使免疫反应的调节与生物药品的给药相关的方法和制剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种方法和制剂，其使免疫反应的调节与生物药品的给药相关。
【背景技术】
[0002] 由于多种原因，例如分子大小，许多现代药物如生物药物不适合用于口服给药。相 反地，需要侵入式注射至血管外位置，如皮下注射（s.c.)、肌内注射（i.m.)、或直接注射至 血管系统，如静脉注射（i.v.)。在这些选择中，皮下注射途径通常是最优选的。其中一个主 要的原因是，其允许患者自我给药，这对于长期治疗的情况而言是特别重要的。此外，相对 于静脉注射给药，皮下注射是微创的，因此相关的风险通常较低，如在较差的卫生条件情况 下无意中注入。尽管在皮下空间的吸收仅仅是局部的，且由于生物利用度低通常需要增加 剂量从而导致更高的治疗成本，皮下注射给药也是有利的。
[0003] 除了监管和感觉功能，皮肤的主要功能是保护。它不但充当应对机械应力的屏障， 还充当微生物的第一道屏障以保护个体，在感染/炎症的风险增加情况下皮肤会损伤可以 说明此事。单独的机械功能是不够的，pH值和某些位置、蛋白酶也对病原体起到附加的化学 防御机制。重要的是，保护的高效机制是通过组织的免疫系统加强监视。病原体的生理检 测是所期望的，而大多数情况下免疫系统（如病原体）对生物药物的处理是不需要的。从 而加强监视解释了生物药物的皮下注射给药的第二个缺陷，也称为不需要的免疫原性，除 了因更高量的产品使用而导致成本增加之外，还需要在生产开发这种产品类别上做出更多 的努力。这种不需要的免疫原性可能会导致各种后果。可能会导致疗效的损失，增加清除 循环（clearancefromcirculation)或触发潜在危及生命的过敏反应。由于疗效损失可 能经过长时间才注意到，而这种产品类别价格高，这也可能意味着将不必要的成本转嫁到 医疗保健系统中。从患者和医疗接受者最优选的角度来看，有限的生物利用度和如免疫原 性的风险一起会造成严重的问题。
[0004] 由于对与病人发生免疫原性相关的风险因素（如遗传倾向）知之甚少，从而难以 控制。控制和优化产品相关的风险因素是让患者从现代疗法充分受益的唯一机会，如生物 制剂，特别是由于规定了它们是在所有其它治疗方案已经失败了情况下才使用，这也是因 为其成本过高的结果。
[0005] 在此背景下，在大多数情况下所希望的调节是旨在减少免疫原性，因为在大多数 情况下，药物具有被免疫系统识别的潜在可能性，包括随后抗体的形成，只有当没有这样的 免疫反应发生时才是充分有效和安全的。另一方面，疗法存在特异性旨在引起合适的免疫 反应，以消除指定目标或使得指定目标失去活性。单独的目标可能是能被识别/中和的异 性蛋白。
[0006] 在所有这些情况下，可能希望进一步增加药物产生预期的免疫反应，和在给药溶 液存在柠檬酸的情况下，或前述制造阶段可能是有益于这一方面。
[0007] 现有技术阶段的制剂，例如作为抗TNF-a(anti-TNFα)抗体阿达木单抗的制剂， Humira、k'含有磷酸盐且以柠檬酸作为缓冲物质，符合给药耐受性、生物药品的稳定性和保 质期的要求。
[0008] 然而，上述制剂具有许多缺点。一个缺点是许多生物制药在皮下注射给药时会诱 导如上概述的不需要的免疫原性。由于它们的抗原性质，难以分析的其他蛋白质类污染物 也会在人类中触发免疫反应。此外，由于它们通常的物种特定属性，动物来源的蛋白质会在 人类中触发免疫反应。即使在现有技术制造方法中这样反应的风险已经很低了，但它可能 会随时间积累，特别是在这类药物的慢性再运用中。
[0009] 特别是要担心的是在皮下注射给药的情况下，这是由于通过血液去除和分配相比 静脉注射给药更延迟。因此，一种有利的制剂将有助于减少药物诱发免疫原性并提供更具 成本效益的药物，或增加药物诱导免疫原性，在此情况下，这是作为预防性或治疗性干预的 预期反应。
[0010] 本发明要解决的问题是提供一种用于生物药品的制剂形式，其不会表现出上述迄 今已知剂型的缺点，如果需要的话，提供的制剂形式是针对低免疫原性或导致增加免疫反 应情况。它特别是适合于由患者或受过训练的医疗个人自我给药，且具有减少免疫原性或 根据医疗状况增加免疫原性和/或在同一时间避免不期望的皮肤刺激和/或通过注射装置 (自）给药时在注射部位发生的疼痛。
[0011] 因此，有必要提供适用于肠胃外的药物制剂，特别是皮下注射、给药/注射。
[0012] 这个问题通过在权利要求中表征的实施方式解决。本发明制备制剂的方法具有减 少或如在本说明书中描述的增加生物药品的免疫原性的优点。本发明基于令人惊讶的观察 结果，即免疫反应可以通过选择适当的制剂进行调节，该制剂包括己二酸和/或适当水平 柠檬酸。具有被免疫系统识别的潜力，这对药物而言是特别理想。这使得本发明的制剂在 用于即用型注射器和其所提供的试剂盒是合适和有利的，如用于家庭。
【发明内容】
[0013] 对本发明进行详细描述之前，应当理解的是，本发明并不限于所描述装置的特定 组成部件或所描述方法的工艺步骤，这样的装置和方法是可以变化的。还需要理解的是， 本文所使用的术语仅是为了描述特定的实施例，并不意图起限制性作用。必须指出的是， 除非上下文另有明确说明外，如在说明书和所附权利要求中的单数形式"一个（a) "，"一个 (an)"，及"该（the)"包括单数和/或复数个对象。还需要理解的是，在给出参数范围的情 况下，其范围通过给出数值来确定界限，该范围被认为包括这些限定值。
[0014] 在第一个方面，本发明提供一种制备包含生物药品的药物制剂的方法，该方法使 得免疫反应的调节与其给药相关。该方法包括以下步骤：
[0015] (1)提供缓冲液，该缓冲液包括：
[0016] 己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
[0017] 柠檬酸或至少一种其所对应的盐
[0018] (2)将该缓冲液与生物药品接触
[0019] (3)可选择地冻干该制剂，及
[0020] (4)得到步骤⑵的制剂或悬浮液和/或步骤（3)的冻干制剂。
[0021] 己二酸（Hexanedioicacid)是羧酸化合物，其也被称为肥酸（adipicacid)， 1，4-丁二駿酸，1，6-己二酸，己二酸（acifloctin)，己二酸（acinetten)，己二酸（adipinic acid)，八氟己二酸（octafluorohexanedioic)或恪融的肥酸。肥酸的分子式为C6H1Q04，其 分子量为 146.lg/mol。术语"肥酸（adipicacid)"和"己二酸（hexanedioicacid)"在本 文可互换使用。
[0022] 根据本发明的另一个方面，提供了一种采用己二酸或至少一种其所对应的盐，和/ 或柠檬酸或至少一种其所对应的盐的方法，该方法能够调节包含生物药品的药物制剂的免 疫原性。
[0023] 根据本发明的另一个方面，提供一种药物制剂，其可以使免疫反应的调节与其给 药相关。该制剂包含生物药品，及
[0024] 己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
[0025] 柠檬酸或至少一种其所对应的盐，
[0026] 或通过上述讨论的方法获得的制剂。
[0027] 根据本发明，术语"药物制剂"涉及任何适合于对患者给药的制剂，并且包括能表 现出治疗和/或诊断效果的药物。这样的"药物制剂"优选为药物缓释制剂。
[0028] 根据本发明的另一个方面，提供了一种调节与药物制剂给药相关的免疫反应的方 法。该方法包括在含有缓冲液的制剂中调整下述物质浓度的步骤，
[0029] 乙二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
[0030] 柠檬酸或至少一种其所对应的盐。
[0031] 如本文所用的术语"免疫原性（immunogenicity) "和/或"免疫原性的 (immunogenic) "和/或"免疫原性的速率"应当从分子的势能角度来理解，当注射至受试 者，可以被免疫系统识别，包括在随后的反应中，不论是有意或无意的，如抗分子的抗体的 形成，即可能导致/诱导影响受试者的免疫系统的反应。
[0032] 如本文所用的"免疫反应的调节"应理解为增加或减少给定制剂的与给药有关的 免疫原性。而在许多情况下，为提高患者的顺应性并降低有害的副作用，免疫原性的减少可 能是需要的，在其它情况下免疫原性的增加是需要的。
[0033] 这里使用的术语"减少的免疫原性"涉及一种包括至少一种生物药品分子的制剂， 当注射给患者，例如皮下注射，会造成/诱导免疫反应，该免疫反应实质上不比参照分子引 起的免疫反应强烈，参照分子表示为本质上不具有免疫原性。
[0034] 如本文所用的术语"生物药品"应包括任何从生物或从生物源衍生得到的治疗剂 或诊断分子，或化学合成的等同于从该来源获得的产品，如蛋白质、肽、核酸、免疫球蛋白、 多糖、细胞产物、植物提取物、动物提取物、重组蛋白或它们的组合。通常，生物药品是指生 物药物的活性成分。术语"药物"和"化合物"在本文可互换使用，并且是指用于诊断、预防 或治疗疾病的症状、身体或精神状况、损伤或感染的（一个或多个）药剂和/或（一个或多 个）药物。
[0035] 术语"生物利用度"是指在给药后，药物或其他物质被吸收或在生理活性的部位变 得有效的程度或速率。大分子的生物利用度可通过在体内采用本领域中已知的药物动力学 的方法测定。
[0036] 合适的免疫原性的评估测定法是本领域熟知的，包括定性和半定量结合测定法、 中和测定法、和验证性测定法（免疫以及免疫层析测定法），用于测定抗药物抗体（ADAs)。 进一步的分析包括采用定性测定法进行总抗体测定（屏幕和滴定度（screenandtitre))， 采用了ELISA、ECL、RIA和流式细胞仪（包括用于增加耐药性的酸解离"AD"和固相萃取 "SPEAD"和"BEAD"化验）验证性试验（特异性）。基于细胞检测用于测定大分子的中和抗 体和毒代动力学分析也是众所周知的。
[0037] 术语"受试者"或"个体"或"动物"或"患者"或"哺乳动物"，是指任何受试者，特 别是哺乳动物受试者，对他们来说，诊断、预知、预防或治疗是期望的。为了治疗的目的，"哺 乳动物"是指分类为哺乳动物的任何动物，包括但不限于人、家畜、及在动物园、运动所的动 物或宠物动物，如狗、马、猫、牛等任何动物。优选地，哺乳动物为人。
[0038] 在本发明的范围内进行的实验过程中，令人惊讶地发现：给药后一周后，相比市售 药物和参考制剂，己二酸缓冲制剂经皮下注射给兔子时具有良好的可接受性/相容性和更 低的清除（clearance)。因此，如实施例1和2所示，免疫原性受所选择的制剂或使用的溶 液中己二酸的适当浓度的影响。具有被免疫系统识别的潜力，这对于药物而言是特别理想 的。
[0039] 许多因素会影响包括生物药品的药物制剂的免疫原性，包括结构特征（序列变异 和