幅降低，差异非常显著(P<〇.01);实施例15-17组(石解蛋白铁复合物组）用药 后数值比用药前有降低，但无显著差异(P>〇. 05);正常组基本恒定，而模型组则有升高； [0K5]用药后:实施例1-14组各组红细胞游离原化嘟(FEP)均值均大幅低于模型组，差异 非常显著(p<0.01);达到正常组水平，无显著差异(p>0.05);其中，实施例2、4、6、8、10、 12、14组(未除去蛋白的石解提取物铁复合物组)均值分别低于均低于阳性对照力董能组， 差异显著或非常显著(P<〇.〇5或P<0.01);也低于相应同种石解的实施例1、3、5、7、9、11、 13组（已除去蛋白的石解提取物铁复合物组），差异显著(P<0.05);
[0156] 实施例15-17组(石解蛋白铁复合物组)均值均高于实施例1-14组，差异非常显著 (P<0.01);均高于正常组，差异非常显著(P<0.01);也高于阳性对照力董能组，差异非常 显著(P<0.01)。
[0157] 表4石解提取物铁复合物对IDA大鼠用药前后红细胞游离原化嘟（FEP) (ug/L) (X±s)
[0160] 注：与模型组比较★?<0.05，★★?<0.01，模型组本身只标记与正常组标记；与 正常组相比较??<〇. 05，???<0.0 l，正常组本身不标记;与力董能组比较??<0.05，? ? P<0.Ol;实施例1-14组与实施例15组比较▲?<0.05，▲▲?<0.Ol;实施例1-14组与实 施例16组比较▼P<〇.〇 5, ▼▼?<〇.01;实施例1-14组与实施例17组比较?<0.05，?<0.01; 实施例1组与实施例2组比较JP化化^^<0.01;实施例3组与实施例4组比较 、P<0.05, 、kP<0.01;实施例5组与实施例6组比较,P<0.05, ,,P<0.01;实施例7组与实施例8组比 较，P<〇.化，、P<0.0 l;实施例9组与实施例10组比较*P<〇. 〇日，化Ol;实施例11组与实施例12 组比较W<〇. 0日，**P<〇. 01;实施例13组与实施例14组比较(*P〈〇. 0日.**P<〇. 01。
[0161] 结果表明：未除去蛋白的石解提取物铁复合物和已除去蛋白石解提取物铁复合物 均能非常显著降低IDA大鼠红细胞游离原化嘟(FEP);未除去蛋白石解提取物铁复合物显著 优于阳性对照力董能效果;也显著优于已除去蛋白的石解提取物铁复合物效果。
[0162] 而单独分离出的石解蛋白制备的石解蛋白铁复合物则没有达到W上效果，能降低 IDA大鼠红细胞游离原化嘟(FEP)，但无显著差异(P>0.05);非常显著低于未除去蛋白的石 解提取物铁复合物和已除去蛋白的石解提取物铁复合物的作用，非常显著低于阳性对照力 董能作用。
[0163] 1.4.4安全性:该实验大鼠用药治疗过程中各组均未发现严重药物不良反应。
[0164] 实施例23、治疗缺铁性贫血的初步临床试验研究 [01化]1.受试者纳入标准
[0166] 1.1经诊断为缺铁性贫血患者；
[0167] 1.2 血红蛋白化 b)<90g/l;
[01側 1.3血铁蛋白（5尸）<1411邑/1;
[0169] 1.3 年龄:18-65周岁；
[0170] 1.4签署知情同意书。
[0171] 2.受试者排除标准
[0172] 2.1合并有屯、、脑血管、肝、肾、消化道等严重疾病及精神病患者；
[0173] 2.2过敏体质或对该受试样品过敏者；
[0174] 2.3短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者；
[0175] 2.4未按标准服用受试样品、资料不全影响功效或安全性判断者；
[0176] 2.5其他的研究者认为的情况。
[0177] 3.试验设计及分组要求
[0178] 采用自身和组间两种对照设计，组间对照采用已上市多糖铁(力董能)作为阳性对 照，按受试者的血红蛋白水平随机为试验组各组和对照组分组。
[0179] 4.试验样品的剂量
[0180] 试验样品：采用实施例1(已除去蛋白的铁皮石解提取物铁复合物）、实施例2(未除 去蛋白的铁皮石解提取物铁复合物）、实施例3(已除去蛋白的鲜铁皮石解提取物铁复合 物）、实施例4 (未除去蛋白的铁皮石解提取物铁复合物)为原料制备铁浓度为12mg/ml的石 解提取物铁复合物口服液，按照口服液标准检测合格，重金属含量、微生物及致病菌等检测 均合格。
[0181] 试验剂量:每天服IOml,每天服用2次，即每天服用含铁240mg的石解提取物铁复合 物。
[0182] 对照组及剂量:力董能胶囊，每粒150mg，每次服用1粒，每天服用2粒，即每天服用 剂量300mg铁。
[0183] 治疗周期:42天(6周）。
[0184] 注意:试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。
[01化]5.主要疗效指标
[0186] 血红蛋白、血清铁蛋白、红细胞内游离原化嘟。
[0187] 6.结果统计分析及判定标准
[0188] 试验前后自身比较和试验后组间比较，受试样品组与对照组比较，血红蛋白升高 且平均升高幅度含lOg/U差异有显著性;血清铁蛋白增加，红细胞游离原化嘟降低，差异有 显著性判定治疗缺铁性贫血有效。
[0189] 7.试验主要研究结果：
[0190] 7.1临床试验数据统计见表5:
[0191 ]根据表5临床试验数据可见:实施例1-4组治疗前后=项指标均有大幅改善，差异 非常显著(P<〇.01);治疗后实施例2、4组对S项指标的改善显著或非常显著强于阳性对照 力董能组(P<〇.05或P<0.01);治疗后实施例2、4组分别也分别显著或非常显著强于实施 例1、3组(P<0.05或P<0.0 l);依据判定标准判定5组对缺铁性贫血的治疗均有效。
[0192]表5石解提取物铁复合物治疗缺铁性贫血各指标变化情况(5；±3：?
[01M] 注:治疗后各组与治疗后阳性对照力董能组比较??<0.05，令令？<0.01;治疗后 实施例1组与实施例2组比较JP<0.05, J JP化Ol:治疗后实施例3组与实施例4组比较 、P<0.05, 、、P<0.01。
[0196] 结果表明：已除去蛋白和未除去蛋白的铁皮石解提取物铁复合物、W及相应的鲜 铁皮石解提取物铁复合物均能有效治疗缺铁性贫血，其中未除去蛋白的铁皮石解提取物铁 复合物的治疗作用显著强于阳性对照力董能，也显著强于已除去蛋白的铁皮石解提取物铁 复合物。
[0197] 7.2安全性:临床试验过程中各组均未见严重药物不良反应。
【主权项】
1. 一种石斛提取物与铁的复合物，其特征在于组分中含有石斛多糖100份、铁5-50份。2. 如权利要求1所述的复合物，其特征在于所述组分还可以含有石斛蛋白5-20份。3. 如权利要求1和2所述的复合物，其特征在于，所述石斛为兰科石斛属(Dendrobium Sw.)中的可供药用石斛。4. 如权利要求3所述的复合物，其特征在于，所述石斛为铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo)、霍山石角斗（Dendrobium huoshanense C. Z . Tang et S.J.Cheng)、齿辦石斛（Dendrobium devonianum Paxt)、金钦石斛（Dendrobium nobile Lindl ·)、流苏石角斗（Dendrobium f imbriatum Hook. Var oculatum Hook·)、鼓植石角斗 (Dendrobium chrysotoxum Lindl ·)、美花石角斗（Dendrobium loddigesii Rolfe.)或束花 石斛（Dendrobium chrysanthum Wall · ex Lindl ·)中的任一种。5. -种如权利要求1、3或4中所述的复合物的制备方法，其特征在于，所述石斛提取物 的制备过程为:将石斛药材粉碎，溶剂脱色素脱脂，挥掉溶剂，加10-50倍水加热提取0.5-4 小时，过滤得滤液或离心得离心液，再在所得滤液或离心液中加入4倍体积的乙醇，离心，所 得沉淀加水溶解，再经过Sevage法或三氯乙酸法或盐酸法除蛋白处理后，得到所述的石斛 提取物水溶液。6. 如权利要求5所述的复合物的制备方法，其特征在于，所述石斛提取物与铁复合的方 法为:石斛提取物水溶液中按照所含多糖质量40-100 %的比例加入柠檬酸钠或碳酸钠作为 络合剂，搅拌溶解，加入NaOH溶液至pH值为7-11，保持在此碱性条件下，60-80°C下加入 FeCl3溶液，与铁进行络合反应，离心，离心液透析后浓缩，干燥，即得到所述复合物。7. -种如权利要求1-4中任一所述的复合物的制备方法，其特征在于，所述石斛提取物 制备过程为:将石斛药材粉碎，溶剂脱色素脱脂，挥掉溶剂，加10-50倍水加热提取0.5-4小 时，过滤得滤液或离心得离心液，再在所得滤液或离心液中加入4倍体积的乙醇，离心，所得 沉淀加水溶解，即得到含有蛋白的所述的石斛提取物水溶液。8. 如权利要求7所述的复合物的制备方法，其特征在于，所述石斛提取物与铁复合的方 法为:石斛提取物水溶液中按照所含多糖和蛋白总质量40-100 %的比例加入柠檬酸钠或碳 酸钠作为络合剂，搅拌溶解，加入NaOH溶液至pH值为7-11，保持在此碱性条件下，60-80°C下 加入FeCl 3溶液，与铁进行络合反应，离心，离心液透析后浓缩，干燥，即得到所述复合物。9. 一种如权利要求1至4中任一所述的复合物的应用，其特征在于所述复合物可以制备 成口服液、颗粒剂、片剂或胶囊的剂型。10. -种如权利要求1至4中任一所述的复合物的应用，其特征在于可制备为预防或治 疗缺铁性贫血疾病方面的药物、保健品或食品添加剂中的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种石斛提取物与铁的复合物及其制备方法与应用。其组分中含有石斛多糖100份、铁5-50份；还可以含有石斛蛋白5-20份；所述石斛为兰科石斛属中的可供药用石斛。所述复合物的制备方法为：在石斛提取物水溶液中加入络合剂，碱性条件下加入FeCl3溶液进行络合反应，离心，离心液透析，干燥，即得到所述复合物。本发明制备得到的石斛提取物与铁的复合物可制备成胶囊、片剂、口服液、颗粒剂等各种剂型。经过缺铁性贫血药理药效实验与临床比较试验，取得了比力蜚能多糖铁更好的药效。本发明的复合物可用于制备预防和治疗缺铁性贫血的药物、保健品或食品添加剂。
【IPC分类】A61K36/8984, A23L33/165, A23L33/105, A61P3/02, A61K31/715, A23L33/00, A61P7/06, A61K33/26, A61K38/02, A61K31/295
【公开号】CN105497059
【申请号】CN201610058466
【发明人】朱慧慧, 熊秀娟
【申请人】南京耕丰医药科技有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月25日