作用
[0177] 不同浓度的杜仲皮或杜仲叶中单萜杜仲醇类化合物中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱氧-Λ4，5-杜仲醇、2，3-二羟基-Λ4，5-杜仲醇、V -乙酰基-杜仲醇、杜仲醇苷A等单体化 合物对Αβ25-35所致PC12细胞损伤有保护作用，使其细胞活力增强，表现为A 492nm值上升。结果 见表13和图10。不同浓度的单萜杜仲醇类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用如图10 所示。
[0178；
[0179；
[0180]表13不同浓度的单萜杜仲醇类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用(n = 10)
[0181]
[011
[0183] 注：##与空白对照组比较p〈0.01; *与Αβ模型组比较p〈0.05 ,与Αβ模型组比较p〈 0.01
[0184] 7.4不同浓度的杜仲皮或杜仲叶中倍半萜大柱烷类单体化合物对Αβ25_35所致 PC12细胞损伤的保护作用
[0185] 不同浓度的杜仲皮或杜仲叶中倍半萜大柱烷类化合物中杜仲叶苷Α、杜仲叶苷Β、 杜仲叶苷C、杜仲叶苷D等单体化合物对Αβ25- 35所致PC12细胞损伤有保护作用，使其细胞活力 增强，表现为A492nm值上升。结果见表14和图11。不同浓度的倍半萜大柱烷类单体化合物对受 损的PC12细胞的保护作如图11所示。 α-
[0187]表14不同浓度的倍半萜大柱烷类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用(η = 10)
[0186]
[0189] 注：##与空白对照组比较p〈0.01; *与Αβ模型组比较p〈0.05 ,与Αβ模型组比较p〈 0.01
[0190] 7.5不同浓度的杜仲皮或杜仲叶中木脂素类单体化合物对六|325-35所致?(：12细胞 损伤的保护作用
[0191] 不同浓度的杜仲皮或杜仲叶中双环氧木质素类化合物中（+ )松脂素-4,4'-0-β-?-双葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基一松脂素-4'-0-?Η)_葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基一松脂素-4-0-β-D-葡萄吡喃糖苷、（+ )松脂素-8_(H3-D-葡萄吡喃糖苷、（+ )松脂素-4-0-?Η)-葡萄吡喃糖 苷、（+ )8,9'_二羟基-松脂素-4'-(H3-D-葡萄吡喃糖苷、（ + )8-羟基-松脂素-4,4'-(H3-D-双 葡萄吡喃糖苷、丁香脂素-4-〇-i3_D-吡喃葡萄糖苷等和单环氧木质素类化合物中橄榄树脂 素-4 ' -Ο-β-D-葡萄糖苷、橄榄树脂素-4-(H3-D-葡萄吡喃糖苷、落叶松脂醇-4，4 ' -Ο-β-D-双 葡萄吡喃糖苷、8-羟基-落叶松脂醇-4'-〇-i3-D-葡萄吡喃糖苷、落叶松脂醇-4-〇-i3-D-葡萄 吡喃糖苷等单体化合物对Αβ 25-35所致PC12细胞损伤有保护作用，使其细胞活力增强，表现为 A492nm值上升。结果见表15、16和图12、13。不同浓度的木脂素类化合物1~7单体对受损的 PC12细胞的保护作用如图12所示。不同浓度的木脂素类化合物9~14单体对受损的PC12细 胞的保护作用如图13所示。
[(
[01Q9l
[(
[0195]
[0196] 注：##与空白对照组比较p〈0.01; *与Αβ模型组比较p〈0.05 ,与Αβ模型组比较p〈 0.01
[0197] 表16不同浓度的木脂素类单体化合物对受损的PC12细胞的保护作用(n = 10)
[0198]
[015
[〇2〇〇J 注广与空白对照组比较p〈0.01;"与Αβ模型组比较p〈0.05 ; ^与如模型组比较p〈 0.01ο
【主权项】
1. 杜仲皮或杜仲叶中聰类物质在制备各类药物中的应用，其特征在于:该杜仲皮或杜 仲叶中聰类物质是从杜仲皮或杜仲叶的总提取物上大孔吸附树脂后用水洗脱部位制备得 到和杜仲皮或杜仲叶中制备得到单聰杜仲醇类化合物中杜仲醇(eucommiol)、1-脱氧杜仲 醇（l-deo;xyeucommiol)、1-脱氧-A4，5-杜仲醇（l-deo;xy-A4，5-eucommiol)、2，3-二鞋基-A4，5-杜仲醇（2，3-dih)^dro;xyl-A4，5-eucommiol)、4'-乙醜基-杜仲醇（4' -acetyl-eucommiol)和杜仲酉享骨 A( 5-hydroxy 1-3，4-dihydroxyme thy l-2-hydroxye thy 1-cy C lohex-1-enone-2"-〇-目-D-glucopyranoside)的一种或多种；2. 杜仲皮或杜仲叶中聰类物质在制备各类药物中的应用，其特征在于:该杜仲皮或杜 仲叶中聰类物质是从杜仲皮或杜仲叶的总提取物上大孔树脂后用40%乙醇洗脱部位制备 得到和杜仲皮或杜仲叶制备得到倍半聰大柱焼类化合物中杜仲叶骨A为（6R，7E，9R)-megastigma_4，7_dien_3_one_9_O_[0_D_xylopyranos_yl_(1"一6')_0_〇_ glucopyranoside]、杜仲叶骨B为（6S，7E, 9R)-megastigma-4，7-dien-3-〇ne-9-〇-[目-D-巧1〇97拘1103-八-(1"一6')-目-〇-容111(3〇97拘11031(16]、杜仲叶骨〔为（65,91〇-1116容33^容111过打6-4-ene- 3-〇ne-9_〇-[目-D-xylopyranos5d-( 1"一6')-目-D-glucopyranoside]、杜仲叶骨D为 (6S，9S)_megastigmane_4_ene_3_one_9_O_[0_D_xyIopyranosy1_(1"一6' )_0_D_ glucopyranoside]中的一种或多种；3.杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质在制备各类药物中的应用，其特征在于:其中所述 杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质是指从杜仲皮或杜仲叶的总提取物上大孔树脂后用25% 乙醇洗脱部位制备得到或25%乙醇洗脱部位制备得到木脂素类化合物中的（+ )松脂素-4， 少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4/-0-0-0-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松 脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-8-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-4-O-0-D-葡 萄化喃糖巧、（ + )8,9/ -二径基-松脂素-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基-松脂素-4，少-0-e-D-双葡萄化喃糖巧、下香脂素-4-O-0-D-化喃葡萄糖巧、中脂素-4-O-0-D-化喃葡糖糖 巧、橄揽树脂素-少-O-P-D-葡萄糖巧、橄揽树脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4， 少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、8-径基-落叶松脂醇-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4-0-e-D-葡萄化喃糖巧、橄揽素二糖巧、耳草素二糖巧、下香丙S醇-0-下香脂素酸二糖巧中 一种或多种含量大于90%组分或单一成分的化合物；4. 杜仲皮或杜仲叶中祗类物质在制备治疗老年性痴呆W及阿尔茨海默病药物或保健 食品中的应用，其特征在于:该杜仲皮或杜仲叶中祗类物质是杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱 氧-A4，5-杜仲醇、2，3-二径基-A4，5-杜仲醇、少-乙酷基-杜仲醇、杜仲醇巧A、杜仲叶巧A、 杜仲叶巧B、杜仲叶巧C、杜仲叶巧D中的一种或多种。5. 杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质在制备治疗老年性痴呆W及阿尔茨海默病药物或 保健食品中的应用，其特征在于:所述杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质是指从杜仲皮或杜 仲叶的总提取物上大孔树脂后用25%乙醇洗脱部位制备得到或25%乙醇洗脱部位制备得 到木质素类化合物中（+ )松脂素-4,4/-0-e-D-双葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4^-0-e-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-8-O-0-D-葡 萄化喃糖巧、（+ )松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )8，g/ -二径基-松脂素-少-O-P-D-葡萄 化喃糖巧、（ + )8-?基-松脂素-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、下香脂素-4-O-0-D-化喃葡萄 糖巧、中脂素-4-O-0-D-化喃葡糖糖巧、橄揽树脂素-少-O-P-D-葡萄糖巧、橄揽树脂素-4-0- e-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4,4/-o-e-D-双葡萄化喃糖巧、8-?基-落叶松脂醇-少-o-P-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、橄揽素二糖巧、耳草素二糖巧、下 香丙=醇-e-下香脂素酸二糖巧中一种或多种含量大于90%组分或单一成分的化合物。6. 如权利要求1、2和4中任意一种或多种杜仲皮或杜仲叶中祗类物质在制备治疗老年 性痴呆W及阿尔茨海默病药物或保健食品中的应用，其特征在于:所设及的老年性痴呆W 及阿尔茨海默病是由衰老、屯、脑血管疾病导致脑低灌注状态、淀粉样蛋白A的冗积病因形成 的老年性痴呆W及阿尔茨海默病疾病中的任意一种。7. 如权利要求3和5中任意一种或多种杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质在制备治疗老 年性痴呆W及阿尔茨海默病药物或保健食品中的应用，其特征在于:所设及的老年性痴呆 W及阿尔茨海默病是由衰老、屯、脑血管疾病导致脑低灌注状态、淀粉样蛋白A的冗积病因形 成的老年性痴呆W及阿尔茨海默病疾病中的任意一种。8. 如权利要求1、2、3、4、5、6和7中任意一种或多种杜仲皮或杜仲叶中祗类物质或木脂 素类物质在制备治疗老年性痴呆W及阿尔茨海默病药物或保健食品中的应用，其特征在 于:所述药物包括口服液、胶囊、片剂、泡腾片、颗粒剂或注射剂或已知各种剂型。9. 如权利要求1-8中任意一种或多种杜仲皮或杜仲叶中祗类物质或木脂素类物质在制 备治疗老年性痴呆W及阿尔茨海默病药物或保健食品中的应用，其特征在于:所述药物还 包括各种单方和复方制剂。10. 杜仲皮或杜仲叶祗类物质中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱氧-A4，5-杜仲醇、2，3-二 径基-A4,5-杜仲醇、少-乙酷基-杜仲醇、杜仲醇巧A、杜仲叶巧A、杜仲叶巧B、杜仲叶巧C、杜 仲叶巧D和木脂素类物质中（+ )松脂素-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-8-0-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8,9/-二径基-松脂素-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基-松脂素-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、下香脂素-4-O-0-D-化喃 葡萄糖巧、中脂素-4-O-0-D-化喃葡糖糖巧、橄揽树脂素-少-O-P-D-葡萄糖巧、橄揽树脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、8-径基-落叶松脂醇-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、橄揽素二糖巧、耳草素二糖 巧、下香丙S醇-0-下香脂素酸二糖巧的制备方法，其特征在于步骤如下： (1) .将杜仲皮或杜仲叶药材粉碎成粗粉，用0-100 %乙醇浸泡，加入4-12倍量溶剂加热 回流提取若干次，过滤，合并滤液； (2) .上述滤液减压浓缩至0.5-1. Sg生药材/ml，冷藏过夜，析胶，过滤，滤液再用有机溶 剂萃取或滤液上大孔吸附树脂AB-8型或D-IOl型或HPD-400或各种已知型号大孔吸附树脂 富集，进行梯度洗脱，依次用水洗脱、25%乙醇水洗脱、40%乙醇水洗脱、60%乙醇水洗脱、 95%乙醇水洗脱，主要收集水洗脱部位、25 %乙醇水洗脱部位、40%乙醇水洗脱部位，回收 洗脱液得浸膏上硅胶柱;其中，水洗脱部位主要为单祗杜仲醇类化合物，25 %乙醇水洗脱部 位主要为木脂素类化合物且总木脂素类物质含量大于90 %，40 %乙醇水洗脱部位主要为倍 半祗大柱烧类化合物； (3) .上硅胶柱后依次用=氯甲烧：甲醇或二氯甲烧：甲醇或=氯甲烧：甲醇：水或二氯 甲烧：甲醇：水梯度洗脱，W上述杜仲皮或杜仲叶祗类物质中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱 氧-A4，5-杜仲醇、2，3-二径基-A4，5-杜仲醇、少-乙酷基-杜仲醇、杜仲醇巧A、杜仲叶巧A、 杜仲叶巧B、杜仲叶巧C、杜仲叶巧D和木脂素类物质中（+ )松脂素-4,4/-0-e-D-双葡萄化喃 糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4/-0-0-0-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4-O-0-D-葡萄化 喃糖巧、（+ )松脂素-8-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8,9/-二?基-松脂素-4/-0-(6-D-葡萄化喃糖巧、（+)8-?基-松脂素-4,4/-0-(6-D-双葡萄化喃糖 巧、下香脂素-4-O-0-D-化喃葡萄糖巧、中脂素-4-O-0-D-化喃葡糖糖巧、橄揽树脂素-少-O-P-D-葡萄糖巧、橄揽树脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4，少-O-P-D-双葡萄化喃 糖巧、8-径基-落叶松脂醇-4/-0-0-0-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、 橄揽素二糖巧、耳草素二糖巧、下香丙S醇-0-下香脂素酸二糖巧作为对照品化C或HPLC检 测，合并相应流份； (4).将上述杜仲皮或杜仲叶祗类物质中杜仲醇、1-脱氧杜仲醇、1-脱氧-A4，5-杜仲 醇、2,3-二径基-A4,5-杜仲醇、少-乙酷基-杜仲醇、杜仲醇巧A、杜仲叶巧A、杜仲叶巧B、杜 仲叶巧C、杜仲叶巧D和木脂素类物质中（+ )松脂素-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、（ + )8-? 基一松脂素-4/-O-P-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基一松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松 脂素-8-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（+ )松脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8,9^-二径基-松脂 素-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、（ + )8-?基-松脂素-4，少-O-P-D-双葡萄化喃糖巧、下香脂素-4-O-0-D-化喃葡萄糖巧、中脂素-4-O-0-D-化喃葡糖糖巧、橄揽树脂素-4/-O-0-D-葡萄糖 巧、橄揽树脂素-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4,4/-0-e-D-双葡萄化喃糖巧、8-径 基-落叶松脂醇-少-O-P-D-葡萄化喃糖巧、落叶松脂醇-4-O-0-D-葡萄化喃糖巧、橄揽素二 糖巧、耳草素二糖巧、下香丙=醇-0-下香脂素酸二糖巧的相应流份减压浓缩蒸干，用适量 乙醇溶解，过滤，减压回收乙醇至含醇量为10-60%之间，析胶，过滤，滤液中加入适量的聚 酷胺，揽拌0.5-2小时，静置4-24小时，过滤，滤液中加入适量活性炭，揽拌0.5-2小时，静置 4-24小时，过滤，滤液用喷雾干燥或冷冻干燥法进行干燥，收集喷雾干燥粉或冻干粉，用10-100%乙醇结晶并重结晶，即得;或者将相应流份减压浓缩蒸干或结晶产物，经中压制备色 谱或高效液相制备色谱制备纯化，流动相为甲醇水5-100%或乙腊水5-100%的等度或梯度 洗脱，回收洗脱液，即得。
【专利摘要】本发明涉及杜仲皮或杜仲叶中萜类和木脂素类物质的制备方法及其在制备治疗老年性痴呆以及阿尔茨海默病药物或保健食品中的应用。所制备的杜仲皮或杜仲叶中萜类物质本身是指1-脱氧-△4,5-杜仲醇、2,3-二羟基-△4,5-杜仲醇、杜仲醇苷A、杜仲叶苷A、杜仲叶苷B等中的一种或多种。所制备的杜仲皮或杜仲叶中木脂素类物质本身是指松脂素-4，4ˊ-O-β-D-双葡萄吡喃糖苷、8-羟基－松脂素-4ˊ-O-β-D-葡萄吡喃糖苷、落叶松脂醇-4，4ˊ-O-β-D-双葡萄吡喃糖苷等中的一种或多种。因拥有共同或相似的杜仲醇类、倍半萜大柱烷类、双环氧木脂素类、单环氧木脂素类等结构单元，而在人体中具有类似的治疗功效。
【IPC分类】C07H1/08, C07H15/26, C07C67/56, A61K31/7032, C07C29/76, C07C35/06, A61K31/047, C07H17/04, A61K31/7048, A61K31/22, C07H15/18, A23L33/105, A23L33/10, C07C69/21, A61P25/28
【公开号】CN105582000
【申请号】CN201610016096
【发明人】张忠立, 左月明
【申请人】张忠立
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2016年1月12日