黑芥）、印度芥菜（Brassica juncea)(棕 芥）、白芥（Brassica hirta)(白芥或黄芥）、埃塞俄比亚芥（Brassica carinata)(埃塞 俄比亚芥）、甘蓝（Brassica oleracea)(野生芥）、油菜（Brassica campestris)(包括大 油菜（Brassica napus L.)和白菜型油菜（B.campestris L.))以及欧洲油菜（Brassica napus)。"芥子油"所包括的油可包括可从油菜籽获得的油。
[0051] 在某些实施方案中，所述植物油是芥花籽油。此类芥花籽油可具有下列组成： 6-8 %的饱和脂肪酸（具有3. 5棕榈酸）；14. 4%的单不饱和脂肪酸（具有60 %的油酸）和 69. 3%的多不饱和脂肪酸类（具有20%亚油酸，10%的a亚麻酸）。
[0052] 在某些实施方案中，用于本申请所描述的组合物中的植物油可由约14% -70%的 单不饱和脂肪酸、约18% -22%的多不饱和脂肪酸和约5% -12%的饱和脂肪酸构成。所述 单不饱和脂肪酸可具有约18% -51 %的芥酸和约7% -22%的油酸，所述多不饱和脂肪酸可 具有约9-15%的亚麻酸和约6-24%的亚油酸，并且所述饱和脂肪酸可具有约3-4%的棕榈 酸。
[0053] 在某些实施方案中，本申请中描述的组合物中所使用的植物油可由14% -70%的 单不饱和脂肪酸、18% -22%的多不饱和脂肪酸和5% -12%的饱和脂肪酸构成。
[0054] 在某些实施方案中，本申请中描述的组合物中所使用的植物油可由14% -20%的 单不饱和脂肪酸、18% -20%的多不饱和脂肪酸和5% -6%的饱和脂肪酸构成。
[0055] 在某些实施方案中，本申请中描述的组合物中所使用的植物油可由约60% -70% 的单不饱和脂肪酸、约18% -22%的多不饱和脂肪酸和约5% -6%的饱和脂肪酸构成。
[0056] 当所述植物油是芥子油时，在某些实施方案中，所述芥子油可具有下列组成：单 不饱和脂肪酸（芥酸（18-51% )、油酸（7-22% ))、多不饱和脂肪酸（亚麻酸（9-15% ) 和亚油酸（6-24% ))和5%的饱和脂肪酸。所述芥子油还可额外地包含其它组分，例如 蛋白质（30%)、酸醛树脂、植酸妈镁和二疏基硫酮（dithiol thione)。芥子油还可含有 490mg/100gm的钙。芥子油还可含有9-15%的脂肪酸。
[0057] 在一些实施方案中，所述芥子油是可从芜青获得的油。可从芜青获得的芥子油包 括具有下列组成的油：5. 4%的饱和脂肪酸（具有2. 7%的棕榈酸、1. 0%的硬脂酸、0. 6%的 山嵛酸、1. 1 %的其它）；67. 3%的单不饱和脂肪酸（具有23. 3%的油酸、10. 0%的鳕烯酸、 33. 8%的芥酸）和20. 6%的多不饱和脂肪酸（具有9. 4%的亚油酸、9. 9%的a亚麻酸）。
[0058] 在某些实施方案中，所述植物油载体（例如，芥子油）可以是一种或多种植物油的 混合物，例如芥子油（添加或不添加AIT)和玉米油；芥子油（添加或不添加AIT)和豆油； 芥子油（添加或不添加AIT)和椰子油。本公开还包括具有下列植物油载体的组合物：所述 植物油载体本身是发红剂和/或与发红剂油相结合。发红剂油的实例包括冬青油（水杨酸 甲酯）、芥子油和迷迭香油（迷迭香（Rosmarinus officinalis))。
[0059] 类昔酮
[0060] 所述佐剂组合物可包括一种或多种类黄酮或其衍生物或盐。类黄酮（也已知为生 物类黄酮）是在水果和蔬菜中发现的植物素（phytochemical)。类黄酮有下列类型：类黄酮 (例如，芹菜素（apigenin)、木犀草素）、黄酮醇类（例如，槲皮素、杨梅黄酮）、黄素酮类（例 如，柑桔素、橙皮苷）、儿茶素（例如，表儿茶素、儿茶素、表没食子儿茶素、没食子儿茶素、表 儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素没食子酸酯）、花色素/花青苷类（例如，花青定、花葵 素）和异类黄酮（例如，染料木黄酮、黄豆苷元）。
[0061] 在某些实施方案中，所述佐剂组合物可包含表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG)、 儿茶素的一种形式（多酚）。在一些实施方案中，所述佐剂组合物可包含儿茶素，例如儿茶 素水合物。在一些实施方案中，所述儿茶素不是儿茶素的多聚体形式。
[0062] 维牛素
[0063] 所述佐剂组合物可任选地包含一种或多种维生素，或者其衍生物或盐。所述一种 或多种维生素可以是维生素A、维生素E、维生素D、维生素C及其衍生物或盐的一种或多种。
[0064] 维生素A.维生素A是脂溶性维生素，其源自两个来源：预形成的类维生素 A (preformed retinoids)和维生素原类胡萝卜素类。类维生素A (例如视黄醛和视黄酸） 在动物来源（例如肝、肾、卵和乳制品）中被发现。类萌萝卜素（例如胡萝卜素（其具 有最高的维生素A活性））在植物（例如深色蔬菜（dark vegetable)或黄色蔬菜（yellow vegetable)和胡萝卜）中被发现。维生素A也已知为视黄醇、视黄酸、抗干眼醇、维生素A 醇、维生素A1、全-反式-3, 7-二甲基_9_(2, 6, 6-三甲基-1-环己烷-1-基）-2, 4, 6, 8-任四 烯-1-醇。在某些情况下，维生素A的酸衍生物全反式视黄酸（ATRA)可被包含在所述佐剂 组合物中。在某些情况下，所述佐剂组合物可包含类维生素A，例如异维A酸（Ro 4-3780)、 阿维A酯（R0 10-9359;合成的类维生素A)或莫维A胺（Ro 11-1430)。在某些情况下，维 生素A棕榈酸酯（VA)可被包含在所述佐剂组合物中。
[0065] 维生素E.在8种发挥维生素E活性的天然物质（a-、0_、S-和Y -生育酚类 以及a-、0-、8 -和y -生育二稀酸类）中，a -生育酸（a-T)传统地被认为是最重要 的维生素，因为当在动物模型系统中评估时，其在所有维生素中发挥最高的生物学活性。维 生素E也与（±) - a -生育酚和DL-all-rac- a -生育酚、5, 7, 8-三甲基母育酚、D- a -生 育酚、2, 5, 7, 8-四甲基_2_(4'，8'，12'-三甲基十三烷基）-6-色原烷醇和非氧化型 (+) - a -乙酸生育酚和相关的all-rac-a -乙酸生育酚同义。相关的分子是D-a -琥珀酸 生育酚、琥珀酸维生素E。
[0066] 在某些实施方案中，包含在所述佐剂组合物中的维生素E可以是a-生育酚 (a-T)。在其它情况下，维生素E类似物（例如a琥珀酸生育酚（a-T0S))可被包含在所 述佐剂组合物中。
[0067] 维生素D.维生素D是一组脂溶性激素原，其两种主要形式是维生素D 2 (或麦角沉 钙醇）和维生素％ (或胆钙化醇）。通过阳光照射、食物和补充物获得的维生素D在生物学 上是惰性的并且必须经历两次羟化反应而在体内被活化。骨化三醇（1，25-二羟胆钙化醇） 是在体内发现的维生素D的活性形式。术语维生素D是指这些代谢产物和这些物质的其它 类似物。在某些实施方案中，所述佐剂组合物可包含1，25-二羟维生素D 3(DHVD3)。
[0068] 维生素C.维生素C或L-抗坏血酸对于人而言是必需的营养物。抗坏血酸盐（抗 坏血酸的离子）是所有动物和植物中许多关键的代谢反应所需的。维生素C的药效团是抗 坏血酸盐离子。在活的生物体中，抗坏血酸盐是抗氧化剂，因为其保护身体免受氧化应激， 并且其是若干至关重要的酶促反应中的辅因子。维生素C纯粹是抗坏血酸的L 一对映体； 相反的D-对映体不具有生理学意义。
[0069] 添加剂
[0070] 在某些实施方案中，所述佐剂组合物的植物油载体可包含异硫氰酸烯丙酯 (AIT)。异硫氰酸烯丙酯（AIT)也被称为挥发性芥子油或芥子精油或芥子油。AIT是式为 CH 2CHCH2NCS的有机硫化合物。AIT导致芥子、辣根和绿芥末（wasabi)的辛辣味道。其微溶 于水，但良好地溶于大多数有机溶剂中。异硫氰酸烯丙酯来自于黑芥或褐色印度芥（brown Indian mustard)的种子。当这些芥籽破碎时，黑芥子硫苷酸酶被释放并且作用于已知为 黑芥子硫苷酸钾（s inigrin)的硫代葡萄糖酸盐上，以产生异硫氰酸稀丙酯。异硫氰酸稀 丙酯对于植物是作为抵抗草食动物的防御；因为其对植物本身是有害的，所以其以无害的 硫代葡萄糖酸盐的形式贮存，与黑芥子硫苷酸酶分离。当动物咀嚼植物时，异硫氰酸烯丙酯 被释放，从而驱赶动物。异硫氰酸烯丙酯在商业上通过烯丙基氯与硫氰酸钾的反应：CH 2 = CHCH2C1+KSCN - CH2= CHCH2NCS+KC1而产生。以这种方式获得的产物有时已知为合成芥子 油。异硫氰酸烯丙酯还可通过种子的干馏而被释放。以这种方式获得的产物已知为挥发性 芥子油并且纯度通常为约92%。其主要在食品中用作调味剂。合成的异硫氰酸烯丙酯用作 杀虫剂、杀菌剂和杀线虫剂，并且在某些情况下被用于作物保护。
[0071] 在某些情况下，所述佐剂组合物可由：AIT和维生素（例如，维生素A、C、D、E或者 其盐或衍生物的一种或多种）构成。在某些情况下，所述佐剂组合物可由：AIT和类黄酮 (例如儿茶素，例如儿茶素水合物）构成。在某些情况下，所述佐剂组合物可由：AIT、维生 素（例如，维生素A、C、D、E或者其盐或衍生物的一种或多种）和类黄酮（例如儿茶素，例 如儿茶素水合物）构成。
[0072] 所述佐剂组合物可包含含有角鲨烯的MF59,其是已在动物和人研究中显示出佐 剂特性的类萜植物衍生物。然而，在某些实施方案中，所述佐剂组合物中可不包含MF59或 角鲨烯。因此，在一些实施方案中，本申请中所提供的佐剂组合物包含类黄酮；药学上可接 受的油载体；和任选地选自维生素A、维生素E和维生素C的一种或多种维生素，但不包含 MF59或角鲨烯。
[0073] 所述佐剂组合物可包含皂苷及其衍生物QS-21。然而，在某些实施方案中，皂苷可 不被包含在所述佐剂组合物中。因此，在一些实施方案中，本申请中所提供的佐剂组合物包 含类黄酮；药学上可接受的油载体；和任选地选自维生素A、维生素E和维生素C的一种或 多种维生素但不包含皂苷或其衍生物。
[0074] 在结构上与天然存在的类异戊二烯佐剂相似的叶绿醇的衍生物膳食二萜醇 (dietary diterpene alcohol)引起所有主要IgG亚类（特别是IgG2a)的增加的滴度和细 胞毒性效应T细胞应答。所述佐剂组合物可包含叶绿醇或其衍生物。然而，在某些实施方 案中，叶绿醇可不被包含在所述佐剂组合物中。因此，在一些实施方案中，本申请中提供的 佐剂组合物包含类黄酮；油载体和任选地选自维生素A、维生素E和维生素C的一种或多种 维生素，但不包含叶绿醇或其衍生物。
[0075] 所述佐剂组合物可包含其它添加剂，例如明胶、抗生素、山梨醇、蔗糖、乳糖、其它 糖类、生物粘附剂（bioadhes ive)、粘膜粘着剂（例如透明质酸或其衍生物，例如HYAFF)、 亲水性聚合物和水凝胶类、聚氧化乙烯同聚物、壳聚糖、蜂蜡等。
[0076] 所述佐剂组合物可包含免疫原性增强剂，例如脂多糖类、肠毒素类例如来自大肠 杆菌（Escherichia coli)的不耐热毒素、来自霍乱弧菌（Vibrio cholerae)的霍乱毒素、 toll样受体激动剂（例如，CpG或CpG寡核苷酸）。例如，可将所述佐剂组合物与其它疫苗 递送系统例如明巩、脂质体、水包油乳剂组合。
[0077] 可用大的、被缓慢代谢的大分子（例如蛋白质、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、多聚氨基 酸、氨基酸共聚物和灭活的病毒颗粒）来配制所述佐剂组合物。微粒载体（particulate carrier)的实例包括从聚甲基丙烯酸甲酯聚合物衍生的载体以及从聚（交酯类）和已知为 PLG的聚（丙交酯-co-乙交酯）衍生的微粒。
[0078] 所述佐剂组合物可包括包含突变的A亚基和B亚基的全毒素的突变体形式（例如 来自大肠杆菌的），其可以是寡聚的，如在野生型全毒素中一样。B亚基优选是未突变的。然 而，预期可与B亚基相分离而使用突变的A亚基，以基本上纯的形式或与其它试剂相复合， 所述其它试剂可替代B亚基和/或其功能性贡献。用于所述组合物的LT突变体包括具有 一个或多个下列突变的突变体：A亚基中位置63处的丝氨酸的突变和A亚基中位置72处 的丙氨酸的突变，例如，位置63处的丝氨酸被赖氨酸置换以及位置72处的丙氨酸被精氨酸 置换。
[0079] 所述佐剂组合物可包含霍乱毒素（〃CT〃）或者其去毒突变体，或者从生物可降解 的且无毒性的材料（例如，聚（a-羟酸）、聚羟丁酸、聚原酸酯、聚酐、聚已酸内酯等）形成 的微粒（即，直径约l〇〇nm至约150 y m，更优选直径约200nm至约30 y m和更优选直径约 500nm至约10 y m的颗粒）。
[0080] 可使用聚（a -羟酸），特别是由聚（丙交酯）（〃PLA〃）（其为D，L-丙交酯与乙交 酯或乙醇酸的共聚物）例如聚（D，L-丙交酯-co-乙交酯）（〃PLG〃或〃PLGA〃）或D，L-丙交 酯与己内酯的共聚物，来将本申请中公开的佐剂组合物配制为微粒。所述微粒可源自各种 聚合起始材料的任一种，所述各种聚合起始材料具有各种分子量并且在共聚物（例如PLG) 的情况下具有各种丙交酯：乙交酯比率，对其的选取将主要是个选择的问题，部分取决于 共施用的抗原。如果所述组合物包含抗原，抗原可被圈闭在微粒内，或者可被吸附于其表面 上。
[0081] 在某些实施方案中，本申请中公开的组合物包含免疫调节因子，例如能够调节免 疫应答的蛋白质。免疫调节因子的非限制性实例包括淋巴因子（也已知为细胞因子）例如 IL-6、TGF-P、11-1、11-2、11-3等）；和趋化因子（例如，分泌的蛋白质例如巨噬细胞抑制因 子）。某些细胞因子例如TRANCE、flt-3L和⑶40L的分泌形式能够增强APC的免疫刺激能 力。可被单独使用或与本申请中公开的组合物结合使用的细胞因子的非限制性实例包括白 细胞介素-2 (IL-2)、干细胞因子（SCF)、白细胞介素3 (IL-3)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞 介素12(IL-12)、G-CSF、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF)、白细胞介素-1 a (IL-1. 〇)、白细胞介素-11(11-11)、1〇卩-1丫、白血病抑制因子（1^)、(：-1^〖配体、血小板生 成素（TP0)、CD40配体（CD40L)、肿瘤坏死因子相关激活诱导因子（TRANCE)和flt3配体 (flt-3L)〇
[0082] 所述佐剂组合物可包含乳化剂（例如卵磷脂），例如为两性的且对于人和/或兽 医学用途是可接受的磷脂类和/或表面活性剂。所述表面活性剂可以是离子性的（例如 T Ween80)、阳离子性的（例如CTAB)或两性离子性的（例如CHAPS)。表面活性剂对于人和 /或兽医学用途的