眼科清洗剂及其方法
【专利说明】眼科清洗剂及其方法
[0001] 相关申请 本申请要求2013年5月10日提交的美国临时申请顺序号：61/822, 219的权益，其藉 此通过引用以其整体结合到本文中。
[0002] 1.引言 本文公开了清洗剂。在某些实施方案中，它是用于外科手术的清洗剂。在某些实施方 案中，它在眼科程序后使用。还公开了用作清洗剂的含或不含疏水表面活性剂的低分子量 硅油。在某些实施方案中，本文提供了在眼科程序后使用所公开的清洗剂清洗眼腔以降低 硅油蓄积的方法。在某些实施方案中，所公开的剂有效减少与眼科程序期间硅油在眼腔中 乳化有关的并发症。
[0003] 2.背景 存在于人眼中的许多疾病可归因于视网膜或玻璃体中的病理生理改变。玻璃体占据了 眼体积的主要部分，并可用于维持眼的形状。玻璃体可位于接近眼的中心、晶状体的后面和 视网膜的前面。玻璃体可包含约98.0%的水和约2.0%的透明质酸。至少部分因胶原纤维 的保水能力所致还可存在胶原纤维网以稳定含水量。这可导致其凝胶状结构的形成，所述 结构可保护周围的结构和组织免受机械创伤，并保持晶状体和视网膜的位置。
[0004] 治疗视网膜眼病症（包括视网膜脱落和增殖性玻璃体视网膜病变（PVR))所用方 法在近年来可观地增加。增加可能是至少部分响应于摘除玻璃体的手术技术（玻璃体切 割术）的快速进步。例如，睫状环玻璃体切割术（PPV)是涉及将玻璃体凝胶从眼中除去的 手术程序。PPV是一个重大进展，因为它首次允许通过封闭系统而不是通过开放式露天技 术（open sky technique)除去玻璃体。另外，已开发出通过在眼的巩膜上切开3个小切口 并延伸到眼的后部（玻璃体所处的位置）来除去玻璃体的三口 PPV技术（three-port PPV technique)。可通过小切口引入小的计量仪；可有效地除去玻璃体相当大的部分。三口 PPV 包含光导纤维灯（fiberoptic light)、输注套管和玻璃体切割器；它已变成金标准，已保持 如此至少三十年。三口 PPV被广泛用于纠正视力破坏性病况，包括视网膜脱落、黄斑变性 和糖尿病性眼病。在PPV步骤后，眼内填塞物被用于促进视网膜重新附着。与玻璃体视网 膜手术组合，硅油注射已成为标准技术，并改善与增殖性玻璃体视网膜病变、巨大视网膜撕 裂、增生型糖尿病性视网膜病或眼损伤有关的复杂性视网膜脱落的手术结果。通常对于视 网膜填塞，使用动态粘度为1000 mPa · s和5000 mPa · s的硅油。
[0005] 然而，如果在该步骤后不有效地除去硅油，则因其被周围的体液乳化所致可能导 致长期的并发症，特别是白内障、青光眼和角膜病。在现行的临床实践中，在除去大量硅油 后使用一种模拟眼内流体的灭菌盐水（例如平衡盐溶液（BSS))清洗眼腔。然而，该方法已 被证实是无效的。
[0006] 因此，需要可以有效除去乳化硅油滴，从而减少与眼科程序期间硅油的乳化有关 的并发症的清洗剂。
[0007] 3.概述 本文提供有效除去眼科程序后余留在眼腔中的乳化硅油滴以防止长期并发症的发展 的清洗剂。本文提供的清洗剂包含具有某种密度、粘度和表面张力的硅油。在某些实施方 案中，硅油是低分子量硅油。在某些实施方案中，硅油是高分子量硅油。在某些实施方案 中，硅油具有高挥发性。在某些实施方案中，硅油具有约0. 5 mPa · S-约10.0 mPa · S的动 态粘度。在某些实施方案中，硅油具有低挥发性。在某些实施方案中，清洗剂中的硅油是六 甲基二硅氧烷。在另一个实施方案中，清洗剂中的硅油是八甲基三硅氧烷。在某些实施方 案中，清洗剂具有 〇· 5-1%、1-10%、10-20%、20-30%、30-40%、40-50%、50-60%、60-70%、70-80%、 80-90%或90-99% v/v比率的硅油。
[0008] 在本文所述某些实施方案中，清洗剂还包括是生物相容性疏水表面活性剂的至少 一种活性成分，其可用来产生双乳液以促进乳化油滴从眼腔中除去。在某些实施方案中，清 洗剂具有约〇. 5%_约20%的v/v比率的生物相容性疏水表面活性剂。清洗剂中疏水表面活性 剂的存在至少部分导致油包水包油双乳液，其中乳化硅油滴被含水小球包封。清洗剂中的 疏水表面活性剂至少部分稳定在所述清洗剂内包封有乳化硅油滴的所述含水小球。在本文 提供的某些实施方案中，疏水表面活性剂是约50. 0%三甲基甲硅烷氧基硅酸酯和约50. 0% 环甲硅油（cyclomethicone)(十甲基五环硅氧烷（decamethylpenta-cyclosiloxane))的 共混物。
[0009] 本文提供用于有效去除眼科程序后余留在眼腔中的乳化硅油滴以防止长期并发 症的发展的方法。清洗剂可在外科手术或程序期间或之后给予。在一个或多个实施方案中， 所述方法包括开始手术程序，并用清洗剂清洗眼腔。在某些实施方案中，可按下列方式将清 洗剂给予受试者眼部：1)在除去手术程序后的大量硅油后，可能余留乳化硅油滴（呈水包 油乳液的形式）；2)由于清洗剂中疏水表面活性剂的存在，相对大量的清洗剂与眼腔中的 水包油乳液混合，引发o/w/o双乳液的形成；3)不需要的乳化硅油滴被较大的含水小球包 封；4)由于含水溶液的密度比清洗剂高，包封了乳化油滴的含水小球在眼腔底部聚集；5) 可通过抽吸和通过重复允许空气/清洗剂交换除去双重乳化液滴；和6)可在操作结束时， 在除去清洗剂后使用手术长效气体充满眼腔。
[0010] 在一个或多个实施方案中，清洗剂可另包括其它治疗剂，包括蛋白质和蛋白质性 化合物、类固醇、非留体抗炎药、抗菌药、抗感染剂、抗病毒药、抗真菌药、胰岛素、胰高血糖 素样肽-I (Glucagon-like Peptide-Ι)及其类似物、β肾上腺素能阻滞剂、抗组胺药、抗 微管剂、玻璃体切割剂（vitrectomy agent)、治疗性抗体、抗青光眼剂、缓冲剂、张度剂、粘 度增强剂、防腐剂和愈合剂。
[0011] 4.附图描述 图1.在使用硅油作为眼腔中的眼内填塞物后，乳化（水包油乳液形成）发生的示意 图。
[0012] 图2.显示水包油乳液内表面活性剂的相互作用的示图。
[0013] 图3.鉴别油包水乳液和水包油乳液的各相的示图。
[0014] 图4.鉴别在使用盐水作为清洗剂的方法中的步骤的示意图。
[0015] 图5.比较在眼腔中使用硅油（1.0 cSt，0. 65 cSt)与其它清洗剂的示图。
[0016] 图6.显示通过加入清洗剂水包油乳液转化为油包水包油双乳液的示图。
[0017] 图7.乳液油相和水相分离的示意图。
[0018] 图8.显示与疏水表面活性剂（乳化剂）和水包油乳液组合的低分子量硅油产生 油包水包油乳液的示意图。
[0019] 图9A-B.说明与典型乳液（A)相比双乳液在大小上大得多（B)的示图。
[0020] 图10A-E.说明按照至少一个实施方案使用眼科清洗剂的方法的示图。
[0021] 图11A-B.具有荧光标记的硅油。㈧标记前（左）和BODIPY标记后（右）的硅 油。（B)用BODIPY标记的硅油保持透明。
[0022] 图12A-C.水包油乳液的显微图像。明场（A)，BODIPY标记⑶和A与B的合并 图像（C)。放大倍数：100X。比例尺为100 μπι。
[0023] 图13Α-Β.集中在（A)外边界和⑶内边界的双乳液的显微图像。在⑶中，清楚 显示小液滴，其被较大的泡包封。放大倍数：1〇〇Χ。比例尺为100 μ m。
[0024] 图14A-C.油包水包油双乳液的显微图像。明场（A)，BODIPY标记⑶和A与B的 合并图像（C)。放大倍数：100X。比例尺为100 μ m。
[0025] 图15.第6. 2节中讨论的体外眼模型清洗实验的方法的示意图。
[0026] 图16.在洗涤后保留在室中的乳化液滴的量。清洗剂的值关于BSS组的值归一化 (t 检验，***，/<0· 001 ;误差条=土SD ;n =8)。
[0027] 图17.第6. 4节中讨论的体外培养试验的示图。
[0028] 图18.采用MTS测定法在与测试剂孵育1小时后RGC-5的细胞成活力（相对 于HBSS)。（单因素方差分析（one-way AN0VA)接着邦弗朗尼事后检验（bonferroni post test)，误差条=土SD;n=3)。
[0029] 图19.采用LDH测定法在与测试剂孵育1小时后死的RGC-5细胞的百分比（单因 素方差分析接着邦弗朗尼事后检验，误差条=土SD ;n=3)。
[0030] 图20A-F.体外用不同类型的清洗剂孵育1小时后RGC-5形态学的显微图像。 [0031 ] 图21.采用MTS测定法在与测试剂孵育1小时后rMC-Ι细胞的细胞成活力（相对 于HBSS)(单因素方差分析接着邦弗朗尼事后检验，误差条=土SD ;n=3)。
[0032] 图22.采用LDH测定法在与测试剂孵育1小时后死的rMC-1细胞的百分比（单因 素方差分析接着邦弗朗尼事后检验，误差条=土SD ;n=3)。
[0033] 图23A-F.体外用不同类型的清洗剂孵育1小时后rMC-1形态的显微图像。
[0034] 图24.采用MTS测定法在暴露于不同测试剂30分钟后相对于HBSS的RGC-5细 胞成活力（单因素方差分析检验接着邦弗朗尼多重比较检验；*，P〈 0.05;误差条=±SD; n=3) 〇
[0035] 图25。采用LDH测定法在暴露于不同测试剂30分钟后的RGC-5细胞死亡（单因 素方差分析检验接着邦弗朗尼多重比较检验；误差条=土SD ;n=3)。
[0036] 参考附图的下列详细描述(所述详述构成其一部分)，其中整篇中类似数字可标明 类似部分以说明相应或类似的要素。为了说明的简要和/或清楚起见，图中说明的要素未 必按比例绘制。例如，为为清楚起见，一些要素的尺寸可相对于其它要素被夸大。此外，要 了解可采用其它实施方案，且可进行结构和/或逻辑改变而不偏离本公开内容的范围。还 应注意，可以使用方向和参照，例如上、下、顶、底、在……之上、在……上方等，以有助于讨 论附图，并且无意限制公开内容的应用。因此，不以限制性意义进行下列详细描述，而且本 公开内容的范围预期由随附权利要求书和等同内容限定。
[0037] 4. 1 定义 当提及本文提供的化合物时，下列术语具有以下含义，除非另有说明。
[0038] 本文所用术语"盐水"、"盐水溶液"、"等渗盐水溶液"、"灭菌盐水"可互换。这类 术语还可以指特定制剂，包括平衡盐溶液（BSS)、Hank平衡盐溶液（HBSS)和磷酸缓冲盐水 (PBS) 〇
[0039] 本文所用术语"洗涤"和"清洗"可互换。
[0040] 如本文所用，硅油可缩写为"so"。
[0041] 本文所用术语"眼的"和"眼科的"可互换使用。
[0042] 5.发明详述 在下列详细描述中，阐述了许多具体细节以供详尽了解所要求保护的主题。然而，本 领域技术人员应了解，可以实施所要求保护的主题而没有这些具体细节。在其它情况下，没 有详细描述会为本领域普通技术人员已知的方法、仪器或系统以便不混淆所要求保护的主 题。
[0043] 在整个该说明书中提及一个实施、实施、一个实施方案、实施方案等可意指与特定 实施或实施方案关联描述的特定性质、结构或特性可包括在所要求保护的主题的至少一个 实施或实施方案中。因此，这类短语在整个该说明书中不同位置中的出现不必意图指相同 的实施或所述的任何一个具体实施。此外，要了解，所述特定性质、结构或特性可在一个或 多个实施中以多种方式组合。当然一般来说，这些和其它问题可随具体背景而变化。因此， 这些术语的描述或使用的具体背景可提供关于该具体背景要得出的推论有帮助的指导。
[0044] 同样地，本文所用术语"和"、"和/或"和"或"可包括多种含义，其会再一次至少 部分取决于其中使用这些术语的上下文。通常，"和/或"以及"或"如果被用来连接列表， 例如A、B或C，则意指A、B或C，在此以专属含义使用，以及A、B和C。另外，本文所用术语 "一个或多个"可用来描述呈单数的任何特征、结构或特性，或可用来描述多个特征、结构或 特性的一些组合。
[0045] 在不同的眼科手术程序期间和/或响应不同眼科手术程序，本申请的实施方案可 能是有益的。在某些实施方案中，所述程序与其中玻璃体附着在内界膜上的那些有关。在 某些实施方案中，内膜是视网膜的最内层。在某些实施方案中，由于衰老，可能发现玻璃体 液化并收缩。玻璃体结构的这