标本兼治。
[0020] 杜仲皮或杜仲叶萜类物质中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱氧-Λ4,5-杜仲醇、2,3-二羟基-Λ4,5-杜仲醇、乙酰基-杜仲醇、杜仲醇苷Α、杜仲叶苷Α、杜仲叶苷Β、杜仲叶苷C、 杜仲叶苷D和木脂素类物质中（+ )松脂素-4,4'-〇-i3-D-双葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基一松脂 素-4'-(H3-D-葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基一松脂素-4-(H3-D-葡萄吡喃糖苷、（+ )松脂素-8-Ο-β-D-葡萄吡喃糖苷、（+ )松脂素-4-0-?Η)_葡萄吡喃糖苷、（+ )8，9 '-二羟基-松脂素-4 '-0-β-D-葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基-松脂素-4,4'-(H3-D-双葡萄吡喃糖苷、丁香脂素-4-(H3-D-吡喃葡萄糖苷、中脂素-4-〇-i3-D-吡喃葡糖糖苷、橄榄树脂素-4 ' -Ο-β-D-葡萄糖苷、橄榄树 脂素-4-〇-i3_D-葡萄吡喃糖苷、落叶松脂醇-4，4 '-Ο-β-D-双葡萄吡喃糖苷、8-羟基-落叶松 脂醇-4'-0-?Η)-葡萄吡喃糖苷、落叶松脂醇-4-〇-i3_D-葡萄吡喃糖苷、橄榄素二糖苷、耳草 素二糖苷、丁香丙三醇-β_ 丁香脂素醚二糖苷的制备方法主要通过从天然药物中提取，为纯 天然组分与单体，具有良好的生物相容性。其中，1-脱氧-Λ4,5-杜仲醇、2,3_二羟基-Λ4， 5-杜仲醇、V -乙酰基-杜仲醇、杜仲醇苷A、杜仲叶苷Α、杜仲叶苷Β、杜仲叶苷C、杜仲叶苷D等 为新化合物。
【附图说明】
[0021]图1是25%乙醇洗脱部位总木脂素类的含量大于90%色谱图。
[0022]图2是25%乙醇洗脱部位保留时间8-14分钟所含木脂素类化合物的紫外吸收图 谱。
[0023] 图3是25%乙醇洗脱部位保留时间14-19分钟所含木脂素类化合物的紫外吸收图 谱。
[0024] 图4是杜仲皮提取物治疗老年性痴呆实验A-F各组大鼠空间搜索轨迹。
[0025] 图5是杜仲皮或杜仲叶的洗脱部位和单体化合物实验设计与筛选流程图。
[0026]图6是不同浓度的Αβ25_35对PC12细胞活力的影响。
[0027]图7是不同浓度的Αβ25-35与PC12细胞共孵24h后或48h后细胞活力图。
[0028] 图8不同浓度的杜仲皮提取物对受损的PC12细胞保护作用。
[0029] 图9不同浓度的杜仲叶提取物对受损的PC12细胞保护作用。
[0030] 图10不同浓度的单萜杜仲醇类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用。
[0031] 图11不同浓度的倍半萜大柱烷类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用。
[0032] 图12不同浓度的木脂素类化合物1~7单体对受损的PC12细胞的保护作用。
[0033] 图13不同浓度的木脂素类化合物9~14单体对受损的PC12细胞的保护作用。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合实施例对本发明作进一步描述：
[0035] 实施例1
[0036] 杜仲皮或杜仲叶砲类物质中单砲杜仲醇类化合物中杜仲醇（eucommiol)、1_脱氧 杜仲醇（1-deoxyeucommiol)、1-脱氧-Λ4，5-杜仲醇（l-deoxy_A4，5-eucommiol)、2，3-二 羟基-Λ4，5-杜仲醇（2，3-dihydroxyl_A4，5-eucommiol)、4/ -乙酰基-杜仲醇（4/ -acetyl-eucommiol)和杜仲酉享苷 A( 5-hydroxy 1-3，4-dihydroxymethyl-2-hydroxye thy 1-cyclohex-1-enone-2〃-〇-0-D-glucopyranoside)的制备方法，其中：将杜仲皮或杜仲叶药材粉碎成粗 粉，用60 %乙醇浸泡1小时，8倍量溶剂加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液。上述 滤液与65°C减压浓缩至1.0g生药材/ml，0-4°C冷藏过夜，析胶，离心过滤，滤液上AB-8型号 大孔吸附树脂富集，依次用水洗脱、25 %乙醇洗脱、40 %乙醇洗脱、60%乙醇洗脱和95%乙 醇洗脱，得到各洗脱部位，其中水洗脱部位主要含有单萜杜仲醇类化合物，将水洗脱部位进 行60-80%乙醇分级沉淀离心除杂质，回收80%乙醇提取液得浸膏上硅胶柱，上样后依次用 三氯甲烷：甲醇梯度洗脱，主要收集三氯甲烷：甲醇为10:1、8:1、2:1的洗脱流份，以上述杜 仲皮或杜仲叶萜类物质中单萜杜仲醇类化合物中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱氧-Λ4，5-杜 仲醇、2，3-二羟基-Λ4，5-杜仲醇和V -乙酰基-杜仲醇和杜仲醇苷A为对照品TLC或HPLC检 测，合并相应流份。上述流份于50°C减压浓缩蒸干，用95%乙醇溶解，过滤，结晶并重结晶， 即得。或者将上述流份减压浓缩蒸干或结晶产物，经中压制备色谱或高效液相制备色谱制 备纯化，流动相为甲醇水5-20%或乙腈水5-15%的等度或梯度洗脱，回收洗脱液减压浓缩 蒸干，即得。采用上述方法制备杜仲皮或杜仲叶萜类物质中单萜杜仲醇类化合物中杜仲醇 得率为1 · 6-13 · 5g/kg，经HPLC检测纯度为99 · 2 % ; 1-脱氧杜仲醇得率为0 · 9-10 · 2g/kg，经 HPLC检测纯度为99.0 % ;、1-脱氧-Λ4，5-杜仲醇得率为0.6-9.4g/kg，经HPLC检测纯度为 98 · 6 % ; 2，3-二羟基-Λ4，5-杜仲醇得率为0 · 5-6 · 5g/kg，经HPLC检测纯度为97 · 8 % ; V -乙 酰基-杜仲醇得率为0.5-5.5g/kg，经HPLC检测纯度为99.0 % ;杜仲醇苷A得率为0.5-8.8g/ kg，经HPLC检测纯度为99.0% ;色谱条件YMC-C18色谱柱（4.6mmX 150mm，3μπι)，流动相为甲 醇-水（10%-100%梯度洗脱），检测波长为210nm，流速为l.Oml/min，柱温30°C，进样量10μ 1〇
[0037] 实施例2
[0038]杜仲皮或杜仲叶砲类物质中单砲杜仲醇类化合物中杜仲醇（eucommiol)、1-脱氧 杜仲醇（1-deoxyeucommiol)、1-脱氧-Λ4，5-杜仲醇（l-deoxy_A4，5-eucommiol)、2，3-二 羟基-Λ4，5-杜仲醇（2，3-dihydroxyl_A4，5-eucommiol)、4/ -乙酰基-杜仲醇（4/ -acetyl-eucommiol)和杜仲酉享苷 A( 5-hydroxy 1-3，4-dihydroxymethyl-2-hydroxye thy 1-cyclohex-1 -enone-2" -Ο-β-D-glucopyranos i_de)的结构确证。
[0035
[004(
[0041 ]杜仲醇（l-deoxyeucommiol)无色油状物，分子式为C9Hi6〇4，ESI_MS m/z[M+H] + 189 16.4Hz，H-5a)，2.58(lH，dd，J=6.8，16.4Hz，H-5b)，1.28(lH，m，H-2/a)，1.77(lH，m，H-2 / b),3.85(lH,dJ=12.5Hz,H-3/a),4.06(lH,dJ=12.5Hz,H-3/b),3.97(2H,t,H-2 //),3.47 (2Η，α，Η-47 )；13C-NMR(DMS〇-d6a〇〇MHz)5：74.8(C-l) ,52.6(C-2),135.4(C-3)a37.5(C-4),42.3((:-5),34.2((:-27 ),55.3((:-37 ),59.8((:-47 )，57.0(C-2〃）；杜仲醇为已知化合物。 [0042] 1-脱氧杜仲醇（l-deoxyeucommiol)无色油状物，分子式为C9H16O3，ESI_MS m/z [M+ H]+173</H-NMR(DMS0-d6,400MHz)S:1.90(lH，m，H-la)，1.40(lH，m，H-lb)，2.75(lH，m，H-2)， 1.83(lH,m,H-5a)a.20(lH,m,H-5b),2.29(2H,m,H-2/ ), 3.86( 1H, d, J= 12.5Hz ,H-37 a), 4.08(lH,dJ=12.5Hz,H-3/b),3.99(2H,ddJ = 9.6,12.5Hz,H-2//),3.44(2H,m,H-4/ )；13C- NMR(DMS0-d6，100MHz)S:28.0(C-l)，43.0(C-2)，137.8(C-3)，139.7(C-4)，36.2(C-5)，32.7 (C-27 ),55.2((:-37 ),59.7((^ )，57.1(C-2〃）；1-脱氧杜仲醇为已知化合物。
[0043] 1-脱氧_Λ4，5-杜仲醇（l-deoxy_A4，5-eucommiol)无色油状物，分子式为 C9Hi6〇3，ESI-MS + (lH，m，H-lb)，2.30(lH，m，H-2)，2.47(lH，dd，J=9.6，13.2HZ，H-3)，5.56(lH，s，H-5)，1.73 (lH,m,H-2/a)a.50(lH,m,H-2/b),3.50(lH,m,H-3 /a),3.38(lH,m,H-3/b),3.45(lH,m,H- 38.84(0-2),49.04(0-3),147.43(0-4),124.66(0-5),33.27(0-27),59.87(0-3 7),59.66 (C-〇，60 · 35 (C-2〃）； 1 -脱氧-Λ4，5-杜仲醇为新化合物。
[0044] 2，3_ 二羟基 _Λ4，5_ 杜仲醇（2，3-dihydroxyl-A4，5-eucommiol)无色油状物，分 子式为C9Hi6〇6，ESI-MS m/z[M+Na] +243·0343。^-NMI^DMSO-cb，400MHz)δ:4·16(1Η，πι，Η-1)， 6.44(lH,s,H-5),2.48(lH,m,H-2 /a),2.02(lH,m,H-2/b),3.35(lH,m,H-3/ ),3.46(lH,m,H-0,3.75(1^111,11-2^^3(:-^^(0150-(16,1001^)3:65.77((:-1),63.23((:-2),51.33((:-3), 174.10(0-4),133.51(0-5),31.76(0-27 ),72.43(0-37 ),71.54(0-47 ),66.79(0-2^)^,3-二羟基-Λ4，5-杜仲醇为新化合物。
[0045] 4/ -乙酰基-杜仲醇（4/ -3〇6七71-611(3〇1]11]1；[01)无色油状物，分子式为&1!11805431-]\^ m/z[M+Na]+253.0632〇1H-NMR(DMS0-d6,400MHz)5：3.92(lH,m,H-l),2.53(lH,m,H-2),2.58 (lH,m,H-5a),2.14(lH,m,H-5b)a.76(lH,m,H-2/a)a.27(lH,m,H-2 /b),4.08(lH,d,J = 13.2,H-3/a),3.89(lH,dJ=13.2,H-3/b),4.57(lH,dJ=12.8,H-4 / ) ,3.46( ΙΗ,πι,Η-277), 2 · 00 (3Η，s，CH3CO-); 13C-NMR(DMS〇-d6，100MHz) δ: 74 · 33 (C-l)，52 · 63 (C-2)，129 · 23 (C-3)， 142.13(0-4),42.42(0-5),34.00(0-27 ),55.60(0-30,59.95(0-40,62.43(0-2^),20.65 (CH3C0_)，170 · 28(CH3C0_) -乙酰基-杜仲醇为新化合物。
[0046] 杜仲醇苷A (5-hydroxy 1-3，4_d ihydroxyme thy 1-2-hydroxy ethyl-eye lohex-1-611〇116-2//-〇-0-〇-8111(3〇卩5^&11〇81(16)白色固体，分子式为〇161126〇1()431-]\^111/2[]\1+似] +4〇1。 H-6),1.13(lH,t,1 = 6.8^-27 ),4.02(ΙΗ,πι,Η-37 ),3.63(ΙΗ,πι,Η-47 ),3.80(ΙΗ,ι?,Η^β), 3.48(lH,m,H-2//b),4.10(lH,dJ = 8.0,H-l/// ) ,2.92( ΙΗ,πι,Η-2777 ) ,3.05( ΙΗ,πι,Η-3777 ), 3.02(lH,m,H-4/// ) ,3.03(ΙΗ,πι,Η-5777 ) ,3.64(ΙΗ,πι,Η-6777 a) ,3.42(ΙΗ,πι,Η-6777 b) ；13C-NMR (DMS〇-d6,100ΜΗζ)δ :204.54(01)，140.45(02)，173.97(03)，31.04(C-4)，68.43(05)， 44.20(0-6),15.12(0-2 7 ),51.69(0-37 ),58.81(0-47 ) ,63.78(〇-2/7) ,102.58(〇-1//7 ), 73.38(C-2'"），76.72(C-3'"），70.02(C-4'"），76.79(C-5'"），61.03(C-6'"）；杜仲醇苷A为 新化合物。
[0047] 实施例3
[0048] 杜仲皮或杜仲叶萜类物质中倍半萜大柱烷类化合物中杜仲叶苷A S(6R，7E，9R)_ megastigma_4,7_dien_3_one_9_O_[0_D_xylopy;ranos_yl_(l〃-6' )_0_D_ glucopyranoside]、杜仲叶苷B为（6S，7E，9R)-megastigma_4，7-dien-3-〇ne_9-〇-[0-D-xylopyranos-yl_( lZ'46' )-0_D-glucopyranoside]、杜仲叶苷C为（6S，9R)-megastigmane_ 4-ene-3-〇ne-9-〇-[0-D_xylopyranosyl-( lZ'46' )-0_D-glucopyranoside]、杜仲叶苷D为 (6S，9S)_megastigmane_4_ene_3_one_9_O_[0_D_xylopy;ranosyl_( 1〃 -6' )_0_D_ glucopyranoside]的制备方法，其中：将杜仲皮或杜仲叶药材粉碎成粗粉，用60%乙醇浸泡 1小时，8倍量溶剂加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液。上述滤液与65 °C减压浓缩 至l.Og生药材>1，0-4°(：冷藏过夜，析胶，离心过滤，滤液上48-8型号大孔吸附树脂富集，依 次用水洗脱、25%乙醇洗脱、40%乙醇洗脱、60%乙醇洗脱和95%乙醇洗脱，得到各洗脱部 位，其中40 %乙醇洗脱部位主要含有倍半萜大柱烷类化合物，回收40 %乙醇洗脱部位得浸 膏上硅胶柱，上样后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脱，主要收集三氯甲烷：甲醇为5:1、3:1、 2:1的洗脱流份，以上述杜仲皮或杜仲叶萜类物质中倍半萜大柱烷类化合物中杜仲叶苷A、 杜仲叶苷B、杜仲叶苷C、杜仲叶苷D为对照品TLC或HPLC检测，合并相应流份。上述流份于50 °C减压浓缩蒸干，用95%乙醇溶解，过滤，结晶并重结晶，即得。或者将上述流份减压浓缩蒸 干或结晶产物，经中压制备色谱或高效液相制备色谱制备纯化，流动相为甲醇水10-40%或 乙腈水5-40%的等度或梯度洗脱，回收洗脱液减压浓缩蒸干，即得。采用上述方法制备杜仲 皮或杜仲叶萜类物质中倍半萜大柱烷类化合物中杜仲叶苷A得率为0.5-11.2g/kg，经HPLC 检测纯度为99.0 % ;杜仲叶苷B得率为0.2-3.8g/kg，经HPLC检测纯度为98.6 % ;杜仲叶苷C 得率为0.6-9.8g/kg，经HPLC检测纯度为99.2 % ;杜仲叶苷D得率为0.2-2.6g/kg，经HPLC检 测纯度为97 · 5 % ;色谱条件YMC-C18色谱柱(4 · 6mm X 150mm，3μπι)，流动相为甲醇-水（10 % -100%梯度洗脱），检测波长为235nm，流速为1.0ml/min，柱温30°C，进样量10μ1。
[0049] 实施例4
[0050] 杜仲皮或杜仲叶萜类物质中倍半萜大柱烷类化合物中杜仲叶苷A S(6R，7E，9R)_ megastigma_4,7_dien_3_one_9_O_[0_D_xylopy