特别是参与蛋白质降解的那些，例如胰凝乳蛋白酶。作为机能障碍 的量度，确定患有孤独症的儿童中粪胰凝乳蛋白酶(FCT)水平是异常低的。
[0256] 研究 1
[0257] 这一初步研究是探索研究，以确定患孤独症儿童的小同龄组的确具有异常低水平 (〈9.0)的粪胰凝乳蛋白酶(FCT)。研究001的结果显示于图10中。
[0258] 患有孤独症的所有9个儿童显示低于7单位/克的异常低的FCT水平(正常2 9.0)。 一小组儿童的这种观察导致进一步检测与之前未被发现的孤独症的生理联系的可能性。
[0259] 研究 2
[0260] 进行研究2以确定患孤独症儿童的大同龄组（26名儿童）是否也出现异常低的FCT 水平。也测定粪弹性蛋白酶_1(胰功能不全中以低含量存在的另一种胰腺消化酶）的水平。 再一次，26名儿童中25名的FCT水平异常低，下降至8U/g或更低。一名儿童的FCT水平为9U/ g。另一方面，所有儿童具有正常水平的粪弹性蛋白酶-1。
[0261] 研究 3
[0262] 在研究3中，测定年龄为2岁到14岁的46名儿童的FCT水平，其中25名患有孤独症， 21名未患孤独症，数据显示患有孤独症的儿童具有异常低的FCT水平，且未患孤独症的儿童 具有正常的FCT水平(为12U/g或更高）。结果概括于图12中。图12的顶线显示未患孤独症的 受试者的FCT水平，而底线显示患有孤独症的受试者的FCT水平。
[0263] 研究 4
[0264] 在研究4中，检验了诊断为患孤独症和共病遗传性障碍的54名儿童的FCT水平。数 据显示患有孤独症和共病遗传性障碍的儿童的FCT水平测试为正常。
[0265]由于孤独症通过行为评估确定，假设归因于已知遗传性障碍或与已知遗传性障碍 一起存在的孤独症可能与单独的孤独症或不归因于已知遗传性障碍的孤独症具有不同的 生理机能。一些遗传性障碍具有典型症状，而其他的可能更加易变并与孤独症症状重叠。该 研究检验了也诊断患有另一种已知病症的患孤独症儿童，以确定这些儿童中的FCT水平是 否异常低下。
[0266] 下表12显示也患有遗传性共病的诊断为患孤独症的54名儿童。
[0267] 表12
[0268] 也患有遗传性共病的诊断为孤独症的儿童 FCT水平U/g 共病 1 12 脆性X染色体 2 22 Ha丨Iermann-Strdff 综合征 3 2:5,2 21染色体三体性 4 15.8 9染色体上的移位 5 1.8 Beckwith-Wiedemann 综合征
[0269] 6 26,6 21染色体三体性 7 39.2 18染色体三体性 8 16.6 Rubenstein-Tabi 综合征 9 25.4 脆性X染色体 10 20.6 Prader-Willi 综合征 11 14,6 21染色体三体性 12 25.6 Rett 综合征 13 21.4 Klippel-Feil 综合征 14 20.6 Rett 综合征 15 24.8 杜兴肌营养不良 16 12.2 Tourette 综合征 17 14.8 子宫内中风 18 30 21染色体三体性 19 18.8 脆性X染色体 20 17.6 青少年RA 21 18.8 子宫内中风 2:2 34 6染色体三体性 23 22.2 杜兴肌营养不良 24 18.8 青少年糖尿病 25 28.4 I型糖尿病 26 13.8 肾上腺脑白质营养不良 27 44 Wilson 病 28 19.6 子宫内中风 29 7.4 I型糖尿病
[0270] 30 23.4 Prader-Willi 综合征 31 14.4 22ql3 15.4 Tourctte 综合征 33 17.6 无脑回症 34 22.4 嗜中性粒细胞免疫缺陷综合征 35 18.4 I型糖尿病 36 32.2 Tourette 综合征 37 14.6 18p染色体四体性 38 31 高igE综合征 39 26.6 Angelman 综合征 40 17.4 I型糖尿病 41 12.6 Rett 综合征 42 34 脆性X染色体 43 17.4 Marftm 综合征 44 21.2 Waardenburg 综合征 45 21.8 谷胱甘肽合成酶缺陷 46 6.0 I型糖尿病 47 26,6 Rubinstein-Taybi 48 34 Angelman 综合征 49 25.2 Klinefelter 综合征 50 21.4 出生时脑出血
[0271] 51 16.8 Turner 综合征 52 23.4 甲狀腺机能减退 53 15.8 I型糖尿病 54 7.8： 早产儿脑损伤
[0272] 诊断为孤独症和遗传性共病的54名儿童中仅两名具有异常低的FCT水平。这些儿 童患有I型糖尿病。54名儿童中的52名记录的FCT水平在正常范围内。
[0273] 这进一步支持低FCT水平存在于诊断患有孤独症但没有其他已知遗传病的儿童 中。
[0274] 研究 5
[0275] 在研究5中，在多部门医师进行的研究（multi-off ice physician-conducted study)中测定了年龄为2岁到8岁的463名儿童的FCT水平，其中266名患有孤独症，197名未 患孤独症。数据显示患有孤独症的儿童具有异常低的粪胰凝乳蛋白酶水平，而未患孤独症 的儿童具有正常的粪胰凝乳蛋白酶水平。
[0276]数据概括于下表13。
[0277] 表13
[0278] 患有和未患孤独症的儿童的平均粪胰凝乳蛋白酶水平 患有孤独症儿童不患有孤独症儿童 N= 463 儿童总数 266 1:97 Γ ? 平均 FCT(UZg) 4.4 23.2
[0279] ν FCT水平异常的儿童总数 203 3 % (pO.OOl) 76.34% 1.50% FCT水平正常的儿童总数 63 1:94 (p <0.01)
[0280] % 23,68% 紙纖
[0281]该数据进一步确定，诊断为患孤独症但未同时患已知遗传性共病的儿童具有异常 低的FCT水平。因此如果儿童未患已知遗传性共病(除了该共病是I型糖尿病外），FCT水平可 用于诊断患有孤独症的儿童。
[0282] 胰凝乳蛋白酶是一种胰酶。胰凝乳蛋白酶是丝氨酸蛋白酶，其独特之处在于在消 化过程中它仅切割必需氨基酸。特别地，胰凝乳蛋白酶切割芳香族氨基酸的羧基侧链上的 肽键。如同通过异常FCT水平证明的蛋白质消化的缺失使得儿童缺乏用于新的蛋白质合成 的氨基酸。没有足够水平的必需氨基酸，则不能合成各种机体功能所需的新的蛋白质。例 如，参与神经学过程的蛋白质的不足或缺失可引起孤独症症状。
[0283] 研究 6
[0284] 在研究6中，检验了年龄为2岁到18岁的320名儿童的FCT水平，其中64名患有孤独 症，64名患有ADD，64名患有ADHD，64名患有已知遗传性病症，以及64名是正常儿童(没有已 知病症）。数据显示患有孤独症、ADD和ADHD的儿童与患有已知遗传性病症的儿童和正常儿 童相比具有异常低的FCT水平。在患有多种病症的年龄匹配儿童的多医师部门试验过程中 收集FCT数据。图13描绘了 5组独立的患有孤独症、ADHD (注意力缺陷多动障碍）、ADD (注意力 缺陷障碍）、已知遗传性障碍(也诊断为患孤独症)或未患已知病症(正常)的年龄为6岁到18 岁的儿童的FCT水平。
[0285] 图13中的上面两条线对应于没有任何已知病症的儿童和患有已知共病病症(遗传 性及其他)的儿童的FCT水平。下面三条线对应于患有孤独症、ADD和ADHD儿童的FCT水平。
[0286] 孤独症、ADD和ADHD儿童的FCT水平明显低于没有任何已知病症或患有已知遗传性 共病或具有伤情的儿童(P〈〇. 01)。
[0287] 研究 7
[0288] 在研究7中，诊断为患孤独症并具有异常低的FCT水平的33名儿童参与该研究。用 两种胰酶/消化酶补充剂治疗儿童，或不进行治疗。在第〇、30、60、90和120天的时间点测定 各名儿童的FCT水平。
[0289] 给予^^一（ 11)名儿童低治疗剂量的ULTRASE_? MT20 (胰脂肪酶）胶囊（打开并 撒在食物上）（参见下文）；给予11名儿童Viokase(胰脂肪酶)粉末，以1/4茶匙的最小给药水 平撒在食物上；11名儿童仅测定其粪胰凝乳蛋白酶水平。所有儿童是年龄匹配的且不具有 神经和/或遗传性共病的诊断。
[0290] 口服给药各ULTRASE胶囊，其含有371mg的含有下列组分的猪胰腺浓缩物的肠溶包 衣小片剂：
[0291] 脂肪酶............................................................20,000U.S.P.单位
[0292] 淀粉酶....................................................................65,000U.S.P.单位
[0293] 蛋白酶....................................................................65,000U.S.P.单位
[0294] 各0 · 7g( 1/4茶匙)的Viokase粉末，含有：
[0295] 脂肪酶，USP 单位 16,800
[0296] 蛋白酶，USP 单位70,000
[0297] 淀粉酶，USP 单位70,000
[0298] 在120天内监控FCT水平，以确定FCT水平的变化与不接受酶治疗的儿童相比是否 对用任一酶制剂治疗做出响应。在120天时间内测得的FCT水平的结果显示于下表14中。
[0299] 表14
[0300]基线的、施用多次胰酶替代物、30、60、90和120天后的平均粪胰凝乳蛋白酶水平。 Ultrase Viokase 没有治疗 平均 FCT(单位） 3 49 3 81 3 ! 基线 平均 FCT(单位） 5,05 7.：02 3,IS
[0301 ] 3()天 平均 FCT(单位） 4.82 8.96 3 18 60天 平均 FCT(单位） 4.91 13.73 3.25 90天 平均 FCT(单位） 5 38 15 1 3 13
[0302] 120 天 ：N=33
[0303] 结果显示于图14的条形图中。各时间点的上方条（很浅的条）显示未治疗儿童的 FCT水平。中间条显示用Viokase治疗的儿童的FCT水平，且各时间点的下方条显示Ultrase 治疗后的FCT水平。表中和图14中描绘的结果表明仅在施用Viokase粉末酶制剂后观察到从 第0天的基线到120天的FCT水平的明显变化。在前90天内观察到最大变化。前90天内的变化 较之第90到120天观察到的变化是明显的。而Ultrase组显示从基线到120天的一些变化，该 变化不明显。
[0304] Ultrase中的脂肪酶对pH变化非常敏感，并在酸性条件例如在胃中存在的那些酸 性条件下降解。Ultrase上的肠溶包衣使得酶避开了胃。已经证明Ultrase可用于递送足够 的脂肪酶，从而治疗具有胰酶缺陷的患有囊性纤维化和慢性胰腺炎的成人。然而，Ultrase 及其他类似产品上的肠溶包衣明显不允许将这些组合物的蛋白酶部分递送至其中需要蛋 白质降解的近端小肠中。如小型前导试验中所显示的，Ultrase不允许释放酶的蛋白酶部 分，特别是胰凝乳蛋白酶，如在施用Ultrase后所测得的FCT水平所确定的。Ultrase治疗组 的FCT水平和未治疗组的FCT水平相似。
[0305]酶的蛋白酶部分的最佳递送时机和位置是从食物团处于胃中的时间的后面部分 开始，消化食物将该段时间花费在近端小肠中。
[0306]研究 8
[0307]在研究8中，用粪化验检验42名年龄匹配的儿童（其中25名患有孤独症，17名不患 有孤独症或其他共病状态）中多种病原体以及胃肠功能失调标志物的存在，包括FCT水平。 患有孤独症的儿童存在更多数目的粪病原体以及具有异常低的FCT水平。
[0308] 进行这一小型前导研究来检验患有孤独症儿童相对未患孤独症儿童的肠胃细菌 丛。检验胃肠健康的多种标志物以确定这些儿童中是否有异常胃肠表现。
[0309] 用粪化验筛选42名年龄匹配儿童（其中25名患有孤独症，17名未患孤独症或其他 共病状态）中多种病原体以及胃肠功能失调标志物的存在。也检测本领域技术人员已知的 其他胃肠病原体或粪标志物作为胃肠功能失调的标志物。下表15显示胃肠病原体或其他粪 标志物存在的发生率。
[0310] 表15
[0311]代表胃肠功能失调的病原体或其他粪标志物存在的发生率
[0312] 孤独症 ％总计 无孤独症 ％总计 低 FCT 25 100% 0 0% 艰难梭菌抗原 15 60% 1 6% 粪弹性蛋白酶<200 0 0% 0 0% 幽门螺旋杆菌抗原 17 67% 0 0% 溶组织内阿米巴抗 原 8 32% 0 0%： 贾弟虫抗原 9 36% 1 6% 酵母过度生长 4 16% 0 0% 隐孢子虫 9 36% 1 6% N=25 N= 17
[0313] 患有孤独症的儿童中阳性粪标志物(包括低的粪胰凝乳蛋白酶水平）的存在表明 患有孤独症患者中的另外的胃肠问题。
[0314] 研究 9
[0315] 在研究9中，诊断为孤独症并显示异常低FCT水平的年龄为3岁到8岁的68名儿童服 用胰酶/消化酶组合90天。结果表明在代表孤独症的核心和非核心症状的5个方面中的5个 有了明显改善。
[0316]该研究中对患有孤独症的儿童的症状学的多方面的检验包括胃肠症状以及孤独 症的核心症状。在文献中已有记载，患有孤独症的儿童不随着时间变化，且他们的孤独症水 平是静止的而与儿童年龄无关。进一步认为这些患有孤独症的儿童不伴有成熟变化。
[0317]该研究中，诊断为孤独症并显示异常低FCT水平的年龄为3岁到8岁的68名儿童在 90天的时间内每次进餐时服用1/4茶匙的Viokase，以及可咀嚼的木瓜酶（原木瓜酶牌 (Original Papaya Enzyme))。
[0318] 原木瓜酶 [0319] 补充齐I」标示 [0320]服用量:3片 [0321] 每瓶含量:33 碳水化合物 <1 g <1% 綠 .< I g 木瓜蛋白酶 45mg _
[0322] 波粉酶 6. mg ** 蛋白酶 6 mg ** 番木瓜果(Carica papaya) 3 mg '*'*
[0323] *基于2,000卡路里饮食
[0324] **每日的值没有确定
[0325] 要求医师和父母完成该研究中所检验的各症状的评估评分。各症状用以下(0)到 (10)的评分评级，（〇)表示儿童能够执行该任务，因此说明没有损害，（10)表示儿童完全不 能执行该任务。对于不希望的行为，例如活动过度或强迫行为，从低得分到高得分的变化表 示改善，因为儿童不经常表现该不良行为了。评估评分如下： 10 儿童对于执行该任务具有0%能力 9 在10%时间内儿童能够执行该任务
[0326] 8 在20%时间内儿童能够执行该任务 7 在30%时间内儿童能够执行该任务 6 在40%时间内儿童能够执行该任务 5 在50%时间内儿童能够执行该任务 4 在60%时间内儿童能够执行该任务
[0327] 3 在70%时间内儿童能够执行该任务 2 在80%时间内儿童能够执行该任务 1 在90%时间内儿童能够执行该任务 0 在100%时间内儿童能够执行该任务
[0328]在各时间间隔获得两个得分的平均数:基线和90天。所获得分显示于下表16中： [0329]表16
[0330]服用消化酶前后孤独症儿童的症状得分
[0331] 全部患者得平均得分全部患者得 平均得分 分的