。乙醇酸与乳酸的比率也影响微球的脆性。在聚乳 酸-聚乙醇酸（PLGA)共聚物中的聚乳酸的摩尔百分数（摩尔％ )可在15摩尔％与约85 摩尔％之间。在一些实施方案中，在（PLGA)共聚物中的聚乳酸的摩尔百分数为在约35摩 尔％与约65摩尔％之间。在一些实施方案中，在聚合物基质中可使用具有50摩尔％聚乳 酸和50摩尔％聚乙醇酸的PLGA共聚物。在一些实施方案中，在聚合物基质中可使用具有 75摩尔％聚乳酸和25摩尔％聚乙醇酸的PLGA共聚物。
[0078] 结膜下微球的生物可降解的聚合物基质可包含两个或更多个生物可降解的聚合 物的混合物。例如，微球可包含第一生物可降解的聚合物和不同的第二生物可降解的聚合 物的混合物。一个或多个生物可降解的聚合物可具有末端酸基。
[0079] 根据一些实施方案，使用的生物可降解的聚合物的特性粘度可在约0. 1化/g至 约l.(ML/g的范围内。根据一些实施方案，使用的生物可降解的聚合物的特性粘度可在约 0. 5化/g至约1. (ML/g的范围内。
[0080] 可单独或组合使用W形成微球的一些示例性聚合物包括列于下面表A中的那些， 可商购获得的聚合物的说明书、数据表和测试数据W引用的方式整体并入：
[0081] 表A
[0084] 生物可降解的聚合物微球可包含两种或更多种生物可降解的聚合物的混合物。例 如，微球可包含第一生物可降解的聚合物和不同的第二生物可降解的聚合物的混合物。一 个或多个生物可降解的聚合物可具有末端酸基。根据一些实施方案，微球包括不超过一种 类型的生物可降解的聚合物。
[0085] 根据一些实施方案，基于制剂的总重量，生物可降解的聚合物占所述微球制剂的 75重量％至94重量％。根据其它实施方案，基于微球制剂的总重量，生物可降解的聚合物 占微球制剂的75重量％至85重量％。根据其它实施方案，基于微球制剂的总重量，生物可 降解的聚合物占微球制剂的85重量％至95重量％。
[0086] 微球
[0087] 使用适当的工艺可制得含有蛋白质的微球。在一个实施方案中，含有蛋白质的微 球可通过如在PCT公开号2011/041642中所述的水包油包水乳液工艺来制得，通过水包油 包水乳液工艺制备微球的方法W引用的方式整体并入本文。
[0088] 蛋白质组分从微球中的释放可包括起始的突释，随后是释放的蛋白质组分的量的 逐渐增加，或释放可包括蛋白质组分释放的起始延迟，随后是释放的增加。
[0089] 提供蛋白质组分从微球中的相对恒定的释放速率可为合乎需要的。例如，对于微 球的寿命来说，可希望每天释放约2yg至约10yg量的蛋白质组分。根据一些实施方案， 可希望释放蛋白质组分的量约4yg/天、5yg/天、6yg/天、7yg/天等。然而，释放速率可 取决于生物可降解的聚合物基质的制剂而改变为提高或降低。此外，蛋白质组分的释放曲 线可包括一个或多个线性部分和/或一个或多个非线性部分。在一些实施方案中，一旦微 球开始降解或侵蚀，那么释放速率大于零。
[0090] 微球可为整体的，即一种或多种活性剂均匀地分布于聚合物基质中或包封，其中 活性剂的储存器由聚合物基质包封。由于易于制造，微球可比包封形式展示优势。然而，在 一些情况下，通过包封的微球得到的更大控制可具有益处，运种情况下，药物的治疗水平落 入狭窄治疗窗内。另外，包括蛋白质组分的治疗组分可W非均质模式分布在基质中。例如， 微球可包括相对于微球的第二部分具有更大蛋白质组分浓度的部分。
[0091] 根据一些实施方案，本文公开的微球尺寸可在约5ym与约Imm之间或在约10ym 与约0. 2mm之间，W便用针施用。根据一个实施方案，微球的尺寸可为约.15mm。对于用针 注射的微球，只要微球的最长尺寸允许微球穿过施用装置（如针（如22号针、25号针、27 号针等）），那么微球可为任何合适的尺寸。
[0092] 微球在单剂量中的总重量（最佳量）取决于结膜下空间的体积和蛋白质的活性或 溶解性。根据一些实施方案，每剂量微球的剂量为约Img至约40mg。在一些实施方案中，微 球的剂量在0.Img至lmg、10mg至30mg、10mg至20mg之间等。在一个实施方案中，单次注 射可含有约Img、或约5mg、或约lOmg、或约15mg、或约17mg或约20mg、或约30mg、或约35mg的微球，包括并入的治疗组分。对于非人类个体，根据个体类型，微球的尺寸和总重量可为 更大或更小。
[009引基于聚化^丙交醋-共-乙交醋）（叩LGA")的蛋白质微球制剂具有常规的溶 液制剂，其优势在于微球制剂可在很长的时间段内递送活性蛋白，在一些情况下为几周或 几个月内的事。 实施例
[0094] 在不意图限制公开内容的范围的情况下，通过下列实施例阐述了示例性实施方 案。
[0095] 实施例1
[0096] 通过渗入赋形剂稳定高度浓缩的蛋白质溶液。
[0097] 根据一个实施例，一个月后在37°C下检测憐酸盐缓冲盐水（"PBS")中配制含有W 及不含赋形剂的lOOmg/ml抗巧素示例性实施方案溶液的可溶性蛋白质回收率。根据第一 制剂，在具有摩尔浓度为6mM的SBE-CD的PBS中制备lOOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总 重量，存在于制剂中的6mMSBE-CD的量为10. 6重量％。根据第二制剂，在具有60mMSBE-CD 的PBS中制备lOOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的60mMSBE-CD的 量为54. 1重量％。根据第S制剂，在具有120mMSBE-CD的PBS中制备lOOmg/mL抗巧素溶 液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的120mMSBE-CD的量为70. 2重量％。根据第一比 较制剂，在没有SBE-CD的PBS中制备lOOmg/mL抗巧素溶液。将该溶液于37°C下胆存一个 月，然后分析W确定溶液中可回收的可溶性蛋白的百分率。结果在图1中示出。
[0098] 如图1所示，第一比较制剂显示在37°C下解育一个月后可溶性蛋白质回收率下降 39%。可溶性蛋白质回收减少可归因于蛋白质聚集，导致不溶性颗粒物的形成。然而，如图 1所示，在37°C下解育一个月后添加浓度为6mM和60mM的SBE-CD至PBS中的lOOmg/mL抗 巧素溶液分别将可溶性蛋白质回收率提高了 19%和23%。在120mM的最高测试SBE-CD浓 度下，与不含SBE-CD的第一比较制剂相比，可溶性蛋白质回收率仅提高10%。令人吃惊的 是，在SBE-CD摩尔浓度为60mM时出现可溶性蛋白质的最高回收百分率，其不是用最高摩尔 浓度的SBE-CD测试的制剂。与在PBS中不含有额外赋形剂的制剂相比，第一、第二、第S和 第四制剂示出提高的蛋白质回收率。
[009引实施例2
[0100] 通过渗入赋形剂在升高溫度下稳定抗巧素溶液。
[0101] 根据另一个示例性实施方案，在50°c的升高溫度下评价抗巧素蛋白质的稳定性。 根据运个实施例，两天后在50°C下测试憐酸盐缓冲盐水（"PBS")中配制含有W及不含赋形 剂的lOmg/ml抗巧素示例性实施方案溶液的可溶性蛋白质回收率。根据第四制剂，在具有 SBE-CD的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的SBE-CD的 量为46. 0重量％。根据第五制剂，在具有径基丙基-0 -环糊精（"HP- 0 -CD")的PBS中 制备IOmg/血抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的HP-P-CD的量为35. 2重 量％。根据第六制剂，在具有径基丙基-丫-环糊精（"HP-丫-CD")的PBS中制备lOmg/mL 抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的HP-丫-CD的量为38. 4重量％。根据第屯 制剂，在具有海藻糖的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中 的海藻糖的量为35. 2重量％。根据第二比较制剂，在没有额外赋形剂的PBS中制备IOmg/ mL抗巧素溶液。将所述溶液在保持于50°C的烘箱中胆存2天，然后分析W确定溶液中可回 收的可溶性蛋白质的百分率。结果在图2中示出。
[010引图2显示在50°C烘箱中解育2天后，在PBS中配制含有W及不含赋形剂的IOmg/mL抗巧素溶液的可溶性蛋白质的回收率。如图2所示，比较制剂二的可溶性蛋白质的回收 率为约66%。如所示的，添加SBE-CD(在第四制剂中）或海藻糖（在第屯制剂中）将可溶 性蛋白质回收率提高约18%，而添加HP- 0-CD(在第五制剂中）或HP- 丫-CD(在第六制剂 中）将可溶性蛋白质回收率提高约12%。令人吃惊的是，包含碳水化合物海藻糖的制剂展 示与包含SBE-CD的制剂一样高的可溶性蛋白质回收率。与在PBS中不含有额外赋形剂的 制剂相比，第四、第五、第六和第屯制剂都显示出提高的蛋白质回收率。
[0103] 根据另一示例性实施方案，在50°C的升高溫度下评价抗巧素蛋白质的稳定性。根 据运个实施例，5天后在50°C下测试憐酸盐缓冲盐水（"PBS")中配制含有W及不含赋形 剂的lOmg/ml抗巧素示例性实施方案溶液的可溶性蛋白质回收率。根据第八制剂，在具有 阳G400的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的阳G400的 量为54. 6重量％。根据第九制剂，在具有葡聚糖的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于 制剂的总重量，存在于制剂中的葡聚糖的量为63. 7重量％。根据第十制剂，在具有甘氨酸 的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总重量，存在于制剂中的甘氨酸的量为4. 8 重量％。根据第十一制剂，在具有脯氨酸的PBS中制备lOmg/mL抗巧素溶液。基于制剂的总 重量，存在于制剂中的脯氨酸的