足底电击法(F〇〇tSh〇ck，FS)诱发 大鼠焦虑样行为，具体做法为:将大鼠置于可调式噪音、激惹、脉冲电刺激笼内，设定造模条 件：白天2档（间隔5min)，夜间3档（间隔lOmin)，电流0.5!^，电压2700-3300￥，脉宽0.38，刺 激时间共计12d;造模的同时给予纯水2ml/kg/d腹腔注射。
[0216] ③DXP组:按②造模，同时给予地西泮lml/kg/d腹腔注射。
[0217] ④HFM组:按②造模，同时给予FM药物，lml/kg/d腹腔注射。
[0218] ⑤MFM组:按②造模，同时给予FM药物，0.51ml/kg/d腹腔注射。
[0219] ⑥LFM组:按②造模，同时给予FM药物，0.251ml/kg/d腹腔注射。
[0220]造模完成后即采用旷场实验和EPM实验对其行为学进行评价。
[0221 ]统计方法
[0222] 实验数据采用3?3317.0统计软件分析，采用6抑口11?3(1?1^81115.0软件进行统计作 图。多个样本均数比较用单因素方差分析，结果以平均数士标准差CX 士 S)表示，显著性水平 为 Ρ<0·05〇
[0223] 结果与分析
[0224] 各剂量FM对大鼠旷场实验运动总路径的影响
[0225] 旷场实验结果显示，模型组大鼠旷场运动总路径高于空白组(P〈0.01)，提示采用 足底电击法(FootShock，FS)成功诱发了大鼠焦虑样行为。用药组中的DXP组和MFM组大鼠的 旷场运动总路径低于模型组(P〈〇.01)，LFM组和HFM组与模型组相比，差异无统计学意义，提 示西药地西泮、本发明中药制剂中剂量组均干预有效。
[0226] 各剂量FM对大鼠 EPM实验中OE%、OT%的影响
[0227] EPM实验结果表明，模型组大鼠的0E%和0T%均低于空白组(P〈0.01)，采用足底电 击法成功诱发了大鼠焦虑样行为;MFM组和DXP组的0E%和0T%均高于模型组(P〈0.0 l )，提 示西药地西泮和MFM组均对大鼠的焦虑样行为干预有效，而LFM组和HFM组与模型组相比，虽 未出现显著性差异，但呈现升高趋势。提示西药DXP和MFM组均对大鼠的焦虑样行为干预有 效。
[0228] 各组大鼠行为学比较
[0229]表4各组大鼠行为学比较(χ士s )
[0232] *与空白组比较，P〈0.05广与模型组比较，P〈0.05。
[0233] 本实验采用足底电击法制备焦虑大鼠模型，该模型为动物情绪致病模型中的经典 方法，即把拟造模大鼠置入可调式噪音电刺激笼内，大鼠足部、身体在受到电刺激的同时伴 有噪音刺激，结合噪音是为了建立条件反射，在电流变小的情况下噪音即能达到与之前电 击相同的效果。一可减少电击造成的躯体伤害，二可加强心理性应激以此模拟人类情绪上 的持久紧张，设定造模条件：白天2档（间隔5min)，夜间3档（间隔IOmin)，中等强度电流 0.5mA，电压2700-3300V，脉宽0.3s，持续12天，电刺激条件在大鼠可承受范围，经此方法大 鼠出现易激惹、精神紧张、四下乱窜、跳起等情绪亢奋反应，这类似于临床上焦虑症患者紧 张、易激惹等表现。利用此方法制备焦虑动物模型比较符合疾病的症状表现。
[0234] 本研究中模型组大鼠旷场实验总路径较空白组明显升高；模型组大鼠的0E%和 0T%较空白组明显降低。表明模型组大鼠处于焦虑状态，造模成功。DXP组和MFM组大鼠总路 径较模型组降低，差异具有高度统计学意义，LFM组、HFM组大鼠总路径与模型组相比，差异 无显著性统计学意义，但呈现降低趋势;DXP组和MFM组大鼠的OE %和OT %较模型组均提高， 差异具有显著统计学意义，而LFM组、HFM组的0E%和0T%与模型组相比仍无显著性差异，但 也呈现升高趋势。以上结果表明地西泮和本发明中药制剂中剂量作用浓度具有抗焦虑作 用，本发明中药制剂小剂量(相当于人临床剂量4倍)或高剂量组(相当于人临床剂量16倍） 也呈现抗焦虑作用，但差异无统计学意义。
[0235] 这一结果显示中药复方本发明中药制剂复方剂量与功效的关系并非正相关，也从 另一方面提示中药的量效关系的确有其自身特点，不同于西药单纯的量效关系阐述。由此 可见，中药复方的量效关系受诸多因素的调控，临床用药时要考虑各个方面因素，因人制 宜，因地制宜，在临床实践中不断摸索最精当的药物剂量，以获得最佳疗效。通过以上行为 学评价结果证实了本实验成功复制了大鼠焦虑情绪模型，足底电击法作为一种焦虑动物造 模方法，稳定有效且重复性好，值得推广应用。本实验同时也再次证实中药本发明中药制剂 和西药地西泮片均具有抗焦虑作用，其中本发明中药制剂低、中、高剂量组以中剂量组抗焦 虑效果较为明显，可用其进行后续机制研究。
[0236] 所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施这种新产品 和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改，以实现类似的执行情 况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
[0237] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任 何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等 效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所 作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
【主权项】
1. 一种治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于:原料药包括竹茹、枳 实、法半夏、茯神、青礞石、代赭石、胆南星、白附片、郁金、石菖蒲、龙胆草、柴胡、生栀子、知 母、黄柏、北沙参、麦门冬、陈皮、生大黄、全瓜蒌和生甘草。2. 如权利要求1所述的治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于:各原 料药的重量份分别为竹節25重量份~40重量份、枳实15重量份~25重量份、法半夏10重量 份~15重量份、茯神25重量份~40重量份、青礞石10重量份~15重量份、代赭石15重量份~ 20重量份、胆南星10重量份~20重量份、白附片15重量份~20重量份、郁金25重量份~40重 量份、石菖蒲25重量份~40重量份、龙胆草25重量份~40重量份、柴胡25重量份~40重量 份、生栀子15重量份~25重量份、知母10重量份~15重量份、黄柏25重量份~40重量份、北 沙参10重量份~20重量份、麦门冬15重量份~25重量份、陈皮10重量份~20重量份、生大黄 15重量份~25重量份、全瓜蒌10重量份~30重量份和生甘草10重量份~25重量份。3. 如权利要求1或2所述的治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于： 各原料药的重量份分别为竹茹30重量份~35重量份、枳实15重量份~20重量份、法半夏10 重量份~15重量份、茯神25重量份~30重量份、青礞石10重量份~15重量份、代赭石15重量 份~20重量份、胆南星10重量份~15重量份、白附片15重量份~20重量份、郁金30重量份~ 35重量份、石菖蒲25重量份~30重量份、龙胆草30重量份~35重量份、柴胡25重量份~30重 量份、生栀子20重量份~25重量份、知母10重量份~15重量份、黄柏25重量份~30重量份、 北沙参15重量份~20重量份、麦门冬15重量份~20重量份、陈皮15重量份~20重量份、生大 黄20重量份~25重量份、全瓜蒌20重量份~25重量份和生甘草15重量份~20重量份。4. 如权利要求1至3所述的治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于： 各原料药的重量份分别为竹茹30重量份、枳实20重量份、法半夏10重量份、茯神30重量份、 青礞石10重量份、代赭石15重量份、胆南星10重量份、白附片15重量份、郁金30重量份、石菖 蒲25重量份、龙胆草30重量份、柴胡30重量份、生栀子20重量份、知母10重量份、黄柏30重量 份、北沙参20重量份、麦门冬20重量份、陈皮20重量份、生大黄20重量份、全瓜蒌20重量份和 生甘草20重量份。5. 如权利要求1至4所述的治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于： 所述中药制剂制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液或注射剂。6. 如权利要求1至5所述的治疗痰火扰心证型广泛性焦虑症的中药制剂，其特征在于： 所述注射剂为注射液、注射用混悬液、冻干粉针。7. 权利要求1至6所述中药制剂的制备方法，其特征在于，包括： 第一步，将青礞石、代赭石、胆南星、白附片、石菖蒲、生栀子、黄柏、竹茹、全瓜蒌和法半 夏分别碎成粗粉，混合在一起，用相对于混合物质量8~12倍量水加热煎煮1~3小时，滤过， 药渣加相对于其质量6~10倍量水煎煮1~2小时，滤过，合并两次滤液，浓缩至50°C相对密 度为1.05~1.10,得到第一浸膏； 第二步，将余下原料药分别碎成粗粉，混合在一起，加入相对于混合物质量1~2倍的醇 浓度为80 %的乙醇，润湿12小时，随后装柱进行渗漉，渗漉液为醇浓度为80%的乙醇，使用 的乙醇量为混合物质量的15~20倍，渗漉速度5ml ·π?η-1 · kg-Ι，收集渗漉液，减压浓缩至 65°C时相对密度为1.25-1.30的浸膏； 第三步，将第一步和第二步获得浸膏混合，按照1:1的体积比加入醇浓度为80 %的乙 醇，2~5°C冷藏静置24~48小时，过滤除掉沉淀;滤液减压回收，获得干膏，粉碎成粉末，加 注射用水至所需制剂体积的80%，加入注射级活性炭，加热至微沸并保持10~30分钟搅拌， 过滤除掉活性炭，加注射用水至所需制剂体积的100% ;次经〇. 22μπι的滤膜过滤，调节滤液 温度至30°C~50°C，用截留分子量8000~30000的超滤膜，在压力为0.05~0.3MPa下进行超 滤，超滤液经灌封、灭菌、包装。
【专利摘要】本发明提供了一种治疗广泛性焦虑症的中药制剂，其原料药包括竹茹、枳实、法半夏、茯神、青礞石、代赭石、胆南星、白附片、郁金、石菖蒲、龙胆草、柴胡、生栀子、知母、黄柏、北沙参、麦门冬、陈皮、生大黄、全瓜蒌和生甘草。本发明中药制剂在理论研究的基础上，在临床专家多年中药治疗焦虑症经验的总结上，通过对本发明中药制剂联合黛力新治疗广泛性焦虑症的疗效观察及安全性验证，本发明中药制剂具有很好的促进黛力新治疗广泛性焦虑症的作用，减少西药的使用量，降低西药毒副作用，并且无毒副作用，适用于临床推广应用本发明中药制剂。
【IPC分类】A61P25/22, A61K36/9066, A61K33/26
【公开号】CN105688080
【申请号】CN201610169256
【发明人】孙平, 石少波, 王圣海, 孙忠国
【申请人】青岛市精神卫生中心
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2016年3月23日