，将其放入水性介质而形成微球。但是，恩替卡韦不溶于二氯甲烷， 不能使用这种方法。本发明中使用了将恩替卡韦溶解于能够良好地溶解恩替卡韦的溶剂中 后，与溶解有高分子的溶液进行混合，从而制备分散相(dispersion phase)的方法。确认了 在根据本发明的方法制备时，与通过现有方法来制备微球时得到低的包封率的情况相反， 具有优异的包封率。
[0033] 本发明中，能够用于溶解恩替卡韦的溶剂，可以例举如二甲基亚砜、二甲基甲酰 胺、乙酸、盐酸、甲醇、乙醇及注射用水灯，特别地，优选为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺，以及 乙酸、盐酸等酸性溶液。
[0034]另外，可用于高分子溶解的有机溶剂，可以例举如二氯甲烷、丙酮、氯仿、乙腈、乙 酸乙酯、二甲基亚砜及二甲基甲酰胺等。
[0035]另外，加入恩替卡韦溶液和高分子溶液的分散液而用于制备微球的亲水性高分子 水溶液可以使用聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素等的高分 子。
[0036] 本发明的恩替卡韦微球的制备步骤中，有机溶剂的去除是通过使用通常使用的任 意的溶剂去除方法，例如，可以使用搅拌、加热、氮气吹扫(N 2purge)等方法。
[0037] 另外，本发明提供包含通过如上所述的方法来制备的恩替卡韦微球及药学载体的 非口服给药用药学组合物。其中，非口服给药用药学组合物尤其优选为注射剂。
[0038] 包含本发明的恩替卡韦微球的药学组合物可以作为慢性乙型肝炎病毒感染治疗 剂来使用，给药用量可以根据患者的年龄、症状、给药剂型等来进行多种调节，恩替卡韦的 给药量可以为〇 · 1~5 · Omg/天，优选为2 · 0~3 · Omg/天，更优选为0 · 5~1 · Omg/天。
[0039] 另外，本发明的药学组合物是可以通过使用药学上可接受的通常的载体来制备， 为了达到高的生物体利用率，可以使用通常的制备方法。
[0040] 本发明的恩替卡韦微球可以提供为最终给药时悬浮于可注射的悬浮溶剂中而给 药的制剂。可注射的悬浮溶剂作为水溶性有机载体，可以包含等渗剂、增稠剂、表面活性剂、 缓冲剂等。可使用的等渗剂可以例举如甘露醇、蔗糖、山梨醇、海藻糖、乳糖等水溶性赋形剂 或糖类，增稠剂可以例举如羧甲基纤维素钠 (carmellose sodium)、羧甲基纤维素钠、聚维 酮等。表面活性剂可以使用聚氧乙烯失水山梨醇类的聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20等，还可 以使用山梨醇酯类的斯盘80、斯盘20等。另外，缓冲剂可以使用磷酸氢二钠、无水柠檬酸、氢 氧化钠、氯化钠等。
[0041 ] 有益效果
[0042] 通过本发明来制备的恩替卡韦微球由于相对于恩替卡韦投入量的约80 %以上被 充分包封在微球内，并且维持溶出30天以上，因此，当制备成注射剂等非口服给药用制剂 时，能够安全且持续地发挥效果，从而能够改善患者的服药依从性。
【附图说明】
[0043] 图1为在制备实施例和比较例中制备的微球的扫描式电子显微镜(SEM)照片，图la 为实施例6的微球，图lb为比较例的微球。
[0044] 图2为示出在实施例4中制备的微球的粒度分布的图。
[0045] 图3及图4为示出根据实施例和比较例中制备的微球的体外长期溶出实验结果的 根据时间变化的溶出率（％ )的图表。
[0046] 图5为用恩替卡韦及赋形剂皮下给药4周后的大鼠的注射部位的显微镜下观察到 的照片，图5a为恩替卡韦的给药量为2.33mg/kg/天的给药组，图5b为用赋形剂给药组。
【具体实施方式】
[0047] 以下，将通过实施例来更具体地说明本发明。但是，这些实施例只是本发明的例 示，本发明的范围并不限定于这些实施例。
[0048] 实施例1~3:微球的制备
[0049]将2.5g的恩替卡韦（制造商：爱斯泰克医药有限公司）溶解于40.0g的二甲基亚砜 (第一次有机相）中，并且将下述表1中所示的7.5g的生物降解性高分子(制造商：勃林格殷 格翰公司）溶解于27.0g的二氯甲烷(制造商:默克公司）（第二次有机相）。混合完全溶解的 第一次有机相及第二次有机相而充分混合而制成分散液后，将该分散液缓慢添加到20°C的 0.5 %的聚乙烯醇(Μη = 30，000~70，000，西格玛公司）水溶液相中的同时，利用以3，OOOrpm 的L4RT混合器（西沃森公司（Si Iverson )，英国）制备微球。之后，将温度调高到47 °C而使有 机溶剂挥发，然后再次冷却到20°C而过滤微球，并且用注射用水来清洗经过过滤的微球几 次后，通过冷冻干燥来制备微球。
[0050] 本实施例中使用的生物降解性高分子如下述表1中所示。
[0051] 表 1
[0052] _
[0053]在上述实施例中使用的高分子均为共聚物，其中，RG是指聚丙交酯乙交酯共聚物， Η是指高分子末端为亲水性的共聚物，S是指疏水性的共聚物。中间的数字中，前两位表示共 聚物中的丙交酯的比率，例如，50是指丙交酯为50%的共聚物，75是指丙交酯为75%的共聚 物。另外，数字的最后一位表示高分子的等级、固有粘度的差距，例如，502Η是指固有粘度为 0 · 16 ~0 · 24dl/g，504Η 是表示 0 · 45 ~0 · 60dl/g.
[0054] 实施例4:微球的制备
[0055] 称取2.5g的恩替卡韦（制造商:爱斯泰克医药有限公司）及7.5g的生物降解性高分 子(制造商：勃林格殷格翰公司）RG756S，并分别加入40.0g的二甲基亚砜及27.0g的二氯甲 烷而使其溶解(第一次有机溶剂相）。充分混合各有机溶剂相后，将溶解的有机溶剂相缓慢 添加到20 °C的0.5 %的聚乙烯醇(Μη = 30，000~70，000，西格玛公司）水溶液相中的同时，利 用3,000印111的1^41?1'混合器（西沃森公司（5;[1￥6^011)，英国）来制备微球。之后，将温度调高 到47°C而使有机溶剂挥发，然后再次冷却到20°C而过滤微球，并且用注射用水来清洗经过 过滤的微球几次后，通过冷冻干燥来制备微球。
[0056] 实施例5:微球的制备
[0057]称取2.5g的恩替卡韦（制造商:爱斯泰克医药有限公司）及7.5g的生物降解性高分 子（制造商：勃林格殷格翰公司）（RG756S:RG504H = 8:2)，并分别加入30.0g的醋酸及37.0g 的二氯甲烷而使其溶解(第一次有机溶剂相）。充分混合各有机溶剂相后，将溶解的有机溶 剂相缓慢添加到20°C的0.5%的聚乙烯醇(Mn = 30，000~70，000，西格玛公司）水溶液相中 的同时，利用3，OOOrpm的L4RT混合器(西沃森公司（Si 1 verson)，英国）来制备微球。之后，将 温度调高到47°C而使有机溶剂挥发，然后再次冷却到20°C而过滤微球，并且用注射用水来 清洗经过过滤的微球几次后，通过冷冻干燥来制备微球。
[0058] 比较例
[0059] 将90.61g的1%聚乙烯醇、2.97g的苯甲醇及6.53g的乙酸乙酯混合而制备水性相。 然后，将2.93g的生物降解性高分子RG757S溶解于10.87g的乙酸乙酯及10.84g的苯甲醇中， 待高分子完全溶解后，加入1.57g的恩替卡韦而作为有机溶剂相。将制备的有机溶剂相注入 到水性相中的同时，利用3，OOOrpm的L4RT混合器(西沃森公司（Si Iverson)，英国）来形成微 球。之后，将分散有微球的聚乙烯醇悬浮液加入到10 °C的含有127.6g的乙酸乙酯、9.23g的 无水碳酸氢钠及11.62g的无水碳酸钠的注射用水中，并提取有机溶剂，清洗微球。对制得的 微球进行过滤，用注射用水来清洗经过过滤的微球几次后，通过冷冻干燥来制备微球。 [0060]本比较例是通过将韩国授权专利10-0354270号中所记载的利培酮微球制备实施 例中的主成分变更为恩替卡韦来实施的。
[0061 ] 效果实验例1:微球形态的测定
[0062]为了观察实施例和比较例中制备的微球表面，将约为10 m g的微球固定在铝根 (aluminum stub)上，并且在0· 1托的真空度及高电压（10kv)下用钼涂布3分钟，然后安装在 扫描式电子显微镜(设备