)去除眼罩后眼睑不能完 全张开而影响屈光状态测量的小鼠。造模同时，对照+氯硝柳胺组和FDM+氯硝柳胺组小鼠 每天胃灌注氯硝柳胺200mg/kg，对照组和FDM组小鼠灌注溶剂水。持续造模及给药28天 (即4周）。分别测量实验前后各组小鼠的眼部各项参数。
[0031] 屈光度测试方法：使用专门针对小鼠的红外偏心摄影验光仪（EIR)检测屈光 (ZhouX,XieJ,ShenM,WangJ,JiangL,QuJ,LuF.Biometricmeasurementofthe mouseeyeusingopticalcoherencetomographywithfocalplaneadvancement. VisionRes. 2008Apr;48(9) :1137-43)。该仪器采用红外发光二极管为光源，将通过 眼屈光系统后返回瞳孔区的眼底反光分情况传输到电脑，由Schaeffel等（Schaeffel F,BurkhardtE,HowlandHC,WilliamsR[Measurementofrefractivestateand deprivationmyopiaintwostrainsofmice.OptomVisSci2004 ;81:99-110.)设计的 软件自动计算其垂直子午线方向的屈光力。测量前在暗室中暗适应约I分钟，不需麻醉，当 Purkinje影像（浦金野氏血管影像）位于瞳孔中央，且瞳孔直径和屈光状态处于稳定时，记 录此时的屈光度，单眼连续测量3次，取平均值。
[0032] 实验结果：如表1所示，实验前，各组内和各组间实验动物左右眼屈光度差异不显 著（PM). 05,配对t检验，PM). 05,单因素方差分析）。
[0033] 如表2及图1所示，实验4周后，对照组和对照+氯硝柳胺组内左右眼屈光度差异 不显著（P>0. 05,配对t检验），说明氯硝柳胺不影响正常小鼠屈光度发育。FDM组的剥夺眼 (右眼）较对侧眼（左眼）的近视性偏移-7. 88±2. 52diopter(D) (P〈0. 01，左右眼配对t 检验），在FDM+氯硝柳胺组中，剥夺眼较对侧眼的近视偏移减小为-2. 60±2. 85D(P〈0. 05， 配对t检验），两组间差异有统计学意义（FDM+氯硝柳胺组vsFDM组，P〈0.01，单因素方差 分析），说明FDM+氯硝柳胺组中小鼠的形觉剥夺性近视受到部分抑制。
[0034] 实施例2 :氯硝柳胺对FDM小鼠玻璃体腔深度（VCD)的影响
[0035] 实验动物：同实施例1。
[0036] 分组：同实施例1。
[0037] 造模及给药：同实施例1。
[0038] 玻璃体腔深度测试方法：采用光学相干断层扫描仪OCT(波长1310nm，光源带 宽60nm，分辨力精度IOym)测量眼球生物学参数（ZhouX，XieJFau-ShenM，ShenM Fau-ffangJ,etal.Biometricmeasurementofthemouseeyeusingopticalcoherence tomographywithfocalplaneadvancement.)利用弱相干光干涉仪的原理检测生物组织 不同深度